Апоцинин уменьшает повреждение яичек, вызванное глутаматом натрия, из-за нарушения гемато-тестикулярного барьера и параметров окислительного стресса Ⅱ

Полученные результаты

3.1. Уровни тестостерона, ФСГ и ЛГ в сыворотке

Уровни тестостерона в группе MSG были ниже по сравнению с контрольной группой. Хотя группа MSG плюс APO показала увеличение уровня тестостерона по сравнению с группой MSG, это увеличение не было статистически значимым (рис. 1А). Уровень ФСГ был выше в группе глутамата натрия по сравнению с контрольной группой. Уровень ФСГ в группе глутамата натрия плюс апо был снижен по сравнению с группой глутамата натрия (рис. 1В). Снижение уровня ЛГ в группе глутамата натрия и повышение уровня ЛГ в группе глутамата натрия плюс АПО не были статистически значимыми по сравнению с экспериментальными группами (рис. 1С).

3.2. Тестикулярные уровни MDA, GSH и SOD

Уровень МДА в тканях был повышен в группе глутамата натрия по сравнению с контрольной группой. С другой стороны, при сравнении группы MSG plus APO с группой MSG наблюдалось значительное снижение MDA (рис. 1D). Уровни GSH и SOD значительно снизились в группе MSG по сравнению с контрольной группой и группой APO соответственно. Значительное увеличение уровней GSH и SOD было выявлено в группе MSG plus APO по сравнению с группой MSG (рис. 1E, F).

Нажмите, чтобы увидеть капсулы cistanche tubulosa для тестостерона

3.3. Количество сперматозоидов, подвижность и морфология

Нормальная морфология наблюдалась в образцах спермы в контрольной группе и группах АПО (рис. 2А, В). В группе MSG наблюдалось большое количество сперматозоидов с морфологическими аномалиями (рис. 2C). В группе MSG плюс APO было обнаружено несколько аномальных сперматозоидов, поскольку большинство сперматозоидов имели нормальную морфологию (рис. 2D).

Количество и подвижность сперматозоидов были ниже в группе MSG по сравнению с контрольной группой и группами APO. Эти параметры были значительно увеличены в группе MSG плюс APO по сравнению с группой MSG (рис. 2E, F).

3.4. Соотношение массы яичка и массы тела

Хотя соотношение массы яичек и массы тела в группе глутамата натрия было ниже по сравнению с другими экспериментальными группами, это снижение не было статистически значимым. Статистической разницы в соотношении массы яичек/массы тела между экспериментальными группами не было (рис. 3Е).

3.5. Гистопатологические результаты

Световое микроскопическое исследование ткани яичка с окрашиванием гематоксилин-эозином выявило нормальную морфологию семенных канальцев в контрольной группе. (Рисунок 3(А1)). Интактная морфология яичек наблюдалась в группе APO (рис. 3(B1)). В группе MSG зародышевый эпителий семенных канальцев был дезорганизован. В базальном отделе семенных канальцев были обнаружены вакуоли, указывающие на заметное повреждение тканей (рис. 3(C1)). Эти морфологические нарушения были отражены в значительно высоком гистопатологическом балле для этой группы. В группе, получавшей глутамат натрия плюс апо, большинство семенных канальцев имели нормальную морфологию с ограниченным количеством дегенерированных семенных канальцев (рис. 3(D1)).

По сравнению с группой MSG гистопатологическая оценка была значительно ниже в контрольной группе и группе APO. Гистопатологическая оценка значительно увеличилась в группе глутамата натрия и была значительно снижена в группе глутамата натрия плюс АПО по сравнению с группой глутамата натрия (рис. 3F). Кроме того, толщина семенных канальцев в группе глутамата натрия была меньше, чем в других экспериментальных группах. В группе MSG плюс APO наблюдалось значительное увеличение толщины канальцев по сравнению с группой MSG (рис. 3G). Контрольная группа и группа АПО продемонстрировали сильную PAS-позитивность (рис. 3 (A2, B2)) для базальных мембран семенных канальцев с правильной морфологией. Повреждение базальных мембран семенных канальцев глутамата натрия привело к снижению PAS-позитивности срезов. (Рисунок 3(С2)). PAS-позитивность в группе MSG плюс APO была почти такой же, как и в контрольной группе, с небольшим количеством нарушенных семенных канальцев с отслоением базальных мембран (рис. 3 (D2)). Морфология канальцев яичка и белочной оболочки была нормальной в контрольной группе (рис. 3 (A3)), группе апо (рис. 3 (B3)) и группе глутамата натрия плюс апо (рис. 3 (D3)). Однако в группе глутамата натрия (рис. 3(С3)) жировая ткань наблюдалась в белочной оболочке, и морфология тубулярной стромы также была нормальной.

3.6. Результаты для PCNA

Большое количество PCNA-позитивных клеток в семенном эпителии темно-коричневого цвета наблюдалось в контрольной группе и группе APO (рис. 4 (A1, B1)). В группе MSG было отмечено уменьшение количества PCNA-позитивных клеток семенного эпителия (рис. 4(C1)). Также в группе глутамата натрия наблюдаются PCNA-позитивные сперматогенные клетки в просвете семенных канальцев. Индекс пролиферации, самый низкий в группе MSG, был увеличен в группе MSG plus APO по сравнению с группой MSG (рис. 4E). Группа MSG плюс APO также показала увеличение PCNA-позитивных клеток в семенном эпителии (рис. 4 (D1)).

3.7. Результаты иммуноцитохимии TUNEL

В контрольной группе и группе APO количество TUNEL-положительных клеток было низким (рис. 4 (A2, B2)). Количество TUNEL-положительных клеток было выше в группе MSG, чем в других экспериментальных группах (рис. 4(C2)). TUNEL-положительные клетки были меньше в группе MSG плюс APO, чем в группе MSG (рис. 4 (D2)). Индекс апоптоза был выше в группе MSG, чем в других экспериментальных группах. Наблюдалось сравнительное снижение этого показателя в группе MSG плюс APO (рис. 4F).

3.8. Результаты для NOX-2 иммунофлуоресценции

Слабая иммунопозитивность NOX-2 наблюдалась в контрольной (рис. 5A–C) и группе APO (рис. 5D–F). Самая высокая иммунореактивность наблюдалась в группе, получавшей глутамат натрия (рис. 5G-I), тогда как снижение было обнаружено в группе, получавшей глутамат натрия плюс апо (рис. 5J-L). Отрицательные контроли иммунофлуоресцентного анализа NOX-2 показаны на рисунке S1.

3.9. Результаты для ZO-1 и иммуногистохимии окклюдина

ZO-1 и окклюдин-положительные результаты были обнаружены как темно-красный цвет в базолатеральной цитоплазме клеток Сертоли, расположенных в семявыносящих канальцах зародышевого эпителия. В то время как интенсивность ZO-1 и иммунореактивности окклюдина была самой высокой в ​​контрольной группе (рис. 6A–C, рис. 7A–C, рис. 8 (A1, A2) и рис. 9A, B) и группе APO (рис. 6D– F, рис. 7D-F и рис. 8 (B1, B2)) и снижение распределения иммунореактивности наблюдалось в группе MSG (рис. 6G-I, рис. 7G-I и рис. 8 (C1, C2)). Увеличение ZO-1 и положительности окклюдина наблюдалось в группе MSG плюс APO по сравнению с группой MSG (рис. 6J–L, рис. 7J–L и рис. 8 (D1, D2)).

3.10. Результаты трансмиссионной электронной микроскопии

В контрольной группе и группе APO наблюдалась нормальная ультраструктура зародышевого эпителия семенных канальцев, представленного многочисленными сперматозоидами, и клетки Сертоли, соединенные плотными соединениями (рис. 10А). Группа APO имела такую ​​же ультраструктуру, как и контрольная группа (фиг. 10B). В группе MSG наблюдались вакуолизация и липидные капли в зародышевых эпителиальных клетках семенных канальцев, разделение между соединениями клеток Сертоли-Сертоли и разрушение базальной пластинки семенных канальцев (рис. 10C). Ультраструктура группы, получавшей глутамат натрия плюс АПО, отражала нормальную организацию семенных канальцев с небольшим количеством липидных капель в цитоплазме (рис. 10D).

Как Цистанхе повышает уровень тестостерона?

Цистанхе — это трава, традиционно используемая в китайской медицине для повышения энергии, либидо и общего жизненного тонуса. Считается, что Цистанхе может повышать уровень тестостерона за счет ингибирования активности фермента, называемого ароматазой, который превращает тестостерон в эстроген. Также было обнаружено, что цистанхе увеличивает выработку лютеинизирующего гормона (ЛГ) в организме. ЛГ играет решающую роль в регуляции выработки тестостерона в яичках. Повышая уровень ЛГ, Цистанхе может косвенно повышать выработку тестостерона. Кроме того, Cistanche также содержит несколько фитохимических веществ, таких как эхинакозид и актеозид, которые обладают антиоксидантными свойствами. Эти соединения могут помочь защитить яички и другие репродуктивные органы от окислительного повреждения, тем самым улучшая их функцию и увеличивая выработку тестостерона. В целом, точные механизмы, с помощью которых Цистанхе повышает уровень тестостерона, до конца не изучены, но, вероятно, это взаимодействие ингибирования ароматазы, увеличения выработки ЛГ и обеспечения антиоксидантной поддержки репродуктивной системы.

Продолжение следует...

Мерве Аджикель-Эльмас 1,*, Сальва Асма Алгилани 1 , Бегум Шахин 1 , Озлем Бингол Озакпынар 2 , Мерт Геджим 2 , Кутай Короглу 3 и Серап Арбак 1

1 Кафедра гистологии и эмбриологии, Медицинский факультет, Университет Аджибадем Мехмет Али Айдынлар, Ичеренкой Мах., Кайисдаги Кад. 32, Аташехир, Стамбул 34752, Турция

2 Кафедра биохимии, Фармацевтический факультет, Университет Мармара, Басибуюк Йолу, 4/А, Басибуюк, Стамбул 34854, Турция

3 Кафедра гистологии и эмбриологии, Медицинский факультет Университета Мармара, Басибуюк Йолу № 9 D:2, Малтепе, Стамбул 34854, Турция