Иммуногенность и безопасность третьей дозы CoronaVac и иммунная устойчивость схемы двух доз у здоровых взрослых: промежуточные результаты двух одноцентровых, двойных слепых, рандомизированных, плацебо-контролируемых клинических испытаний 2 фазы
Mar 23, 2022
Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com
Резюме
Фон
Во многих странах проводится широкомасштабная вакцинация против COVID-19 с помощью инактивированной вакцины CoronaVac. Мы стремились оценить иммунную стойкость схемы двух доз CoronaVac, а также иммуногенность и безопасность третьей дозы CoronaVac у здоровых взрослых в возрасте 18 лет и старше.
Методы
В первом из двух одноцентровых, двойных слепых, рандомизированных, плацебо-контролируемых клинических испытаний фазы 2 взрослые в возрасте 18–59 лет в провинции Цзянсу, Китай, были первоначально распределены (1:1) на две когорты графика вакцинации: день 0 и когорта вакцинации на 14-й день (когорта 1) и когорта вакцинации на 0 и 28-й день (когорта 2); каждая когорта была случайным образом распределена (2:2:1) либо к дозе 3 мкг, либо к дозе 6 мкг CoronaVac, либо к группе плацебо. После внесения поправки в протокол от 25 декабря 2020 г. половина участников каждой группы была распределена для получения дополнительной дозы через 28 дней (период окна 30 дней) после второй дозы, а другая половина была распределена для получения третьей дозы через 6 месяцев. (период окна 60 дней) после второй дозы. В другом испытании фазы 2, проведенном в провинции Хэбэй, Китай, участникам в возрасте 60 лет и старше было назначено последовательное введение трех инъекций по 1,5 мкг, 3 мкг или 6 мкг вакцины или плацебо с интервалом в 28 дней для первой инъекции. две дозы с интервалом в 6 месяцев (период окна 90 дней) для второй и третьей доз. Основными результатами исследования были средние геометрические титры (GMT), средние геометрические увеличения (GMO) и серопозитивность нейтрализующих антител к SARS-CoV-2 (штамм вируса SARS-CoV-2/человек/CHN /CN1/2020, инвентарный номер GenBank MT407649.1), как было проанализировано в популяции согласно протоколу (все участники, которые завершили назначенную им третью дозу). Наша отчетность сосредоточена на группах 3 мкг, поскольку 3 мкг является лицензированным составом. Испытания зарегистрированы на ClinicalTrials.gov, NCT04352608 и NCT04383574.
Результаты
540 (90 процентов) из 600 участников в возрасте 18–59 лет имели право на получение третьей дозы, из которых 269 (50 процентов) получили третью дозу. первичная третья доза через 2 месяца после второй дозы (группы 1a-14d-2m и 2a-28d-2m) и 271 (50 процентов) получили бустерную дозу 8 месяцев после второй дозы (группы 1b-14d-8m и 2b-28d-8m). В группе 3 мкг титры нейтрализующих антител, индуцированные первыми двумя дозами, снизились через 6 месяцев почти или ниже серопозитивного порогового значения (GMT 8) для когорты 1b-14d-8m (n{{ 29}}; GMT 3,9 [95% ДИ 3,1–5,0]) и для когорты 2b-28d-8m (n=49; 6,8 [5 ·2–8·8]). Когда бустерная доза была введена через 8 месяцев после второй дозы, GMT, оцененные через 14 дней, увеличились до 137,9 (95-процентный ДИ 99,9–190,4) для когорты 1b-14d-8m и 143,1 (110,8–184,7) через 28 дней для когорты 2b-28d-8m. GMT умеренно увеличились после первичной третьей дозы, с 21,8 (95% ДИ 17,3–27,6) на 28-й день после второй дозы до 45,8 (35,7–58,9) на 28-й день после первой дозы. третья доза в когорте 1a-14d-2m (n=54) и с 38,1 (28,4–51,1) до 49,7 (39,9–61,1). ·9) в когорте 2a-28d-2m (n=53). GMT снизились почти до положительного порога через 6 месяцев после третьей дозы: GMT 9,2 (95-процентный ДИ 7,1–12,0) в когорте 1a-14d-2m и 10· 0 (7·3–13·7) в когорте 2a-28d-2m. Аналогичным образом, у взрослых в возрасте 60 лет и старше, получивших бустерные дозы (303 [87 процентов] из 350 участников имели право на получение третьей дозы), титры нейтрализующих антител снизились почти или ниже серопозитивного порога через 6 месяцев после первых двух доз. -серия доз. Третья доза, введенная через 8 месяцев после второй дозы, значительно повысила концентрацию нейтрализующих антител: GMT увеличились с 42,9 (95-процентный ДИ 31,0–59,4) на 28-й день после второй дозы до 158,5 (96,6–59,4). 259·2) на 28-й день после введения третьей дозы (n=29). Все побочные реакции, о которых сообщалось в течение 28 дней после введения третьей дозы, относились к степени тяжести 1 или 2 во всех группах вакцинации. О трех серьезных нежелательных явлениях (2 процента) сообщили 150 участников из когорты 1a-14d-2m, о четырех (3 процента) - 150 участников из когорты 1b-14d{{ 159}}m, по одному (1 процент) на 150 участников в каждой из когорт 2a-28d-2m и 2b-28d-8m, и 24 (7 процентов) ) 349 участниками из когорты 3-28d-8m.
Интерпретация
Третья доза CoronaVac у взрослых, введенная через 8 месяцев после второй дозы, эффективно вызывала специфические иммунные реакции на SARS-CoV-2, которые существенно снизились через 6 месяцев после двух доз CoronaVac, что привело к заметному увеличению концентрации антител, что указывает на то, что двухдозовая схема создает хорошую иммунную память, а первичная третья доза вводится через 2 месяца после того, как вторая доза вызвала немного более высокие титры антител, чем первые две дозы.
Финансирование
Национальная ключевая программа исследований и разработок, Пекинская научно-техническая программа и Ключевая программа Национального фонда естественных наук Китая.
Ган Цзэн*, Цяньхуэй Ву*, Хунсин Пан*, Миньцзе Ли*, Хуан Ян*, Линь Ван, Чживэй Ву, Дэю Цзян, Сяовэй Дэн, Кай Чу, Вэнь Чжэн, Лэй Ван, Ванин Лу, Бихуа Хань, Юлян Чжао† , Фэнцай Чжу†, Хунцзе Юй†, Вэйдун Инь†
* Внесли равный вклад † Совместные руководители Sinovac Biotech, Пекин, Китай (G Zeng Ph.D., Le Wang MSc, W Yin MBA); Школа общественного здравоохранения, Университет Фудань, Ключевая лаборатория безопасности общественного здоровья, Министерство образования, Шанхай, Китай (Q Wu MPH, J Yang Ph.D., X Deng MSc, W Zheng BSc, W Lu BSc, Prof H Yu Ph. Д.); Провинциальный центр по контролю и профилактике заболеваний Цзянсу, Нанкин, Китай (H Pan MSc, K Chu MSc, Prof F Zhu MD); Хэбэйский провинциальный центр по контролю и профилактике заболеваний, Шицзячжуан, Хэбэй, Китай (M Li MSc, Z Wu MSc, B Han MSc, Prof Y Zhao MSc); Sinovac Life Sciences, Пекин, Китай (Li Wang MSc, D Jiang MSc); Шанхайский институт инфекционных заболеваний и биобезопасности, Университет Фудань, Шанхай, Китай (J Yang, Prof H Yu); Отделение инфекционных заболеваний, больница Хуашань, Университет Фудань, Шанхай, Китай (проф. Х. Юй) Адрес для переписки: Юлян Чжао, Хэбэйский центр по контролю и профилактике заболеваний, Шицзячжуан 050021, Фэнцай Чжу, Провинциальный центр по контролю и профилактике заболеваний Цзянсу, Нанкин 210000 , Hongjie Yu, Школа общественного здравоохранения, Университет Фудань, Ключевая лаборатория безопасности общественного здоровья, Министерство образования, Шанхай 200032, Китай или Weidong Yin, Sinovac Biotech, Пекин 100085,
Введение
Более 20 вакцин были одобрены для использования в ответ на пандемию COVID-191, при этом по состоянию на 3 октября 2021 г. во всем мире было введено более 6,33 млрд доз.2 После первичной вакцинации вакцинами, включая BNT162b23–5 (Pfizer–BioNTech мРНК-вакцина), мРНК-12734,6 (мРНК-вакцина Moderna) и ChAdOx1 nCoV-197,8 (нереплицирующаяся аденовирусная векторная вакцина AstraZeneca), наблюдались титры нейтрализующих антител и эффективность вакцины против симптоматического заболевания. со временем уменьшаться, особенно в отношении дельта-варианта (B.1.617.2) SARS-CoV-2, который стал преобладающим штаммом во всем мире9. Бустерная доза, введенная через 6–8 месяцев после второй дозы мРНК BNT162b2,10-1273,11 и NVX-CoV237312 (белковая субъединичная вакцина Novavax) значительно повысили концентрацию нейтрализующих антител и, таким образом, увеличили нейтрализующую способность против дельта-варианта.
Бустерная вакцинация BNT162b2 была начата в Израиле в ответ на всплеск случаев COVID-19, вызванных дельта-вариантом;13 промежуточные результаты показывают, что бустерная доза значительно снижает уровень подтвержденной инфекции и тяжелых заболеваний.14 CoronaVac (Sinovac Life Sciences, Пекин, Китай), инактивированная вакцина против COVID-19, была разрешена для условного применения в Китае15 и включена в список ВОЗ для использования в чрезвычайных ситуациях16. Эта вакцина применялась в 26 странах, включая Китай, 1, и увеличивает глобальные поставки через COVAX.17 В Китае по состоянию на 3 октября 2021 г. было введено 2·21 млрд доз вакцин против COVID-19,18 подавляющее большинство из которых являются инактивированными вакцинами. Данные реальных исследований CoronaVac в двух дозах в Чили,19 Бразилии,20 и Китае21,22 показывают, что вакцина эффективно предотвращает лабораторно подтвержденный COVID-19, с большей эффективностью против более тяжелых исходов, в том числе в настройки с тиражом интересующих вариантов. Однако устойчивость иммунитета, индуцированного вакциной CoronaVac, неизвестна, а иммуногенность и безопасность бустерной дозы не определены.
Чтобы восполнить этот пробел в знаниях, мы стремились оценить иммунную персистенцию после первичной иммунизации CoronaVac, а также иммуногенность и безопасность третьей гомологичной дозы в двух группах населения: взрослых в возрасте 18–59 лет и взрослых в возрасте 60 лет и старше.
цистанхе трубчатая:цистанхе целые корни
Методы
Дизайн исследования и участники
Наше исследование основано на двух одноцентровых, двойных слепых, рандомизированных, плацебо-контролируемых клинических испытаниях CoronaVac фазы 2. Одно испытание было начато в уезде Суйнин, провинция Цзянсу, Китай, Центром по контролю и профилактике заболеваний провинции Цзянсу (CDC) 3 мая 2020 г. среди здоровых взрослых в возрасте 18–59 лет, а другое было начато в Жэньцю, провинция Хэбэй. , Китай, CDC провинции Хэбэй, 12 июня 2020 г., среди здоровых взрослых в возрасте 60 лет и старше. Планы испытаний фазы 2 были опубликованы ранее.23,24 Вкратце, ключевые критерии исключения для участия в испытаниях включали подозрение или лабораторно подтвержденную инфекцию SARS-CoV-2 и известную аллергию на любой компонент вакцины. Полный список критериев исключения содержится в протоколе (Приложение 2, стр. 74–76; приложение 3, стр. 38–39).
Для исследования взрослых в возрасте 18–59 лет подходящие участники были первоначально набраны и случайным образом (1:1) распределены в когорты вакцинации с двухдозовым графиком, либо с интервалом в 14 дней (группа 1), либо с интервалом в 28 дней (группа 2). В каждой когорте участники были случайным образом распределены (2:2:1) либо в группу 3 мкг, либо в группу 6 мкг, либо в группу плацебо. Для испытания у взрослых в возрасте 60 лет и старше подходящие участники были распределены (2:2:2:1) последовательно для получения двух доз вакцины или плацебо с интервалом в 28 дней (1,5 мкг, 3 мкг или 6 мкг). 3). Коды рандомизации для каждой когорты календаря вакцинации были созданы индивидуально и случайным образом назначены с использованием блочной рандомизации, разработанной с помощью SAS версии 9.4. Взрослым в возрасте 18–59 лет был назначен размер блока из пяти, а взрослым в возрасте 60 лет и старше был назначен размер блока из 14. Скрытые случайные распределения по группам и слепые коды хранились в подписанных и запечатанных конвертах.
Исследователи, участники и сотрудники лаборатории были замаскированы для группового назначения. Код рандомизации присваивался каждому участнику последовательно в порядке регистрации исследователями, которые участвовали в остальной части исследования. 1,5 мкг, 3 мкг или 6 мкг дозы CoronaVac (ячейка Vero, инактивированный штамм CN02 SARS-CoV-2 с 1,5, 3 или 6 мкг на {{13 }}·5 мл адъюванта гидроксида алюминия) или плацебо (0,5 мл адъюванта гидроксида алюминия) в предварительно заполненных шприцах вводили путем внутримышечной инъекции в дельтовидную мышцу. Для оценки иммуногенности первичной вакцинации образцы крови брали до вакцинации и на 28-й день после введения второй дозы. Промежуточные результаты этих данных были опубликованы.23,24 Для исследования с участием взрослых в возрасте 18–59 лет 25 декабря 2020 г. в протокол были внесены поправки для оценки иммуногенности дополнительной дозы (приложение 2, стр. 3).
польза экстракта цистанхе: повышение иммунитета
В соответствии с порядком блоков половина участников была последовательно распределена для получения дополнительной дозы вакцины или плацебо через 28 дней после второй дозы (с периодом окна 30-дней; здесь и далее - когорта 1a{{3 }}d-2m и когорта 2a-28d-2m, где 14d и 28d обозначают интервал в днях между первыми двумя дозами, а 2m обозначает фактический средний интервал в месяцах между вторая и третья дозы), а другая половина была распределена для получения бустерной дозы через 6 месяцев после второй дозы (с периодом 60-дневного окна; далее - когорта 1b-14d-8 m и когорта 2b-28d- 8m, где 8m обозначает фактический средний интервал в месяцах между второй и третьей дозами). В ходе исследования у взрослых в возрасте 60 лет и старше бустерную дозу вводили через 6 месяцев после второй дозы (с периодом 90-дневного окна; когорта 3-28d-8m) в соответствии с оригинальный протокол (приложение 3 стр. 41–42). Ключевые критерии исключения для третьих доз приведены в приложении 4 (стр. 3).
Письменное информированное согласие было получено от участников как перед включением в исследование, так и перед введением третьей дозы вакцины неприемлемым участникам. Протокол клинического испытания и формы информированного согласия для исследования взрослых в возрасте 18–59 лет были одобрены Этическим комитетом Цзянсу (JSJK2020-A021–02), а для исследования взрослых в возрасте 60 лет и старше были одобрен Комитетом по этике CDC провинции Хэбэй (IRB2020–006). Основные этапы и сроки каждого визита, указанные в протоколе, показаны в приложении 4 (стр. 4). Участники каждой когорты получали гомологичные третьи дозы, вакцину или плацебо.
Участники должны были быть исключены из исследования, если у них возникали неприемлемые нежелательные явления, по оценке исследователей и определенные в Руководящих принципах Национального управления медицинских изделий по стандартам классификации нежелательных явлений для клинических испытаний профилактических вакцин (2019 г.), неприемлемое состояние здоровья как по оценке исследователей, или аномальные клинические проявления по оценке исследователей, или по запросу участника, или по любой другой причине, которую исследователь сочтет необходимой. Исследование будет приостановлено при следующих условиях, по мнению исследователей: появление одной или нескольких местных или системных побочных реакций 4-й степени, связанных с вакцинацией, или более 15 процентов участников, имеющих побочные реакции 3-й степени или выше, включая местные реакции, системные реакции и изменения жизненно важных функций.
В течение испытательных периодов в этом исследовании не проводилось активного наблюдения за естественной инфекцией SARS-CoV-2. Необходимо было сообщить исследователю о появлении SARS-CoV-2 у участников исследования. В соответствии с политикой правительства Китая по профилактике и борьбе с COVID-19, предусматривающей нулевую терпимость к местной передаче, все инфекции своевременно выявляются и сообщаются местными департаментами здравоохранения для отслеживания контактов, изолированного лечения и карантина близких контактов и тестирования на наличие инфекции. РНК SARS-CoV-2.
У участников, получивших третью дозу через 28 дней после второй дозы (когорта 1a-14d-2m и когорта 2a-28d-2m), образцы крови были собраны на день 28 и месяц 6 после третьей дозы, чтобы оценить иммуногенность и иммунную стойкость третьей дозы. Для участников, получивших третью дозу через 6 месяцев после второй дозы (когорта 1b-14d-8m, когорта 2b-28d-8m и когорта {{16} }d-8m) образцы крови собирали через 6 месяцев после введения второй дозы для оценки иммунологической стойкости второй дозы и на 28-й день после введения третьей дозы для оценки иммуногенности третьей дозы (при исключение когорты 1b-14d-8m, в которой образцы были собраны на 14-й день после третьей дозы; рисунок 1; приложение 4 п. 4). Информация о безопасности после третьей дозы была получена теми же методами, что и для первых двух доз, как описано ранее.23
Участники должны были записывать побочные эффекты в месте инъекции (например, боль, покраснение и отек) или системные побочные эффекты (например, аллергические реакции, кашель и лихорадка) в дневниках в течение 7 дней после их третьей дозы. В течение 8-28 дней нежелательные побочные реакции были собраны путем спонтанных сообщений от участников всех когорт. Мы планировали собирать данные о серьезных нежелательных явлениях в течение 6 месяцев после третьей дозы для участников из групп 1 и 2 и в течение 1 года после третьей дозы для участников из группы 3. Крайним днем в этом отчете было 6 месяцев после второй дозы. доза для участников в когорте 1b-14d-8m, когорте 2b-28d-8m и когорте 3-28d-8m, и 6 месяцев после третьей дозы для участников из когорты 1a-14d-2m и когорты 2a-28d-2m. Зарегистрированные нежелательные явления классифицировались в соответствии с рекомендациями Китайского национального управления медицинской продукции.23 Серьезные нежелательные явления были закодированы в соответствии с классом систем и органов Медицинского словаря регуляторной деятельности (MedDRA).
Исследователи установили наличие причинно-следственной связи между побочными эффектами и вакцинацией. Методы иммунологической оценки и соответствующие процедуры описаны в приложении 4 (стр. 5). Количество нейтрализующих антител против инфекционного SARS-CoV-2 (штамм вируса SARS-CoV-2/human/CHN/CN1/2020, инвентарный номер GenBank MT407649.1) определяли с помощью анализа микроцитопатогенного эффекта.23 Было предпринято несколько мер для контроля качества анализа микроцитопатогенного эффекта, включая обратное титрование вируса для каждой партии тестов, чтобы определить, находится ли количество вируса в диапазоне 32–320 инфекционных доз культуры ткани (TCID50) на 50 мкл.25 Два типа положительного контроля антител, отрицательный контроль антител, контроль токсичности сыворотки и контроль клеток были включены в каждый тест. Образцы крови были взяты на исходном уровне и через 28 дней после того, как вторая доза была протестирована ранее, и титры нейтрализующих антител были сопоставимы между группами в возрасте 18–59 лет и людьми в возрасте 60 лет и старше.23,24 Образцы крови, взятые через 6 месяцев после вторая доза или 14 дней, 28 дней или 6 месяцев после третьей дозы была протестирована в наших анализах.
Однако титры нейтрализующих антител сывороток, полученных на 28-й день после введения третьей дозы у участников старшей возрастной группы, были примерно в два раза выше (352,8 [95% ДИ 266,4–441,1] в когорте {{9} }d-8m), чем титры у участников младшей возрастной группы (143,1 [95% ДИ 110,8–184,7] в когорте 2b-28d-8m) которые были привиты по тому же графику вакцинации. Чтобы проверить стабильность и надежность результатов теста на нейтрализующие антитела, мы повторно протестировали удобную случайную выборку образцов от 100 взрослых в младшей возрастной группе и 100 взрослых в старшей возрастной группе. В группе более молодых взрослых титры нейтрализующих антител были одинаковыми между первым тестом и повторным тестом. Соответственно, результаты первого теста были использованы в нашем анализе для этой популяции. В группе пожилых людей титры нейтрализующих антител при повторном тестировании были значительно ниже, чем при первом тесте.
польза цистанхе: повышение иммунитета
Принимая во внимание приемлемые результаты повторных анализов образцов сыворотки у молодых и пожилых людей, а также соответствие наших процедур протоколу после оценки, мы использовали результаты повторных анализов 100 взрослых в старшей возрастной группе, которые мы считаем более достоверными. надежный, по нашим анализам. Из-за многократного замораживания и оттаивания, а также недостаточного количества сыворотки мы не смогли повторно протестировать образцы других взрослых в старшей возрастной группе. Подробное описание процедур и результатов повторного тестирования для пожилых людей приведено в приложении 4 (стр. 9–11).
Результаты
О первичных иммунологических исходах двухфазных испытаний 2 сообщалось ранее;23, 24 здесь мы сообщаем о результатах предварительно определенных вторичных и поисковых иммунологических исходов. Вторичные иммунологические результаты включали среднее геометрическое титров (GMT), среднее геометрическое увеличение (GMI) и серопозитивность нейтрализующих антител к инфекционному SARS-CoV-2 28 дней после третьей дозы (для когорты 1a-14d{{ 8}}м и когорта 2а-28г-2м). Исследовательские иммунологические результаты включали GMT и серопозитивность через 6 месяцев после второй дозы (для когорты 1b-14d-8m, когорты 2b-28d-8m и когорты {{ 19}}d-8m) и через 14 дней (для когорты 1b-14d- 8m) или 28 дней (для когорты 2b-28d-8 m и когорта 3-28d-8m) после третьей дозы. Дополнительным результатом GMT и серопозитивности через 6 месяцев после третьей дозы для когорты 1a-14d-2m и когорты 2a-28d-2m был постфактум анализ. Чтобы оценить иммуногенность третьей дозы, мы включили участников, которые получили назначенные им третьи дозы и имели доступные результаты антител на 28-й день после третьей дозы (14-й день после третьей дозы для когорты 1b{41}}d{{42 }}м); определяется как набор третьих доз для анализа согласно протоколу. Чтобы оценить иммунную персистенцию первой серии двух доз, мы включили участников, завершивших 6-месячное наблюдение после двух доз для когорты 1b-14d-8m, когорты 2b{{51 }}д-8м и когорта 3-28д-8м; чтобы оценить иммунную стойкость после первичной серии трех доз, мы включили участников, завершивших 6-месячное наблюдение после трех доз для когорты 1a-14d-2m и когорты 2a{{62} } д -2 м; определяется как набор для анализа иммунологической персистенции. Мы определили серопозитивность как титр 8 или выше для нейтрализующих антител к инфекционному SARS-CoV-2. Первичные конечные точки безопасности включали любые побочные реакции в течение 28 дней после введения третьей дозы во всех когортах. Вторичными конечными точками безопасности были серьезные нежелательные явления, возникающие от первой дозы до 6 месяцев после третьей дозы во всех когортах вакцинации. Полный список результатов приведен в приложении 4 (стр. 6–7). Учитывая, что доза 3 мкг является лицензированной лекарственной формой, и из-за нехватки места мы в основном представляем результаты для группы 3 мкг в основном тексте и приводим подробные результаты для других групп вмешательства в таблицах и приложении 4.
статистический анализ
Размер выборки был определен в соответствии с требованиями Национального управления медицинской продукции, регулирующего органа Китая по вакцинам. Мы оценили иммунологические конечные точки в популяции согласно протоколу, которая включала всех участников, которые завершили назначенные им третьи дозы и имели результаты антител, доступные в соответствии с протоколом. Кроме того, мы оценили иммунную персистенцию первичной иммунизации в наборе для анализа иммунологической персистенции, который включал участников, завершивших 6-месячное наблюдение после двух доз для когорты 1b-14d-8m. , когорта 2b-28d-8m и когорта 3-28d-8m, и кто завершил 6-месячное наблюдение после трех доз для когорты 1a{{ 14}}д-2м и когорта 2а-28д-2м. Серьезные нежелательные явления оценивались в группе безопасности, в которую входили все участники, получившие хотя бы одну дозу исследуемой вакцины с начала графика вакцинации. Оценки безопасности для третьей дозы проводились в наборе данных о безопасности всех участников, получивших третью дозу.
Демографические данные участников, получивших третью дозу, были обобщены для групп вакцинации, а для анализа категориальных исходов использовался критерий χ² Пирсона или точный критерий Фишера. Мы рассчитали 95-процентные доверительные интервалы для всех категорий исходов, используя метод Клоппера-Пирсона. Мы рассчитали GMT и соответствующие 95-процентные доверительные интервалы на основе стандартного нормального распределения логарифмически преобразованных титров антител. Для третьей дозы, введенной через 28 дней после второй дозы (когорта 1a-14d-2m и когорта 2a-28d-2m), GMI рассчитывались с использованием титров антител. до вакцинации и через 28 дней после введения третьей дозы (принимая предвакцинацию за исходный уровень). Для бустерной дозы, введенной через 6 месяцев после второй дозы (группа 1b-14d-8m, группа 2b-28d-8m и группа 3-28d -8m), GMI рассчитывали с использованием титров антител до (т. е. через 6 месяцев после второй дозы) и через 28 дней или 14 дней после третьей (бустерной) дозы (принимая предварительную бустерную дозу за исходный уровень).
Модели ANOVA с логарифмическим преобразованием (по GMT и GMI, как указано выше) использовались для выявления различий между группами. Были созданы апостериорные обобщенные линейные смешанные модели (GLMM) для сравнения концентраций антител, вызванных третьей дозой, среди участников четырех групп в когортах 1 и 2 с учетом возраста, пола, дозовой группы, схемы вакцинации, взаимодействия дозы и схемы. , время выборки и случайный перехват для каждого участника.
Сравнения между группами проводились с помощью групповых t-тестов с логарифмическим преобразованием и коррекцией Бонферрони, выполненной в качестве постдокторского теста, если дисперсия была значительной. Проверка гипотезы была двусторонней, и мы считали значения p менее 0·05 значимыми. Мы использовали программное обеспечение R версии 3.6.0 для всех анализов. Клиническое исследование контролируется независимым комитетом по мониторингу данных, в состав которого входят независимый статистик, клиницист и эпидемиолог. Подробная информация о членах представлена в приложении 4 (стр. 8). Испытания зарегистрированы на ClinicalTrials.gov, NCT04352608 и NCT04383574.
Роль источника финансирования
Спонсор исследования не имел никакой роли в разработке исследования, сборе данных, анализе данных, интерпретации данных или написании отчета.
повысить иммунитетпродукты цистанхе
Полученные результаты
3 мая 2020 г. 600 участников в возрасте от 18 до 59 лет были включены в исследование фазы 2, из которых 540 (90 процентов) имели право на получение третьих доз (приложение 4, стр. 13–14). Из этих 540 участников 139 (26 процентов) участников были отнесены к когорте 1a-14d-2m, а 130 (24 процента) участников были отнесены к группе 2a-28d{{21} } м; когорта 1a-14d-2m получила третью дозу в среднем через 2 месяца (межквартальный интервал 56–56 дней), а группа 2a-28d-2m получила третью дозу в среднем через 2 месяца (межквартильный интервал 51–51 день) после второй дозы. 135 (97 процентов) из 139 участников из когорты 1a-14d-2m и 124 (95 процентов) из 130 участников из когорты 2a-28d-2m завершили забор крови для оценки стойкости иммунитета в течение 6 месяцев после введения третьей дозы. Отдельно 147 (25 %) из 600 участников, отнесенных к группе 1b-14d-8m, и 138 (23 %) из группы 2b-28d- 8m, были наблюдались в течение 6 месяцев после второй дозы, и 141 участник в когорте 1b-14d-8m (26 процентов из 540 участников, имеющих право на третью дозу) и 130 участников в когорте 2b{{67 }}d-8m (24 процента из 540 участников, имеющих право на третью дозу) получили третью дозу через 8 месяцев после второй дозы для оценки иммуногенности (рис. 1).
12 июня 2020 г. 350 участников в возрасте 60 лет и старше были включены в исследование фазы 2, и 303 (87 процентов) были распределены для получения третьих доз через 8 месяцев после введения второй дозы (приложение 4, стр. 15). 98 (32 процента) из 303 участников были включены в анализ иммуногенности, как описано в методах (два участника были исключены из-за нарушения протокола). Демографические характеристики этих 98 участников были аналогичны другим участникам той же возрастной группы (Приложение 4, стр. 9–11). В анализ безопасности были включены все участники старшей возрастной группы. Ни в одной когорте не было зарегистрировано естественных инфекций.
В когорте 1b-14d-8m было 141 незначительное отклонение от протокола, в том числе 141 участник, получивший третью дозу через 9–11 дней после установленного временного окна, что не привело к исключению участников из исследования. анализ (приложение 3 стр. 12). Средний возраст участников составлял от 40,4 года (SD 10,3) до 45,7 лет (9,7) в когортах 1 и 2 (взрослые в возрасте 18–59 лет) и от 66,3 года (SD 4). ·4) и 67,1 года (4·7) в когорте 3 (взрослые в возрасте 60 лет и старше; табл. 1). На исходном уровне ни у одного из участников ни в одной когорте не было обнаруживаемых нейтрализующих антител (рис. 2, 3). Третья доза CoronaVac была введена через 2 месяца после того, как вторая доза умеренно повысила уровни нейтрализующих антител, вызванные первыми двумя дозами. В группе, принимавшей 3 мкг, среднее время по Гринвичу в когорте 1a-14d-2m на 28-й день после введения дозы 2 составило 21,8 (95-процентный ДИ 17,3-27,6), а на 28-й день после доза 3 составила 45,8 (35,7–58,9), а в когорте 2a-28d-2m GMT на 28-й день после дозы 2 было 38,1 (95% ДИ 28,4 –51·1), а на 28-й день после дозы 3 – 49,7 (39,9–61,9; рис. 2; табл. 2).
GMI нейтрализующих антител от исходного уровня до 28 дней после третьей дозы составлял 22,9 (95-процентный ДИ 17,8–29,4) для когорты 1a-14d{{10}}m и 24,8 (19,9–31,0) для когорты 2a-28d-2m (табл. 2). Показатели серопозитивности во всех группах вакцинации в когортах 1a-14d-2m и 2a-28d-2m превышали 95 процентов через 28 дней после введения трех доз (таблица 2). Результаты анализа иммунологической персистенции в когорте 1a-14d-2m и когорте 2a-28d-2m показывают, что через 6 месяцев после третьей дозы среднее время по Гринвичу было примерно 10, а серопозитивность оставалась выше 50 процентов (приложение 4, стр. 16–17). GMT в когорте 1a-14d-2m на 28-й день (p=0·0053) и на 6-м месяце (p=0·039) после третьей дозы были значительно выше в группе 6 мкг, чем в группе 3 мкг, тогда как не было существенной разницы между двумя дозами в любой момент времени в когорте 2a-28d-2m (приложение 4, стр. 16–17).
Независимо от интервала между первыми двумя дозами титры нейтрализующих антител снизились до уровня ниже серопозитивного порогового значения через 6 месяцев после второй дозы (GMT 3,9 [95% ДИ 3,1–5·0] в когорте 1b -14d-8м и 6·8 [5·2–8·8] в когорте 2b-28d-8м; рис. 2). В наборе для анализа иммунологической персистенции через 6 месяцев после введения второй дозы десять (17 процентов) из 59 участников в когорте 1b-14d-8m и 19 (35 процентов) из 54 участников в когорте 2b -28d-8m были серопозитивными (приложение 4, стр. 18–19).
В ретроспективном анализе после введения бустерной дозы через 8 месяцев после второй дозы среднее время по Гринвичу увеличилось до 137,9 (95-процентный ДИ 99,9–190,4) в когорте 1b-14d{{11} }m через 14 дней и до 143,1 (110,8–184,7) в когорте 2b-28d-8m через 28 дней (рис. 2). Концентрации нейтрализующих антител через 14 дней после введения дозы 3 были приблизительно в пять раз выше, чем концентрации нейтрализующих антител на 28-й день после введения второй дозы в группе 1b-14d-8m (от 27,4 до 137 по Гринвичу). ·9 в группе 3 мкг и от GMT от 30,4 до 175,1 в группе 6 мкг) и в когорте 2b-28d-8m, титры нейтрализующих антител через 28 дней после третья доза была примерно в три раза выше, чем титры нейтрализующих антител через 28 дней после второй дозы (от GMT 45,9 до 143,1 в группе 3 мкг; таблица 2, рисунок 2). Серопозитивность на 14-й день после третьей дозы в когорте 1b-14d-8m и на 28-й день после третьей дозы в когорте 2b-28d-8m составила 100 процентов для обе дозы (таблица 2). GMI до и после бустерной дозы составил 35,1 (95-процентный ДИ 24,3–50,7) в когорте 1b-14d-8m и 21,2 (15,3–29· 2) в когорте 2b-28d-8m (табл. 2).
В моделях GLMM титры нейтрализации снижались с возрастом (приложение 4, стр. 21). Иммунный ответ, вызванный дозой 6 мкг, был лучше, чем ответ, вызванный дозой 3 мкг, а третья доза значительно повысила уровень антител по сравнению с 28-м днем после дозы 2. График вакцинации, использованный в когорте 2b-28d{{8 }}m показал лучшую иммуногенность (приложение 4 стр. 21). В анализе иммунологической персистенции когорты 3-28d-8m в группе 3 мкг титры нейтрализующих антител снизились до уровня ниже серопозитивного порогового значения через 6 месяцев после введения второй дозы (с 40,8 [95 процент ДИ 33,8–49,3] на 28-й день после дозы 2–3,4 [2,9–4,1]), и 17 (18 процентов) из 98 участников были сероположительными (приложение 4, стр. 20).
Бустерная доза, введенная через 8 месяцев после второй дозы, увеличила среднее время по Гринвичу до 158,5 (95-процентный ДИ 96,9–259,2) через 28 дней после бустерной дозы (рис. 3, таблица 2). GMI до и после бустерной дозы составил 39,7 (95-процентный ДИ 23,6–66,6; таблица 2). GMT на 28-й день после третьей дозы были самыми высокими в группе, принимавшей 6 мкг (p<0·0001) and="" similar="" between="" the="" 3="" μg="" group="" and="" the="" 1·5="" μg="" group="" (p="0·18;" table="" 2).="" severities="" of="" solicited="" local="" and="" systemic="" adverse="" reactions="" reported="" within="" 28="" days="" after="" the="" third="" dose="" were="" grade="" 1–2="" in="" all="" vaccination="" cohorts="" in="" both="">
Наиболее часто сообщаемой реакцией была боль в месте инъекции (таблица 3; приложение 4, стр. 22–28). Возьмем, к примеру, группу 3 мкг, случаи побочных реакций в течение 28 дней после третьей дозы при первичных трехдозовых схемах были у пяти (9 процентов) из 55 участников в когорте 1a-14d-2 m и трое (6 процентов) из 54 участников когорты 2a-28d-2m; не выше частоты побочных реакций в течение 28 дней после каждой предыдущей дозы (таблица 3; приложение 4 стр. 22–23, 25–26). Общая частота любых побочных реакций в течение 28 дней после бустерной дозы (3 мкг) составила десять (18 процентов) из 55 участников в когорте 1b-14d-8m, восемь (15 процентов) из 52 в когорте 2b-28d-8m и пять (6 процентов) из 90 в когорте 3-28d-8m (таблица 3; приложение 4, стр. 24, 27–28). ).
Серьезные нежелательные явления были зарегистрированы у одного (2 процента) из 60 участников в группе 3 мкг и у двух (3 процентов) из 60 участников в группе 6 мкг в когорте 1a-14d-2m, в два (3 процента) из 60 участников в группе 3 мкг и два (3 процента) из 60 в группе 6 мкг в когорте 1b-14d-8m, и ни один участник в группе 30 мкг группе и одному (2 процента) из 60 в группе 6 мкг в каждой из когорт 2a-28d-2m и 2b-28d-8m (приложение 4, стр. 29). –30). Ни один из участников группы плацебо не сообщил о серьезных нежелательных явлениях. С начала иммунизации до 28 дней после дозы 3 в когорте 3-28d-8m десять (10 процентов) из 100 участников в группе 1,5 мкг, пять (5 процентов) из 101 в группе в группе 3 мкг, у семи (7 процентов) из 99 в группе 6 мкг и у двух (4 процентов) из 49 в группе плацебо были серьезные побочные эффекты без летального исхода (Приложение 4, стр. 30–31). Исследователи не сочли, что серьезные нежелательные явления в обоих испытаниях были связаны с вакцинацией, и не были соблюдены заранее установленные правила прекращения испытаний.
добавка цистанхе повышает иммунитет
Обсуждение
Наше исследование показало, что первоначальный ответ нейтрализующих антител на две дозы CoronaVac снизился почти до нижнего предела серопозитивности или ниже его через 6 месяцев. Третья доза CoronaVac (3 мкг), введенная через 8 месяцев после второй дозы, привела к сильному повышению иммунитета, при этом GMT нейтрализации увеличился примерно до 140 среди взрослых в возрасте 18–59 лет и до 159 среди взрослых в возрасте 60 лет и старше 14–28 лет. дней после ревакцинации.
Это увеличение соответствует приблизительно трехкратному или пятикратному увеличению титров нейтрализующих антител по сравнению с титрами через 28 дней после введения второй дозы. Серопозитивность через 28 дней после третьей дозы через 8 месяцев составила 98–100% независимо от возрастной группы. Напротив, третья доза вводится через 2 месяца после того, как вторая доза вызвала гораздо более низкие титры нейтрализующих антител. Реактогенность третьей дозы была неотличима от реактогенности двух предыдущих доз независимо от возрастной группы. Снижение с течением времени индуцированных вакциной нейтрализующих антител против наследственного SARS-CoV-2 наблюдалось с другими вакцинами против COVID-19, но в гораздо меньшей степени.
Например, после вакцинации мРНК-1273 вакциной Moderna нейтрализующие антитела снижались, но оставались обнаруживаемыми у всех участников на 90-й и 180-й дни после введения второй дозы. В-клетки обнаруживаются у большинства пациентов с COVID-19 и у людей, ранее не инфицированных SARS-CoV-2, после получения двух доз вакцин против COVID-19.27,28 Это исследование является первым. чтобы показать, что ответ антител, опосредованный третьей дозой CoronaVac, введенной через 2 месяца после второй дозы, восстановился лишь умеренно и снизился почти до серопозитивного порога через 6 месяцев.
Это наблюдение, вероятно, связано с тем, что интервал между двумя дозами был коротким, а В-клетки памяти были незрелыми. Тем не менее, третья доза CoronaVac, введенная через 8 месяцев после второй дозы, по-видимому, эффективно увеличивает силу, широту и вероятную продолжительность анамнестических ответов против SARS-CoV-2.29 По сравнению с 3 мкг препарата CoronaVac, который одобрен для использования, препарат 1,5 мкг продуцировал аналогичные титры нейтрализующих антител к 28 дню после третьей дозы у взрослых в возрасте 60 лет и старше. Вопрос о том, может ли препарат 1,5 мкг служить бустерной дозой, нуждается в дальнейшем изучении из-за небольшого размера выборки при анализе этой дозы (28 участников).
Для других вакцин сообщалось о значительном восстановлении концентрации антител, вызванном гомологичными бустерными дозами. Титры нейтрализации наследственного SARS-CoV-2 увеличились примерно в четыре раза после введения гомологичной бустерной дозы по сравнению с титрами после первичной серии с мРНК BNT162b2,10-1273,11 и NVX-CoV2373,12 с такими же длительными интервалами (6–8 месяцев) между бустерной дозой и первичной вакцинацией.
Девятикратное увеличение антител, связывающих шиповидный белок, наблюдалось после 6-месячного введения гомологичной бустерной дозы Ad26.COV2-S.30. Гетерологичные схемы первичной бустерной вакцинации, по-видимому, вызывают более высокий уровень иммунного ответа, чем гомологичные бустерные дозы. Вакцинация мРНК-вакцинами и вакцинами на основе аденовируса31,32 или инактивированными вакцинами и вакцинами на основе аденовируса33 продемонстрировала сильный кратковременный иммунный ответ и переносимую реактогенность.
Ванлапакорн и его коллеги34 обнаружили, что у реципиентов вакцин CoronaVac и AZD1222 была более высокая активность нейтрализующих антител против исходного вируса дикого типа и вызывающего озабоченность бета-варианта (B.1.351), чем у реципиентов двух доз CoronaVac или AZD1222, что позволяет предположить, что гетерологичная иммунизация может рассматриваться как альтернатива гомологичной бустерной иммунизации в программах иммунизации. Долгосрочная эффективность бустерной вакцины остается неоцененной из-за новизны дозирования бустерной вакцины против COVID-19.
SARS-CoV-2 продолжает развиваться и продуцировать варианты, среди которых дельта-вариант стал преобладающим.9 Хотя мы не проводили тестирование нейтрализации in vitro против возникающих вызывающих озабоченность вариантов, предполагается, что высокие титры нейтрализующих антител против предкового штамма важно для защиты от новых циркулирующих вариантов SARS-CoV-2, которые потенциально могут привести к ускользанию от иммунного ответа.35 В нескольких исследованиях сообщалось о титрах нейтрализации in vitro против вариантов CoronaVac, но результаты сильно различались. Вахаратит и его коллеги, используя анализ микронейтрализации живого вируса, выявили 22-кратное и 32-кратное снижение нейтрализующих антител против бета- и дельта-вариантов соответственно по сравнению с предковым SARS-CoV-2 .36 Ван и его коллеги сообщили о трехкратном снижении титров нейтрализующих антител против бета-варианта с помощью анализа нейтрализации псевдовируса.37 В другом исследовании сообщалось о 5·7-кратном, 4·3-кратном и 3-кратном ·7-кратное снижение титров нейтрализующих антител против бета-, гамма- (P.1) и дельта-вариантов соответственно.29
Следует отметить, что трудно напрямую сравнивать эти оценки из-за различий в дизайне исследований и лабораторных методах.38 Определение способности CoronaVac нейтрализовать возникающие варианты и оценка уровня защиты в группах риска, таких как лица с ослабленным иммунитетом или пожилые люди, являются важными исследованиями. усилия. Снижение эффективности мРНК-вакцин против инфекции SARS-CoV-2 с циркулирующими вариантами наблюдалось в реальных исследованиях в США, но эффективность в отношении госпитализации сохранялась39,40.
Две дозы CoronaVac показали хорошую эффективность в условиях одновременно циркулирующих альфа- и гамма-вариантов в Чили: вакцина была эффективна на 66% против COVID-19 и почти на 90% эффективна при тяжелых исходах19. контрольное исследование, проведенное в Бразилии, показало, что скорректированная эффективность вакцины против госпитализации у пожилых людей во время обширной передачи гамма-варианта превышала 55 % [20]. Во время локальных вспышек, вызванных дельта-вариантом в Китае, два исследования с небольшим размером выборки показали, что инактивированные вакцины были на 70,2 % эффективны против заболеваний средней или тяжелой степени тяжести41 и могли снизить риск прогрессирования заболевания до тяжелой формы на 88 %.22 Необходимо постоянно оценивать защиту от вариантов и устойчивость защиты с помощью CoronaVac в реальных условиях. исследования. Промежуточные результаты защиты от бустерных программ в Израиле показали, что бустерные дозы эффективно снижают прорыв инфекции, в том числе прорыв дельта-варианта.14
Принимая во внимание устойчивую защиту первичной иммунизации вакцинами против COVID-19 от тяжелых исходов42 и справедливость в распределении вакцин, ВОЗ в настоящее время отдает приоритет завершению первичной иммунизации, а не стратегиям бустерных доз, чтобы защитить больше людей от COVID-19 из-за глобальной нехватки поставки вакцин против COVID-19,43 хотя Центры по контролю и профилактике заболеваний США выпустили рекомендации по ревакцинации для определенных групп населения.44 Во время испытаний участники были замаскированы для назначения в исследовательскую группу, а участники в группах плацебо могли быть вакцинированы немедленно. после завершения фазы 2 исследования для взрослых в возрасте 18–59 лет и завершения последующего наблюдения в течение 28 дней после бустерной дозы для взрослых в возрасте 60 лет и старше. Поскольку строгие немедикаментозные вмешательства до настоящего времени сохранялись в материковом Китае, риск заражения был очень низким для участников группы плацебо.
Сохранение групп плацебо до конца испытания было одобрено Комитетом по этике провинции Цзянсу (JSJK2020-A021–02) и Комитетом по этике CDC провинции Хэбэй (IRB2020–006). Наше исследование имеет несколько ограничений. Во-первых, для успешной вакцины против COVID-19 может быть важно формирование специфической иммунной памяти, специфичной для белка SARS-CoV-2, в дополнение к индукции стойких антител. Например, Т-клеточный иммунитет, вызванный инактивированными вакцинами, может способствовать защите.45,46 Однако в нашем исследовании не оценивались ответы Т-клеток и тесты нейтрализации in vitro против появляющихся вариантов, и они нуждаются в дальнейшем изучении.
Во-вторых, мы сообщаем о результатах промежуточных анализов, и продолжается долгосрочное наблюдение для определения удовлетворительной продолжительности иммунитета, вызванного бустерной дозой, и для оценки долгосрочной безопасности. В-третьих, в этом исследовании не оценивалась популяция с наибольшим риском иммуностарения (т. е. взрослые в возрасте 80 лет и старше). Потребуются более крупные многоцентровые исследования для оценки первичных исходов среди субпопуляций, доля которых в нашем исследовании была относительно небольшой. В-четвертых, хотя нейтрализующие антитела связаны с защитой, фактическую защиту от заражения текущими и появляющимися вариантами необходимо контролировать с помощью обсервационных исследований в реальном мире. Важны дальнейшие исследования для выявления коррелятов защиты и определения того, имеют ли разные вакцины разные корреляты. В заключение, наше исследование показало, что схема CoronaVac с двумя дозами создает хорошую иммунную память.
Хотя титры нейтрализующих антител снизились почти или ниже нижнего предела серопозитивности через 6 месяцев после второй дозы, третья доза, введенная через 8 месяцев после второй дозы, оказалась высокоэффективной для восстановления специфического иммунного ответа на SARS-CoV-2-, что привело к к значительному восстановлению уровня антител. Наше исследование показывает, что гомологичная бустерная доза может обеспечить более продолжительный иммунитет и более высокий уровень защиты, чем схема с двумя дозами, но необходимы дополнительные исследования для мониторинга нейтрализующей способности и эффективности против вариантов.
Авторы
GZ, QW, HP, ML, JY, YZ, FZ, HY и WY разработали исследование и внесли свой вклад в сбор данных, анализ данных, интерпретацию данных и написание рукописи. GZ, QW, HP и ML проверили данные. ZW, KC, LeW и BH собрали данные и отредактировали рукопись. DJ и LiW провели лабораторные анализы и отредактировали рукопись. XD, WZ и WL проанализировали данные и отредактировали рукопись. Все авторы имели полный доступ ко всем данным (включая статистические отчеты и таблицы) в исследовании и несут ответственность за целостность данных и точность анализа данных. Все авторы несут окончательную ответственность за решение представить рукопись для публикации.
Декларация интересов
HY получила финансирование исследований от Sanofi Pasteur, GlaxoSmithKline, Yichang HEC Changjiang Pharmaceutical Company и Shanghai Roche Pharmaceutical Company; никакое финансирование этих исследований не связано с разработкой вакцин против COVID-19. GZ, LeW и WY — сотрудники Sinovac Biotech, а LiW и DJ — сотрудники Sinovac Life Sciences. Все остальные авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
Благодарности
Исследование было поддержано грантами Национальной ключевой программы исследований и разработок (2020YFC0849600), Пекинской научно-технической программы (Z201100005420023) и Ключевой программы Национального фонда естественных наук Китая (82130093). Мы благодарим доктора Ланса Родевальда из Китайского центра по контролю и профилактике заболеваний за его комментарии и редактирование на английском языке.
