Экспрессия иммунных генов и функциональные сети в различных классах волчаночного нефрита Ⅱ
Nov 08, 2023
ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Характеристика когорты
Из нашего архиваFFPE-биопсия почкимы выявили 55 биопсий ЛУ, содержащих достаточно ткани для анализа. Биопсии были взяты у пациенток женского пола и включали биопсию ЛУ класса III (n=11), класса IV (n=23) и класса V (n=21). Были включены только биопсии ЛУ класса III и IV с активными поражениями (т. е. A или A/C, но не C). Мы использовали заболевание ТБМ (n=14) в качестве контроля. Мы также сравнили ВН класса V с МН (n=9), учитывая явное гистологическое сходство при световой микроскопии, но разную этиологию. Демографические, клинические данные и данные биопсии представлены в Таблице 1. Возраст биопсии варьировался от менее 1 года до более 11 лет. Активные поражения клубочков, клубочковые полулуния и некроз присутствовали в биоптатах ЛУ класса III и IV, но не в биоптатах ЛУ класса V. Гломерулярный тромбоз был выявлен только в одной биопсии класса III. Тубучастичные включения (TRI) были идентифицированы в большинстве биопсий класса III (91%), класса IV (78%) и класса V (81%). IFTA был низким во всех классах.Сывороточный креатинини белок мочи:креатининсоотношение было выше в классе IV по сравнению с классом III или классом V LN (таблица 1, дополнительные онлайн-рисунки 1A и B). Сывороточный альбумин был снижен во всех классах по сравнению с TBM (таблица 1, дополнительный онлайн-рисунок 1B). Количество комплементов C3 и C4 было значительно снижено как в классе III, так и в классе IV по сравнению с классом V LN (таблица 1, дополнительный онлайн-рисунок 1C).
НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, ЧТОБЫ ПОЛУЧИТЬ ТРАВЯНУЮ ФОРМУЛУ ЦИСТАНША ДЛЯ ПОЧЕК
Анализ экспрессии иммунных генов в биопсии почки LN
Сначала мы сравнили экспрессию генов между всеми классами LN и образцами TBM и идентифицировали 171 (159 повышенных и 12 пониженных) дифференциально экспрессируемых гена (рисунок 1A, дополнительные онлайн-данные S3). Анализ путей показал, что передача сигналов IFN типа I была значительно обогащена LN по сравнению с контролем в дополнение к передаче сигналов JAK-STAT, каскаду комплемента, MHC II, связыванию интегрина, NF-κB и путям апоптоза (рисунок 1B, дополнительные онлайн-данные S4 и S5). Иерархическая кластеризация с использованием транскриптов с log2-кратным изменением (FC) больше или равным 1 (n=49) или меньше или равным -0,5 (n=5) в течение вся когорта выявила три основных кластера (рис. 1C). Слева направо на рисунке 1C группа 1 содержала только образцы LN (n=16), группа 2 содержала все образцы TBM, кроме одного (n=13TBM, n=3LN). и группа 3 была LN-доминантной (n=36LN против n=1TBM). Как сообщалось,16 не было четкой связи между молекулярными кластерами и гистологическими классами LN (рис. 1C).
Сравнение ВН класса V и идиопатической МН
Гистологическое поражение при ВН V класса представляет собой диффузное мембранозное поражение.гломерулопатиясо сходством с идиопатическим МН. Когда мы сравнивали LN класса V с образцами MN, было обнаружено 26 (23 с более высокой и 3 с более низкой экспрессией) дифференциально экспрессируемых генов (рисунок 2A, дополнительные онлайн-данные S6). Наибольшим дополнительным термином была передача сигналов IFN типа I (рисунок 2B, дополнительные онлайн-данные S4 и S7). Основной набор из 67 генов, связанных с IFN типа I, активируется в подгруппах лейкоцитов (нейтрофилы, CD4 и CD8-положительные Т-клетки, моноциты) при СКВ.24 Наша панель содержала зонды, нацеленные на 17 из этих генов и 13 из 23 транскриптов с более высоким уровнем активности. экспрессии были частью этого основного набора, что указывает на то, что сигнатура IFN типа I является ключевым молекулярным различием между классом V LN и MN.
Рисунок 1. ДГЭ при ЛН в сравнении с заболеванием ТБМ. (A) График вулкана, изображающий DGE LN (n=55 биопсий) и заболевание ТБМ (n=14 биопсий). Бенджамини-Хохберг скорректировал p=0.05 и log2 FC отсечку=0.5. (B) Сеть взаимодействия STRING для всех 171 значимого дифференциально экспрессируемого гена между LN и TBM (наивысший показатель достоверности =0,9). Красные узлы — ИФН I типа; синие узлы — каскад дополнений; розовые узлы — MHC II; желтые узлы — сигнализация JAK-STAT; фиолетовые узлы – связывание интегрина; светло-зеленые узлы — домен NF-κB+TIR; темно-зеленые узлы — NF-κB и модуляция апоптоза. (C) Тепловая карта всех существенно повышенных дифференциально экспрессируемых транскриптов с log2 FC больше или равной 1 (n=49) и всех значительно сниженных транскриптов с log2 FC меньше или равно -0,5 (n=5 ) выявлено при LN по сравнению с TBM во всей когорте (биопсия LN n=55, биопсия MN n=9, биопсия TBM n=14). DGE, дифференциальная экспрессия генов; FC — кратное изменение; ЛН — волчаночный нефрит; МН — мембранозная нефропатия; НС — незначительно; ТБМ, тонкая базальная мембрана.
Иерархическая кластеризация с использованием 17 транскриптов, связанных с IFN типа I, отделила LN как от образцов MN, так и от TBM (рисунок 2C). Доля биопсий ЛУ в ИФН-положительном кластере (n=48, 87%) была достоверно больше, чем в ИФН-негативном кластере (n=7, 13%, р<0.0001, Fisher exact test). Within the IFNpositive cluster, the next hierarchy contained two clusters, with higher or lower IFN expression. The proportion of class V LN samples in the cluster with lower IFN expression (n=14, 74%) was significantly greater than that in the cluster with higher IFN expression (n=5, 26%, p=0.0009, Fisher exact test). TRIs in glomerular endothelial cells is frequent in LN and related to the type I IFN response. TRIs were present in 45 out of 54 LN biopsies (83%, data unavailable for one biopsy) and of the 47 biopsies in the IFN-positive cluster, 89% (n=42) had TRIs (figure 2C). We measured the blood type I IFN signature in 25 (46%) of the 55 patients with LN. A high blood IFN score was present in 13 (62%) of the 21 patients within the renal biopsy IFN-positive cluster and 1 of the 5 (20%) of patients within the renal biopsy IFN-negative cluster. There were no significant differentially expressed genes between MN and TBM samples (online supplemental figure 2, online supplemental data S15).
Анализ экспрессии генов в гистологических классах LN
Затем мы провели DGE (рис. 3A–C) и анализ путей (дополнительный онлайн-рисунок 3 и дополнительные онлайн-данные S4, S16–S18) для каждого класса LN. По сравнению с заболеванием ТБМ, в ВН класса III было 63 дифференциально экспрессируемых гена (60 увеличены и 3 уменьшены, рисунок 3A, дополнительные онлайн-данные S8); в классе IV LN 205 дифференциально экспрессируемых генов (189 увеличились и 16 уменьшились, рисунок 3B, дополнительные онлайн-данные S9) и в классе V LN 95 дифференциально экспрессируемых генов (92 увеличились и 3 уменьшились, рисунок 3C, дополнительные онлайн-данные S10). Было 52 значимых дифференциально экспрессируемых гена, общих для всех классов (рисунок 3D, дополнительная онлайн-таблица 2), и анализ путей показал обогащение путей передачи сигнала IFN типа I, комплемента и MHC II (рисунок 3E, дополнительные онлайн-данные S4 и S11). FC был выше в классе IV для всех 52 генов по сравнению с классом V и для 85% генов по сравнению с классом III (дополнительная онлайн-таблица 2).
По сравнению с заболеванием ТБМ, было 105 генов, которые значительно дифференциально экспрессировались в биоптатах LN класса IV, но не в биопсиях LN класса III или V (рисунок 3D). Анализ путей показал обогащение сигнального пути NF-κB и домена устойчивости к Toll-IL1-, положительную регуляцию метаболических процессов реактивных окислительных видов (АФК) и положительную регуляцию путей пептидазной активности (рисунок 3F, дополнительные онлайн-данные S4 и S12). ). Когда мы нанесли на график размеры эффекта всех 205 значительно дифференциально экспрессируемых транскриптов класса IV с соответствующими размерами эффекта для класса III (рисунок 3G) и класса IV (рисунок 3H) LN. большинство изменений были согласованными. Это указывало на то, что только небольшое количество транскриптов в нашем наборе данных однозначно дифференцировано регулировалось в биопсиях LN класса IV (т.е. где значительные размеры эффекта в транскриптах LN класса IV имели низкие или нулевые размеры эффекта в LN класса III или класса IV).
Чтобы изучить различия между пролиферативными и мембранозными ВН, мы сравнили класс IV с ВН класса V. Это выявило 179 (167 более высоких и 12 более низких экспрессий) дифференциально экспрессируемых генов класса IV (рисунок 4A, дополнительные онлайн-данные S13). Анализ путей показал обогащение путей передачи сигналов IFN типа I, передачи сигналов JAK-STAT, каскада комплемента, MHC II, связывания интегрина, NF-κB и путей апоптоза (рис. 4B, дополнительные онлайн-данные S4 и S14). Хотя большинство этих путей также были идентифицированы в нашем анализе одного подкласса классов IV и V по сравнению с заболеванием ТБМ (дополнительный онлайн-рисунок 3BC), соответственно, мы наблюдали дополнительную значительную активацию и обогащение этих путей в классе IV по сравнению с классом V ( рисунок 4Б).
Рисунок 4. Дифференциальная экспрессия генов между классом IV и классом V LN. Графики вулкана, показывающие дифференциальную экспрессию генов (DGE) класса IV (n=23 биопсий) и класса V (n=21 биопсий). Бенджамини-Хохберг скорректировал p=0.05 и отсечку log2 FC=0.5. (B) Сеть взаимодействия STRING для 167 значимых дифференциально экспрессируемых генов с более высокой экспрессией в классе IV по сравнению с классом V (наивысший показатель достоверности =0,9). Красные узлы — ИФН I типа; синие узлы — каскад дополнений; розовые узлы — MHC II; желтые узлы — сигнализация JAK-STAT; фиолетовые узлы – связывание интегрина; светло-зеленые узлы — домен NF-κB+TIR; темно-зеленые узлы — NF-κB и модуляция апоптоза. FC — кратное изменение; ЛН — волчаночный нефрит; НС, несущественно.
По сравнению с заболеванием ТБМ, было 105 генов, которые значительно дифференциально экспрессировались в биоптатах LN класса IV, но не в биопсиях LN класса III или V (рисунок 3D). Анализ путей показал обогащение сигнального пути NF-κB и домена устойчивости к Toll-IL1-, положительную регуляцию метаболических процессов реактивных окислительных видов (АФК) и положительную регуляцию путей пептидазной активности (рисунок 3F, дополнительные онлайн-данные S4 и S12). . Когда мы нанесли на график размеры эффекта всех 205 значительно дифференциально экспрессируемых транскриптов класса IV с соответствующими размерами эффекта для класса III (рисунок 3G) и класса IV (рисунок 3H) LN. большинство изменений были согласованными. Это указывало на то, что только небольшое количество транскриптов в нашем наборе данных однозначно дифференцировано регулировалось в биопсиях LN класса IV (т.е. где значительные размеры эффекта в транскриптах LN класса IV имели низкие или нулевые размеры эффекта в LN класса III или класса IV).
Чтобы изучить различия между пролиферативными и мембранозными ВН, мы сравнили класс IV с ВН класса V. Это выявило 179 (167 более высоких и 12 более низких экспрессий) дифференциально экспрессируемых генов класса IV (рисунок 4A, дополнительные онлайн-данные S13). Анализ путей показал обогащение передачи сигналов IFN типа I, передачи сигналов JAK-STAT, каскада комплемента, MHC II, связывания интегрина, NF-κB ипути апоптоза(рис. 4B, дополнительные онлайн-данные S4 и S14). Хотя большинство этих путей также были идентифицированы в нашем анализе одного подкласса классов IV и V по сравнению с заболеванием ТБМ (дополнительный онлайн-рисунок 3BC), соответственно, мы наблюдали дополнительную значительную активацию и обогащение этих путей в классе IV по сравнению с классом V ( рисунок 4Б).
ОБСУЖДЕНИЕ
Наше и другие исследования16 18 19 продемонстрировали возможность использования технологии NanoString для количественной оценки экспрессии транскриптов наТкань биопсии почки FFPEи, что примечательно, это стало возможным с использованием биопсий возрастом до 11 лет. Этот подход имеет потенциальную клиническую ценность, поскольку ткань FFPE является неотъемлемым компонентом диагностической биопсии почки. В нашем сравнении ВН с заболеванием ТБМ было идентифицировано 36 значимых кластеров сети STRING, причем первые 10 терминов включают NF-κB (шесть верхних кластеров STRING, всего 8 из 36) или передачу сигналов IFN альфа/бета (6 из 36 кластеров STRING). . Комплемент также был широко представлен (6 из 36 кластеров STRING). В соответствии с опубликованными данными мы смогли обнаружить сигнатуру IFN типа I во всех трех классах LN.16 Эта связанная с IFN транскриптомная сигнатура была настолько хорошо представлена в LN, что она четко различала LN класса V и MN, несмотря на их поразительное морфологическое сходство. Интересно, что при сравнении MN и TBM значительного увеличения транскриптов не наблюдалось.
Молекулярный профиль ЛН был впервые изучен с использованием захваченных лазером клубочков из замороженной ткани пациентов с пролиферативным ЛН (класс III и IV).17 Четыре кластера генов, идентифицирующих В-клетки, ответ IFN типа I, миелоидное клонирование и продукция внеклеточных клеток. были описаны матрицы. Примечательно, что между биопсиями наблюдалась заметная гетерогенность (что могло быть как по техническим, так и по биологическим причинам) и не было четкого профиля между биопсиями классов III и IV. В исследовании, включавшем пролиферативные, смешанные ВН и ВН класса V и в котором отдельно анализировались гломерулярный и тубулоинтерстициальный компартменты, содержание транскриптов РНК не коррелировало ни с гистологическим классом, ни с индексами активности и хронизации Национального института здоровья.16 Аналогично, в исследовании В исследовании 28 парных биоптатов от 14 пациентов с ВН, оцененных с использованием иммунной панели NanoString, аналогично нашему исследованию, не было выявлено четких кластеров при анализе содержания транскриптов РНК как в клубочковых, так и в тубулоинтерстициальных компартментах.18 Основным преимуществом нашего исследования было выбор четко определенных биоптатов классов III, IV и V без смешанных поражений. Несмотря на этот подход и в соответствии с исследованиями, изложенными выше, мы не смогли обнаружить отчетливую транскриптомную подпись для каждого гистологического подтипа.
Однако мы идентифицировали 52 дифференциально экспрессируемых гена во всех трех классах LN. Анализ STRING продемонстрировал усиление передачи сигналов IFN, MHC II и классической антитело-опосредованной активации комплемента. FC в ВН класса IV был выше для большинства этих генов по сравнению с классом III или V. Примечательно, что внутрипочечная экспрессия генов, связанных с интерфероном, зависит от обострения заболевания и лечения, причем все MX1, STAT1 и IRF7 повышаются. при обострении, а также снижается или дополнительно повышается в биопсии после лечения у пациентов, получавших лечение, или у лиц, не ответивших на лечение, соответственно. 19 В этом и нашем анализе не удалось определить вклад ответа IFN от резидентных эндотелиальных клеток клубочка и от инфильтрирующих лейкоцитов, сигнал от последних с большей вероятностью находился под влиянием противовоспалительной терапии. Мы идентифицировали 105 значительно дифференциально экспрессируемых генов в LN класса IV, где все идентифицированные кластеры обогащения STRING были вовлечены в NF-κB и апоптоз. Накапливающиеся данные указывают на участие NF-κB в патогенезе ВН, включая повреждение подоцитов,25 а экспрессия цитокинов, опосредованная NF-κB, была отмечена при отсутствии ответа. 19 Варианты нескольких генов, участвующих в передаче сигналов TLR/NF-κB, связаны с LN, включая TLR 3/7/9, MYD88, IRAK1, TNFAIP3 и TNIP1, 26 но это первый случай, когда NF-κB был отнесен к классу IV. ЛН. VCAM-1 был предложен в качестве биомаркера активности LN27 с повышенной экспрессией между начальной и вспышечной биопсией18 и способностью отличать класс IV от других классов. Мы согласны с тем, что в нашем исследовании мы наблюдали значительное повышение только в классе IV LN. Наш анализ класса IV также выявил регуляцию метаболических процессов АФК, которые, как сообщается, играют роль в SLE.21 CYBB, ген, который кодирует бета-цепь цитохрома-245, субъединицы ферментного комплекса НАДФН-оксидазы. и маркер макрофагов М2 CD163 были увеличены во всех классах, но наиболее заметны в классе IV. CD163 был предложен в качестве биомаркера активности мочи при ВН.18 Наличие передачи сигналов IFN типа I было связано с митохондриальными аномалиями, приводящими к митохондриальной недостаточности и повышенной гибели клеток в качестве регуляторного механизма при стойком ответе IFN I типа.21 Однако На животных моделях было продемонстрировано, что измененная метаболическая дисфункция представляет собой обратимое изменение в тканях, пораженных волчанкой, не вызванное воздействием IFN типа I, и правильная модуляция может быть восстановлена после иммуносупрессии на животных моделях.28 Мы наблюдали аналогичную сеть взаимодействия STRING в наших исследованиях. класс IV против класса V и наш анализ класса IV против ТБМ. Фактически, сравнивая эти два гена, 71,4% (135 из 189) генов, идентифицированных относительно TBM, также значительно выше при сравнении класса IV с классом V, с путями, обогащенными передачей сигналов IFN типа I, передачей сигналов JAK-STAT, каскадом комплемента, MHC II, связывание интегрина, NF-κB и апоптоз. Исходя из этого, мы можем заключить, что иммунологическое обогащение ВЛ класса IV значительно усиливается за счет нашего контроля заболевания (биопсия ТБМ) и ВН класса V.
Исследовательский анализ выявил остеопонтин (OPN/SPP1), фибронектин (FN1) и галектин-3 (LGALS3) как гены, представляющие интерес в отношении активности волчанки.16 FN1 также связан с обострением.18 В нашем исследовании LGALS3 не было существенно выражено. Однако FN1 был значимым как в классе IV, так и в V. OPN был значимым только в классе IV, что не было отмечено в исходном исследовании. OPN был предложен в качестве кандидатного маркера агрессивного и пролиферативного LN16 и был связан с гиперклеточностью, клеточной пролиферацией и образованием полумесяца в мышином LN.29 Ключевой целью нашего исследования было предоставитьТранскриптомные профили всей почкидля классов III, IV и V LN с целью выявления молекулярных путей и воспалительных молекул, которые могут быть нацелены на терапию. Хотя мы не выявили новых путей воздействия при ВН, недавнее одобрение анифролумаба, человеческого моноклонального блокирующего антитела к субъединице 1 рецептора IFN типа I, для лечения волчанки дает возможность понять, как внутрипочечный характер IFN может влиять на ответ. Ингибирование комплемента также может быть потенциальным методом лечения ВН, а использование почечных маркеров комплемента, таких как сочетание иммуноокрашивания комплементом и транскриптомных профилей, может быть методом отбора пациентов для исследований, подтверждающих концепцию.30
Наше исследование имеет важные ограничения. Транскриптомный анализ был ограничен 750 транскриптами, опрошенными нашей группой NanoString. Тем не менее, панель была выбрана из-за ее способности исследовать иммунные и связанные с воспалением транскрипты, которые, очевидно, имеют большое значение для понимания молекулярного патогенеза ЛН. Мы использовали целые срезы почечной ткани, а не разделяли клубочковую и тубулоинтерстициальную ткань, поэтому мы не могли отличить экспрессию из разных почечных компартментов. Преимущество использования цельной ткани заключается в том, что это наиболее технически осуществимый подход экспериментально и наиболее практичный для последующего клинического применения. Это было ретроспективное исследование, поэтому подходы к лечению были неоднородными. Мы ограничили нашу биопсию четко определенными поражениями классов III, IV и V без значительных рубцов, чтобы усилить нашу способность обнаруживать различия между классами. То, как на сигналы будут влиять смешанные поражения или поражения с хроническими повреждениями (например, атеросклероз, IFTA и гломерулосклероз), потребует дальнейшего изучения.
Таким образом, мы предоставили транскриптомный анализ всего среза почки биопсий ЛУ классов III, IV и V с использованием панели зондов генов иммунности и воспаления. Мы определили пути, общие для всех трех классов, и охарактеризовали пути, которые были значительно модулированы только в наших биопсиях класса IV. Поскольку для ВН разрабатываются более целенаправленные методы лечения, возможно, можно будет использовать транскриптомный анализ для выбора лечения.
Благодарность Мы хотели бы поблагодарить наших пациентов-соавторов за участие в консорциуме MASTERPLANS (https://sites.manchester.ac.uk/masterplans/). Мы также хотели бы поблагодарить Джеймса Э. Питерса за его помощь в кодировании, статистические советы и поддержку. Мы благодарим Центр нанострун Университетского колледжа Лондона. Мы признательны за поддержку со стороны Центра биомедицинских исследований Национального института медицинских исследований на базе Национального фонда здравоохранения Имперского колледжа здравоохранения и Имперского колледжа Лондона, а также Сети клинических исследований Национального института медицинских исследований. INB является почетным старшим исследователем Национального института медицинских исследований (NIHR) и финансируется Манчестерским центром биомедицинских исследований NIHR.
Участники ACG провели эксперименты, проанализировали данные и стали соавторами рукописи. HRW оказала помощь в сборе образцов и клиническом фенотипировании. Компания HTC предоставила экспертные знания по почечной патологии. MB, LL, TDC и INB оказали помощь в клиническом фенотипировании и интерпретации данных. MCP курировала проект, была соавтором рукописи и является гарантом.
Финансирование Эта работа финансировалась Советом медицинских исследований, грант MR/ M01665X/1, «Максимизация терапевтического потенциала СКВ путем применения новых и системных подходов и инженерии (MASTERPLANS)».
Отказ от ответственности Выраженные мнения принадлежат авторам и не обязательно принадлежат Национальной службе здравоохранения, Национальному институту медицинских исследований или Министерству здравоохранения.
Конкурирующие интересы Не заявлены.
Согласие пациента на публикацию Не применимо.
Этическое одобрение Этическое одобрение было получено через Банк тканей Имперского колледжа: MREC 12/WA/0196, Проект: R16063. Участники дали информированное согласие на участие в исследовании, прежде чем принять участие.
Провенанс и экспертная оценка Не введен в эксплуатацию; внешне рецензируемый.
Заявление о доступности данных Данные доступны по обоснованному запросу. Все данные, имеющие отношение к исследованию, включены в статью или загружены в качестве дополнительной информации. Данные представлены в дополнительном файле Excel. Файлы необработанных данных доступны по запросу.
ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА
1 Гаспаротто М., Гатто М., Бинда В. и др. Волчаночный нефрит: клинические проявления и исходы в 21 веке. Ревматология 2020;59:т39–51.
2 Гувер П.Дж., Костенбадер К.Х. Взгляд на эпидемиологию и лечение волчаночного нефрита с точки зрения ревматолога США. Kidney Int 2016;90:487–92.
3 Фануриакис А., Костопулу М., Чима К. и др. Обновление совместных рекомендаций Европейской лиги борьбы с ревматизмом и Европейской ассоциации почек – Европейской ассоциации диализа и трансплантологии (EULAR/ERA–EDTA) по лечению волчаночного нефрита от 2019 года. Энн Реум Дис 2020;79:713–23.
4 Морони Дж., Верчеллони П.Г., Кваглини С. и др. Изменение закономерностей клинико-гистологической картины и почечного исхода за последние пять десятилетий в когорте из 499 пациентов с волчаночным нефритом. Энн Реум Дис 2018;77:1318–2
5. 5 Венинг Дж.Дж., Д'Агати В.Д., Шварц М.М. и др. Пересмотр классификации гломерулонефрита при системной красной волчанке. J Am Soc Nephrol 2004; 15: 241–50.
6 Баджема И.М., Вильгельмус С., Альперс К.Э. и др. Пересмотр классификации Международного общества нефрологов/Почечной патологии для волчаночного нефрита: уточнение определений и модифицированные индексы активности и хронизации Национального института здоровья. Kidney Int 2018;93:789–96.
7 Харинг CM, Ритвельд А, ван ден Бранд JAJG и др. Сегментарные и глобальные подклассы волчаночного нефрита IV класса имеют сходные последствия для почек. J Am Soc Nephrol 2012; 23: 149–54.
8 Остин Х.А., Мюнц Л.Р., Джойс К.М. и др. Диффузный пролиферативный волчаночный нефрит: выявление специфических патологических особенностей, влияющих на почечный исход. Kidney Int 1984;25:689–95.
9 Далл'Эра М., Цистернас М.Г., Смилек Д.Е. и др. Предикторы долгосрочного почечного исхода в исследованиях волчаночного нефрита: уроки, извлеченные из когорты евро-волчаночного нефрита. Ревматол артрита 2015;67:1305–13.
10 Морони Г., Гатто М., Тамборини Ф. и др. Отсутствие ответа EULAR/ERA-EDTA через 1 год предсказывает плохие долгосрочные последствия для почек у пациентов с волчаночным нефритом. Энн Реум Дис 2020;79:1077–83.
Служба поддержки Wecistanche-крупнейшего экспортера цистаншей в Китае:
Электронная почта:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Телефон:+86 15292862950
Магазин для получения дополнительных технических характеристик:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
