13-недельное исследование субхронической токсичности 2-(l-ментокси)этанола на крысах F344 Ⅲ

Обсуждение

На сегодняшний день 24 ароматизатора, включая 2-(l-ментокси)этанол, были оценены JECFA как вещества, структурно родственные ментолу, и все они внесены в список «не вызывающих опасений по поводу безопасности» при текущих расчетных уровнях потребления1. 11. 2-(lМентокси)этанол классифицируется в подгруппе алициклических спиртов или простых эфиров и считается, что он в первую очередь конъюгируется с глюкуроновой кислотой с последующей экскрецией с мочой1. Хотя значения ЛД50 этих веществ при пероральном приеме у грызунов относительно высоки, данные исследований токсичности при повторных дозах остаются ограниченными. 13-Недельное исследование токсичности при повторных дозах показало, что ментилпирролидонкарбоксилат (номер CAS 68127-22-0), соединение, структурно родственное ментолу, может быть связано с увеличением относительной массы печени и почек у мужчин и женщин. Крысы Вистар.

Добавка Цистанхе Добавка для поддержки функции почек PhGs75% Ech 30% Act 12%

Накопление 2u-глобулина в проксимальных канальцах крыс-самцов наблюдалось также при дозе 1111 мг/кг массы тела/день, а NOAEL был определен как 109 мг/кг массы тела/день1.В настоящем 13-недельном исследовании субхронической токсичности 2-(l-ментокси)этанола не наблюдалось токсикологических изменений в общем состоянии, массе тела и потреблении пищи. После гематологического обследования мы наблюдали снижение HGB (96,6% к контрольным средним значениям), HCT (96,3%), MCV (98,4%) и MCH (98,2%), а также увеличение PLT (111%) у мужчин. 250 мг/кг, что было расценено как токсикологическое воздействие обработки 2-(l-ментокси)этанолом. Как абсолютная (115% у обоих полов), так и относительная (119% у мужчин и 111% у женщин) масса печени была значительно увеличена у обоих полов в группах, получавших дозу 250 мг/кг. Хотя гистопатологических изменений в печени не было, повышенные уровни сывороточного Т-Хол (110% у мужчин и 121% у женщин) и ТП (105% у мужчин) и снижение ТГ (60,1% у женщин) у 250 группы мг/кг указывают на токсические изменения, связанные с липидным обменом и синтезом белка в печени. Также были обнаружены снижение HGB и MCH и повышение PLT, T-Chol и TP у мужчин, а также снижение TG и увеличение абсолютной и относительной массы печени у обоих полов со статистической значимостью в предварительном 28-дневном исследовании (данные не показаны). ), подтверждая, что эти измененные гематологические и биохимические параметры сыворотки, а также вес печени были не случайными, а эффектами, связанными с тестируемым веществом. Напротив, значительное увеличение относительного веса печени, обнаруженное в группе мужчин, получавших дозу 60 мг/кг в настоящем исследовании, не сопровождалось увеличением абсолютного веса или изменениями связанных с ним биохимических параметров, что позволяет предположить, что это увеличение было адаптивным изменением.

Таблица 2. Биохимические данные сыворотки крыс F344, обработанных 2-(1-ментокси)этанолом в течение 13 недель

Считалось, что значительное увеличение абсолютной (120%) и относительной (118%) массы надпочечников в группе мужчин, получавших дозу 250 мг/кг, было связано с тестируемым химическим веществом. Кроме того, увеличение абсолютной и относительной массы надпочечников у обоих полов показало четкую зависимость от дозы в предварительном 28-дневном исследовании (данные не показаны), что указывает на связь с исследуемой химической обработкой. Хотя гипертрофия надпочечников может быть результатом стресса, ни в настоящем, ни в предварительных исследованиях не было обнаружено никаких данных, указывающих на стресс, таких как снижение прибавки массы тела или атрофия тимуса и других лимфоидных органов. Поскольку в случае ингибирования ферментов, связанных со стероидогенезом, гистопатологические изменения в надпочечниках могут отсутствовать даже при нарушении продукции глюкокортикоидов12, нельзя исключить возможность того, что увеличение массы надпочечников является токсическим признаком. Напротив, увеличение относительной массы селезенки и яичек в группе мужчин, получавших дозу 250 мг/кг, не наблюдавшееся в предварительном исследовании, считалось токсикологически незначительным из-за отсутствия гистопатологических поражений или значительного увеличения абсолютной массы. Аналогично, биохимия сыворотки выявила снижение A/G и увеличение Ca у обоих полов, что считалось не имеющим токсикологического значения, поскольку не было обнаружено никаких отклонений в соответствующих параметрах. Более того, снижение уровней Bil и ALP у обоих полов, а также снижение AST и ALT у женщин противоречили ожидаемым токсическим эффектам и считались незначимыми.

Таблица 3. Данные о массе органов у крыс F344, обработанных 2-(l-ментокси)этанолом в течение 13 недель

Хроническая нефропатия, характеризующаяся базофильными канальцами, гиалиновым цилиндром и очаговым интерстициальным воспалением, наблюдалась со статистической значимостью у мужчин во всех группах лечения. Кроме того, в группах самцов, получавших дозы 60 и 250 мг/кг, было обнаружено увеличение Cre в сыворотке, а также абсолютной и относительной массы почек; эти изменения не наблюдались в группах лечения женщин. В этих случаях степень накопления эозинофильных гранул в эпителиальных клетках проксимальных канальцев увеличивалась явно дозозависимым образом. Эти гранулы были подтверждены как 2u-глобулин с помощью иммуногистохимии, что указывает на возникновение 2u-глобулиновой нефропатии. 2u-глобулины, связанные с определенными химическими веществами, такими как d-лимонен, накапливаются в лизосомах и наблюдаются в проксимальных канальцах в виде эозинофильных или гиалиновых гранул9. Такое накопление может повредить эпителиальные клетки, что приведет к хронической прогрессирующей нефропатии и последующему образованию опухоли9. Таким образом, хотя NOAEL для 2-(l-ментокси)этанола, связанного с 2u-глобулиновой нефропатией в почках самцов крыс, не был идентифицирован, этот тип нефропатии, как сообщается, специфичен для самцов крыс и, следовательно, не имеет отношения к оценке риска для человека13. Повышенный риск почечной недостаточности, опосредованный механизмами, связанными с накоплением 2u-глобулина, маловероятен, поскольку этот белок отсутствует у людей14. Поэтому было признано целесообразным исключить из определения NOAEL изменения, связанные с хронической нефропатией, наблюдаемые у мужчин.

В заключение, настоящее 13-недельное исследование субхронической токсичности продемонстрировало, что лечение этанолом 2-(l-ментокси) в дозе 250 мг/кг массы тела/день вызывает токсические изменения в гематологии, биохимии сыворотки и массе органов у мужчин и женщин. самки крыс F344. На основании наблюдаемых результатов NOAEL для 2-(l-ментокси)этанола был оценен как 60 мг/кг массы тела/день для обоих полов.

Раскрытие потенциала

Конфликты интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарность: Данное исследование было проведено при поддержке Министерства здравоохранения, труда и социального обеспечения Японии. Авторы благодарят Аяко Сайкаву и Ёсими Комацу за экспертную техническую помощь в обработке гистологических материалов.

Рекомендации

1. JECFA. Серия ВОЗ по пищевым добавкам: 60. Оценка безопасности некоторых пищевых добавок. 579–593. 2009.

2. Акаги Дж., Чо Ю.М., Мизута Ю., Тойода Т. и Огава К. Оценка субхронической токсичности 5-гексенилизотиоцианата, идентичного натуральному ароматизатору из Wasabia japonica, у крыс F344/DuCrj. Пищевой химический токсикол. 122: 80–86. 2018. [Medline] [CrossRef]

3. Мацусита К., Тойода Т., Морикава Т. и Огава К. 13-недельное исследование субхронической токсичности ванилин-пропиленгликоль-ацеталя на крысах F344. Пищевой химический токсикол. 132: 110643. 2019. [Medline] [CrossRef]

4. Мацусита К., Тойода Т., Морикава Т., Такахаши М., Иноуэ К. и Огава К. 13-недельное исследование субхронической токсичности 2-этилбутаналя на крысах F344. Регул Токсикол Фармакол. 100: 118–126. 2018. [Medline] [CrossRef]

5. Тойода Т., Чо Ю.М., Мацусита К., Тачибана С., Сенума М., Акаги Дж. и Огава К. 13-недельное исследование субхронической токсичности гексилацетата на крысах SD. J Токсикол Патол. 32: 205–212. 2019. [Medline] [CrossRef]

6. Акаги Дж., Чо Ю.М., Мизута Ю., Татебе С., Сато К. и Огава К. Оценка субхронической токсичности изоэвгенилметилового эфира у крыс F344/DuCrj при 13-недельном пероральном введении. Регул Токсикол Фармакол. 102: 34–39. 2019. [Medline] [CrossRef]

7. Иде Т., Мизута Ю., Акаги Дж., Масумото Н., Сугимото Н., Сато К., Огава К. и Чо Ю.М. Исследование токсичности 90-дневных повторных пероральных доз четырех стереоизомеров 2,4-диметил- 4-фенилтетрагидрофурана, синтетического ароматизатора, на крысах F344. Регул Токсикол Фармакол. 114: 104664. 2020. [Medline] [CrossRef]

8. Фурукава С., Нагаике М. и Озаки К. Базы данных по техническим аспектам иммуногистохимии. J Токсикол Патол. 30: 79–107. 2017. [Medline] [CrossRef]

9. Сили Дж. К., Хард Г. К. и Бланкеншип Б. Почки. В: «Патология крысы» Бурмана, 2-е изд. AW Сатти (ред.). Академическое издательство, Лондон. 125–166. 2018.

10. Таканобу К., Айсо С., Умеда Ю., Сено Х., Сайто М., Катагири Т., Икава Н., Исикава Х., Мине Т., Таке М., Харесаку М., Мацумото М. и Фукусима С. [Исходные данные о спонтанных опухолях в F344. /DuCrlCrlj крысы]. Сангё Эйсейгаку Засси. 57: 85–96. 2015 (на японском языке). [Medline] [CrossRef]

11. JECFA. Серия технических отчетов ВОЗ: 891. Оценка некоторых пищевых добавок (Пятьдесят первый доклад Объединенного комитета экспертов ФАО/ВОЗ по пищевым добавкам). 111–118. 2000.

12. Валлиг М.А. Эндокринная система. В: Основы токсикологической патологии, 3-е изд. М. А. Валлиг, В. М. Гашек, К. Г. Руссо, Б. Болон и Б. В. Малер (ред.). Академическое издательство, Лондон. 565–624. 2018.

13. Свенберг Я.А. 2u-глобулиновая нефропатия: обзор задействованных клеточных и молекулярных механизмов и их значение для оценки риска для человека. Перспектива здоровья окружающей среды. 101 (Приложение 6): 39–44. 1993. [Medline] [CrossRef] 14. Гривс П. Мочевыводящие пути. В: Гистопатология доклинических исследований токсичности, 4-е изд. Академическое издательство, Лондон. 537–614. 2012.