Влияние Cistanche Deserticola на острое повреждение легких у крыс с сепсисом

Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com

[Абстрактный]Цель: изучить влияниеЦистанхе пустыннаяпри остромповреждение легких(ALI) у крыс с сепсисом. Методы: Модель сепсиса создавали путем перевязки и пункции слепой кишки. Были проведены гистопатологические исследования и измерены биологические маркеры ОЛИ. Результаты: под световым микроскопом в группе солевого раствора отмечался отеклегкое пространство, большое количество эритроцитов и нейтрофилов, белка плазмы в альвеолярных полостях.легкоеВлажная/сухая масса, количество нейтрофилов и содержание белка в лаважной жидкости легочных альвеол, проницаемость легочных сосудов и легочная альвеолярная проницаемость, а также МДА, СОД, а также МПО были соответственно значительно увеличены. В группе сЦистанхе пустыннаялечения эти показатели ИАЛ были значительно ниже, чем в группе с физиологическим раствором.

Вывод: Цистанхе пустыннаяоказывает большое влияние на ALI у крыс с сепсисом. Терапевтический механизм, возможно, заключается в ингибировании нейтрофилов и окислительных свободных радикалов.

【Ключевые слова】Сепсис; Острое повреждение легких; Цистанхе пустынная

Сепсис является неотложным клиническим состоянием и критическим заболеванием, и поиск эффективных лекарственных препаратов всегда был серьезной проблемой в клинических и фундаментальных исследованиях. В традиционной китайской медицине патогенез сепсиса заключается в недостатке праведности и избытке зла. Атакующая терапия дурного благополучия тела – одна из действенных лечебных мер.Цистанхеявляется традиционным тонизирующим средством китайской медицины. Фармакологические исследования подтвердили, что он обладает защитными функциями, такими как повышение скорости синтеза клеточной ДНК и сопротивление свободным радикалам кислорода. Автор экспериментально наблюдает эффектCistanche при повреждении легкихпри сепсисе, чтобы обеспечить эффективное исследование для лечения сепсиса.

Цистанхе эхинакозид лечит заболевания легких

1 Материал и методы

1. 1 ЖивотноеЗдоровье 40 самцов крыс 5D весом 200–250 г, предоставленных Центром экспериментальных животных Хуачжунского университета науки и технологий, номер проверки качества: TJLA—2008—1670, были случайным образом разделены на 3 группы: 8 групп с нормальным физиологическим раствором, Ig/. 12 крыс в группе мл баклажанной пасты и 12 крыс в группе 5 г/мл.Цистанхегруппа. Подопытным животным вводили соответствующие препараты через желудочный зонд в течение 15 дней 2 раза в сутки.ЦистанхеDeserticola был предоставлен отделом подготовки традиционной китайской медицины этой больницы), а дозировка 200 мг/кг применялась у экспериментальных животных в соответствии с литературным методом U] через 12 минут после перевязки и перфорации слепой кишки. Сбор образцов.

1.2 Гистологическое исследование легкого крысы.Возьмите небольшое количество левой доли животноголегкоеиз каждой группы, зафиксировать 10-процентным формальдегидом, залить срез парафином, окрасить HE, наблюдать в обычный оптический микроскоп и на этом основании снятьлегкоезадача сделать 1мм3 за 25. Фиксировал в процентном растворе глутарового альдегида, затем фиксировал в 1-процентном растворе четырехокиси, обезвоживал этанолом и ацетоном, заливал в Эпон 81, готовил ультратонкие срезы, окрашивал уран-свинцом и наблюдал с помощью трансмиссионных электронов. микроскоп.

1.3 Определение отношения влажного/сухого веса проблемных легких крыс, соотношения количества клеток в жидкости альвеолярного лаважа и содержания белка. Весовое соотношение.Другой группе крыс проводили альвеолярный лаваж после торакотомии, лаважную жидкость подвергали подсчету клеток и классификации клеток под микроскопом. Метод кумасси бриллиантового синего используется для определения содержания белка и расчеталегкоеиндекс проницаемости (белок жидкости альвеолярного лаважа/белок плазмы, LPI).

1.4 Изменения проницаемости легочных сосудов (PVP) у крыс.Согласно методу, предложенному Zhou et al. (2), после введения животным в каждой группе проводили перевязку и перфорацию слепой кишки, а для вскрытия грудной клетки и удаления легких использовали инъекцию 50 мг/кг лантана в бедренную вену. Удалите окружающие проблемы, замочителегкиев растворе формамида (количество формамида 20 мг/100 г массы тела), инкубируют в 45-50Т-инкубаторе в течение 72 ч, ждут, пока все пигменты в проблемах не вымываются, вынимают проблемы, центрифугируют и берут супернатант. Используйте ультрафиолетовый спектрофотометр для проведения колориметрии при 620 нм и рассчитайте содержание этанола в соответствии со стандартной кривой, чтобы определить изменение PVP.

1.5 Определение малонового диальдегида (МДА) при проблемах с легкими у крысДля определения активности МДА использовали метод тиобарбитуровой кислоты (ТБК). Добавьте 4 мл 1,67 моль/л серной кислоты. 0.541% фосфоновой кислоты к 50 мл испытуемого образца, хорошо перемешайте, центрифугируйте при 3000 об/мин в течение 10 минут и еще раз обработайте осаждение, как указано выше, затем добавьте 1 мл бидистиллированной воды, 1 мл раствора ТВА, 95% безводного баня в течение 60 минут, экстракция 5 мл н-бутанола, тетраэтоксипропан в качестве стандарта, конечная концентрация 1 нмоль/л, флуоресцентный спектрофотометр при 532 нм для измерения поглощения.

1.6 Определение супероксиддисмутазы (СОД) при проблемах с легкими крысСогласно методу, описанному в литературе [4], активность СОД определяли методом оксидазы Хуанпуинь (набор, приобретенный в Нанкинском институте биологической инженерии Цзяньчэн).

1.7 Определение миелопероксидазы (МПО) у крыслегкоепроблема.Возьмите проблему с легкими, чтобы промыть остаточную кровь, насколько это возможно, в изотоническом солевом растворе и поместите ее в фосфатный буфер, содержащий {{0}},5% цетилтриметилбромида (PH6.0). Сделайте 5% гомогената. и действуйте в соответствии с инструкциями комплекта.

1.8 Статистические методыИспользуйте статистическое программное обеспечение SPSS и измерьте данные в форме (x±s), используя t-критерий и критерий X2.

Цистанхе

2 результата

2.1 Сравнение отношения влажного/сухого весалегкоепроблемы, соотношение количества клеток и содержание белка в жидкости альвеолярного лаважа в каждой группе показаны в таблице 1.легкоесоотношение влажного/сухого веса в группе, получавшей физиологический раствор, было значительно выше, чем в группе, получавшейЦистанхегруппа (П<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Цистанхев группе были значительно ниже, чем в группе с физиологическим раствором (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Таблица 1. Сравнение отношения влажного/сухого веса пораженных легких, количества клеток и содержания белка в альвеолярной лаважной жидкости крыс в каждой группе (X ± S)

По сравнению с группой, получавшей нормальный физиологический раствор, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Сравнение морфологических изменений легких у крыс в каждой группе. Общее наблюдение:легкиев солевой группе были значительно увеличены и темно-красного цвета, с разной степенью гиперемии и отека на поверхности и большим количеством легочных инфарктов по краю; легкие в.Цистанхегруппа была светло-красной с поверхностным легким скоплением и отеком, без явного инфаркта легкого. Наблюдение под световым микроскопом показало, что в группе, получавшей физиологический раствор, наблюдались альвеолярный и легочный интерстициальный застой и отек, большое количество диффузной нейтрофильной инфильтрации в альвеолярной полости, некоторое образование абсцесса, ателектазы различной степени, некроз и компенсаторная эмфизема. , Тромб и подобное образование прозрачных мембран. Вышеупомянутые поражения в группе Cistanche были значительно уменьшены. В группе, получавшей физиологический раствор, альвеолярные эпителиальные клетки набухали, ламеллярные тельца явно опорожнялись, образовывались крупные вакуоли, капиллярные эндотелиальные клетки были набухшими, эндотелиальные клетки постоянно повреждались, межклеточное пространство расширялось, капилляры и базальные мембраны альвеол были рыхлыми и расширенными. Неравномерное утолщение, неравномерная толщина. В группе Cistanche клетки альвеолярного эпителия не были набухшими, опорожнение ламеллярных телец было снижено, количество образовавшихся вакуолей было небольшим, связь между эндотелиальными клетками капилляров была близка к норме, базальная мембрана была слегка рыхлой и неравномерно утолщенной. По сравнению с группой, получавшей Ig/мл цистанхе, группа, получавшая 5 г/мл цистанхе, имела меньший диапазон морфологических изменений проблем с легкими, а степень повреждения легких была меньше.

2.3 Сравнение LPI и PVP крыс в каждой группе показано в таблице 2. LPI и PVP в группе, получавшей физиологический раствор, были значительно выше, чем в группе, получавшей Цистанхе (PV0.05 или 0,01). ). LPI и PVP в группе Цистанхе были ниже, что имело значительную взаимосвязь доза-эффект.

2.4 Сравнение активности МДА.СОД.МПО влегкоепроблемы крыс в каждой группе представлены в табл. 3. Содержание МДА влегкоепроблема солевой группы была значительно выше, чем уЦистанхегруппе, в то время как активность СОД и активность МПО при проблеме с легкими группы Цистанхе были значительно повышены (F<0.05 or="">

3 Обсуждение

Полиорганная недостаточность является основной причиной необратимого состояния и высокой смертности на поздних стадиях сепсиса (5). Защита функции органов имеет большое значение для снижения высокой клинической смертности от сепсиса. Легкие являются первым органом полиорганной недостаточности. 1/3 больных сепсисом умирают от острого повреждения легких (ОПЛ) и острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС). Основным патофизиологическим механизмом ОПЛ является накопление большого количества нейтрофилов в легочной проблеме, которые активируют и прилипают к эндотелиальным клеткам сосудов. В то же время увеличивается концентрация восстановленной оксидазы кофермента II, которая переносит одиночные электроны, вызывая респираторные взрывы, генерируя большое количество свободных радикалов кислорода и вызывая повреждение и функцию клеточных мембран и мембранных структур за счет сильного окисления. Препятствия⑹. Перекись липидов отражает изменение содержания свободных радикалов кислорода в проблеме и напрямую связана со степенью повреждения легких (7). В ферментативной и неферментативной системе антирадикального окисления организма активность СОД хорошо коррелирует со степенью проблемного повреждения ⑺. По сравнению с группой, получавшей физиологический раствор, активность МДА и СОД в группе Цистанхе показала статистически значимые различия. Цистанхе обладает функциями усиления иммунной функции, омоложения и повышения скорости синтеза клеточной ДНК. Экспериментальные результаты показали, что легочный коэффициент, PLT, соотношение нейтрофилов в жидкости альвеолярного лаважа и проницаемость легочных сосудов в группе Cistanche были значительно снижены, активность MDA легочной проблемы снизилась, SOD значительно увеличилась, а активность MPO снизилась. В то же время морфологическое наблюдение показало, что степень повреждения легких значительно уменьшилась, инфильтрация нейтрофилов уменьшилась, а в группе 5 г/мл цистанхе было меньше повреждений легких, чем в группе 1г/мл цистанхе, и было хорошее зависимость доза-эффект. Это говорит о том, что Cistanche оказывает значительное защитное действие на ALI. Механизм может быть следующим: (1) Ингибировать миграцию воспалительных клеток влегкие, уменьшить свободные радикалы кислорода, продуцируемые нейтрофилами и другими активированными клетками, чтобы защитить биопленку; (2) способствует синтезу нуклеиновых кислот и белков и защищает от повреждения легких; (3) Усилить иммунную функцию фагоцитов и уменьшитьлегкоепроблемное повреждение, вызванное эндотоксином. Результаты эксперимента дают экспериментальную основу для лечения острого поражения легких при клиническом сепсисе путем укрепления организма и усиления дефицита.

использованная литература

[1] Цзинь Хуймин. Модель сепсиса после перевязки и перфорации слепой кишки [J]. Китайский журнал патофизиологии "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Роль фактора активации тромбоцитов в развитии острого повреждения легких у крыс, связанного с панкреатитом [J]. Ам Дж. Патол, 1992, 140: 971 -979.

[3] Ван Цянь, Чжу Сяофэн, Чжао Силун. Экспериментальные методы современной медицины [М]. Пекин: Народное медицинское издательство, 2007:508.

[4] Чжан Сюмин, Ли Цзяньчжай, Вэй Минцзин. Современная клинико-биохимическая лабораторная наука [М]. Пекин: Народная военно-медицинская пресса, 2008: 896.

[5] Ло Чжэнъяо. Шоковые исследования [M]. Тяньцзинь: Тяньцзиньское научно-техническое издательство, 2008: 345.

[6] Xanthous CA, Hall JB. Самсель РВ. Эндотоксины при заболеваниях человека, часть 2. Биологический эффект и клиническая оценка антиэндотоксиновых препаратов[J]