Параметры экстракции и методы сушки Cistanche Deserticola

Цистанхе — это Cistanche Deserticola YC Ma илиЦистанхе трубчатая (Schenk) Уайтсухой мясистый стебель с чешуйчатыми листьями растения OrobanchiaceaeЦистанхе пустынная YC Ma[1]. Основным действующим веществом Cistanche Deserticola являются гликозиды фенилэтанола [2-4]. Фармакологические исследования показали, что он обладает функциямиафродизиак, улучшение иммунитета, иулучшение памяти[4-9].

В последние годы методология поверхности отклика широко используется в традиционной китайской медицине [{{0}}]. Метод поверхности отклика обладает такими преимуществами, как высокая точность обнаружения, меньшее количество требуемых экспериментов, точное предсказание функциональных моделей и способность отражать взаимосвязь между факторами и прогнозируемыми значениями [15-17]. Таким образом, в этом эксперименте в качестве значения ответа используется комплексная оценка содержания пяти фенилэтанолгликозидов, а также используется программное обеспечение Design-Expert 8.0.6.1 для планирования эксперимента, оптимизации процесса экстракции Cistanche Deserticola и предоставления информации для идентификации и установление стандартов качестваЦистанхе пустынная.

В настоящее время индекскомпоненты эхинацеазид и вербаскозидявляются актуальными темами исследований в области технологий добычи и переработкиЦистанхе пустынная. В Китайской фармакопее за 2015 год указано, что метод обработки Cistanche Deserticola заключается в «удалении примесей, промывании, увлажнении, нарезании толстыми ломтиками и сушке». [1], четких регламентов по способу сушки нет. Таким образом, в этом эксперименте для обработки Cistanche Deserticola использовалось восемь различных методов сушки, включая сушку на солнце, сушку в тени, сушку в печи (40, 60, 80, 100, 120 градусов) и сублимационную сушку [18], что обеспечило теоретическую основу для Процесс сушки Cistanche Deserticola.

По руководству.

ЭКСТРАКТ ЦИСТАНШИ С 30% ЭХИНКАОЗИДА

1 Материалы и инструменты

Свежий Cistanche Deserticola был собран в октябре 2018 года. Место происхождения — поселок Митан, уезд Миньцинь, Байинь, провинция Ганьсу. Доцент Го Ехун из Сельскохозяйственного университета Ганьсу определил это как Cistanche Deserticola YC Ma, мясистый стебель с чешуйчатыми листьями. Эталонные вещества эхинацеазид (номер партии 82854-37-3, массовая доля больше или равна 98%), цистанхеазид А (номер серии 93236-42-1, массовая доля больше или равна 95%), вербаскозид (номер серии { {5}}, массовая доля больше или равна 98%), изомурабазин (номер партии 61303-13-7, массовая доля больше или равна 98%), 2'-ацетил вербаскозид (номер партии 94492-24-7 , массовая доля более или равная 95%) были приобретены у Chengdu Pu. Фиде Биотехнология Лтд.; муравьиная кислота и метанол имеют хроматографическую чистоту, компания Merck, Германия; вода – очищенная вода, остальные реагенты – аналитической чистоты.

Жидкостный хроматограф Waters Acquity, детектор PDA, рабочая станция для хроматографии Empower и система управления четвертичными растворителями; Ультразвуковой очиститель KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Компания; Аналитические весы AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; Сублимационная сушилка LyoQuest-85, Telstar, Испания.

2 Методы и результаты

2.1 Приготовление эталонного раствора

Точно взвесьте необходимое количествоэхинацеазид, цистанхеозид А, вербаскозид, изорбаскозиди эталонные стандарты 2'-ацетилвербаскозида и добавляют 70% метанола до получения массовых концентраций 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 и 0,48 мг/мл смешанного раствора сравнения.

2.2 Хроматографические условия Cistanche Deserticola

Waters Symmetry C18 (250 мм×4,6 мм, 5 мкм); температура колонки 30 градусов, объемный расход 1,0 мл/мин; подвижная фаза - метанол-0.1% водный раствор муравьиной кислоты, градиент элюирования: 0~12 мин, 29%~34% метанол; 12-40 мин, 34%-40% метанола; 30-35 мин, 40%-35% метанола; 35-40 мин, 30% метанол;

1-эхинакозид 2-цистанхе А 3-вербаскозид 4-изоактеозид 5-2'-ацетилактеозид

Рис. 1. ВЭЖХ смешанного эталонного образца (А) и образца C. Deserticola (Б).

2.3 Приготовление тестируемого раствора

Точно взвесьте 1 г высушенного порошка Cistanche Deserticola в колбу Эрленмейера (пропустите через сито 65-), добавьте 50 мл 50% метанола, взвесьте массу ультразвуком при 40 кГц при мощности 150 Вт, охладите до комнатной температуры. , и составим массу, чтобы получить ее.

2.4 Исследование линейной зависимости

Возьмите {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 и 8 мл вышеуказанного смешанного эталонного раствора в 10 мл в мерную колбу и долейте до метки 70% метанола. Точно наберите 10 мкл и измерьте в соответствии с хроматографическими условиями «2.2». Массовая концентрация обозначена по оси абсцисс (X), а площадь пика — по ординате (Y). Выполните линейную регрессию и получите следующие уравнения регрессии: Эхинацея Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, линейный диапазон 10,4~832,0 мкг/мл; Цистанхезид AY=87 980 -447 963, r=0,999 8, линейный диапазон 6,3-504,0 мкг/мл; Изомурабазин Y＝92 831 Гликозид Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, линейный диапазон 4,8~384,0 мкг/мл.

2.5 Методологический обзор

2.5.1 Прецизионный контроль

Возьмите 20 мкл смешанного эталонного раствора, указанного в пункте «2.1», и введите 6 раз непрерывно, чтобы измерить площади пиков эхинацеазида, цистанхеазида А, вербаскозида, изоребаскозида и 2'-ацетилвербаскозида. ОСО составляют 0,23% соответственно. , {{10}},71%, 0,59%, 0,41%, 0,29%, что указывает на хорошую точность прибора.

2.5.2 Испытание на повторяемость

Возьмите 6 порций одной и той же пробы Cistanche Deserticola, приготовьте испытуемый раствор согласно пункту «2.3», введите пробу в хроматографических условиях пункта «2.2» и измерьте площадь пика. Результаты. Средние массовые доли эхинацеазида, цистанхеозида А, вербаскозида, изоребаскозида и 2'-ацетилвербаскозида составили 1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% и {{15). }},68% соответственно, а RSD составило 1,32 соответственно. %, 0.83%, 1,24%, 2,19%,

0,78 %, что указывает на хорошую повторяемость метода.

2.5.3 Проверка стабильности

Определите стабильность одного и того же тестируемого раствора (приготовленного согласно «2.3») при 0, 2, 4, 8, 12, 24 и 48 часов для получения эхинацеазида, цистанхеозида А, вербаскозида и изолебаскозида. , площадь пика 2'-ацетилвербаскозида, RSD составляли 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, 2,19% соответственно, что указывает на то, что тестируемый раствор был стабилен в течение 48 часов.

2.5.4 Тест на восстановление образца

Возьмите 1 г 6 образцов Cistanche Deserticola с известным содержанием и аккуратно добавьте определенное количество смешанного эталонного раствора (эхинацеазид 1, 0 6 мг/мл, цистанхеозид А 0, 86 мг. /мл, вербаскозид 2,17 мг/мл, изолебаскозид 0,79 мг/мл, 2'-ацетил вербаскозид 0,91 мг/мл), добавьте 70% метанола, чтобы получить до 50 мл, и вводят образцы в соответствии с хроматографическими условиями «2.2». Средние измеренные показатели восстановления составляют 101,52%, 99,21% и 102,62% соответственно. , 98,62%, 97,36%, RSD составляют 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13% соответственно, а степень извлечения проб хорошая.

Цистанхе – известное тонизирующее растение, которое питает и защищает почки. Согласно теории традиционной китайской медицины, цистанхе является лучшей травой для почек. Цистанхе богат эхинакозидами, актеозидами и флавоноидами. Эти эффективные ингредиенты цистанхе могут уменьшить апоптоз клеток почек и увеличить пролиферацию клеток почек. Таким образом, Цистанхе является натуральной добавкой для почек.