Экстракт Herba Cistanche усиливает выработку митохондриального АТФ в крысиных сердцах и клетках H9c2
Mar 04, 2022
Контактное лицо: Одри Хуaudrey.hu@wecistanche.com
Хой Ян Люн и Кам Минг Ко
Чтобы процитировать эту статью: Hoi Yan Leung & Kam Ming Ko (2008) Экстракт Herba Cistanche Enhances митохондриальный АТФ Генерация в крысиных сердцах и клетках H9c2, Pharmaceutical Biology, 46: 6, 418-424, DOI: 10.1080/13880200802055883
Абстрактный
Чтобы исследовать фармакологическую основу «бодрящего Ян» действия Herbal Cistanche [высушенное цельное растение Cistanche Deserticola YC Ma (Orobanchaceae)], в китайской медицине изучалось влияние метанольного экстракта Herba Cistanche на способность митохондрий генерировать АТФ. исследовали с использованием модели сердца крысы ex vivo и анализа клеток H9c2 in situ. Лечение экстрактом Herba Cistanche увеличивало способность миокардиальных митохондрий генерировать АТФ дозозависимым образом у крыс, что оценивалось измерениями in vitro. Стимуляция способности генерировать АТФ была связана с параллельным усилением митохондриального транспорта электронов, поддерживаемым пируватом, но не сукцинатом. Лечение Herba Cistanche также повышало активность миокардиального митохондриального комплекса I и комплекса III, при этом степень стимуляции активности комплекса I была больше. Лечение Herba Cistanche вызывало дозозависимое и времязависимое увеличение способности митохондриальной генерации АТФ в клетках H9c2. Результаты показывают, что обработка Herba Cistanche может увеличить выработку митохондриального АТФ в сердцах крыс ex vivo и клетках H9c2 in situ, возможно, за счет усиления окислительного фосфорилирования.
Ключевые слова:АТФ, Cistanche Deserticola, клетки H9c2, сердце, митохондрии.
Введение
«Оживление Ян», которое олицетворяет общее улучшение функций организма в китайской медицине, включает использование энергии для управления различными биохимическими процессами. В связи с этим АТФ, который является универсальной валютой энергии для подпитки клеточных функций, в основном генерируется за счет окислительного фосфорилирования в митохондриях. Мы предположили, что «бодрящие Ян» травы обладают способностью повышать способность митохондриальной генерации АТФ (Ko et al., 2004). Это подтверждается нашим недавним открытием, что китайские тонизирующие травы, укрепляющие Ян, но не питающие Инь, могут повышать способность миокардиального АТФ генерировать в сердцах мышей ex vivo (Ko et al., 2006). Herba Cistanche, высушенное целое паразитическое растение (за исключением цветка) Cistanche Deserticola YC Ma (Orobanchaceae), классифицируется как тонизирующее растение, «бодрящее Ян» в традиционной китайской медицине (Chen, 1998), и оно является самым популярным. ингредиент в ряде рецептур китайских патентов, используемых для укрепления Ян». В Китае и Японии Herba Cistanche широко используется для лечения множества симптомов дефицита Ян. Фармакологические исследования показали, что Herba Cistanche может удалять свободные радикалы (Xiong et al., 1996), оказывать седативное (Lu, 1998), антивозрастное (Lee et al., 1990), антиноцицептивное и противовоспалительное действие (Lin et al., 2002). ) и усиливают иммунную функцию (Wu et al., 2005). Основным активным ингредиентом Herba Cistanche являются фенилэтаноидные гликозиды (Ouyang et al., 2003), которые, как было установлено, обладают антибактериальными, антистрессовыми и антиоксидантными свойствами (Xiong et al., 1998), а также антиапоптотическим действием на культивируемые растения. нейроны (Tian & Pu, 2005). В текущем исследовании, чтобы изучить фармакологическую основу укрепляющего Ян действия Herba Cistanche, изучалось влияние лечения Herba Cistanche на способность генерировать АТФ в митохондриях, выделенных из сердец крысы ex vivo и культивируемых кардиомиоцитах H9c2 in situ. Чтобы изучить биохимический механизм, лежащий в основе действия, усиливающего выработку АТФ, влияние обработки Herba Cistanche на митохондриальный электронный транспорт и активность комплексов I-IV также исследовали в сердце крысы.
Экстракт цистанхе пустынной
Материалы и методы
Химические вещества, клеточные культуры и растительные материалы АТФ, АДФ и 3-[4,5-диметилтиозол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромид ( МТТ) были приобретены у Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Раствор люциферазы (ATPlite) был получен от PerkinElmer (Бостон, Массачусетс, США). Модифицированную Дульбекко среду Игла (DMEM) и эмбриональную бычью сыворотку (FBS) приобретали у GIBCO BRL Life Technologies (Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США). Клеточная линия H9c2 была приобретена у ATTC (Rockville, MD, USA). Herba Cistanche был поставлен местным торговцем травами (Lee Hoong Kee). Трава была подтверждена поставщиком, и образец ваучера (HKUSTY00301) был передан на хранение в Департамент биохимии Гонконгского университета науки и технологий (HKUST).
Травяной экстракт
Herba Cistanche (100 г) разрезали на мелкие кусочки и затем экстрагировали при нагревании с обратным холодильником в 300 мл метанола.
при 65°С в течение 2 ч. Процедуру повторили дважды. Объединенный экстракт сушат путем выпаривания растворителя при пониженном давлении и получают метанольный экстракт Herba Cistanche с выходом 39 процентов (мас./мас.). Химический анализ показал, что метанольный экстракт Herba Cistanche содержит общее количество сапонинов, общее количество флавоноидов, общее количество лигнанов и полисахаридов в концентрациях 1,62 процента (вес/вес), 0.08 процентов, 0,15 процентов и 75,6 процента соответственно.
Забота о животных
Взрослых самцов крыс Sprague-Dawley (8–10 недель; 250–300 г) содержали при 12-часовом цикле темноты/света в помещении с контролируемым воздухом/влажностью при температуре около 22°C и давали пищу и воду вволю. в учреждениях по уходу за животными
в ХКУСТ. Экспериментальные протоколы были одобрены Комитетом по исследовательской практике HKUST.
Медикаментозное лечение
Животные были случайным образом разделены на группы по пять-шесть особей в каждой. В экспериментальных группах крысам внутрижелудочно вводили метанольный экстракт Herba Cistanche (растворенный/суспендированный в воде) в возрастающих суточных дозах ({{0}},031–0,5 г/кг) в течение 3 дней. Контрольные животные получали только воду. Через 24 часа после последней дозы у анестезированных фенобарбиталом животных получали сердце и подвергали биохимическому анализу.
Приготовление митохондриальных фракций и измерение способности генерировать АТФ (АТФ-ГХ) ex vivo
Образцы ткани левого желудочка сердца вырезали и промывали ледяным изотоническим буфером (0,32 М сахарозы, 1 мМ ЭДТА, 50 мМ Трис/HCl, рН 7,4). Митохондриальные фракции сердца готовили дифференциальным центрифугированием в изотоническом буфере при 4°С. 10-процентный (вес/объем) гомогенат сердца готовили путем гомогенизации измельченной ткани желудочка с помощью гомогенизатора из тефлонового стекла при 4000 об/мин в течение 20–30 полных ударов. Гомогенат центрифугировали при 600 g в течение 10 мин для удаления ядер и клеточного дебриса. Затем супернатант центрифугировали при 8000 g в течение 30 мин для осаждения митохондрий (Evan, 1992). Осадки ресуспендировали в 1 мл изотонического буфера и восстанавливали митохондриальные фракции. Митохондриальный АТФ-ГХ необработанных животных измеряли по методу Leung et al. (2005).
Измерение митохондриального транспорта электронов
Измерение транспорта электронов в изолированных митохондриях, основанное на восстановлении МТТ, проводили, как описано Cohen et al. (1997). Митохондрии готовили при концентрации белка 1 мг/мл с инкубационным буфером (25{15}} мМ сахарозы, 50 мМ HEPES, 10 мМ KH2PO4, 2 мМ MgCl2, 1 мМ EGTA, pH 7,4). . Аликвоту (40 мкл) митохондрий смешивали с 100 мкл каждого из 15 мМ пирувата или 0,5 мМ сукцината и 0,42 мг/мл МТТ. Реакционную смесь инкубировали при 37°С в течение 10 мин при осторожном встряхивании. После инкубации реакцию реакционной смеси останавливали добавлением 100 мкл буфера для лизиса (10% масс./об. додецилсульфата натрия и 45% диметилформамида, доведенного до pH 4,7 ледяной уксусной кислотой). После выдерживания в течение 5 минут измеряли поглощение реакционной смеси с помощью устройства для считывания микротитрационных планшетов (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) и регистрировали как разницу между 570 нм и 630 нм. Данные были выражены в процентах от среднего значения контрольной группы (т.е. Herba Cistanche-без лечения).
Культура клеток
Клетки H9c2, постоянная клеточная линия, полученная из сердечных миобластов (Hescheler et al., 1991), культивировали в виде монослоев в среде DMEM с добавлением 10% (об./об.) FBS. Среда содержала глюкозу (4,5 г/л) и глутамин (4,5 мМ), дополненные NaHCO3 (17 мМ), пенициллином (100 МЕ/мл) и стрептомицином (100 мкг/мл). Все клетки выращивали в атмосфере 5% (об./об.) CO2 на воздухе при 37°С. Среду заменяли свежей каждые 2-3 дня. Запас клеток выращивали в культуральной колбе объемом 75 см2 и разделяли до слияния при соотношении субкультивирования 1:10. Для анализа АТФ-ГХ клетки H9c2 высевали при плотности 2,5 104 клеток/лунку в 24-луночный планшет. После прикрепления клеток в среду наносили экстракт Herba Cistanche (растворенный в фосфатно-солевом буфере; PBS) и инкубировали клетки в течение увеличивающихся периодов времени (2–16 ч). Контрольные (необработанные) клетки получали только PBS.
Измерение АТФ-ГХ in situ
После указанных периодов инкубации с экстрактом Herba Cistanche при возрастающих концентрациях (5{{1{0}}-300 мкг/мл) проводили анализ АТФ-ГХ. Среду отсасывали и клетки обрабатывали дигитонином (50 мкг/мл) в инкубационном буфере (120 мМ KCl, 5 мМ KH2PO4, 2 мМ EGTA, 10 мМ HEPES, 0,1 мМ MgCl2, 0,5% BSA, pH 7,4) в течение 3 мин при 37◦C. После аспирации дигитонина к клеткам добавляли глутамат (5 мМ), малат (5 мМ) и АДФ (60 мкМ) для образования митохондриального АТФ, которое контролировали с увеличивающимися временными интервалами в диапазоне от 0 до 15 минут. Реакцию останавливали добавлением 60 мкл хлорной кислоты (30%, вес/объем), затем реакционные смеси центрифугировали при 600 g в течение 10 мин при 4°C. Аликвоту (120 мкл) супернатанта смешивали с 90 мкл 1,4 М KHCO3 для нейтрализации. Смеси повторно центрифугировали при 600 g при 4°C и измеряли содержание АТФ в супернатантах, как описано ранее. АТФ-ГХ необработанных клеток оценивали путем вычисления площади под кривой графика (AUC1) с построением генерируемого АТФ (нмоль/мг белка) в зависимости от времени (0–15 мин) и выражали в произвольных единицах. Для клеток, обработанных Herba Cistanche, значения AUC1 при увеличении времени инкубации (3, 5, 7, 10 и 15 минут) нормализовали к соответствующему среднему контрольному значению для необработанных образцов и выражали в процентах от контроля. Затем площадь под кривой (AUC2) графика, отображающего процентные контрольные значения в зависимости от времени инкубации (3–15 мин), рассчитывали и выражали в условных единицах. Данные групп, получавших Herba Cistanche, выражали в процентах от контроля по уравнению:
[AUC2 (обработанный HerbaCistanche)/AUC2 (необработанный)] × 100%.
Измерение активности комплекса I–IV и цитратсинтазы.
Активность комплекса I–III митохондриальной электрон-транспортной цепи (ЭТЦ) измеряли спектрофотометрическими методами с использованием специфичных для комплекса субстратов (НАДН для комплекса I, сукцинат для комплекса II и децилубихинол для комплекса III), как описано (Grad & Lemire, 2004; Hsu et al. и др., 2005; Марк и др., 2001). Активность комплекса IV измеряли с использованием набора для анализа цитохром-с-оксидазы от Sigma. Активность митохондриальной цитратсинтазы измеряли по методу Шрере (1969).
Анализ белка
Концентрацию белка в митохондриальных фракциях и клеточных лизатах определяли с использованием набора для анализа белка BioRad с использованием в качестве стандарта альбумина бычьей сыворотки ({{0}},038–0,600 мг/мл).
статистический анализ
Все данные были выражены в виде средней стандартной ошибки среднего (SEM). Они были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Последующие множественные сравнения были сделаны с ЛСД. Р-значения<0.05 were="" regarded="" as="" statistically="">
Полученные результаты
Влияние лечения Herba Cistanche на миокардиальный митохондриальный ATP-GC у крыс
Как показано на рис. 1, лечение экстрактом Herba Cistanche в дозах до 0,5 г/кг увеличивало миокардиальный митохондриальный ATP-GC дозозависимым образом у крыс, при этом степень стимуляции составляла 89 процентов. в дозе 0,5 г/кг.
Влияние обработки Herba Cistanche на митохондриальный транспорт электронов в сердце крысы
Степень транспорта электронов в изолированных митохондриях измеряли, наблюдая за восстановлением МТТ. Субстратом, используемым для анализа, был либо пируват, либо сукцинат. Как показано на рисунке 2а, лечение Herba Cistanche дозозависимо увеличивало степень митохондриального транспорта электронов, поддерживаемого пируватом, в сердцах крыс, при этом оптимальная стимуляция наблюдалась при дозах 0,5 г/кг. Однако в сердцах крыс, обработанных Herba Cistanche, не было обнаружено значительных изменений в степени митохондриального транспорта электронов, поддерживаемого сукцинатом (рис. 2b).
Влияние обработки Herba Cistanche на активность митохондриального дыхательного комплекса в сердце крысы
Как показано на рисунке 3, обработка Herba Cistanche в оптимальной дозе 0,5 г/кг значительно увеличивала активность комплекса I (34%) и комплекса III (22%) в сердце крыс. На активность цитратсинтазы, ключевого фермента цикла трикарбоновых кислот, обработка Herba Cistanche не влияла (рис. 3). Вестерн-блоттинг показал, что обработка Herba Cistanche не влияла на уровни белка комплексов I и III (данные не представлены).
Динамика вызванных Herba Cistanche изменений митохондриального АТФ-GC в клетках H9c2
Изменения АТФ-ГХ исследовали в клетках, обработанных Herba Cistanche (50 и 150 мкг/мл), после инкубации от 2 до 16 часов. Как показано на Рисунке 4, обработка Herba Cistanche увеличивала АТФ-ГХ в зависимости от времени и двухфазно в клетках H9c2, при этом максимальная стимуляция (44% и 89% соответственно) наблюдалась после 8-часовой инкубации для обеих концентраций препарата. Затем АТФ-ГХ вернулся к необработанным контрольным значениям, когда время инкубации было увеличено до 16 часов. Более раннее начало стимуляции происходило, когда клетки обрабатывали более высокой концентрацией (150 мкг/мл) экстракта Herba Cistanche.
Концентрация-зависимость Herba
Индуцированное цистанхе увеличение АТФ-ГХ в клетках H9c2
Клетки H9c2 обрабатывали возрастающими концентрациями (50–300 мкг/мл) экстракта Herba Cistanche в течение 4 часов. На Рисунке 5 показано, что лечение Herba Cistanche повышало уровень АТФ-ГХ в зависимости от концентрации, при этом максимальная стимуляция (82 процента) наблюдалась при концентрации 300 мкг/мл.
Экстракт цистанхе увеличивает выработку АТФ
Обсуждение
Повышающая регуляция клеточной активности для улучшения функций организма, таких как сокращение мышц и иммунные реакции, посредством активизации Ян требует увеличения потребления АТФ, что, в свою очередь, поддерживается митохондриальным окислительным фосфорилированием. В текущем исследовании было обнаружено, что лечение Herba Cistanche дозозависимо увеличивает способность митохондриальной генерации АТФ ex vivo в сердцах крыс. Это наблюдение согласуется с нашими предыдущими выводами о том, что среди китайских тонизирующих трав, укрепляющих Ян, обработка Herba Cistanche вызывала относительно большую степень стимуляции образования митохондриального АТФ в сердце мыши (Ko et al., 2006). Усиление образования митохондриального АТФ происходило параллельно увеличению митохондриального транспорта электронов, вызываемому пируватом, но не сукцинатом, о чем свидетельствует снижение МТТ. Результаты, полученные при измерении кинетики митохондриального комплекса I-IV, показали, что активность обоих комплексов I и III была увеличена в сердцах, обработанных Herba Cistanche, при этом степень стимуляции активности комплекса I была больше, чем у комплекса III. Поскольку активность цитратсинтазы, ключевого фермента цикла трикарбоновых кислот, не была затронута, усиление способности митохондриальной генерации АТФ при обработке Herba Cistanche может быть в основном связано со стимуляцией активности комплексов I и/или III. Большинство потребностей сердца в АТФ удовлетворяются митохондриями, которые почти полностью полагаются на окисление жирных кислот и глюкозы, связанное с комплексом I (НАДН) (Stanley et al., 1997; Taegtmeyer, 1998). Комплекс I, активность которого ниже, чем у других дыхательных комплексов, считается важным фактором регуляции окислительного фосфорилирования. Таким образом, стимуляция или ингибирование активности комплекса I может оказывать большое влияние на энергетику сердца. Хотя вестерн-блоттинг не выявил каких-либо изменений в уровне белка в этих двух комплексах (данные не представлены), повышенная активность фермента может быть результатом изменений в тиоловом статусе белка и/или липидной среде (Davey et al., 1998; Paradies). и др., 2004).
Экстракт травы цистанхеможет производить эффект усиления образования АТФ в культивируемых клетках H9c2 in situ. Относительно раннее начало стимулирующего действия, вызванного лечением Herba Cistanche, особенно в высоких дозах, согласуется с наблюдениями, полученными в исследованиях ex vivo, которые показали, что синтез белков комплексов I и III маловероятен в повышении образования АТФ. действие. Демонстрация вызванного Herba Cistanche усиления выработки АТФ в условиях in situ подтверждает мнение о том, что увеличение способности митохондрий вырабатывать АТФ, оцениваемое по измерениям ex vivo, может просто отражать параллельный эффект, вызываемый лекарственным лечением в условиях in vivo. Измерение образования АТФ в изолированных митохондриях и культивируемых клетках с использованием малата и глутамата в качестве субстратов является косвенным показателем состояния 3 митохондриального дыхания (Chen et al., 2003). Используя тот же биолюминесцентный анализ АТФ, скорость образования митохондриального АТФ в различных тканях нелеченых крыс, как сообщалось ранее в нашей лаборатории (Leung et al., 2005), хорошо согласовывалась с недавно опубликованными данными (Drew & Leeuwenburgh, 2003). ). Способность генерировать АТФ оценивали путем двухэтапной интеграции зависящих от времени изменений уровня АТФ как в анализах ex vivo, так и in situ. Таким образом, наблюдаемый стимулирующий эффект, вызванный лекарственным средством, был преувеличен для сравнения. Усиление способности генерировать АТФ при обработке Herba Cistanche в митохондриях сердца крысы ex vivo происходило параллельно со стимуляцией генерирования АТФ в клетках H9c2 in situ. Учитывая наличие повышающей выработку АТФ активности китайских тонизирующих трав, в том числе Herba Cistanche, в сердцах мышей ex vivo (Ko et al., 2006), результаты показывают, что измерение способности выработки АТФ в клетках H9c2 в situ можно использовать в качестве фармакологического теста для китайских тонизирующих трав или травяных смесей, укрепляющих Ян.
В заключение, обработка экстрактом Herba Cistanche может повысить способность митохондриальной генерации АТФ в сердцах крыс ex vivo и в клетках H9c2 in situ. Полученные данные подтверждают наше предположение о том, что фармакологическая основа Ян-оживления включает усиление функций организма посредством стимуляции митохондриальной выработки АТФ.
Экстракт Herba Cistanche повышает способность митохондриальной генерации АТФ
использованная литература
Чен П. (1998): Тонизирующие травы. Продвинутая серия TCM. Пекин, Китай, Science Press, стр. 233–320.
Chen Q, Vazquez EJ, Moghaddas S, Hoppel CL, Lesnefsky EJ (2003): Производство активных форм кислорода митохондриями: центральная роль комплекса III. J Biol Chem 278: 36027–36031.
Коэн Г., Фаруки Р., Кеслер Н. (1997): Болезнь Паркинсона: новая связь между моноаминоксидазой и митохондриальным потоком электронов. Proc Natl Acad Sci USA 94: 4890–4894.
Davey GP, Peuchen S, Clark JB (1998): Энергетические пороги в митохондриях мозга. Возможное участие в нейродегенерации. J Biol Chem 273: 12753–12757.
Drew B, Leeuwenburgh C (2003): Метод измерения продукции АТФ в изолированных митохондриях: продукция АТФ в митохондриях мозга и печени крыс Fischer-344 в зависимости от возраста и ограничения калорийности. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 285: R1259–R1267.
Эван У.Х. (1992): Выделение и характеристика мембран и клеточных органелл. В: Риквуд Д., изд. Препаративное центрифугирование: практический подход. Нью-Йорк, издательство Оксфордского университета, стр. 223–270.
Град Л.И., Лемир Б.Д. (2004): Мутации митохондриального комплекса I у Caenorhabditis elegans вызывают дефицит цитохром-с-оксидазы, окислительный стресс и лактоацидоз, чувствительный к витаминам. Human Mol Genetics 13: 303–314.
Hescheler J, Meyer R, Plant S, Krautwurst D, Rosenthal W, Schultz G (1991): Морфологическая, биохимическая и электрофизиологическая характеристика линии клональных клеток (H9c2) из сердца крысы. Circ Res 69: 1476–1486.
Хсу М., Сринивас Б., Кумар Дж., Субраманиан Р., Андерсен Дж. (2005): Истощение глутатиона, приводящее к селективному ингибированию митохондриального комплекса I в дофаминергических клетках, происходит через NO-опосредованный путь, не включающий пероксинитрит: последствия для болезни Паркинсона. Дж. Нейрохим 92: 1091–1103.
Ko KM, Leon TYY, Mak DHF, Chiu PY, Du Y, Poon MKT (2006): Характерное фармакологическое действие «бодрящих Ян» китайских тонизирующих трав: повышение способности миокарда генерировать АТФ. Фитомедицина 13: 636–642.
Ко К.М., Мак Д.Х., Чиу П.Ю., Пун М.К.Т. (2004): Фармакологическая основа «оживления Ян» в китайской медицине. Trends Pharmacol Sci 25: 3–6.
Lee CJ, Chuan S, Lee SL (1990): Исследование омолаживающего эффекта Cistanche Deserticola Ma. Shanghai J Trad Chin Med 11: 22–23.
Lei L, Song ZH, Tu PF, Li YZ, Wu LJ, Chen FK (2001): Метаболическая регуляция фенилэтаноидных гликозидов из Herba cistanches в желудочно-кишечном тракте собак. Яо Сюэ Сюэ Бао 36: 432–435
Leung HY, Chiu PY, Poon MKT, Ko KM (2005): Китайская травяная формула, укрепляющая Ян, повышает функциональную способность митохондрий и антиоксидантную способность в различных тканях самцов и самок крыс. Rejuven Res 8: 238–247.
Lin LW, Hsieh MT, Tsai FH, Wang WH, Wu CR (2002): Антиноцицептивная и противовоспалительная активность, вызванная Cistanche Deserticola у грызунов. Дж. Этнофармакол 83: 177–182.
Lu MC (1998): Исследования седативного эффекта цистанхе пустынной. J Этнофармакол 59: 161–165.
Марк А., Берч М., Дуглас М.Т. (2001): Анализ активности митохондриального дыхательного комплекса в митохондриях, выделенных из клеток и тканей человека. Meth Cell Biol 65: 97–117.
Ouyang J, Wang X, Zhao B, Yuan X, Wang Y (2003): Влияние редкоземельных элементов на рост клеток Cistanche Deserticola и производство фенилэтаноидных гликозидов. Дж. Биотех 102: 129–134.
Paradies G, Petrosillo G, Pistolese M, Di Venosa N, Federici A, Ruggiero FM (2004): Снижение активности митохондриального комплекса I в ишемическом/реперфузированном сердце крысы: участие активных форм кислорода и кардиолипина. Циркуляр Рез. 94: 53–59.
Срере П.А. (1969): Цитратсинтаза. Цикл лимонной кислоты. Мет Энзимол 13: 3–11.
Стэнли В.К., Лопащук Г.Д., Холл Дж.Л., МакКормак Дж.Г. (1997): Регуляция углеводного обмена миокарда в нормальных и ишемических условиях. Потенциал для фармакологических вмешательств. Cardiovasc Res 33: 243–257.
Taegtmeyer H (1998): Метаболизм энергетических субстратов как цель фармакотерапии при ишемии и реперфузии сердечной мышцы. Сердце Метаб 1: 5–9.
Tian XF, Pu XP (2005): Фенилэтаноидные гликозиды из Cistanches salsa ингибируют апоптоз, вызванный ионами 1-метил-4- фенилпиридиния в нейронах. Дж. Этнофармакол 97: 59–63.
Wu XM, Gao XM, Tsim KW, Tu PF (2005): Арабиногалактан, выделенный из стеблей Cistanche Deserticola, вызывает пролиферацию культивируемых лимфоцитов. Int J Biol Macromol 37: 278–282.
Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T, Kadota S (1998): Гепатопротекторная активность фенилэтаноидов из Cistanche Deserticola. Планта Мед 64: 120–125.
Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T (1996): Антиоксидантное действие фенилэтаноидов из Cistanche Deserticola. Биол Фарм Бык 19: 1580–1585.
