Актеозид: исследование антиоксидантной и антигипертензивной активности

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com

Антиоксидантная и антигипертензивная активность актеозида и его аналогов

Чао-Сян ЧЭНЬ1,2, Инь-Шиу ЛИН3, Мэй-Инь ЦЯНЬ2,4, Вэнь-Чи ХОУ5,6,* и Мяо-Линь ХУ1,*

Абстрактный. актеозид(Act), фенилэтаноидный гликозид, является активным соединением в некоторых растениях и традиционных лекарственных средствах на травах. действовать вместе со своим структурным изомером,изоактеозид(Isoact) и аналог 6-O-ацети-лактеозид (6-O-ацетилакт), использовались в исследовании для изученияантиоксидант, антиангиотензинпревращающий фермент (АПФ) и ингибирующее действие на гемолизв пробиркаи антигипертензивная активность против спонтанно гипертензивных крыс (SHR)в виво. Мы показали, что Act, Isoact и 6-O-ацетилакт эффективно очищает 1,1-дифенил-2-пикрил-гидразильные радикалы (с IC50 при 11,4, 9,48 и 9,55 мкМ соответственно) и супероксидные радикалы (с IC50 при 66,0, 38,5). и 39,1 мкМ соответственно). Как Isoact и 6-O-ацетилакт обладал аналогичной активностью по удалению радикалов, в следующих исследованиях использовались только Act и Isoact. И Act, и Isoact ингибировали активность ксантиноксидазы с IC50 при 53,3 и 62,2 мкМ соответственно. И Акт, и Изоакт также значительно ингибировали активность АПФ и гемолиз, вызванный 2,2'-азо-бис(2-амидинопропан)дигидрохлоридом, но эффекты Акта были сильнее, чем Изоакта. Затем мы перорально вводили однократную дозу Act или Isoact (10 мг/кг массы тела) SHR и измеряли изменения систолического артериального давления (САД) и диастолического артериального давления (ДАД) в течение 24 часов. Акт, но не Изоакт, проявлял антигипертензивную активность в отношении снижения САД и ДАД. Результаты свидетельствуют о потенциальной полезности Акта в качестве продукта здорового питания дляантиоксидантзащита и регулирование артериального давления.

Ключевые слова: актеозид; Антигипертензивная активность; Ангиотензинпревращающий фермент (АПФ); антиоксидант; Гемолиз.

активный ингредиент актеозид в цистанхе

Введение

актеозид(Act), фенилэтаноидный гликозид, содержащий кофейную кислоту, 3',4'-дигидроксифенилэтанол, глюкозу и рамнозу, впервые был выделен из цветковСирень Вул- Гари(Birkofer et al., 1968), а вместе со структурным изомеромизоактеозид(Isoact) и производная от6-O-ацетилактеозид(6-O-ацетилакт), был обнаружен во многих растениях и растительных лекарственных средствах, таких какЛигструм пурпура восходящая(Вонг и др., 2001),Калликарпа дихотомия(Ку и др., 2006; Ли и др., 2006),Цистанхе пустыняа такжеБошниакия россика(Ву и др., 2006 г.),Скрофулярия нингпоэнис(Хуанг и др., 2008 г.),Рехманния глютиноза(Ли и др., 2006). Сообщалось, что этот акт проявляет антиметастатическую активность в отношении клеток меланомы B16 на моделях мышей C57BL/6 (Ohno et al., 2002). Act, Isoact и 6-OНедавно было показано, что -ацетилакт ингибирует активируемую IL -1 -экспрессию межклеточной САМ-1 и сосудистой САМ-1 в эндотелиальных клетках пупочной вены человека (Chen et al., 2009). Act также защищает эндотелиальные клетки легких крупного рогатого скота от окислительного стресса, индуцированного гидроксильными радикалами (Chiou et al., 2004), и ингибирует выработку оксида азота и TNF путем блокирования активации AP-1 в макрофагах, стимулируемых липополисахаридами (Rao et al. , 2009). Act и Isoact проявляют нейропротекторную активностьв пробирка(Ку и др., 2005). Ку и др. (2006) сообщили, что Act и его агликоны эффективно удаляют 1,1-дифенил-2-пикрилгидразил (DPPH) и оксид азота.в пробирка. Тем не менее, несколько исследований сравнивали бок о бокв пробирка антиоксидантактивности Act и его структурно родственных соединений, таких как Isoact и 6-O- ацетилакт.

Для лечения гипертензии использовались несколько классов фармакологических средств (Mark and Davis, 2000). Один класс антигипертензивных препаратов, известный как ингибиторы ангиотензин-I-превращающего фермента (АПФ) (т.е. ингибиторы пептидазы), имеет низкую частоту побочных эффектов и является предпочтительным классом антигипертензивных средств.

препаратов при лечении пациентов с сопутствующими вторичными заболеваниями (Fotherby and Panayiotou, 1999). ACE (пептидилдипептидгидролаза EC 3.4.15.1) представляет собой дипептид-высвобождающую Zn-содержащую экзопептидазу, которая удаляет дипептид с С-конца ангиотензина I с образованием ангиотензина II, очень гипертензивного соединения. Несколькоантиоксидантпептиды (восстановленный глутатион и родственные карнозину пептиды) проявляют ингибиторную активность АПФ (Hou et al., 2003). Первый клинически доступный перорально активный ингибитор АПФ каптоприл был разработан для лечения гипертензии (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). Сообщалось, что этот акт оказывает опосредованное оксидом азота расслабляющее действие на интактные эндотелиальные кольца аорты крыс SD (Wong et al., 2001). Ахмад и др. (1995) сообщили, что Act вызывает дозозависимое снижение систолического артериального давления (САД) и диастолического артериального давления (ДАД) после его внутривенной инъекции нормотензивным анестезированным крысам Wistar. Однако неясно, являются ли перорально принимаемые Act и/или его родственные изомеры антигипертензивными средствами.в виво. В настоящем исследовании мы исследовалив пробирка антиоксидантспособность и ингибирующая активность АПФ, а такжев вивоантигипертензивное действие Act, Isoact и/или 6-O-ацетилакт на крысах со спонтанной гипертензией (SHR). Ожидается, что эти исследования предоставят полезные данные для разработки Act как продукта здорового питания.

Материалы и методы

Материалы

2,2'-азо-бис(2-амидинопропан)дигидрохлорид (AAPH), ACE (I блок, легкие кролика), бутилированный гидрокситолуол (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}фурил]акрилоил)-Phe-Gly-Gly (FAPGG), NADH, феназинметосульфат (PMS), ксантин и ксантиноксидазу приобретали у Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Каптоприл был приобретен у Calbiochem Co. (Калифорния, США). Act, Isoact и 6-O-ацетилакт (рис. 1) были приобретены у Equal Corp. (чистота > 98 процентов, Шанхай, Китай). Другие химикаты и реагенты были получены от Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США).

уборка мусора Мероприятия из Действовать, Изоакт, а также 6-O- ацетилакт против dPPH радикалы по спектрофотометрия

Объем (0,3 мл) Act, Isoact и 6-O-ацетилакт (конечные концентрации от 1,56 до 50 мкМ), BHT и аскорбиновую кислоту (конечные концентрации от 2,4 до 60 мкМ) добавляли к 0,1 мл 1 М трис-HCl-буфера (рН 7,9). ), а затем смешивали с 0,6 мл 100 мкМ DPPH в метаноле до конечной концентрации 60 мкМ в течение 20 минут под защитой от света при комнатной температуре (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Снижение поглощения при 517 нм измеряли и выражали как ΔA517 нм. В качестве холостого опыта использовали деионизированную воду. Активность по удалению радикала DPPH (в процентах) рассчитывали по уравнению: (ΔA517холостой образец - ΔA517образец) ÷ ΔA517холостой × 100. IC50 обозначает концентрацию полуингибирования.

тормозящий Мероприятия из Действовать а также Изоакт против ксантин оксидаза

Активность ксантиноксидазы измеряли путем определения образования мочевой кислоты при 295 нм с использованием ксантина в качестве субстрата (Kalckar, 1947). Различные количества Act и Isoact (конечные концентрации 25, 50 и 75 мкМ) предварительно смешивали с 50 мкл 1 мЕд/мл ксантиноксидазы при 4 градусах в течение 1 ч, а затем 300 мкл 1 мМ ксантиноксидазы. были добавлены. Изменения поглощения при 295 нм регистрировали в течение 2 мин и выражали как ΔA295 нм/мин. Ингибирующую активность ксантиноксидазы (в процентах) рассчитывали следующим образом: (ΔA295 нм/мин черного цвета - ΔA295 нм/мин образца) ÷ ΔA295 нм/мин черного цвета × 100. Деионизированную воду использовали вместо раствора образца в качестве контрольного эксперимента. IC50 означает концентрацию полуингибирования.

уборка мусора Мероприятия из Действовать, Изоакт, а также 6-O- ацетилакт против супероксид радикалы по спектрофотометрия

Радикал супероксида был получен с помощью системы PMS-NA-DH (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Все образцы объемом 0,2 мл, содержащие разное количество Act, Isoact и 6-O-ацетилата (конечная концентрация 15,6, 31,3, 62,5, 125 и 25{9}} мкМ), последовательно добавляли к 0,2 мл 630 мкМ нитросинего тетразолия, 0,2 мл 33 мкМ PMS и 0,2 мл 156 мкМ NADH в 100 мМ фосфатном буфере (pH 7,4). В качестве холостой пробы вместо раствора образца использовали деионизированную воду. В качестве положительного контроля использовали аскорбиновую кислоту (конечная концентрация 6, 9, 12 и 24 мкМ). Изменения поглощения при 560 нм регистрировали в течение 2 мин и выражали как ΔA560 нм/мин. Активность по удалению супероксидных радикалов (в процентах) рассчитывали следующим образом: (ΔA560 нм/мин черного цвета - ΔA560 нм/мин образца) ÷ ΔA560 нм/мин черного цвета × 100. IC50 обозначает концентрацию полуингибирования.

решимость из Туз тормозящий Мероприятия из Действовать а также Изоакт по ВЭЖХ

Каждые 50 мкл Act (0,2, 0,4, 0,5 и 2,0 мкмоль) и Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0 и 2.0 мкмоль) предварительно смешивали с 15 мкл 1 ЕД/мл АПФ. в течение 5 мин, а затем добавляли 200 мкл 0,5 мМ FAPGG и реагировали при комнатной температуре в течение 10 мин (Анзенбахерова и др., 2001). Для остановки реакции добавляли 800 мкл метанола. Холостым экспериментом был только FAPGG. В контрольном опыте АСЕ реагировал с ВАПГ в тех же условиях. Хроматографическое разделение FAPGG и FAP проводили на хроматографической системе Hitachi (Япония) с петлей на 10 мкл. ВЭЖХ-анализ проводили на колонке Biosil Aqua-ODS-W 5 мкм (Biotic Chemical Co., Ltd., Тайвань, 250 × 4,6 мм id), размер частиц 5 мкм. Прореагировавшую смесь разделяли изократически с подвижной фазой, состоящей из 0,02 М нониламина (доведенного до рН 2,4 фосфорной кислотой) и ацетонитрила в соотношении 67,5:32,5 (об/об) (Анзенбахерова и др., 2001). Скорость потока составляла 1 мл/мин; объем инъекции 10 мкл; детектор был установлен на 345 нм. Ингибирование ACE (проценты) Act и Isoact рассчитывали следующим образом: [(Площадь FAPGGblank - Площадь FAPGGcontrol) - (Площадь FAPGGblank - Площадь FAPGGsample) ÷ (Площадь FAPGGblank - Площадь FAPGGcontrol) × 100.

тормозящий Мероприятия из Действовать а также Изоакт против AAPH-опосредованный гемолиз

Свободнорадикальное цепное окисление эритроцитов крыс (эритроцитов) посредством гемолиза, опосредованного AAPH (Miki et al., 1987). Кровь крыс помещали в пробирки с гепарином и центрифугировали при 1000×gв течение 10 мин. После трехкратной промывки 0,15 М раствором NaCl упакованные эритроциты получали центрифугированием при 1000×gв течение 10 мин. Различные количества Act и Isoact (конечные концентрации составляли 2, 5 и 10 мкМ) смешивали с 25 мкл 20-процентной суспензии эритроцитов (об./об., в 10 мМ PBS) и 25 мкл 500 мМ раствора AAPH при 37 градусах в течение 0 , 1, 1,5, 2, 2,5, 3 и 3,5 ч при легком встряхивании. Каждую смесь центрифугировали при 1000×gв течение 10 мин, а супернатант измеряли при 536 нм. Деионизированную воду использовали вместо раствора AAPH или раствора образца, соответственно, в качестве контрольной группы или контрольной группы. Ингибирование гемолиза (в процентах) Act и Isoact через 3 часа или через 3,5 часа рассчитывали следующим образом: (ΔA536 нмконтроль — ΔA536 нмобразец) ÷ ΔA536 нмконтроль × 100.

антигипертензивный последствия из Действовать а также Изоакт на Шр

Влияние перорально вводимых Act, Isoact и каптоприла через зонд для кормления (2,0 × 80 мм) на снижение САД и снижение ДАД определяли в соответствии с методом, описанным в предыдущих отчетах (Lin и др., 2006; Лин и др., 2008; Хан и др., 2011). Все экспериментальные процедуры на животных следовали опубликованным руководствам (National Science Council, 1994). Самцы SHR (в возрасте 8 недель, Национальный центр лабораторных животных, Тайбэй) содержались по отдельности в стальных клетках при температуре 24 градуса с циклом свет-темнота 12- часов и имели свободный доступ к стандартному корму для мышей/крыс ( Prolab RMH2500, диета 5P14, PMI Nutrition International, Брентвуд, Миссури) и вода. SHR были случайным образом разделены на контрольную и пробную обработку для определения SBP и DBP (по шесть крыс в группе). Для краткосрочного антигипертензивного эксперимента перорально однократно вводили 0,5 мл 10 мг Акта или Изоакта/кг SHR или 5 мг каптоприла/кг SHR, а кровяное давление в хвосте измеряли через 2, 4, 6 и 24 часа. ч после однократного приема внутрь. Для холостого опыта использовали 0,5 мл дистиллированной воды. Непрямой измеритель артериального давления (BP-98A, Softron Co. Ltd. Токио, Япония) использовался для измерения САД и ДАД четыре раза при каждом определении для каждого лечения.

данные анализ

Значения представлены как средние значения ± стандартное отклонение и проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки для множественных сравнений средних. Студентыt-тест проводился, когда сравнивались только две группы данных (например, между Act и Isoact при одинаковой концентрации). Значение p < 0.05="" считается="" статистически="" значимым.="" статистический="" анализ="" был="" выполнен="" с="" использованием="" spss="" для="" windows,="" версия="" 10="" (spss,="" inc.,="" чикаго,="" иллинойс,="">

актеозидв цистанхе для улучшения памяти

Полученные результаты

уборка мусора Мероприятия из PPH а также супероксид радикалы

Act, Isoact и 6-O-ацетилакт проявлял дозозависимую активность по удалению DPPH при pH 7,9 (рис. 2). Значения IC50 составили 11,4, 9,48 и 9,55 мкМ соответственно для Act, Isoact и 6-.O-ацетилакт. Значения IC50 положительных контролей аскорбиновой кислоты и BHT составляли 13,1 и 18,5 мкМ соответственно.

Запрет из ксантин оксидаза Мероприятия

Было показано, что Act и Isoact проявляют дозозависимое ингибирование ксантиноксидазы (рис. 3). Было рассчитано, что IC50 составляет 53,3 и 62,2 мкМ соответственно для Act и Isoact.

Запрет из супероксид дисмутаза Мероприятия

Поскольку и Act, и Isoact ингибируют активность ксантиноксидазы, мы использовали систему PMS-NADH для создания супероксидных радикалов (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Действовать,

Изоакт и 6-O-ацетилакт проявлял дозозависимую активность по удалению супероксидных радикалов (рис. 4). Значения IC50 составляли 66,0, 38,5 и 39,1 мкМ соответственно для Act, Isoact и 6-.O-ацетилакт. Значения IC50 положительного контроля аскорбиновой кислоты составляли 9,0 мкМ. Из результатов рисунков 2 и 4 стало ясно, что Isoact и 6-O-ацетилат обладал аналогичной активностью по удалению радикалов в отношении радикалов DPPH и супероксида, и, таким образом, для дальнейшего скрининга биологической активности были выбраны только Act и Isoact.

Туз тормозящий виды деятельности из Действовать а также Изоакт

В предварительном тесте мы обнаружили, что Act и Isoact мешали абсорбции субстрата ACE FAPGG и его гидролизованного продукта FAP при 345 нм, которые использовались для непрерывного спектрофотометрического анализа (Holmquist et al., 1979). Таким образом, разделение в сочетании с обнаружением Act или Isoact и FAPGG с помощью ВЭЖХ использовали для мониторинга ингибирующей активности ACE. Рисунок 5A–Рисунок 5D представляет собой типичные хроматограммы ВЭЖХ из 1 0 мкл реакционных смесей холостой пробы (только FAPGG, рисунок 5A); контрольный тест (ACE реагировал с FAPGG с образованием FAP, рис. 5B); 0,5 мкмоль Act (312,5 мкг), ACE и FAPGG (рис. 5C); и 0,5 мкмоль Isoact (312,5 мкг), ACE и FAPGG (рис. 5D). Площадь FAPGG на фигуре 5B была наименьшей, а на фигуре 5A - самой большой из четырех типичных хроматограмм ВЭЖХ. Области FAPGG на рисунках 5C и 5D зависят от ингибирующей активности ACE различных концентраций Act и Isoact. Рассчитанные ингибирования ACE для Act и Isoact показаны на фигуре 5E. Акт показал более высокую ингибирующую активность ACE, чем Isoact, и IC50 первого была рассчитана как 472 мкМ по площади на хроматограммах ВЭЖХ.

тормозящий Мероприятия из Действовать а также Изоакт против AAPH-опосредованный гемолиз

Ингибирующую активность Act и Isoact в отношении гемолиза, опосредованного AAPH, в концентрациях 2, 5 и 10 мкМ оценивали в течение 3,5 ч (Miki et al., 1987). Результаты на фиг. 6А демонстрируют, что гемолиз в эритроцитах крыс резко увеличился (выражается как ΔA536 нм) после 3-ч или 3,5-ч реакции в присутствии радикалов AAPH (в качестве контрольных групп, белый символ цикла ). Небольшой гемолиз или его отсутствие наблюдали в отсутствие радикалов AAPH в течение 3,5-ч реакции (пустые группы, черный символ цикла). Таким образом, ингибирование гемолиза Act и Isoact через 3 ч или через 3,5 ч рассчитывали следующим образом: (ΔA536 нмконтроль — ΔA536 нмобразец) ÷ ΔA536 нмконтроль × 100. Рисунок 6B

показывает, что как Act, так и Isoact в концентрациях 2, 5 и 10 мкМ проявляли зависимое от концентрации ингибирование гемолиза, вызванного AAPH, при этом ингибирующие эффекты Act значительно сильнее, чем эффекты Isoact при каждой используемой концентрации.

антигипертензивный последствия из Действовать а также Изоакт на Шр

SHR получали однократное пероральное введение Акта и Изоакта (10 мг/кг SHR), и изменения САД и ДАД регистрировались в течение 24 часов. Ранее мы сообщали, что артериальное давление (САД и ДАД) SHR было изменчивым в течение 24- ч (Lin et al., 2006; Han et al., 2011). Поэтому было использовано сравнение в фиксированное время (например, 2, 4, 6, 8 и 24 часа) между бланком и образцом, а не до и после самого перорального введения. Было обнаружено, что Act, но не Isoact, эффективно снижал SBP и DBP SHR по сравнению с контрольной группой (дистиллированная вода). САД было значительно снижено в группе Акт через 2, 4 и 6 ч на 18,8, 16,5 и 14,9 мм рт.ст. соответственно, но снижение САД (3,3 мм рт.ст.) через 24 ч после лечения Актом не было постоянным.

художественно значимое (рис. 7А). Как показано на рис. 7В, ДАД снижалось в группе Акт через 2, 4 и 6 ч (на 8,5, 7,6 и 12,{10}} мм рт. ст. соответственно), хотя только результат, полученный через 6 ч, был статистически значимым. (P< 0.05).="" отмечено,="" что="" акт="" и="" каптоприл="" (в="" качестве="" положительного="" контроля)="" оказывали="" сходное="" влияние="" на="" сад="" на="" ранних="" стадиях="" (2,="" 4="" и="" 6="" ч)="" после="" перорального="">

актеозидв цистанхе оказывают хорошее антиоксидантное действие

ОБСУЖДЕНИЕ

Активные формы кислорода и реакции, опосредованные свободными радикалами, участвуют в дегенеративных или патологических процессах, таких как старение, рак, ишемическая болезнь сердца и болезнь Альцгеймера (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). Несколько докладов были посвящены проверкеантиоксидантдеятельности из природных ресурсов. В настоящем исследовании мы впервые сравнилиантиоксидантдеятельность Act, Isoact и 6-O-ацетилат. Act и Isoact представляют собой структурные изомеры, в которых составляющая часть кофейной кислоты связана с гидроксильной группой C-4 глюкозы в первом случае и с гидроксильной группой C-6 глюкозы во втором. В то время как составляющие рамнозы и 3',4'-дигидроксифенилэтанола, соответственно, связаны с гидроксильными группами C-3 и C-1 фрагмента глюкозы в одной и той же молекуле Act и Isoact, { {8}}O-ацетилакт представляет собой производное Act, в котором уксусная кислота связана с гидроксильной группой C-6 в молекуле глюкозы (рис. 1). Ку и др. (2006) сообщили, что Act и его агликоны проявляют активность по удалению DPPH, и порядок этих активностей (выраженный как IC50) был следующим: Act (1,28 мкМ) > кофейная кислота (2,22 мкМ) > 3',4'-дигидроксифенилэтанол ( 7,72 мкМ) > -токоферол (15,1 мкМ). В настоящем отчете (рис. 2) порядок действий по очистке DPPH (выраженный как IC50) следующий: 6-O-ацетилат (9,55 мкМ) ≈ Isoact (9,48 мкМ) > Act (11,4 мкМ). Эти значения были сравнимы или лучше, чем у аскорбиновой кислоты (IC50 13,1 мкМ) и BHT (IC50 18,5 мкМ) для удаления радикалов DPPH. Более высокая IC50 Act в настоящем отчете может быть связана с конечной концентрацией 60 мкМ DPPH вместо 30 мкМ, использованной Koo et al. сообщается (2006 г.). Поскольку анализ радикалов DPPH относится к реакции переноса электрона (Huang et al., 2005), предполагается, что производное в C-6 гидроксильной группе глюкозного фрагмента, такое как ацетильная группа в {{21 }}O- фрагмент ацетилата и кофейной кислоты в Isoact может более легко обеспечить реакцию переноса электрона, чем свободная гидроксильная группа C-6 в глюкозном фрагменте Act для анализа удаления DPPH.

Действуйте, 6-OСообщалось, что -ацетилат и Изоакт обладают активностью по удалению супероксидов in vitro с использованием системы ксантин/ксантиноксидазы для образования супероксидных радикалов (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Однако наше настоящее исследование показало, что Act проявляет ингибирующую активность ксантиноксидазы (рис. 3). Таким образом, супероксидный радикал был получен с использованием системы PMS-NADH в настоящем отчете (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) вместо системы ксантин/ксантиноксидаза. Действительно, используя систему ксантин/ксантиноксидаза для образования супероксидных радикалов, Wang et al. (1996) получили IC50, равную 63 мкМ Act, против радикалов супероксида, и это значение близко к значению для ингибирования активности ксантиноксидазы Act, как сообщается в настоящем исследовании (53,3 мкМ). Сообщалось, что кофейная кислота ингибирует ксантиноксидазу (Chiang et al., 1994). Можно предположить, что активность по удалению супероксидов с использованием системы генерации ксантин/ксантиноксидазы некоторых фитохимических веществ со структурой, связанной с кофейными кислотами, таких как Act или Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999), может способствовало, по крайней мере частично, ингибированию ксантиноксидазы. Интересно, что Ван и др. (1996) обнаружили, что Act (0,5 и 2,5 мМ) не ингибирует активность ксантиноксидазы, которая определяется кислородным электродом по потреблению кислорода во время окисления ксантина. Таким образом, важно иметь в виду, что разные методы анализа активности удаления супероксида могут давать противоречивые данные.

Ли и др. (1993) сообщили об одинаковой степени ингибирования Act и Isoact в отношении гемолиза, опосредованного AAPH, в эритроцитах мышей. Однако мы показали здесь, что Акт проявлял гораздо более высокую ингибирующую активность в отношении гемолиза, вызванного AAPH, в эритроцитах крыс, чем Isoact (рис. 6). Неясно, могло ли такое несоответствие быть связано с различием видов грызунов.

Канг и др. (2003) сообщили, что Act проявлял ингибиторную активность ACE, а IC50 составляла 373,3 мкг/мл, что было рассчитано как 598 мкМ с использованием Hip-His-Leu в качестве субстрата. В настоящем отчете Act показал более высокую ингибирующую активность ACE, чем Isoact, а IC50 первого была рассчитана как 472 мкМ по площади на хроматограммах ВЭЖХ (рис. 5). Сообщалось, что этот акт оказывает опосредованное оксидом азота расслабляющее действие на интактные эндотелиальные кольца аорты крыс SD (Wong et al., 2001). Хотя было показано, что Act оказывает антигипертензивное действие на крысах Wistar,

в исследовании использовалась внутривенная инъекция Act анестезированной крысе, чтобы исключить фактор адсорбции (Ahmad et al., 1995). Здесь мы вводили Act перорально SHR и определяли изменения артериального давления. Мы обнаружили, что факт перорального введения, но не Изоакт, оказывает антигипертензивное действие за счет снижения САД и ДАД в течение 24 часов после однократного введения (рис. 7). Акт в дозе 10 мг/кг массы тела оказывал эффект, близкий к эффекту каптоприла в дозе 5 мг/кг SHR по снижению САД, и был лучше каптоприла по снижению ДАД.

В заключение акт выставленантиоксидантактивностью, ингибирующей активностью АПФ и антигипертензивным действием на SHR. Представленные здесь результаты принесут пользу усилиям по разработке растительных лекарственных средств или связанных с ними продуктов с использованием Акта, который был обнаружен во многих растениях и растительных лекарственных средствах, для антиоксидантной защиты и терапевтических эффектов в будущем.

Цистанхеактеозиддля антиоксидантов и антивозрастных средств

1 Кафедра пищевой науки и биотехнологии, Национальный университет Чунг Син, Тайчжун, Тайвань

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Тао-Юань, Тайвань

3Фармацевтическая школа, Тайбэйский медицинский университет, Тайбэй, Тайвань

4 Высший институт биомедицинских материалов и инженерии, Тайбэйский медицинский университет, Тайбэй, Тайвань

5Научно-исследовательский центр традиционной фитотерапии, Больница Тайбэйского медицинского университета, Тайбэй, Тайвань

6Высший институт фармакогнозии, Тайбэйский медицинский университет, Тайбэй, Тайвань

(Поступила 12.03.2012; Принята 20.04.2012)

ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

Ахмад М., Г. Х. Ризвани, К. Афтаб, В. У. Ахмад, А. Х. Гилани и С. П. Ахмад. 1995.актеозид: новый антигипертензивный препарат. Фитотерм. Рез. 9: 525-527.

Эймс, Б.Н. 1983. Пищевые канцерогены и антиканцерогены: кислородные радикалы и дегенеративные заболевания. Наука 221:1256-1264.

Анзенбахерова Э., П. Анценбахер, К. Мацек и Ю. Кветина. 2001. Определение ингибиторов фермента (ангиотензинконвертазы) на основе ферментативной реакции с последующей ВЭЖХ.J. Фармацевт. Биомед. Анальный. 24: 1151-1156.

Биркофер Л., К. Кайзер и У. Томас. 1968 год.актеозиди неоактеозид: Zuckerester aus Syringa vulgaris. Naturforschung 23B: 1051-1058.

Борер, Дж. С. 2007. Ингибирование ангиотензинпревращающего фермента: важное достижение в лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Евро. Heart J. Suppl. 9(Дополнение E): E2-E9.

Chen, CH, TY Song, YC Liang и ML Hu. 2009.актеозиди 6-O-ацетилактеозид подавляет молекулы клеточной адгезии, индуцированные IL-1, путем ингибирования ERK и JNK в эндотелиальных клетках сосудов человека. Дж. Агрик. Еда

хим. 57: 8852-8859.

Чан, Х.К., И.Дж. Ло и Ф.Дж. Лу. 1994. Ингибиторы ксантиноксидазы из листьев Alsophila spinulosa (Hook) Tryon. J. Ингибирование ферментов. 8: 61-71.

Chiou, WF, LC Lin и CF Chen. 2004.актеозидзащищает эндотелиальные клетки от окислительного стресса, вызванного свободными радикалами. Дж. Фарм. Фармакол. 56: 743-748.

Фотерби, доктор медицины и Б. Панайоту. 1999. Антигипертензивная терапия в профилактике инсульта: что, когда и для кого? Наркотики 58: 663-674.

Гао, Дж. Дж., К. Игалаши и М. Нукина. 1999. Активность фенилпропаноидных гликозидов по удалению радикалов у Caryopteris incana. Бионауч. Биотехнолог. Биохим. 63: 983-988.

Гей, К.Ф. 1990.антиоксидантгипотеза сердечно-сосудистых заболеваний: эпидемиология и механизмы. Биохим. соц. Транс. 18: 1041-1045.428 Ботанические исследования, Vol. 53, 2012 г.

Han, CH, JC Liu, KH Chen, YS Lin, CT Chen, CT Fan, HL Lee, DZ Liu и WC Hou. 2011. Антигипертензивное действие обработанного чеснока на спонтанно гипертензивных крысах и гипертензивных людях. Бот. Стад. 52: 277-283.

Холмквист Б., П. Баннинг и Дж. Ф. Риордан. 1979. Непрерывный спектрофотометрический анализ ангиотензинпревращающего фермента. Анальный. Биохим. 95: 540-548.

Хоу, В.К., Х.Дж. Чен и Ю.Х. Лин. 2003. Антиоксидантные пептиды с ингибирующей активностью ангиотензинпревращающего фермента и применение для очистки ангиотензинпревращающего фермента. Дж. Агрик. Пищевая хим. 51: 1706-1709.

Хуанг Д., Б. Оу и Р.Л. Прайор. 2005. Химия позадиантиоксидантанализы емкости. Дж. Агрик. Пищевая хим. 53: 1841-1856.

Хуанг, К.Г., Ю.Дж. Шанг, Дж. Чжан, Дж.Р. Чжан, В.Дж. Ли и Б.Х. Цзяо. 2008. Гипоурикемические эффекты фенилпропаноидных гликозидов.актеозидScrophularia ningpoenis на уровни мочевой кислоты в сыворотке у мышей, предварительно обработанных оксонатом калия. амер. Дж.

Подбородок. Мед. 36: 149-157.

Lee, KY, EJ Jeong, HS Lee и YC Kim. 2006.актеозидCallicarpa dichotoma ослабляет вызванные скополамином нарушения памяти. биол. фарм. Бык. 29: 71-74.

Ли, Дж., П. Ван, Р. Чжэн, З. Лю и З. Цзя. 1993. Защита фенилпропаноидных гликозидов Pedicularis от окислительного гемолиза in vitro. Планта Мед. 59: 315-317.

Ли, Х., Г. X. Чоу, З. Т. Ван и З. Б. Ху. 2006. ВЭЖХ определениеактеозидв Radix Rehmanniae. Чжунго Чжун Яо За Чжи 31: 822-824.

Лин, С.И., К.К. Ван, Ю.Л. Лу, В.К. Ву и В.К. Хоу. 2008.антиоксидант, чувствительной к семикарбазиду аминоксидазы и антигипертензивной активности гераниина, выделенного из Phyllanthus urinaria. Пищевая хим. Токсикол. 46: 2485-2492.

Лю, Д.З., Ю.С. Лин и В.К. Хоу. 2004. Моногидроксаматы аспарагиновой и глутаминовой кислот проявляютантиоксидантингибирующей активностью ангиотензинпревращающего фермента. J. Agric.Food Chem. 52: 2386-2390.

Kalckar, HM 1947. Дифференциальная спектрофотометрия пуриновых соединений с помощью специфического фермента. Дж. Биол. Chem.167: 429-443.

Канг, Д.Г., Ю.С. Ли, Х.Дж. Ким, Ю.М. Ли и Х.С. Ли. 2003. Ингибирующие ангиотензинпревращающий фермент фенилпропаноидные гликозиды из Clerodenron trichotomum. Ж. Этнофармакол. 89: 151-154.

Koo, KA, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee и YC Kim. 2005. Нейропротекторная активность фенилэтаноидных гликозидов из Callicarpa dichotoma in vitro. Планта Мед.71: 778-780.

Ку, К.А., С.Х. Ким, Т.Х. О и Ю.К. Ким. 2006.актеозиди его агликоны защищают первичные культуры клеток коры головного мозга крыс от глутамат-индуцированной эксайтотоксичности. Жизнь наук. 79:709-716.

Лин, С.Л., С.И. Лин, Ю.Х. Лин и В.К. Хоу. 2006. Влияние запасного белка клубней ямса (Dioscorea alata сорта Tainong No.1) и его пептических гидролизатов на крыс со спонтанной гипертензией. J. Sci. Фуд Агрик. 86: 1489-1494.

Марк, К.С. и Т.П. Дэвис. 2000. Инсульт: развитие, профилактика и лечение ингибиторами пептидаз. Пептиды 21:1965-1973.

Мики М., Х. Тамаи, М. Мино, Ю. Ямамото и Э. Ники. 1987. Свободнорадикальное цепное окисление эритроцитов крысы молекулярным кислородом и его ингибирование -токоферолом. Арх Биохим. Биофиз. 258: 373-380.

Национальный научный совет. 1994. Руководство по уходу и использованию лабораторных животных. Национальный научный совет, Тайвань.

Оно, Т., М. Иноуэ, Ю. Огихара и И. Саракоглу. 2002. Антиметастатическая активностьактеозид, фенилэтаноидный гликозид. Biol. фарм. Бык. 25: 666-668.

Вендетти, Массачусетс, Б. Рубин, Д. В. Кушман. 1977. Дизайн специфических ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента: новый класс перорально активных антигипертензивных средств. Наука 196: 441-444.

Rao, YK, SH Fang, SC Hsieh, TH Yeh и YM Tzeng. 2009. Составные части анисомелес Индии и их противовоспалительная активность. Ж. Этнофармакол. 121: 292-296.

Smith, MA, G. Perry, PL Richey, LM Sayre, VE Anderson, MF Beal и N. Kowal 1996. Окислительное повреждение при болезни Альцгеймера. Nature 382: 120-121. Ван, П., Дж. Кан, Р. Чжэн, З. Ян, Дж. Лу, Дж. Гао и З. Цзя.

1996. Очищающее действие фенилпропаноидного гликозида из Pedicularis на супероксидный анион и гидроксильный радикал методом спиновой ловушки. Биохим. Фармакол. 51: 687- 691.

Вонг, И.И.Ф., Ю. Хуан, З.Д. Хэ, Ч.В. Лау и З.И. Чен. 2001. Расслабляющее действие экстракта Ligstrum purpurascens и очищенногоактеозидв кольцах аорты крыс. Планта Мед. 67:317-321.

Ву, Ю. Т., Л. С. Лин, Дж. С. Сун и Т. Х. Цай. 2006. Определениеактеозидв Cistanche Deserticola и Boschniakia rossica и его фармакокинетике у свободно передвигающихся крыс с использованием ЖХ-МС/МС. Ж. Хроматогр. Б 844: 89-95.