CISTANCHE DESERTICOLA POLYSACHARIDES ослабляет диабетическую нефропатию у мышей, влияя на кишечную флору и ингибируя сигнальный путь, похожий на Toll, 4/ядерный фактор-κB ⅱ

2.5 Влияние CDP на патологию толстой кишки у мышей C57BL/6J

Порошок экстракта экстракта Cistanche Deserticola из высококачественного сырья

Нажмите, чтобы получить более подробную информацию

Как показано на рисунке 2, окрашивание H & E показало, что структура ткани толстой кишки нормальных мышей была нормальной, крипты были аккуратно и плотно расположены, число было большим, а эпителиальные клетки не имели очевидной дегенерации и выброса. Напротив, мыши DN показали очевидное выброс эпителиальных клеток толстой кишки, инфильтрацию воспалительных клеток, повреждение клеток из крипта, исчезновение кишечной железистой структуры и повышенную проницаемость. После 4 недель вмешательства CDP приведенные выше патологические условия восстанавливались в различной степени.

Результаты окрашивания AB-PAS показали, что по сравнению с контрольной группой число неосновных бокалов в толстой кишке мышей модельной группы было значительно снижено, а секреция кислого слизистого белка была значительно увеличена; Количество неосложных бокалов в толстой кишке контрольной группы было самым большим; По сравнению с модельной группой, секреция кистного слизистого белка толстой кишки в группе CDPS-H была снижена.

Рис. 2 Влияние CDP на гистопатологические изменения толстой кишки у мышей DN, исследованные с помощью H & E и AB-Pas окрашивание

2.6 Влияние CDP на кишечную флору мышей C57BL/6J

Влияние CDP на биохимические показатели и патологические результаты мышей DN были всесторонне проанализированы, и содержание толстой кишки мышей в группе CDPS-H с наилучшей общей эффективностью было отобрано для исследования кишечной флоры.

2.6.1 Вариант последовательности ампликонов (ASV) Диаграмма Венна, как показано на рисунке 3, по сравнению с контрольной группой, относительная численность видов кишечной флоры у мышей модельной группы уменьшилось, и относительное содержание улучшилось после лечения CDPS.

Cistanche

2.6.2 Анализ альфа -разнообразия, как показано в таблице 6, по сравнению с контрольной группой, индекс CHAO1 кишечной флоры мышей модельной группы уменьшился. После вмешательства CDP индекс CHAO1 увеличился, но не было статистической значимости, что указывает на то, что CDP могут изменить структуру кишечной флоры, увеличивая общее число видов. Индекс покрытия близок к 1, что указывает на то, что результаты секвенирования могут в основном отражать истинную ситуацию выборки. Не было статистически значимого различия в индексе Шеннона, Симпсона, охвата и Пиелу _ E среди групп, что указывает на то, что видовое богатство и разнообразие экологических сообществ в каждой группе были хорошими, а охват колонии был последовательным и равномерно распределенным.

Рис. 3 Диаграмма Венна распределения ASV

Таблица 6 Индексы альфа-разнообразия кишечной микробиоты у мышей в группах контроля, модели и CDP (n=6)

2.6.3 Анализ бета -разнообразия

Как показано на рисунке 4, с помощью анализа бета-разнообразия, анализ основных компонентов (PCA) может различать три группы образцов в трехмерном пространстве, что указывает на то, что существуют значительные различия в кишечной флоре этих трех групп образцов. Модельная группа и контрольная группа разделены вдоль оси PC2, а группа CDPS-H находится между модельной группой и контрольной группой, близкой к контрольной группе.

Рис. 4 Бета -разнообразие кишечной флоры у мышей в группах управления, модели и CDP (n=6)

2.6.4 Влияние CDP на кишечную флору мышей C57BL/6J

2.6.4.1 Уровень филома

Как показано на рисунке 5, по сравнению с контрольной группой, относительная численность фирмут в модельной группе значительно увеличилась, относительная численность бактероидоты и веррукомикробии значительно снизилось, и относительное соотношение численности (b/f) бактероидаетов до твердости снижалось. По сравнению с модельной группой, CDP значительно увеличивал относительное количество бактериоидетов и verrucomicrobia, уменьшило относительную численность Firmicutes и увеличивало значение B/F, что было ближе к значению B/F контрольной группы.

Рис. 5 Барная диаграмма относительной численности кишечной флоры на уровне филома (n=6)

2.6.4.2 Уровень рода

Гистограмма состава численного вида на уровнях 30 лучших родов (рис. 6) показывает, что существуют различия в кишечной флоре мышей в модельной группе и в группе CDPS-H. Существует 16 различных бактериальных родов между модельной группой и контрольной группой; Существует 8 различных бактериальных родов между группой CDPS-H и модельной группой; 5 бактериальных родов в перекрывающейся области могут быть бактериальными родами, что CDP могут улучшить диабетическую нефропатию (рис. 7). Как видно из таблицы 7, на уровне рода в кишечной флоре мыши, по сравнению с контрольной группой, относительная численность аллобакулума в модельной группе была значительно уменьшена, и относительная численность розбурии, romboutsia, ruminococcus _ Corques _ rf39 (P<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

Рис. 6 Барная диаграмма относительной численности кишечной флоры на уровне рода (n=6)

Рис. 7 Диаграмма Венна кишечной флоры на уровне рода (n=6)

Таблица 7 Влияние CDP на относительную численность дифференциальных микробных родов кишечника между группами управления, модели и CDP (n=6)

2.6.4.3 Влияние CDP на выражение толстой кишки ZO -1 и окклюдин

Как показано на рисунке 8 и в таблице 8, по сравнению с контрольной группой, относительные уровни экспрессии ZO -1 и окклюдина в ткани толстой кишки мышей в модельной группе были значительно снижены (p <0. 01); По сравнению с модельной группой, вмешательство CDPS в каждой дозе могло бы быть значительно увеличены относительные уровни экспрессии ZO -1 и окклюдин в тканях толстой кишки (P<0.01).

Рис. 8 Экспрессия ZO -1 и окклюдин в тканях толстой кишки мышей из каждой группы (n=3)

Таблица 8 Относительные уровни экспрессии ZO -1 и окклюдин в ткани толстой кишки мышей из каждой группы (n=3)

Cistanche сырье

2.7 Влияние CDP на экспрессию белка передачи сигналов почек TLR4/NF-κB

Как показано на рисунке 9 и таблице 9, по сравнению с контрольной группой, относительная экспрессия белка TLR4 в ткани почек мышей в модельной группе и отношения P-NF-κBP65/NF-κB P65 и PI κBα/I κBα были значительно увеличены. Высокий (с<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

Рис. 9 Вестерн-блот-анализ экспрессии белка, связанный с сигнальным путем TLR4/ NF-κB в почечной ткани мышей из каждой группы (n=3)

Таблица 9 Относительные уровни экспрессии белков сигнального пути TLR4/NF-κB, связанных с путями, в почечной ткани мышей из каждой группы (n=3)