Абстрактный:Род Salvia L. (Lamiaceae) широко используется в фармацевтической и пищевой промышленности. Несколько биологически значимых видов широко используются в традиционной медицине, в том числе Salvia aurea L. (syn. S. africana-lutea L.), который используется в качестве традиционного дезинфицирующего средства для кожи и ран как заживляющее средство; тем не менее, эти свойства еще не подтверждены. Настоящее исследование направлено на то, чтобы охарактеризовать эфирное масло (ЭМ) S. aureus, раскрыть его химический состав и подтвердить его биологические свойства. ЭО получали гидродистилляцией и затем анализировали с помощью ГХ-ПИД и ГХ-МС. Были оценены различные биологические активности: противогрибковый эффект на дерматофиты и дрожжи и противовоспалительный потенциал путем оценки продукции оксида азота (NO) и уровня белков ЦОГ-2 и iNOS. Ранозаживляющие свойства оценивали с помощью теста на заживление царапин, а омолаживающую способность оценивали по активности бета-галактозидазы, связанной со старением. ЭМ S. aurea в основном характеризуется 1,8-цинеолом (16,7%), -пиненом (11,9%), цис-туйоном (10,5%), камфорой (9,5%) и (Е)-кариофилленом (9,3%). процент ). Результаты показали эффективное ингибирование роста дерматофитов. Кроме того, он значительно снижал уровни белка iNOS/ЦОГ-2 и одновременно высвобождение NO. Кроме того, эфирное масло проявляло потенциал против старения и ускоряло заживление ран. В целом, это исследование подчеркивает замечательные фармакологические свойства эфирного масла шалфея золотистого, которые необходимо дополнительно изучить для разработки инновационных, устойчивых и экологически чистых продуктов для кожи.

Гликозид цистанхе также может повышать активность СОД в тканях сердца и печени и значительно снижать содержание липофусцина и МДА в каждой ткани, эффективно удаляя различные активные кислородные радикалы (ОН-, Н₂О₂ и др.) и защищая от повреждения ДНК, вызванного ОН-радикалами. Цистанхефенилэтаноидные гликозиды обладают сильной акцепторной способностью свободных радикалов, более высокой восстановительной способностью, чем витамин С, улучшают активность СОД в суспензии сперматозоидов, снижают содержание МДА и оказывают определенное защитное действие на функцию мембран сперматозоидов. Полисахариды цистанхе способны усиливать активность СОД и GSH-Px в эритроцитах и ​​тканях легких экспериментально стареющих мышей, вызванную D-галактозой, а также снижать содержание МДА и коллагена в легких и плазме, повышать содержание эластина, хороший очищающий эффект на DPPH, продлевает время гипоксии у стареющих мышей, улучшает активность SOD в сыворотке и задерживает физиологическую дегенерацию легких у экспериментально стареющих мышей Эксперименты с клеточной морфологической дегенерацией показали, что Cistanche обладает хорошей антиоксидантной способностью и потенциально может стать лекарством для профилактики и лечения заболеваний кожи, вызывающих старение. В то же время эхинакозид в цистанхе обладает значительной способностью улавливать свободные радикалы DPPH и обладает способностью улавливать активные формы кислорода и предотвращать вызванную свободными радикалами деградацию коллагена, а также оказывает хорошее восстанавливающее действие на повреждение свободных радикалов тимина.

Нажмите «Где я могу купить Цистанхе».

【Для получения дополнительной информации: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Введение

Лекарственные растения обладают несколькими органолептическими характеристиками, которые обуславливают их высокую ценность в фармацевтической, нутрицевтической, косметической и пищевой промышленности. Их вторичные метаболиты становятся потенциальными кандидатами на роль новых противовоспалительных и противогрибковых препаратов [1–3]. Среди прочих ароматические виды из семейства губоцветных хорошо известны своим богатством эфирных масел, проявляющих широкий спектр биологических эффектов, включая, в частности, противовоспалительное и противогрибковое [4–8]. Одним из самых крупных и важных родов этого семейства является род Salvia L., насчитывающий около 1000 видов [9]. Некоторые из них выращиваются во всем мире как для кулинарии, так и для медицинских целей; на самом деле они уже давно используются в народной медицине [10,11]. Многие виды проявляют важные биологические свойства, в том числе антибактериальные, противогрибковые, антиоксидантные, противовоспалительные, противораковые, гипогликемические и противодеменционные эффекты [12,13].

Хотя этот род широко изучен, по-прежнему существует большой интерес к тем видам, которые можно культивировать (одомашнивать) и использовать для улучшения здоровья. Хорошо известно, что вторичные метаболиты являются результатом взаимодействия растений и окружающей среды. Таким образом, исследования домашней популяции могут предоставить соответствующую информацию о том, отличаются ли вторичные метаболиты и связанные с ними биологические свойства от местной популяции. Среди них Salvia aurea L. (syn. S. africana-lutea L.) — важный ароматический вид, который используется в медицинских целях в Западно-Капской провинции (Южная Африка) и культивируется во многих частях мира как ароматическое растение. лекарственное растение, а также декоративное (городская мебель). Этот вид представляет собой серо-зеленый ветвистый ароматический кустарник, который вырастает примерно до 2 м, с черешковыми листьями, которые накапливают эфирное масло в железистых трихомах, и имеет характерно большие золотисто-коричневые цветы [14]. Он произрастает в Южной Африке, где его географическое распространение простирается на запад от полуострова Кейп в направлении Намакваленда, а также на восток от мыса в направлении Порт-Альфред в провинции Восточный Кейп. Его часто называют «пляжным шалфеем, песчаным шалфеем», что характерно для среды дюн, или «коричневым дюнным шалфеем» за характерный цвет его цветов [15,16].

S. aurea известен своими многочисленными применениями в традиционной медицине, в частности, в качестве противовоспалительного и лечебного промывания для лечения ран и кожных заболеваний. Кроме того, этот вид также используется для лечения бронхита и других респираторных заболеваний, усиливая его противомикробные свойства [17,18].

Дерматофиты, особенно Trichophyton, Epidermophyton и Microsporum, часто связаны с поверхностными микозами [19]; однако люди с ослабленным иммунитетом могут быть поражены инвазивными инфекциями [20].

Во время этих инфекций грибковые эпитопы [21,22] связываются с Toll-подобными рецепторами (TLR), вызывая активацию провоспалительного состояния. Одним из наиболее важных путей, связанных с этим состоянием, является путь ядерного фактора каппа B (NF-κB), который включает секрецию воспалительных цитокинов и синтез провоспалительных ферментов, например, индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS). и циклоксигеназа- 2 (ЦОГ-2) [23]. Эти ферменты отвечают за производство оксида азота (NO) и простаноидов соответственно [24,25].

Кроме того, дерматофиты часто приводят к поражению кожи [26]. Следовательно, заживление раны необходимо для регенерации поврежденной ткани; в противном случае рана становится хронической [27].

Грибковые инфекции до сих пор остаются неудовлетворенной клинической потребностью, поскольку этиологические агенты часто связаны с резистентностью к терапии и приводят к рецидивам, в то время как обычные лекарства часто связаны с побочными эффектами [28]. Более того, известно, что несколько штаммов грибов устойчивы к современным противогрибковым средствам [29,30]. Противовоспалительные препараты также были связаны с несколькими побочными эффектами [31]. Поэтому крайне важно разработать новые стратегии, которые, помимо лечения грибковых инфекций, могут также подавлять провоспалительное состояние, возникающее во время инфекции.

Учитывая его традиционное использование, вполне вероятно, что S. aurea может иметь одновременную противогрибковую и противовоспалительную активность. Однако эти свойства проверены ограниченным числом исследований на узком круге микроорганизмов [32–34]. Кроме того, насколько нам известно, до сих пор ни в одном исследовании не сообщалось о ранозаживляющих свойствах S. aureus. Таким образом, эта работа направлена ​​на то, чтобы охарактеризовать эфирное масло S. aureus (sandsalie) при одомашнивании в прибрежной зоне острова Сардиния. Принимая во внимание изменчивость нефти в зависимости от сезона и местности, эта территория была выбрана из-за ее сходства с южноафриканским экорегионом Финбос, территорией обитания S. aurea [35,36]. Кроме того, мы подтвердили некоторые из традиционных применений, приписываемых этому виду, особенно те, которые связаны с противомикробными, противовоспалительными и ранозаживляющими свойствами. Также были обнаружены эффекты против старения, что еще больше повысило интерес к этому растению.

2. Результаты

2.1. Химический состав эфирного масла S. aurea

Листья S. aurea подвергали гидродистилляции с получением эфирного масла (ЭМ) с выходом 0,54% (мас./мас.). В таблице 1 идентифицированные ЭО соединения и их относительное процентное содержание перечислены в порядке их элюирования. Было идентифицировано 36 соединений, что в сумме составляет 98,8%.

Кроме того, 47,4% соединений представляют собой оксигенированные монотерпены, 28,8% углеводородные монотерпены, 19,8% углеводородные сесквитерпены и 2,8% оксигенированные сесквитерпены.

Химический анализ показал, что наиболее характерными компонентами масла S. aurea были 1,8-цинеол (16,7%), -пинен (11,9%), цис-туйон (10,5%), камфора (9,5%). E)-кариофиллен (9,3%), транс-туйон (6,9%), -пинен (4,7%), камфен (3,9%) и -гумулен (3,0%).

2.2. Противогрибковый эффект Salvia aurea

Для оценки противогрибковой активности использовали метод микроразведений в бульоне, как указано в таблице 2. Штаммы Trichophyton mentagrophytes, T. rubrum и Epidermophyton floccosum являются наиболее чувствительными к активности ЭО. В частности, ЭМ показал фунгицидный эффект на T. mentagrophytes и E. floccosum.

2.3. Противовоспалительный потенциал S. aurea

Для оценки противовоспалительного потенциала S. aurea мы прибегли к модели липополисахаридных (ЛПС) стимулированных макрофагов. Как и ожидалось, в присутствии ЛПС макрофаги выделяли NO в среду, где он обнаруживался в виде нитрата ([NO]=43,03 ± 7,74 мкМ). Интересно, что ЭО S. aurea снижал высвобождение NO, вызванное ЛПС, в зависимости от дозы (рис. 1А, IC{8}},07 мкл/мл). Доза 1,25 мкл/мл была выбрана для раскрытия основных механизмов, поскольку она ингибировала выработку NO более чем на 50%, была лишена токсичности (рис. 1В) и представляла собой дозу, подавляющую рост дерматофитов.

Связывание LPS с Toll-подобным рецептором 4 (TLR4) запускает ядерную транслокацию NF-κB, которая, следовательно, вызывает экспрессию индуцибельной синтазы оксида азота (Nos2) и циклооксигеназы-2 (Ptgs2) [39]. Затем мы оценили, может ли ЭО потенциально регулировать уровни этих белков. Как и ожидалось, в макрофагах, обработанных ЛПС, наблюдалось увеличение уровней белка как iNOS, так и ЦОГ-2 (рис. 2А-С). Присутствие эфирного масла S. aurea в дозе 1,25 мкл/мл могло привести к значительному снижению уровня обоих белков, особенно iNOS. Эти результаты свидетельствуют о том, что эфирное масло может модулировать путь NF-κB.

2.4. Ранозаживляющие свойства эфирного масла S. aurea

Принимая во внимание использование S. aurea для лечения ран [18], мы предположили, что эфирное масло может способствовать заживлению ран. Действительно, наши результаты показывают, что ЭО способствует миграции клеток (рис. 3А, В), не влияя на жизнеспособность клеток (рис. 3С).

2.5. Потенциал против старения эфирного масла S. aurea

Принимая во внимание, что традиционное использование, приписываемое S. aurea, связано с лечением возрастных заболеваний [40], мы оценили влияние на старение клеток. Прибегая к индуцированному этопозидом старению клеток, мы наблюдали связанную со старением активность -галактозидазы (рис. 4А, В). Интересно, что когда эфирное масло добавлялось на этапе восстановления, это свойство уменьшалось, что позволяет предположить, что эфирное масло предотвращает старение клеток.

3. Обсуждение

В этом исследовании представлен профиль эфирного масла S. aurea, одомашненного на острове Сардиния. Мы сообщили, что его эфирное масло характеризуется содержанием 47,4% оксигенированных монотерпенов, в основном 1,8-цинеола, цис/транс-туйона и камфоры, 28,8% углеводородных монотерпенов, в основном -пинена, и 19,8% углеводородных сесквитерпенов. с (Е)-кариофилленом и -гумуленом, в то время как только 2,8 процента оксигенированных сесквитерпенов.

При сравнении с литературными данными выявляется четкая качественная и количественная разница в составе нативных ЭМ S. aurea. В частности, сообщалось об основных компонентах -пинена, мирцена, о-цимола, спатуленола и -эвдесмола [32]. Более того, эти изменения отражаются в процентном соотношении основных классов соединений. Здесь мы обнаружили существенное снижение содержания оксигенированных сесквитерпенов (2,8%), тогда как в двух разных исследованиях Западно-Капской провинции на их долю приходилось 18,9% и 41,7% [33,41].

Однако это химическое различие не было неожиданным, так как, по мнению некоторых авторов, впрочем, это химическое различие не было неожиданным, поскольку, по мнению некоторых авторов, оно зависит не только от генетических особенностей, но и от жизненного цикла растения, вегетационного периода, сезона сбора урожая. , свойства почвы и факторы стресса[32, 41]

В частности, в отношении S. aurea было обнаружено постоянное химическое разнообразие в зависимости от сезонности и территории сбора [32,41]. Lim Ah Tock et al., 2020, рассмотрели популяции Западно-Капской провинции и выявили высокую степень внутривидовой изменчивости, составляющую 47,8% [32,33,41]. Кроме того, они проанализировали дендрограмму HCA этих популяций, где у S. aurea появилось четкое разделение кластеров, что объясняет существенную химическую изменчивость [41].

В дополнение к упомянутым факторам, влияющим на химический состав эфирного масла, известно, что послеуборочная обработка, условия хранения и методы экстракции также вносят свой вклад в химическую изменчивость [42,43]. Имея это в виду, наблюдаемые здесь различия могут быть связаны с любым из этих факторов.

Сообщаемая биологическая активность подтверждает традиционное использование S. aurea, особенно тех, которые связаны с воспалительными и микробными инфекциями.

Мы сообщаем, что ЭО ингибировал рост дерматофитов, тем самым подтверждая его использование для лечения кожных заболеваний [18]. Известно, что эфирное масло S. aurea эффективно против Brevibacterium [44], Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Bacillus cereus и Escherichia coli [32,33]. В других исследованиях сообщалось об антимикробной активности нелетучих экстрактов [14,45,46]. Что касается основных соединений, обнаруженных в ЭО S. aurea, сообщалось, что 1,8-цинеол проявлял слабую активность против протестированных дерматофитов [47]. Об ингибировании фитопатогенов сообщалось также для 1,8-цинеола [48–51]. Также широко сообщалось об антимикробном потенциале -пинена в отношении нескольких дрожжевых и мицелиальных грибов, включая Trichophyton spp. [52–56]. Цис-туйон, соответствующее соединение в этом эфирном масле, также проявлял антимикробную активность [57,58]. С другой стороны, сообщалось о слабой антимикробной активности камфоры [59–61]. Сесквитерпен-кариофиллен проявлял антимикробную активность в отношении различных грибков и бактерий [3,62–64]. Эти результаты позволяют предположить, что -пинен, цис-туйон и -кариофиллен могут вносить основной вклад в активность S. aurea.

Из-за традиционного использования S. aurea при лечении заболеваний, связанных с воспалением [18], мы стремились подтвердить эти эффекты. Действительно, наши результаты показывают, что ЭО ингибировал выработку NO в макрофагах, стимулированных ЛПС, и одновременно снижал уровни белка iNOS и ЦОГ -2: двух провоспалительных ферментов, имеющих отношение к воспалительной реакции. Насколько нам известно, только одно исследование изучало противовоспалительный потенциал S. aurea, показывая ингибирующую способность активности липоксигеназы -5 [33]. Что касается изолированных соединений, в нескольких исследованиях сообщалось о противовоспалительной активности 1,8-цинеола [65–70], включая клинические испытания [71]. Кроме того, известно, что это соединение ингибирует активность ЦОГ-2 [66] и предотвращает ядерную транслокацию NF-κB [65,72]. -пинен значительно снижал продукцию NO как в LPS-стимулированных макрофагах [73], так и в IL-1 -активированных хондроцитах [74]. Он также показал ингибирование хемотаксиса в нейтрофилах [75]. О противовоспалительном потенциале камфоры широко сообщается с использованием моделей как in vivo, так и in vitro [76–78]. -Кариофиллен также оказывает противовоспалительное действие при колите [79], иссечении кожных ран [80] и сепсисе [81] на животных моделях. Другие подходы in vitro и in vivo подчеркивают противовоспалительное действие этого сесквитерпена [82,83]. Результаты показывают, что активность, наблюдаемая у S. aurea, может быть связана с присутствием этих соединений, которые могут действовать синергетически.

Мы сообщили, что эфирное масло S. aurea способствует заживлению ран, что подтвердило его использование для лечения открытых ран. Насколько нам известно, ни в одном исследовании не сообщалось о ранозаживляющих свойствах S. aurea. Что касается выделенных соединений, 1,8-цинеол способствует миграции клеток в моделях ран как in vivo, так и in vitro [70,84,85]. Кроме того, сообщалось, что эфирное масло Teucrium polium subsp. капитализм, богатый -пиненом, ускорял заживление ран [86]. Сесквитерпен-кариофиллен также способствовал заживлению раны в модели иссечения кожной раны [80]. Тем не менее, другие соединения, обнаруженные в меньших количествах, могут способствовать заявленной активности. Действительно, -пинен способствует заживлению раны в модели открытой раны на животных [84]. Учитывая, что эфирные масла представляют собой сложные смеси, вполне возможно, что заявленные ранозаживляющие свойства могут быть связаны с синергическим действием нескольких соединений.

Мы впервые сообщаем о омолаживающем эффекте эфирного масла S. aurea. Действительно, клетки, обработанные эфирным маслом, представляли уменьшенное количество связанных со старением -галактозидазо-позитивных клеток. Что касается изолированных соединений, количество исследований, сообщающих об их эффекте, было недостаточным. Действительно, камфора предотвращает повышенную активность связанной со старением -галактозидазы [87]. С другой стороны, 1,8-цинеол, основное соединение этого эфирного масла, вызывает старение клеток [88]. Учитывая нехватку исследований, мы можем только предположить, что сообщаемая активность может быть связана главным образом с соединением камфоры; однако нельзя сбрасывать со счетов влияние второстепенных соединений.

【Для получения дополнительной информации: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】