Анализ химических составляющих видов цистанхе

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Юн Цзян, Пэн-Фэй Ту и др.

Абстрактный

Виды родаЦистанхе(Rou Cong Rong по-китайски) — многолетние травы-паразиты, в основном распространенные в засушливых землях и теплых пустынях. В качестве превосходного тонизирующего средства при почечной недостаточности, импотенции, женском бесплодии, болезненных белях, профузной метроррагии и старческих запорах.Цистанхетравызаслужил звание «Женьшень пустыни». В последнее время растет внимание ученых к Herba Cistanche из-за его замечательной биологической активности, включая антиоксидантное, нейрозащитное и омолаживающее действие. Химические составляющиеЦистанхерастенияв основном включают летучие масла и нелетучиефенилэтаноидгликозиды(PhG), иридоиды, лигнаны, альдиты, олигосахариды и полисахариды. Фармакологические исследования показывают, что PhG являются основными активными компонентами для лечения почечной недостаточности, антиоксидантной и нейропротекции; галактитол и олигосахариды являются представителями для лечения старческих запоров, а полисахариды отвечают за повышение иммунитета организма. В этой статье достижения в области химических компонентовЦистанхерастенияи их соответствующие анализы рассматриваются.

Ключевые слова:Cistanche Herba, Cistanches Chemical, анализ компонентов, фенилэтаноидные гликозиды

1. Введение

ЦистанхеХоффмг. Et Link, один из родов семейства Orobanchaceae, насчитывающий 22 вида в мире, в основном распространен в засушливых землях и пустынях северного полушария, таких как Синьцзян, Внутренняя Монголия, автономные районы Нинся и провинции Ганьсу, Цинхай. Китай, а также Иран, Индия, Монголия и др. [1]. Среда их произрастания очень суровая: экстремально засушливый климат, резкие перепады температур, интенсивное солнечное освещение, менее 250 мм годовых осадков и обедненные почвы [2,3].Цистанхевиды относятся к многолетним паразитическим травам, обычно прикрепляющимся к корням пескофиксирующих растений, таких как Haloxylox ammodendron, H. persicum, Kalidium foliated, Tamarix и др. [3]. Согласно данным Таксономического указателя высших растений Китая [4], в Китае насчитывается шесть видов цистанхе. Однако дальнейшее исследование подтвердило, что только четыре вида и одна вариацияЦистанхесуществуют в Китае, т.е.ЦистанхепустыняYC Ma, C. Tubulosa (Schenk) R. Wight, C. salsa (CA Mey.) G. Beck, C. salsa var. albiflora PF Tu et ZC Lou и C. sinensis G. Beck [5].

Ру Конг Ронг (англ.ХербаЦистанхе), впервые записанный в «Китайской Материи медике» Шэнь Нуна, относится к высушенным сочным стеблямЦистанхерастения.ХербаЦистанхесчитается превосходным тоником и заслужил звание «Женьшень пустыни». Научная ценность Herba Cistanche заключается в лечении почечной недостаточности, импотенции, женского бесплодия, болезненных белей, обильной метроррагии и старческих запоров [6,7]. Это было наиболее часто назначаемое лекарство от почечной недостаточности в Китае для последовательных династий. Среди видов Cistanche только C. Deserticola была изменена в Китайской фармакопее (издание 2000 г.) [8], а C. Tubulosa была добавлена ​​в Китайскую фармакопею 2005 г. в качестве альтернативы из-за сходных химических компонентов, фармакологической активности и относительной богатый ресурс по сравнению с C. Deserticola [9–11]. Однако в последние годы дикая C. Deserticola находится на грани исчезновения из-за чрезмерного сбора урожая, и ее собирают как одно из растений класса II, нуждающихся в защите в Китае. Из-за дефицита природных ресурсов официальнойХербаЦистанхе, другие виды этого рода, такие как C. salsa и C. Sinensis, также используются в качестве заменителей во многих областях [10].

Научные исследованияЦистанхерастенияначалось в 1980-х годах [12], и химический анализ показал, что различные соединения, в том числе эфирные масла,фенилэтаноидгликозиды(PhG), иридоиды, лигнаны, альдиты, олигосахариды и полисахариды являются основными составляющимиЦистанхерастения[13,14]. Фармакологические исследования показали, что экстракты изЦистанхерастения обладают широким спектром действия, таким как лечение почечной недостаточности и старческих запоров, повышение способности к обучению и запоминанию, лечение болезни Альцгеймера, повышение иммунитета, омолаживание и снятие усталости [14–21]. С повышением уровня жизни и приходом стареющего обществаЦистанхерастенияпривлекли больше внимания и стали использоваться все шире и шире благодаря своей выдающейся фармакологической активности.

Было опубликовано несколько обзоров по изучению химического состава и фармакологической активностиЦистанхерастения[13–15]. Настоящая статья посвящена химическому анализу этого рода и прогрессу в исследованиях химического состава.

2. Летучие соединения

Обычно используемые методы экстракции летучих соединений ТКМ включают перегонку с водяным паром и липофильную экстракцию органическим растворителем. С помощью перегонки с водяным паром экстрагировали эфирные масла C. salsa и C. Tubulosa, а методом ГХ-МС идентифицировали 38 и 21 компонент соответственно (табл. 1). Основные компоненты эфирных масел C. salsa состоят из алканов, спиртов, альдегидов и некоторых гетероциклических соединений, в то время как пальмитиновая кислота и линолевая кислота являются двумя основными составляющими всех масел C. Tubulosa [22,23]. Летучие соединения C. Deserticola экстрагировали петролейным эфиром, а 25 компонентов идентифицировали с помощью ГХ-МС. Тремя самыми богатыми компонентами являются метил 14-метилпентадеканоат (13,61%), этилпальмитат (12,39%) и 2,5,6-триметилолетан (7,60%) [24]. Другой отчет о летучих компонентах C. Deserticola показал, что эвгенол был основным компонентом при использовании метода одновременной дистилляции-экстракции [25]. Разные аналитические результаты этих двух статей [24, 25] могут быть вызваны разными методами экстракции и разными аналитическими условиями ГХ-МС.

Помимо этого, Ма сообщил о методе сверхкритической жидкостной экстракции (SFE) для извлечения неполярных компонентов из C. salsa. Анализ экстракта методом ГХ-МС показал, что помимо алканов в нем присутствуют эфиры и низкомолекулярные соединения, содержащие кислород или азот. Этот результат показал, что более полярные соединения могут быть извлечены с помощью SFE за счет добавления полярного модификатора [26].

3. Нелетучие соединения

Нелетучие соединенияЦистанхерастенияв основном включают фенилэтаноиды, иридоиды, лигнаны, альдиты, олигосахариды и полисахариды. К настоящему времени выделено более 100 нелетучих соединений.Цистанхе растение. Распределение различных типов соединений вЦистанхерастенияприведена в Таблице 2. В 1995 г. Мория [27,28] сообщил, что растительный материал C. salsa был ошибочно идентифицирован ранее, когда он исследовал источники Herba Cistanches на японских медицинских рынках, поэтому химические компоненты, выделенные из C. .salsa в 80-х годах в этом обзоре был переназначен C. Deserticola.

3.1. Фенилэтаноидные гликозиды

3.1.1. Химическая структура PhG

PhG считаются основными активными компонентамиЦистанхеразновидность. На сегодняшний день 34 кандидата наук(pгенилэтаноидгликозиды)были изолированы отЦистанхе растения, включая 22 дисахаридных гликозида, 10 трисахаридных гликозидов и 2 моносахаридных гликозида (таблица 3). Анализируя структуры PhG вЦистанхе, были суммированы следующие структурные характеристики: сахарная часть дисахаридных гликозидов состоит из глюкозы и рамнозы со связью Glc (3→1) Rha. Глюкоза обычно связана непосредственно с агликоном и в его положении C4 или C6, где обычно находится кумароил или кофеил. Когда PhG должен быть трисахаридным гликозидом, дополнительная глюкоза или рамноза обычно появляется в положении C6 внутренней глюкозы. Среди этих PhG (pгенилэтаноидгликозиды)изЦистанхевидов, crenatoside (34) является исключительным, поскольку в его структуре существует эфирное кольцо между положением агликона и положением C-2 внутренней глюкозы [34]. Недавно впервые было сообщено о рентгеновской монокристаллической структуре салидрозида (15), PhG, выделенного из C. Deserticola [44].

Исследования фармакологической активности PhG(pгенилэтаноидгликозиды)продемонстрировали, что они выполняют различные функции, такие как антиоксидантная, нейропротекция, усиление иммунной и половой функции, гепатозащита, антирадиационная и т. д. [15–17,40,48–50]. Среди них нейропротекция становится горячей темой. Некоторые отдельные компоненты или фракции PhG(pгенилэтаноидгликозиды)сообщалось, что они ингибируют апоптоз нейрональных клеток, индуцированный различными химическими веществами [51–57], и их нейропротекция in vitro также была доказана на нескольких животных моделях in vivo [58–64]. Эти результаты показывают, что PhG(pгенилэтаноидгликозиды)может быть привлекательным кандидатом для лечения нейродегенеративных заболеваний, таких как слабоумие или болезнь Паркинсона.

3.1.2. Анализ ФГ

В качестве основных активных компонентов вЦистанхерастения, PhGs(pгенилэтаноидгликозиды)обычно используются в качестве маркеров для оценки качества лекарств-сырцов или соответствующих им составов.

3.1.2.1. Анализ ФГ методом тонкослойной хроматографии (ТСХ).

Чжан впервые разработал метод ТСХ для идентификации актеозида (2), эхинакозида (11) и цистанозида А (3) вХербаЦистанхина силикагеле, используя в качестве проявляющего растворителя смесь этилацетат–метанол–9%-ная уксусная кислота (20:3:2), а в качестве красящих реагентов – раствор FeCl3 [65]. Этот метод также использовался в Китайской фармакопее (2000 г.) для идентификации актеозида (2) [8]. Однако в Китайской фармакопее (2005 г.) адсорбент для тонкослойной хроматографии был заменен с силикагеля на полиамид, чтобы получить гораздо лучший эффект разделения, и использовался метанол-уксусная кислота-вода (2:1:7). как проявляющий растворитель. Две основные докторские степени вХербаЦистанхи, эхинакозид (11) и актеозид (2) могут быть одновременно идентифицированы [9].

3.1.2.2. Анализ ФГ методом ультрафиолетовой спектрофотометрии (УФ).

Как упоминалось выше, циннамоильная группа часто присутствует в структурах ФГ, поэтому ФГ могут быть определены непосредственно УФ или колориметрическим методом после взаимодействия с некоторыми красящими реагентами [66–72]. Однако, как мы знаем, колориметрический метод не является разумным подходом для точного определения химических компонентов в ТКМ из-за его нестабильности, плохой воспроизводимости и огромной ошибки тестирования. Кроме того, предварительная обработка образцов, обнаруженных УФ, более утомительна, чем другими методами. Таким образом, в настоящее время УФ-метод больше не используется для количественного определения чистого соединения, а лишь иногда для определения общего PhG.

3.1.2.3. Анализ ФГ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Среди всех методов анализа ВЭЖХ наиболее часто используется для качественного и количественного определения PhG, а в таблице 4 обобщены методы, опубликованные в литературе по анализу PhG с помощью ВЭЖХ, которые будут подробно описаны ниже.

3.1.2.3.1. Анализ PhG в лекарственных препаратах-сырцах, биологических образцах и сложных продуктах методом ВЭЖХ.

В 1995 году Сюй провел сравнение химических компонентов C. Deserticola с его заменителем C. salsa. Анализ ВЭЖХ показал, что химический состав ФГ(pгенилэтаноидгликозиды)между этими двумя видами было одинаково, но их количество было различным [73]. В том же году Мория провел сравнение химических компонентов C. Deserticola (Cd), C. Tubulosa (Ct) и C. salsa (Cs), используя семь PhG в качестве маркеров. Результаты показали, что цистанозиды A (3), C (5) и следовые количества тубулозида A (17) присутствуют в Cd и Cs, тогда как только тубулозид A (17) присутствует в Ct без цистанозидов A (3) и C. (5). Также было обнаружено, что общее количество PhG в растениях Ct и Cs больше, чем в растениях Cd [28]. Ценно, что в этой статье сравнивалась разница междуЦистанхерод через многокомпонентный анализ; однако, к сожалению, количественная оценка этих семи PhG(pгенилэтаноидгликозиды)проводилось только методом внешнего стандарта по одной точке, без систематической валидации методологии.

Ту провел качественный анализ шести PhG.(pгенилэтаноидгликозиды)и количественный анализ двух PhG рода Cistanche с помощью Rp-HPLC. Результаты показали, что химические составляющие C. Deserticola, C. salsa, C. salsa var. albiflora и C. tubulosa были сходны, а C. Sinensis отличались от остальных [10]. Ван разработал метод анализа семи PhG C. Deserticola, C. Tubulosa и C. salsa с помощью ВЭЖХ/МС/МС, и результаты показали, что распределение химических ингредиентов семи эталонных PhG различается у каждого вида [ 74]. Пути фрагментации гликозидных связей, эфирной связи и некоторые интересные нейральные потери PhG обсуждались в этой статье [74] и в другой [75]. Однако преимущества метода ВЭЖХ-МС в этих анализах не были полностью продемонстрированы, поскольку изучался только механизм фрагментации стандартов ФГ. Принятие этих механизмов для выяснения неизвестных соединений PhG, чтобы получить больше химической информации, и изучение механизма фрагментации других скелетных соединений игнорировалось.

Помимо качественного анализа, есть также много отчетов о количественном анализеХербаЧистанчес, особенно двух крупных PhG(pгенилэтаноидгликозиды), эхинакозид (11) и актеозид (2). В 2000 году Чжан установил стандарт качества для C. Deserticola, включающий определение содержания актеозида (2) с помощью ВЭЖХ в сочетании с качественной идентификацией пяти компонентов с помощью ТСХ [65]. В 2003 г. был разработан метод Rp-HPLC для обнаружения эхинакозида (11) и актеозида (2) в Herba Cistanches, культивируемых на различных растениях-хозяевах и в различных средах обитания. Автор использовал две разные подвижные фазы для определения эхинакозида (11) и актеозида (2), т.е. ацетонитрил-вода-ледяная уксусная кислота (13:86:1) для эхинакозида и метанол-вода-ледяная уксусная кислота. (32:67:1) для актеозида. Предварительный результат показал, что на содержание эхинакозида и актеозида явно влияли разные хозяева, и содержание этих двух соединений у C. Tubulosa, культивируемого Tamalrix L., было самым высоким [76].

Учитывая, что определение двух компонентов в одном и том же растении с использованием двух разных растворителей несколько утомительно, был разработан более простой метод Rp-ВЭЖХ для одновременного обнаружения эхинакозида (11) и актеозида (2) [77]. Затем Чен применил этот метод для определения содержания эхинакозида (11) и актеозида (2) в дикой и культивируемой C. Tubulosa [78]. Результаты показали, что содержание эхинакозида (11) было заметно выше, чем актеозида (2) во всех образцах, а содержание этих двух активных компонентов в дикой природе было выше, чем в культивируемых [78]. Следует отметить, что при подготовке образцов в этой статье использовался метод смешивания нескольких партий, что означает, что автор учел очевидные индивидуальные различия в качествеХербаЦистанхи.

Так как дикаяЦистанхевиды находятся на грани исчезновения, в Синьцзяне и Внутренней Монголии, Китай, производятся посадки C. Deserticola и C. Tubulosa. Чтобы дать некоторые теоретические рекомендации по культивированию, были проанализированы различные культивируемые образцы. Цао определил содержание PhG(pгенилэтаноидгликозиды)весной и осенью с помощью ЖХ-МС, чтобы сравнить образцы C. Deserticola, собранные в разные сезоны. Четыре PhG(pгенилэтаноидгликозиды)В качестве маркеров были выбраны эхинакозид (11), актеозид (2), цистанозид А (3) и 2 -ацетилактеозид (1), суммарное содержание которых было выше весной, чем осенью [79]. . Ван провел исследование изменения химических компонентов в разное время выращивания и в разных частях культивируемой C. Tubulosa, используя в качестве показателя отпечатки пальцев и содержание эхинакозида (11). Он обнаружил, что химическое распределение PhG(pгенилэтаноидгликозиды)было одинаково в разных образцах, но количество каждого PhG, особенно эхинакозида (11), значительно отличалось среди разных образцов. После сравнения он пришел к выводу, что время выращивания C. tubulosa должно составлять более трех лет, а время сбора урожая необходимо строго контролировать до цветения. В этой работе было установлено, что качество культурных растений не лучше, чем у дикорастущих, поэтому автор предложил продвигать технологию возделывания для повышения содержания активных соединений [80]. Ян изучал накопление сухого вещества и содержание эхинакозида (11) в C. Tubulosa на равнине Хуабэй. Результат показал, что накопление сухого вещества C. Tubulosa было в «S»-образном варианте, а содержание эхинакозида (11) было максимальным при выращивании C. Tubulosa в течение 5 месяцев [81].

Помимо этого, отпечатки пальцев, новый метод, ориентированный на системные и всесторонние характеристики анализируемых образцов, также использовался для оценки качества.Цистанхерастения. Как упоминалось выше, Ван проанализировал химические компоненты и их вариации в культивируемых C. Tubulosa, используя отпечатки пальцев и другие индикаторы [80]. Се установил хроматографический отпечаток C. Deserticola с помощью ВЭЖХ (рис. 1) и использовал его для оценки различий в присущих качествах образцов из разных местообитаний. Наконец, были обнаружены заметные различия в качестве проб из разных местообитаний [82]. То же явление наблюдалось даже во время наших исследований по оценке качества C. Deserticola, поэтому в дальнейшем более серьезное внимание следует уделить постоянству качества видов Cistanche.

Помимо посадки, культивирование клеток или каллюса является еще одной привлекательной альтернативой для решения проблемы нехватки ресурсов Herba.Цистанхе. В процессе культивирования было установлено множество аналитических методов для анализа результатов культивирования и оптимизации условий культивирования [83–88]. Соответствующие аналитические условия также приведены в таблице 4.

Что касается анализа PhG в сложных продуктах, Чжан сообщил о методе количественного определения изоактеозида (12) в общемЦистанхекапсулы гликозидов методом ВЭЖХ [89]. Мы разработали метод анализа актеозида (2) в капсулах Shenqiyinao с помощью ВЭЖХ [90], а Лей провел определение эхинакозида (11) в спирте Конгронг с помощью ВЭЖХ [91]. Ключевой момент анализа ФГ(pгенилэтаноидгликозиды)в сложных продуктах, чтобы избежать нарушения других компонентов, поэтому обычно необходима предварительная обработка образца и оптимизация условий хроматографии.

3.1.2.3.2. Метаболический анализ PhG методом ВЭЖХ.

В 2001 году Лей впервые сообщил о процессе метаболизма PhG.(pгенилэтаноидгликозиды)в желудочно-кишечном тракте собак породы бигль, а четыре метаболита: эхинакозид (11), актеозид (2), изоактеозид (12) и 2 -ацетилактеозид (1) выделяли из фекалий с помощью препаративной ВЭЖХ [96]. В 2006 году метаболизм актеозида (2) и эхинакозида (11), основных активных компонентовХербаЦистанхибыли соответственно изучены, а также проанализированы их фармакокинетика и биодоступность у крыс [97, 98, 134]. Мы разработали чувствительный метод ЖХ-МС/МС с простой твердофазной экстракцией для обнаружения актеозида (2) в плазме крыс и гомогенатах тканей для исследования биодоступности и распределения в головном мозге у свободно перемещающихся крыс [97,134]. Jia разработала быструю и простую комбинацию ВЭЖХ с УФ-методом для определения содержания эхинакозида (11) в сыворотке крыс [98]. Однако было обнаружено, что биодоступность эхинакозида и актеозида составляет всего {{10}},83% и 0,12% соответственно, что противоречит значительным биологическим эффектам PhG.(pгенилэтаноидгликозиды)у животных [58–64]. В будущем необходимо провести дальнейшие исследования для выяснения метаболического процесса и механизма абсорбции ФГ.(pгенилэтаноидгликозиды).

3.1.2.4. Анализ ФГ(pгенилэтаноидгликозиды)методом высокоскоростной противоточной хроматографии (HSCCC).

HSCCC, жидкостно-распределительная хроматография без носителя, устраняет необратимую адсорбцию образца на неподвижную фазу и широко используется для препаративного разделения природных продуктов. По сравнению с традиционной твердожидкостной колоночной хроматографией она обеспечивает более высокое извлечение и эффективность. Лей применил HSCCC для разделения и очистки актеозида (2) и 2-ацетилактеозида (1) из C. salsa с помощью четвертичной двухфазной системы растворителей, состоящей из этилацетата-н-бутанола-этанола-воды ( 4:0.6:0.6:5, т/об). ВЭЖХ-анализ фракций CCC показал, что два PhG(pгенилэтаноидгликозиды)имели чистоту более 98% [99]. Позже Ли разработал метод с использованием двух систем растворителей, одна из которых состоит из этилацетата-этанола-воды (5:0.5:4,5, об./об./об.), а другая - этилацетат-н-бутанол. –этанол-вода ({{10}}.5:0.5:0.1:1, об./об./об./об.) для выделения PhG(pгенилэтаноидгликозиды)из C. Deserticola. Пять PhG(pгенилэтаноидгликозиды), эхинакозид (11), цистанозид А (3), актеозид (2), изоактеозид (12) и 2 -ацетилактеозид (1) были выделены и очищены, и чистота этих выделенных соединений превышала 92,5 %. определяют методом ВЭЖХ [100]. Эти методы предоставили хорошие ссылки для будущего выделения и очистки стандартов PhG.

3.2. Бензилгликозиды

Недавно Лей сообщил о выделении и выяснении структуры трех новых бензилгликозидов, сальсазидов A–C (35–37, рис. 2) из ​​C. salsa, которые также были бензилгликозидами, выделенными изЦистанхерастениявпервые [47]. Структурные особенности этих бензилгликозидов аналогичны фенилэтаноидам, выделенным из этого рода, за исключением того, что бензиловый спирт заменяет фенетилол в агликоне.

3.3. Иридоиды

К настоящему времени выделено три иридоидных агликона и четырнадцать иридоидных гликозидов.Цистанхерастения(38–54, табл. 5) [102–109]. Особенности строения иридоидных гликозидов изЦистанхерастениярезюмируются следующим образом: глюкоза находится в положении C1 агликона с конфигурацией в H5 и H9; гидроксилирование часто происходит в положениях С8 и С10; иногда может происходить дегидратация между гидроксилами C10 с C1 или C3 с образованием эпоксидной части.

3.4. лигнаны

Один агликон лигнана и пять гликозидов лигнана были выделены из растений C. Deserticola и C. Tubulosa (55–60, таблица 6). Основным скелетом этих соединений являются тетрагидрофурановые и бензофурановые лигнаны. Источники той C. Tubulosa, из которой было выделено несколько лигнанов, в основном из Пакистана, в то время как из C. Tubulosa, собранных в Китае, было выделено несколько лигнанов. Это еще раз доказало, что существуют химические различия между C. Tubulosa из Китая и Пакистана [27,28].

3.5. Сахариды и их производные

3.5.1. Химическое исследование сахаридов и их производных

Углеводы составляют большую долю сухой массы растений видов Cistanche [110]. Среди них один из моносахаридов, галактитол, был зарегистрирован как основной активный компонент со слабительной активностью в Herba Cistanches [18,19,103,104]. В то время как полисахариды считаются активными составляющими с повышением иммунитета организма, омолаживающими и противораковыми действиями вХербаЦистанхи[20,21,111–113].

В 90-х годах исследования полисахаридовЦистанхевидов были сосредоточены на выделении/очистке и анализе состава моносахаридов [110,112,114–116]. Точные структуры полисахаридов изЦистанхевиды не были выяснены до 1997 года. В таблице 7 перечислены выясненные структурные свойства полисахаридов, выделенных из видов Cistanche. Интересно, что все они были выделены из C. Deserticola, а полисахариды — из других растений.Цистанхерастенияне изучены.

Кроме них, некоторые производные олигосахаридов, такие как цистанозид F, цистанозид I, цистантубулозы A1/A2 и цистансиненсозы A1/A2, также были выделены изХербаЦистанхи(рис. 3), которые на самом деле являются остатками ФГ(pгенилэтаноидгликозиды)после потери фенетилолагликона. Поскольку в природе существуют конфигурации глюкозы, иногда эти производные олигосахаридов также существуют в виде аномеров, и это явление можно наблюдать по парным сигналам ЯМР [37,39,40,11,45].

3.5.2. Анализ сахаридов и их производных

Для того, чтобы оценить качествоХерба ЦистанхиВсесторонне, галактитол, основной активный компонент со слабительной активностью в Herba Cistanches [18,19,97,98], был недавно выбран в качестве индикатора для оценки качестваХербаЦистанхи, в сочетании с ФГ(pгенилэтаноидгликозиды). Чтобы всесторонне оценить качество C. Tubulosa из разных регионов, Кай разработал метод количественного определения галактита в сочетании с эхинакозидом (11) и актеозидом (2) с помощью ВЭЖХ. В качестве детектора галактита был выбран ELSD из-за его слабого конечного поглощения в УФ-спектре, и для его разделения использовали колонку с полимерным гелем Prevail Carbohydrate ES. Были измерены партии C. Deserticola и C. Tubulosa из различных местообитаний, и с помощью этого метода также был оптимизирован метод обработки свежих кусочков отвара C. Tubulosa [92,93]. Их результаты показали, что содержание галактита, эхинакозида (11) и актеозида (2) в куске отвара C. tubulosa описанным способом в несколько раз выше, чем в высушенном на солнце или традиционным способом [93]. Кроме того, Чжан когда-либо установил метод ТСХ идентификации маннита в C. Deserticola, используя этилацетат-пиридин-вода (7:2:1) в качестве проявляющего растворителя и 1-процентный раствор KMnO4 в качестве красителя [65].

Что касается определения содержания полисахаридов вЦистанхевидов, фенол-сернокислотный метод является наиболее часто используемым методом, и содержание полисахаридов в C. salsa с помощью различных методов экстракции было определено как от 11,61% до 13,22% [123-125]. Однако это лишь некоторые предварительные аналитические результаты из-за ограничений колориметрического метода.

3.6. Алкалоиды и их соответствующий анализ

К настоящему времени выделено только два алкалоида изЦистанхевиды, то есть бетаин (65) и метиловый эфир N,N-диметилглицина (66) (рис. 3) [126]. Бетаин (65) представляет собой алкалоид, широко распространенный в растениях, поэтому существует больше сообщений о его качественном и количественном анализе. Чжан сравнил изменение содержания бетаина в C. Deserticola до и после обработки, используя идентификацию ТСХ в сочетании с колориметрическим методом [127]. Этот метод ТСХ также был включен в Китайскую фармакопею 2000 г. [8], тогда как этот метод количественного определения с помощью колориметрии позже был принят другими для оптимизации технологии экстракции.ХербаЦистанхи[128,129]. В 2007 году Гонг сообщил о методе ВЭЖХ для обнаружения бетаина в растениях цистанхе в сочетании с детектором ELSD, и было обнаружено, что бетаин существует только в C. Deserticola, но не в C. Tubulosa. Таким образом, автор предложил использовать бетаин в качестве маркера для различения этих двух видов растений цистанхе [101]. Однако, учитывая, что для каждого вида отобрано всего две партии проб, а один из местообитаний C. Tubulosa (Юньнань) является неопределенным, мы рекомендовали дополнительно подтвердить этот вывод. Кроме того, идентификация ТСХ бетаина для Herba Cistanche была удалена из Китайской фармакопеи с 2005 года из-за его неспецифического свойства. Таким образом, использование его в качестве единственного показателя для оптимизации технологии экстракции Herba Cistache было нецелесообразным [129].

3.7. Другие соединения

В растениях цистанхе присутствуют небольшие количества других соединений, таких как фенольные гликозиды, монотерпеноиды, стеролы или их гликозиды, жирные кислоты, аминокислоты, некоторые микроэлементы и т. д. [13,41,42,103,105,130–133].

4. Выводы

В этом обзоре химические составляющиеЦистанхеописаны виды и методы их анализа. Среди существующих анализов большинство было сосредоточено на ФГ.(pгенилэтаноидгликозиды), а ВЭЖХ была наиболее широко используемым методом из-за его высокой эффективности и точности. Благодаря анализу предыдущих исследовательских работ в сочетании с нашими многолетними исследованиями видов Cistanche, некоторые основные проблемы, существующие при анализеЦистанхерастениябыли резюмированы следующим образом: первый - это смешанное использование источника видов: C. Deserticola и C. Tubulosa - два официальных вида, собранных в Китайской фармакопее. Однако два других вида цистанхе, C. salsa и C. Sinensis, также используются в некоторых районах из-за нехватки ресурсов. Хотя имеется несколько публикаций, посвященных сравнению разных видов [6–8], они недостаточно убедительны из-за ограниченных партий образцов и маркеров. Таким образом, необходимо установить комплексный метод, такой как технология снятия отпечатков пальцев, для сравнительного анализа необработанных наркотиков из разных источников. Во-вторых, на несоответствие качества Herba Cistanches не обращали особого внимания. Виды цистанхе являются травами-паразитами. На их качество влияет множество факторов, таких как климат, среда обитания, хозяева, время сбора урожая, метод обработки и различные части одного и того же растения. Наши исследования показали, что качество видов Cistanche нестабильно, особенно дикого C. Deserticola [80,82,92]. Однако эта проблема игнорировалась в некоторых предыдущих анализах, и использовались только один или два образца [74,76], что могло привести к неточным выводам. А значит, в будущем следует собрать и проанализировать гораздо больше образцов, чтобы получить более объективное заключение. В-третьих, настоящий анализ в основном сосредоточен на двух основных PhG.(pгенилэтаноидгликозиды), эхинакозид (11) и актеозид (2), но, как мы знаем, фармакологическое действие ТКМ представляет собой взаимодействие нескольких компонентов или различных типов компонентов. Таким образом, одновременное определение активных мультикомпонентов имеет большее значение для контроля качества ТКМ. Однако до сих пор не было проведено количественного анализа более трех ФГ вХербаЦистанхи, даже нет отчета об анализе бензилгликозидов, иридоидов и лигнанов. Затем будущие исследования должны усилить их аналитическую и фармакологическую проработку. В целом, настоящее исследование по анализу видов Cistanche все еще находится на более низком уровне. Herba Cistanches являются важными тонизирующими препаратами, но на самом деле их качество не могли эффективно контролировать только два представителя PhG.(pгенилэтаноидгликозиды)[9]. Сочетание многокомпонентного определения с отпечатком пальца считается мощным подходом к контролю качества ТКМ. В дальнейшем уровень изученности видов цистанхе на этих двух полях следует повысить. Создание метода, позволяющего одновременно качественно и количественно анализировать ФГ, иридоиды и другие активные компоненты вХербаЦистанхибудет значимым направлением исследований.

Цистанхетрубчатыйимеет много эффектов, нажмите здесь, чтобы узнать больше

Благодарности

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального фонда естественных наук Китая (№ 30472070) и Программы New-Century Talent Program Министерства образования Китая (№ 985-2-102-113), авторы также благодарны Сяомин Лю, Чжихун Сун, ЛиЛей из Пекинского университета за их квалифицированную техническую помощь.

Из: «Анализ химических компонентов вЦистанхевидов» Юн Цзян, Пэн-Фей Ту

---Journal of Chromatography A, 1216 (2009) 1970–1979 гг.