Анализ состава Cistanche Tubulosa: разделение и структура фенилэтаноидного гликозида и неолигнанового гликозида

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com

Составляющие Cistanche Tubulosa (Schrenk) Hook. F. II.1) Выделение и структура нового фенилэтаноидного гликозида и нового неолигнанового гликозида

Фумио Ёсидзава*, Такеши Деяма/Нобуо Такидзава/Хан Усмангани и Мансур Ахмад6

Центральные исследовательские лаборатории, Yomeishu Seizo Co., Ltd., a 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Япония, и кафедра фармакогнозии фармацевтического факультета Университета Карачи? Карачи-32, Пакистан. Поступила в редакцию 9 ноября 1989 г.

новыйфенилэтаноидный гликозидтубулозид E (I) и новыйнеолигнановый гликозид, дегидродиконифериловый спирт yO-0-D-глюкопиранозид (II), выделяли из целых растенийЦистанхе трубчатая (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3) -2-O-ацетил-4-оп-кумароил-^-D-глюкопиранозид на основе химических данных и спектральных данных.

Ключевые слова Цистанхе трубчатая-, оробанховые;фенилэтаноидный гликозид;иридоидный; тубулозид Е; гликозид дегидродикониферилового спирта; сирингалид рамнозид;неолигнановый гликозид; 13C-НМРМОЭ

фенилэтаноидный гликозид в цистанхе

В предыдущей статье мы сообщали об выделении и структурном определении новыхфенилэтаноидные гликозиды, тубулозиды A-D из целых растенийЦистанхе трубчатая(Шренк) Крюк. ф. (Orobanchaceae) в Пакистане.

Эта статья посвящена выделению и структурному разъяснению новогофенилэтаноидный гликозид, названный тубулозидом E (I), и новыйнеолигнановый гликозид, дегидродиконифериловый спирт ■/-QgD-глюкопиранозид (II), а также выделение 11 известных соединений, дегидродиконифериловый спирт 4-OgD-глюкопиранозид (III), сирингалид A 3'-aL-рамнопиранозид (IV), изосирингалид 3'-aL-рамнопиранозид (V), (плюс)-сирингарезинол OgD-глюкопиранозид(VI), (плюс)-пинорезинол OgD-глюкопиранозид (VII), лириодендрон (VIII), 6-дезоксикаталпол (IX) , 8-эпилогановая кислота (X), 20-гидроксиэкдизон (XI), 8-гидроксигераниол 1-gD-глюкопиранозид (XII) и сирингин (XIII). Соединения VI, VIII-X, XII и XIII ранее были выделены из Cistanche salsa?

Тубулозид E (I) был выделен в виде аморфного порошка, C31H38O15 -3/2H2O, степень [a】D -134.0 (MeOH). Инфракрасный (ИК) спектр свидетельствует о наличии гидроксильных групп (3430см-1), сложного эфира (1734см-х), двойной связи (1634см-1) и ароматических колец ( 1608 и 1518см-1). Спектр протонного ядерного магнитного резонанса (0H-ЯМР) I показал сигналы, связанные с метильной группой рамнозы 0 1.07 (3H, d, J= 6 Гц)], ацетоксильной группой {{22} },98 (3H, с)], бензильные метиленовые протоны 0 2,72 (2H, t, J - 1 Гц)], глюкозоаномерный протон 0 4,54 (1H, д, J{{ 32}} Гц)], рамнозеаномерный протон 0 5.00 (1H, шир.с)], два олефиновых протона [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">

При ацетилировании соединение I дает октаацетат (la), спектр 】H-ЯМР которого показывает пять алифатических ацетоксильных групп 0 1,87, 1,95, 2,02 (3H каждая, с), 2,10x2 (6H, с)] и три ароматические ацетоксигруппы [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">

При метанолизе I ацетилхлоридом в метаноле методами тонкослойной хроматографии (ТСХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) обнаружены метил-п-кумарат и 3,4-дигидроксифенэтиловый спирт.

Кислотный гидролиз I 10-процентной серной кислотой дает глюкозу и рамнозу в соотношении 1:1.

From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-кумароил-^-D-глюкопиранозид.

Соединение III выделено в виде аморфного порошка, [a]D — 56,4 град (MeOH). Ферментативный гидролиз III дает агликон (IIIб) в виде аморфного порошка, [0]270—11300, [а]D—31,6 град (МеОН) и глюкозу. Соединения IIIb и III были идентифицированы как дегидродиконифериловый спирт3,4) и его 4-O-#-D-глюкопиранозид3,4) соответственно при сравнении с подлинными образцами (спектры TR,】H- и 13C-ЯМР). .

Соединение II было выделено в виде аморфного порошка [a]D  7,4° (MeOH), в ИК-спектре которого указывалось на присутствие гидроксильной группы (3430 см-1) и ароматического кольца (1614, 1522, 1502 см–1). Т). 〔H-ЯМР II показал сигналы двух ароматических метоксильных групп 0 3.74, 3.80 (3H каждая, с)], бензильного протона 0 5.45 (1H, d, J{{ 16}}Гц)], два трансолефиновых протона 0 6.17 (1H, д, J= 16, 7 Гц), d 6,58 (1H, д, J= 16 Гц)] и пять ароматических протонов 0 6.7-7.1 (5H, м)]. При ацетилировании соединение II дает гексаацетат (Ila), спектр 1H-ЯМР которого показывает пять алифатических ацетильных сигналов 0 2,01, 2,03, 2,09, 2,06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. Ферментативный гидролиз II дает агликон (lib) и глюкозу. Соединение lib было выделено в виде аморфного порошка, [a]D плюс 34,8° (MeOH), чьи ИК-, 1H- и 13C-ЯМР-спектры были почти идентичны спектрам IIIb, за исключением значений [a]D и кругового дихроизма (CD ) спектр.

Абсолютная конфигурация lib была выяснена путем сравнения его спектра КД со спектром IIIb и III, стереохимия которых была подтверждена в опубликованных данных. положительные максимумы, с другой стороны, у IIIb А& -11300 (270) и -10990 (283) были отрицательными максимумами. Эти факты предполагают, что lib и Illb являются энантиомерами друг друга. Стереохимия lib должна соответствовать показанной на схеме 1.

Таким образом, установлено, что соединение II представляет собой моноглюкозид дегидродикониферилового спирта. Положение глюкозы.

соответственно. Сдвиги соответствующих атомов углерода при переходе к II от lib составили —4,4 и плюс 7,3 м.д., что указывает на то, что глюкозильный фрагмент в II связан с гидроксильной группой у атома Су'.5)

Из приведенных выше результатов было установлено, что соединение II представляет собой дегидродиконифериловый спирт γ'-O-^-D-глюкопиранозид.

Соединения IV и V были выделены в виде аморфного порошка (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). ИК-спектры свидетельствовали о наличии гидроксильных групп (3400 см7), двойной связи (1634 см-1) и ароматических колец (1606 и 1518 см-1). При ацетилировании соединений IV и V образуются октаацетаты ( IVa, Va), спектры 1H-ЯМР которого показывают пять сигналов алифатического ацетоксила и три сигнала ароматического ацетоксила соответственно. Соединения IVa и Va были идентифицированы как сирингалид A 3'-aL-рамнопиранозид октаацетат и изосирингалид 3'-aL-рамнопиранозид октаацетат, соответственно, путем сравнения (Å ИК и 】 H-ЯМР) с аутентичными образцами. Спектр 13С-ЯМР соединений IV и V подтверждает эти структуры (см. экспериментальную часть). Соединения VI—XIII идентифицированы как (плюс)-шпризинол-О-β-D-глюкопиранозид (VI), 2с) (плюс)-пинорезинол-О-. jS-D-глюкопиранозид (VII),7) лириодендрин (VIII),2Z,) 6-деоксикаталпол (IX),2c) 8-эпилогановая кислота (X),2fl) {{50} }гидроксиэкдизон (XI),8) 8-гидроксигераниол 1-0-D-глюкопиранозид (XII) и сирингин (XIII),2d) соответственно в сравнении с аутентичными образцами

Экспериментальный

Температуры плавления определяли на приборе для микроплавления Mitamura и не корректировали. Оптические вращения измерялись цифровым поляриметром JASCO DIP-140. ИК-спектры регистрировали на ИК-спектрофотометре Hitachi 279-30, а ультрафиолетовые (УФ) спектры - на спектрофотометре Hitachi 200-20. Спектры КД записывали на спектрофотометре JASCO J-20A CD, а масс-спектры (МС) - на JEOL JMS-100. Спектры 1Н-ЯМР и 13С-ЯМР регистрировали на приборе JEOL FX-90Q (89,55 и 22,5 МГц соответственно).

Химические сдвиги даны по шкале d (частей на миллион) с тетраметилсиланом (ТМС) в качестве внутреннего стандарта. Сокращения, используемые для данных ядерного магнитного резонанса (ЯМР), следующие: с, синглет; д, дублет; т, триплет; кв, квартет; бр, широкий. Газовую хроматографию (ГХ) проводили на приборе Shimadzu GC-4CM с пламенно-ионизационным детектором. ВЭЖХ выполняли на машине Hitachi 655A-11. Силикагель (Wako gel C-300) использовали для колоночной хроматографии. Пластины, предварительно покрытые силикагелем 60 F254 (Merck), использовали для ТСХ, детекцию проводили путем распыления 10-процентной H2SO4 с последующим нагреванием.

Изоляция

Целые растения изцистанхе трубчатая(7 кг), собранные в декабре 1986 г. в Карачи, Пакистан, экстрагировали МеОН ({2}} x 2) с обратным холодильником. Экстракт концентрировали при пониженном давлении и остаток суспендировали в воде. Эту суспензию экстрагировали EtOAc, насыщенным водой. Водный слой помещали на колонку Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) и промывали H2O, а затем элюировали MeOH. Элюат MeOH (140 г) хроматографировали на колонке с полиамидом C-200 (Wako Pure Chemical) с использованием H2O, а затем MeOH с получением двух фракций (фракция 1, элюат H2O; фракция 2, элюат MeOH). Фракцию 1 концентрировали с получением остатка. Остаток повторно хроматографировали на колонке с силикагелем, используя CHCl3-MeOH-H2O. После повторной хроматографии ВЭЖХ (колонка, Develosil ODS-10, 20 x 250 мм, растворитель: H2O-CH3CN или H2O-MeOH) было выделено 10 соединений [II (45 мг), III (40 мг), VI (35 мг ), VII (43 мг), VIII (12 мг), IX (8 мг), X (10 мг), XI (20 мг), XII (10 мг) и XIII (3,6 мг)]. Фракция 2 обрабатывалась так же, как фракция 1, и давала соединения I (150 мг), IV (10 мг) и V (10 мг).

Тубулозид Е (I)

Аморфный порошок, [а]р3 —134,0 град (с= 1,5, МеОН). Анальный. Вычислено для C31H38O15 -3/2H2O: C 54,98; Ч, 6.10. Найдено: С 55,01; Н, 5,98. ИК см-1: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H・ЯМР (MeOH-4) 3: 1,07 (3H, д, J=6Гц, CH3 рамнозы), 1,98 (3H, с, OAc), 2,72 (2H, т, J{ {37}}Гц, Ar-CH2~), 4,54 (1H, д, J=8Hz, Hl глюкозы), 5.00 (1H, шир.с, Hl рамнозы), 6,34 ( 1H, д, J= 16Гц, Ar-CH=CH-), 6,5-6,8 (3H, ароматический H), 6,80 (2H, д, J-9Hz, H{ {65}}; H-5'), 7,46 (2H, д, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7,66 (1H, д, J=16 Гц, Ar-CH=CH-). 13C-ЯМР: таблица L

Дегидродиконифериловый спирт y^-O-^-D-Gлюкопиранозид (II)

Аморфный порошок, [а]^5 —7,4 град (с= 1,6, МеОН). ИК см-1: 3430, 1614, 1522, 1502. УФ, h нм: 227 (ш), 280. d, 丿=6Гц, Ha), 6,17 (1H, dt, 丿=16, 7Hz, H-#), 6,58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) , 6,7-7,1 (5Н, м, ароматический Н).13С-ЯМР: Таблица I.

Дегидродиконифериловый спирт 4-Oj8-D-глюкопиранозид (III)

Аморфный порошок, [а]^5 -56.4.(с= 1.1, МеОН). ИК см-1: 3400, 1604, 1566, 1502. УФ 11 нм; 222, 277. XH-ЯМР (ДМСО-(76) 6: 3,76, 3,82 (3H, с, OCH3), 5,52 (1H, д, J-7 Гц, Ha), 6,18 (1H, дт, J=16, 7 Гц, H-^), 6,49 (1H, д,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">

Сирингалид А 3'-(xL-рамнопиранозид (IV)

Аморфный порошок, Анал. Рассчитано для C29H36O14 • 5/2H2O: C, 56,11; Н, 5,94. Найдено: C, 56,4{{107}}; Ч, 6.04. ИК см - 3400, 1606, 1518% }} Гц, Ar-CH2-), 4,46 (1H, д, J=8Hz, Hl глюкозы), 5,27 (1H, шир.с, Hl рамнозы), 6,35 (1H, д, J-16Hz, Ar-CH=CH-), 6,6-7,3 (3H, ароматический H), 7,68 (1H, д, J=16Hz, Ar-CH{{54 }} СН-). 13C-ЯМР (CD3OD) 8: 130,6 (Cl), 116,1 (C-2), 130,8 (C-3, 156,6 (C-4), 116,1 (C-6) ), 72,1 (Ca, рам-2, 3), 36,2 (C-8), 127,6 (Cr), 114,6 (C2), 149,6 (C・3'), 146,6 (C{{94} }}'), 116,4 (C-5'), 123,1 (C-6'), 168,2 (C・a'), 115,2 (C书), 147.0 104.0 (глу-1), 76,0

(глу-2), 81,5 (глу-3), 70,3 (глу-4), 75,9 (глу-5), 62,3 (глу-6), 102,8 (рамка -1), 73,7 (рамка -4), 70,5 (рамка -5), 18,3 (рамка -6).

Изосирингалид S^aL-рамнопиранозид (V)

Аморфный порошок, Анал. Вычислено для C29H36O14-1/2H2O: C 56,31; Н, 5,96. Найденный; С, 56,4{{70}}; Ч, 6.04. ИК δ см-1: 3420, 1608, 1518. XH-ЯМР (MeOH-J4) d: 1,09 (3H, d, β=6 Гц, CH3 рамнозы), 2,80 (2H, т, J-6 Гц, Ar-CH2-), 4,40 (1H, д, J=8Hz, Hl глюкозы), 5,23 (1H, уш. с, Hl рамнозы), 6,37 (1H, д, J-18Гц, AsCH=C旦'一), 6,6—7,2 (3H, ароматический H), 7,71 (1H, д, 丿=18Hz, Ar -CH= CH-y 13C-ЯМР (CD3OD) S: 131,4 (Cl), 116,3 (C-2), 144,5 (C-3X 146,0 (C-4) ), 117,0 (С-5), 121,2 (С-6), 72,2 (Са), 36,5 (С/), 127,1 (Cr), 116,8 (С-2\ 69, 131,2 (C-3\ 5'), 161,2 (C-4'), 168,2 (CH), 114,7 (C-^), 147,5 (Cy), 104,1 (глу-1), 76,1 (глу-2), 81,5 (глу-3),

70,2 (глу-4), 75,9 (глу-5), 62,3 (глу-6), 102,8 (рам-1), 72,1 (рам-2, 3 ), 73,7 (рамка -4), 70,6 (рамка -5), 18,4 (рамка -6).

(плюс)-Сирингарезинол Oj?-D-глюкопиранозид (VI)

Аморфный порошок, [а]g5 — 14,4 (с=0,1, МеОН). Анальный. Вычислено для C28H36O13: C 57,93; Ч, 6.25. Найдено: С 58,01; Н, 6,26. ИК-спектр ^ см-1: 3430, 1600, 1518. 1H-ЯМР (ДМСО"6): 3,78 (12H, s2OCH3×4), 6,60, 6,66 (2H каждый, с, ароматический H).

( плюс )-Пинорезинол O-^-D-Глюкопиранозид (VII)

Аморфный порошок, [а]^5 плюс 38,9° (с=0,6, МеОН). Анальный. Вычислено для C26H32O11T/2H2O: C 58,97; Н, 6,28. Найдено: 58,94; Ч, 6,29. ИК см-1: 3425, 1606, 1516. 】H-ЯМР (C5D5N) W 3,77, 3,80 (3H, с, OCH3), 6,9-7,7 (6H, м, ароматический H).

Лириодендрон (VIII)

Бесцветные иглы (MeOH), т.пл. 255-257 град., [а]р5 -9.2 град (с=L3, пиридин). ИК см-1: 3400, 1598, 1510. XH-ЯМР (ДМСО/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">

6-Деоксикаталпол (IX)

Бесцветные иглы (МеОН), т.пл. 204—206 град., [а]р5 -50.1 град (с{4}}.7, МеОН). Анализ, вычислено для C15H22O9: C 52,02; Ч, 6.40. Найдено: С 52,12; Ч, 6.41. ИК δ см-1: 3400, 1658. 1H-ЯМР (D2O) 3:

л. 3—1,9 (1Н, м, Н-6), 2,1—2,7 (3Н, м, Н-5, Н-6, Н-9), 3,65 (1Н, s-образный, H-7), 3,90, 4,35 (2H, система AB, J=13Гц, H-10), 4,92 (1H, д, J=7 Гц, аромамерный H), 5,10 (1H, дд, J=6, 4 Гц, H-4), 5,12 (1H, д, J-10 Гц, Hl), 6,38 (1H, дд, 1 Гц, H-3).

{{0}}Эпилогановая кислота (X) Бесцветные иглы (MeOH), т.пл. 147-149 град., [а]р5 — 135.0 град. (с= 1.0, пиридин ). Анальный. Вычислено для C16H24O10H2O: C 48,73; Н, 6,65. Найдено: С 48,60; Ч, 6.70. ИК v; см-1: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・ЯМР (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">

м, H-6), 2,60 (1H, м, H-8), 3,08 (1H, дт, J=3, 8,5 Гц, H-9), 3,58 ( 1H, м, H-5), 5.40 (1H, д, J=7.5Hz, аномерный H), 5.91 (1H, д〃=3Hz, Hl), 7.92 (1H , с, Н-3).

20-Гидроксиэкдизон (XI)

Кристаллическое твердое вещество, т.пл. 241-242°, [a]p5 плюс 70.0 град (c= LI, MeOH). Анальный. Вычислено для C27H44O7: C 67,47; Ч, 9.23. Найдено: С 67,28; Ч, 9.18. ИК см-1: 3440, 1646. XH-ЯМР (C5D5N) 1,06 (3H, с, H-19), 1,20 (3H, с, H-18), 1,36 (6H, с, Н-26, Н-27)? 1,58 (3H, с, H-21), 6,24 (1H, д, J=2Гц, H-7). 13С-ЯМР (C5D5N): 38,0 (Cl),

68,2 (С-2, С-3), 32,5 (С・4), 51,5 (С-5), 203,7 (С-6), 121,8 (С-7), 166,3 (С-8), 34,6 (С-9), 38,8 (С-10), 21,3 (С-II), 31,9 (С {{30}}), 48,2 (С-13), 84,4 (С-14), 32,1 (С-15), 21,6 (С-16 ), 50,2 (С-17), 18,0 (С-18), 24,6 (С-19), 77,0 (С-20), 21,8 (С-21 ), 77,7 (С-22), 27,6 (С-23), 42,7 (С-24), 69,8 (С-25), 30,1 (С-26 , 27).

8-Гидроксигераниол 1-^-D-Gлюкопиранозид (XII)

Бесцветные иглы (МеОН), т.пл. 58—60 град., [а]^5 — 40,1 с. (с=L2, МеОН). Анальный. Вычислено для C16H28O71/2H2O: C 56,29; Н, 8,56. Найдено: С 56,40; Ч, 8.50. ИК см-1: 3350, 1670, 1446. XH-ЯМР (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">

Сирингин (XIII)

Бесцветные иглы (МеОН), т.пл. 188-189 град., [а]^5 — 15,3 град. (с{5}}.4, МеОН). Анальный. Вычислено для C17H24O9: C 55,13; Н, 6,53. Найдено: С 54,83; Ч, 6.50. ИК см-1: 3400, 1592, 1514. 1H-ЯМР (ДМСО/6)W 3,78 (6H, с, OCH3 x 2), 6,3-6,5 (2H, м, -CH= CH-), 6,72 (2H, с, ароматический H).

Ацетилирование I. Соединение I (50 мг) растворяли в пиридине (1 мл) и уксусном ангидриде (1 мл) и оставляли при комнатной температуре на ночь. Реакционную смесь выливали в воду со льдом и затем экстрагировали EtOAc. Экстракт EtOAc концентрировали в вакууме и остаток хроматографировали на колонке с силикагелем, используя бензол-ацетон (5:1), с получением октаацетата (1а) (35 мг). ИК см-1: 1760, 1638, 1604, 1508. 1H-ЯМР (CDCl3) (5: 1,02 (3H, д, J=6Hz, CH3 рамнозы), 1,87, 1,95, 2,02 (3H каждый, с, OAc), 2,10 (6H, с, OAc x 2), 2,27, 2,28, 2,31 (по 3H, с, Ar-OAc), 2,90 (2H, т, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6,38 (1Н, д, J=16Гц, АР~СН=СН-), 6,80-7,15 (3Н, м, аромат. Н), 7,24 (2Н, д, J-9 Гц, H-3\ H・5'), 7,55 (2H, д, 丿=9 Гц, H-2, H-6), 7,72 (1H, д, J =16 Гц, Ar-CH=CH-).

Ацетилирование II и III

Соединения II и III (по 20 мг каждого) ацетилировали так же, как описано для соединения I, и получали гексаацетаты [Ila (12 мг), IIIa (15 мг)]. Ila: ИК δ см-1: 1754, 1608, 1506. 1H-ЯМР (CDCl3) 5: 2,01, 2,03, 2,09 (каждый по 3H, с, OAc), 2,06 (6H, с, OAc x 2). ), 2,30 (3H, с, OAc), 3,84 (3,95 (3H, с, OCH3), 5,54 (1H, д, β=6Hz, Ha), 6,05 (1H5 dt, J{{38} }, 7 Гц, Н-^), 6,53 (1Н, д, «/{44}}Гц, Н-а'), 6,8-7,1 (5Н, м, ароматический Н). IIIa: ИК v^cm 1: 1760, 1604, 1516. 】H-ЯМР (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">

(5Н, м, ароматический Н).

Ацетилирование IV и V

Соединения IV и V ацетилировали так же, как описано для соединения I, и получали октаацетаты [IVa, Va]. IVa: ИК δ смТ: 1754, 1636, 1514. 1H-ЯМР (CDC,) W 1,03 (3H?d, J=6Hz, CH3 рамнозы), 1,87, 1,94, 1,99 (3H каждый, с, OAc), 2,09 (6H, с, OAcx2), 2,28 (6H, с, OAcx2), 2,30 (3H, с, OAc), 2.86 (2H, т, J=6 0,6 Гц, Ar■-CH?-), 3,67 (2H, т, J=7,2 Гц Ar-CH2~CH2-), 6,35 (1H, д, J=16Гц , AsCH=CU-), 6,87-7,35 (3H, м, Ar - 7,09 (4H, кв, J=8},6 Гц, A2/B2/тип), 7,65 (1H, д, J =16 Гц, Ar CH=CH ).Va: ИК см-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-ЯМР (CDCl3) 1,03 (3H, д,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>

A2zB/тип), 7,71 (1H, д, мк/=16Гц, Ar-CH=CH).

Метанолиз I

Соединение I (около 1 мг) кипятили с 5%-ным метанольным раствором CH3COC1 (2 мл) в течение 3{19}} мин, затем реагент выпаривали в вакууме. Присутствие метил-п-кумарата и 3,4-дигидроксифенетилового спирта в остатке определяли методами ТСХ [CHCl3-MeOH (10}:1)] и ВЭЖХ [колонка, Develosil ODS -7 (4,6 x 250 мм); растворитель, 55% МеОН; детектор (УФ), 220 нм; скорость потока, 1,0 мл/мин]. Метил п-кумарат; Rf 0,82, R (мин) 8,8, 3,4-дигидроксифенэтиловый спирт; 母0,31, tR (мин) 3,2.

Кислотный гидролиз IA

раствор соединения I (2 мг) в 10% H2SO4 (1 мл) нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Раствор пропускали через колонку Amberlite IR-45 и концентрировали с получением остатка, который восстанавливали боргидридом натрия (около 3 мг) в течение 1 часа. Реакционную смесь пропускали через колонку Amberlite IR-120 и концентрировали досуха. Борную кислоту удаляли перегонкой с МеОН и остаток ацетилировали уксусным ангидридом (1 капля) и пиридином (1 капля) при 100°С в течение 1 часа. Реагенты упаривали в вакууме. Ацетат глюцита и ацетат рамнита были обнаружены в соотношении 1 к 1 из соединения I с помощью ГХ. Состояние: колонка, 1,5% OV-17, 3 мм x 1,5 м; темп. колонки, 180 градусов; газ-носитель, N2 (30 мл/мин). tR (мин): 2,0 (ацетат рамнита), 5,5 (ацетат глюцита).

Ферментативный гидролиз II и III соединения II

(13 мг) или III (40 мг) гидролизовали целлюлазой (40 мг) в воде (1 мл) в течение 2 ч при 37°С. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc. Экстракт EtOAc концентрировали в вакууме с получением остатка, который хроматографировали на ВЭЖХ [колонка, Develosil ODS-10 (20 x 250 мм); растворитель. II: H2O-CH3CN (77,5:22,5); III: H2O-CH3CN (80:20); детектор (УФ), 205 нм; скорость потока 6,0 мл/мин] с получением lib (3,3 мг), IIIb (5,7 мг). lib: [a]^5 плюс 34,8 градуса (c=0,3, MeOH). CD (с=3,3 мг/10 мл, MeOH) [0]25 (нм): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232 ). ИК 唸E; см-1: 3380, 1606, 1520, 1500. УФ-нм: 276. МС m/z (проценты): 358 (М плюс, 53), 340 (М плюс -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59).XH-ЯМР (ацетон-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">

ПодтверждениеМы благодарны профессору А. Уэно и доктору Т. Миясе, Университет Сидзуока, за измерения спектров ЯМР и КД и их ценные предложения, а также доктору М. Кикути, Фармацевтический колледж Тохоку, за предоставленную информацию. аутентичные образцы.

Ссылки и примечания

1) Х. Кобаяси, Х. Огучи, Н. Такидзава, Т. Миясе, А. Уэно, К. Усмангани и М. Ахмад, хим. фарм. Бюлл., 35, 3309 (1987).

2) а) Кобаяси Х. и Комацу Дж., Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); б) Кобаяси Н., Карасава Х., Миясе Т. и Фукушима С., Chem. Pharm, Bull., 33, 1452 (1985); в) Там же, 33, 3645 (1985); г) Х. Карасава, Х. Кобаяси, Н. Такидзава, Т. Миясе и С. Фукусима, Якугаку Дзаси. 106, 721 (1986).

3) HD Ludemann and H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).

4) а) Х. Ахенбах, Дж. Гроб, К. А. Домингес, Г. Кано, Дж. В. Стар, Л. С. Брюссоло, Г. Муньос, Ф. Сальгадо и Л. Лопес, Фитохимия. 26, 1159 (1987); б) AN Binns, RN Chen, HN Wood и DG Lynn, Proc. Натл. акад. науч. США, 84, 980 (1987); c) Д.Г. Линн, Р.Х. Чен, К.С. Мэннинг и Х.Н. Вуд, там же, 84, 615 (1987).

5) Т. Deyama, Т. Ikawa, S. Kitagawa и S. Nishibe, Chem. фарм. Бюлл., 35, 1803 (1987).

6) Кикучи М., Ямаути Ю. и Танабэ Ф., Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).

7) Чиба М., Хисада С., Нисибе С., Тиме Х., Фитохимия, 19, 335 (1980).

8) а) Х. Хикино, Ю. Хикино, Fortschritted. хим. Орг. Naturst., 28, 256 (1970); б) Р.В. Миллер, Дж. Кларди, Дж. Козловски, К.Л. Миколайчак, Р.Д. Платтнер, Р.Г. Пауэлл, Ч.Р. Смит, Д. Вейследер и К.-Т. Чжэн, Планта Медика, 1985, 40.