Часть 2: Идентификация дофаминергических нейронов, которые могут как устанавливать ассоциативную память, так и резко прекращать ее поведенческое выражение

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Анализ дендрограммы. Дендрограммы нейронов представляют собой 2D-схемы 3D-реконструкций нейронов из Eichler et al. (2017). Как «линеаризованные», уплощенные версии морфологически сложных нейронов, дендрограммы представляют собой компактные визуализации, которые служат для отображения пространственного распределения синапсов. Детали алгоритма построения дендрограммы описаны Strauch et al. (2018). Вкратце, дендрограммы представляют собой топологически правильные эскизы нейронов с доминирующей первичной ветвью, нарисованной в виде прямой линии, и более короткими боковыми ветвями, отклоненными под стереотипными углами и направленными вверх и вниз попеременно, чтобы избежать перекрытия. Они нарисованы таким образом, чтобы расстояния по длине кабеля и положения синапсов были приблизительно правильными. Незначительные модификации для улучшения удобочитаемости включают автоматическую перестановку символов синапсов для устранения беспорядка и перекрытия (Strauch et al., 2018).

Для анализа синаптической организации мы вычислили (синапсную) матрицу расстояний, содержащую геодезические расстояния (т. е. расстояние как «длину кабеля» вдоль нейрона) между местоположениями всех синапсов на нейроне. Геодезические расстояния вычислялись как евклидовы расстояния в трехмерных координатах реконструированного нейрона путем обхода ветвей нейрона. Мы сгруппировали местоположения синапсов с кластеризацией разделительного анализа (DIANA) (Kaufman, 2005), работающей на матрице геодезических расстояний. Основываясь на анализе оценки силуэта, мы установили количество кластеров на нейрон равным 10. Кластеры, которые не содержали все четыре интересующих класса синапсов (KC!DAN-i1, DAN-i1!KC, DAN-i1!MBON-i1 слева, DAN-i1!MBON-i1 справа) были исключены из анализа. Для каждого кластера центральная точка была определена как самый центральный синапс кластера, как определено путем разделения вокруг кластеризации медоидов (PAM с кластером k=1) (Kaufman, 2005) на основе геодезических расстояний синапсов внутри кластера. Наконец, мы определили геодезические расстояния между всеми синапсами и центральной точкой кластера.

Цистанхе может улучшить память

План эксперимента и статистический анализ. Использовались двусторонние непараметрические тесты, и статистические допущения для этих тестов полностью выполнялись. Когда в рамках одного анализа выполнялось несколько сравнений, применялась поправка Бонферрони-Холма, чтобы удерживать уровень ошибок в масштабе всего эксперимента на уровне 5 % (Holm, 1979). Все выполненные статистические тесты и их результаты представлены на рис. 1-1 расширенных данных вместе с исходными данными.

Для всех поведенческих экспериментов значения сравнивались в нескольких группах с помощью тестов Крускала-Уоллиса. В случае значимости последующие попарные сравнения использовали U-критерий Манна-Уитни. Чтобы проверить, отличаются ли значения данной группы от нуля, использовались одновыборочные знаковые тесты.

Эксперименты на рисунках 1, 6C-F и 8 проводились по двухгрупповому плану, в котором сравнивались два условия тестирования для экспериментального генотипа. Обе группы сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни, а их значимость от нуля проверяли с помощью одновыборочных знаков.

Эксперименты на рисунках 6A, B проводились по шестигрупповой схеме с тремя генотипами (экспериментальный генотип, экспрессирующий ChR2-XXL, драйвер и эффекторный контроль) и двумя условиями тестирования. Во-первых, во всех группах был проведен тест Крускала-Уоллиса. В случае значимости проводили попарные U-тесты Манна-Уитни между экспериментальным генотипом и каждым из генетических контролей одного и того же условия тестирования, а также между условиями тестирования экспериментального генотипа (всего пять U-тестов Манна-Уитни). . Каждая группа была проверена на ее значимость с нуля одновыборочными знаковыми тестами.

Эксперименты на Фигуре 7 проводились по схеме с тремя группами с животными экспериментального генотипа, экспрессирующими ChR2-XXL. После первоначального теста Крускала-Уоллиса для всех групп мы провели попарные U-тесты Манна-Уитни для группы без воздействия синего света после тренировки и для обеих других групп. Значимость от нуля была проверена для каждой группы (одновыборочные знаковые тесты).

Эксперименты на фиг. 9 и 10 проводились по четырехгрупповой схеме с животными экспериментального генотипа, экспрессирующего ChR2-XXL. После начального теста Крускала-Уоллиса во всех группах мы провели парные U-тесты Манна-Уитни между группами, которые прошли парное и непарное обучение в одном и том же тестовом режиме, и между тестовыми условиями для данного вида обучения (всего четыре Манна-Уитни). У тесты). Одновыборочные знаковые тесты не проводились.

Мы представляем поведенческие данные в виде диаграмм с медианой в виде средней линии и 25%/75% и 10%/90% в виде границ и усов соответственно. Выбросы не отображаются. Экспериментаторы были слепы к генотипу и к отсутствию или наличию сахарного вознаграждения во время теста отзыва, если это применимо. Размеры выборки (биологические повторения) были выбраны на основе предыдущих исследований, показывающих умеренные и легкие размеры эффекта (Paisios et al., 2017; Saumweber et al., 2018) и отображены в подписях к рисункам. Размер выборки включал n =1; 20 животных обоих полов для всех экспериментов с врожденными предпочтениями и 2 20 животных (по 20 для каждой группы взаимного обучения) обоих полов для всех экспериментов по обучению.

Чтобы сравнить количество синапсов между ипсилатеральной и контралатеральной сторонами нейронов MBON-i1 (см. рис. 3A), мы проверили их распределение с помощью тестов x2, отдельно для синапсов KC!MBON-i1 и DAN-i1!MBON-i1. Чтобы сравнить расстояния синапсов до центра их соответствующей центрально-окружающей структуры на нейроне DAN-i1 (см. рис. 4C, D), мы выполнили тесты Краскела-Уоллиса для всех типов синапсов, а также попарно Манна-Уитни U тесты между всеми типами синапсов (всего 6 U-тестов Манна-Уитни), отдельно для левого и правого нейрона DAN-i1.

Полученные результаты

Пространственное расположение синапсов в матрице DAN-KC-MBON

Недавняя электронно-микроскопическая реконструкция полной схемы грибовидного тела личинки выявила коннектом DAN, KC и MBON на основе количества химических синапсов между ними (Eichler et al., 2017). Аксональные ветви

Рисунок 3. Организация синаптических входов в нейрон MBON-i1. Количество синапсов KC!MBON-i1 и DAN-i1!MBON-i1 с каждым нейроном MBON-i1, разделенных полушариями. Оба нейрона MBON-i1 имеют больше синапсов с этими KC, и этот DAN-i1 расположен в полушарии, противоположном телу их клетки. * Значимые тесты x2 (p, 0.05, с поправкой на Bonferroni-Holm). Данные взяты из Eichler et al. (2017). B, полусхематический обзор распределения синапсов от ипсилатерального и контралатерального полушария до MBON-i1. KCs и оба нейрона DAN-i1 образуют больше синапсов с контралатеральной частью MBON-i1, чем с ее ипсилатеральной частью. C, Распределение количества зрелых KC, образующих указанное количество синапсов с левым или правым нейроном MBON-i1. KC из левого полушария образуют меньше синапсов с левым, чем с правым нейроном MBON-i1 (слева). KC из правого полушария, наоборот, образуют больше синапсов с левым, чем с правым MBON-i1 (справа). Учитывая, что КС не пересекают срединную линию, все синапсы, например, правого MBON-i1, образованного с КС левого полушария, располагаются на части MBON-i1, контралатеральной по отношению к телу его клетки. D. Несмотря на то, что нейроны MBON-i1 получают меньше входных данных от KC полушария, ипсилатерального по отношению к телам их клеток, чем от контралатерального полушария, оба нейрона MBON-i1 получают информацию о полном пространстве входов KC в любом полушарии. Чтобы определить взаимосвязь между MBON-i1 и сенсорным вводом, проецируемым на KC, общий ввод, который MBON-i1 получает от KC, которые, в свою очередь, получают свой ввод от унигломерулярных обонятельных проекционных нейронов (PN) (белые и темно-серые), многоклубочковые обонятельные PN (светло-серый) и необонятельные PN (черный) учитывались для расчета матричного произведения соответствующих синапсов PN!KC и KC!MBON-i1. Это было сделано отдельно для левого MBON-i1 и его соединений с правыми (т.е. контралатеральными) KC (сверху слева) и с левыми (т.е. ипсилатеральными) KC (сверху справа) и, соответственно, для MBON-i1 справа ( нижний). Данные основаны на Eichler et al. (2017). Все статистические тесты и их результаты представлены вместе с исходными данными на рисунке расширенных данных 1-1.

отдельные DAN и дендритные ветви отдельных MBON ограничены и перекрываются внутри определенных компартментов вместе с пучками аксонов KC (личинки: Pauls et al., 2010;

Эйхлер и др., 2017; Саумвебер и др., 2018; Эшбах и др., 2020 г.; взрослые: Aso et al., 2014a; Такемура и др., 2017). DAN-i1 иннервирует i-й отдел медиальной доли грибовидного тела (иногда называемый верхним пальцем медиальной доли). Реконструкция показала, что он не только сигнализирует KCs, но на самом деле имеет две основные мишени: KCs и MBON-i1 (Fig. 2A, B) (Eichler et al., 2017). Соответственно, у MBON-i1 есть два основных восходящих партнера: KC и DAN-i1. Сходная организация DAN и MBON обнаруживается в компартментах грибовидного тела (личинки: Eichler et al., 2017; взрослые особи: Takemura et al., 2017). В частности, для DAN-i1 75 процентов и 21 процент его выходных синапсов в грибовидном теле соединяются с KC и MBON-i1 соответственно, а MBON-i1 получает; 74 процента и 14 процентов его входных синапсов в грибовидном теле от KCs и DAN-i1 соответственно (Eichler et al., 2017; Saumweber et al., 2018). Хотя такие анализы во многом информативны, они не учитывают пространственное расположение синапсов вдоль нейронов. Чтобы пролить свет на это расположение в i-компартменте, мы используем дендрограммы, которые позволяют нам отображать сложный трехмерный гештальт нейрона в виде двухмерного эскиза, который фиксирует его структуру ветвления, сохраняет длины ветвей и определяет расположение синапсов вдоль ветвей ( Штраух и др., 2018). Такой подробный анализ превосходит разрешение, с которым в настоящее время можно манипулировать нейронами у свободно ведущих себя животных (Aso and Rubin, 2020). Тем не менее, они дают представление о реальной сложности изучаемых нейронов и о вычислительных последствиях мотивов цепей, частью которых они являются (см. также Bilz et al., 2020). Из нашего анализа мы выделяем следующие моменты (изображения с высоким разрешением нейронов DAN-i1 и MBON-i1 из обоих полушарий, а также всех зрелых KC доступны на рисунках расширенных данных. 2-1, 2-2 и 2-3 соответственно):

• Как DAN-i1, так и MBON-i1 имеют массивные межполушарные связи. Это примечательно, учитывая, как мало межполушарных перекрестных помех в других случаях наблюдается вдоль восходящих путей, включая KC (рис. 2A) (Berck et al., 2016; Eichler et al., 2017; Saumweber et al., 2018; Thum and Gerber, 2019). ). В частности, оба нейрона DAN-i1 реципрокно связаны с наиболее зрелыми KC в обоих полушариях. Более того, нейроны DAN-i1 обеспечивают выходной сигнал для обоих нейронов MBON-i1, как ипсилатерально, так и контралатерально (рис. 2E; изображения обоих нейронов DAN-i1 с высоким разрешением см. на рис. 2-1 с расширенными данными). Это означает, что каждый нейрон MBON-i1, в свою очередь, получает входные данные от обоих нейронов DAN-i1, как ипсилатерально, так и контралатерально (рис. 2F; изображения обоих нейронов MBON-i1 с высоким разрешением см. на рис. с расширенными данными {{28). }}). Точно так же нейроны MBON-i1 получают входные данные от большинства зрелых KC в обоих полушариях (Eichler et al., 2017) и обеспечивают выходные данные за пределами грибовидного тела, также в обоих полушариях. Дендрограммы более конкретно показывают, что выходы от DAN-i1 на нейрон MBON-i1 ипсилатерального и контралатерального полушария перемешаны, как и входы на MBON-i1 от нейрона DAN-i1 ипсилатерального и контралатерального полушария (рис. 2Д,Е). Примечательно, что MBON-i1 не является полусферически симметричным с точки зрения количества синапсов, которые он получает в грибовидном теле: оба нейрона MBON-i1 получают больше синапсов в полушарии, противоположном телам их клеток (рис. 2F, 3A, B); тем не менее, оба нейрона MBON-i1 получают информацию о полном сенсорном входном пространстве в любом полушарии (Fig. 3C,D).

цистанхе фарма специальный

• Шаблоны ветвления как DAN-i1, так и MBON-i1 структурированы в несколько основных областей. Для DAN-i1 можно выделить три таких основных региона. Начиная с тела клетки, в первой области DAN-i1 получает входные данные от своих партнеров из-за пределов грибовидного тела (отмечено цифрой 1 на рис. 2C–E) (Eschbach et al., 2020), тогда как вторая и третья области совпадают с i-м отделом ипсилатерального и контралатерального грибовидного тела соответственно (обозначены цифрами 2 и 3 на рис. 2C–F). В грибовидном теле DAN-i1 взаимно соединен с KC и обеспечивает вывод в сторону MBON-i1. Первичный нейрит MBON-i1 пересекает среднюю линию, и затем нейрон иннервирует i-компартмент грибовидного тела, противоположный телу его клетки (область, отмеченная цифрой 3 на рис. 2C-F); здесь он в основном получает входные данные от KC и DAN-i1. Затем MBON-i1 пересекает среднюю линию и аналогичным образом иннервирует грибовидное тело, ипсилатеральное по отношению к его клеточному телу (область, отмеченная цифрой 2 на рис. 2C-F). Кроме того, MBON-i1 имеет несколько небольших ветвей в обоих полушариях, которые соединяются с партнерами, расположенными близко к грибовидному телу, но непосредственно снаружи.

• Внутри этих областей не могут быть идентифицированы отделы, подобные компартментам, которые распознаются в нейронах DAN-i1 и MBON-i1 обоих полушарий (рис. 2E, F; рис. с расширенными данными 2-1, {{7). }}). Однако для нейронов DAN-i1 очевидны множественные латерально «идиосинкразические» богатые синапсами центрально-окружающие структуры (рис. 4). Ближе к их центру обнаруживаются все упомянутые выше типы синапсов матрицы DAN-KC-MBON, тогда как их окружение имеет почти исключительно синапсы KC!DAN (рис. 4). Примечательно, что любой данный KC обычно устанавливает все свои синапсы только в одной или двух из этих центрально-окружающих структур (рис. расширенных данных 1-1).

• Что касается зрелых KC, 86 процентов и 88 процентов из них образуют синапсы с левым и правым нейроном DAN-i1 соответственно, а 78 процентов и 74 процента - с левым и правым нейроном MBON-i1 соответственно. Отдельные KC имеют медианы из 4 синапсов KC!DAN-i1, 4 DAN-i1!KC и 5 KC!MBON-i1 (Eichler et al., 2017; более подробную информацию о DAN-i1 см. в Saumweber et al., 2018). ). Согласно дендрограммам всех отдельных КС, КС!ДАН-i1, ДАН-i1!КС и КС! Синапсы MBON-i1, по-видимому, перемешаны без видимых разделений по массиву KC, как и синапсы с левым и правым нейронами DAN-i1, а также с левым и правым нейронами MBON-i1 (Extended DataFig. 2-3).

Вместе эти анализы раскрывают подробную пространственную организацию матрицы DAN-KC-MBON i-го отдела. Следует отметить, что синапсы DAN-i1 с двумя его основными мишенями, KCs и MBON-i1, локально перемешаны внутри множества богатых синапсами структур вдоль аксональных ветвей DAN-i1, а не разделены между ними. рис. 2E, 4; рис. расширенных данных 2-1). Такая архитектура может означать, что DAN-i1 доставляет коррелированные, а не независимо модулированные сигналы к KC и MBON-i1 в этих богатых синапсами структурах.

Активация одних и тех же нейронов может установитьПамятьи прекратить его отзыв

Нас заинтриговал тот факт, что DAN-i1 имеет две основные цели, а именно KC и MBON-i1; что его синапсы с этими двумя мишенями так тесно переплетены; и что естественное вознаграждение имеет две функции, а именно, установитьПамятьв обучении и резко прекратить поведенческое выражение этогоПамятьво время теста на припоминание (рис. 1А) (Гербер и

Рисунок 4. Организация синапсов на нейроне DAN-i1. Кластерный анализ показал, что синапсы от и к левому нейрону DAN-i1 в областях 2 и 3 (см. рис. 2) организованы в шесть кластеров (обозначенных как 29 299 и т. д.). Эти кластеры, по-видимому, имеют организацию центр-окружение: ближе к их центру обнаруживаются синапсы DAN!KC, KC!DAN и DAN!MBON, тогда как их окружающие элементы представляют собой почти исключительно синапсы KC!DAN. B, То же, что и в A, но для правого нейрона DAN-i1. Можно выделить семь центрально-окружающих структур. C. Чтобы количественно оценить эту организацию синапсов, мы определили расстояние (в длине кабеля вдоль нейрона) различных типов синапсов до центра их соответствующего кластера и обнаружили, что синапсы KC!DAN находятся дальше от центра, чем все другие типы синапсов. синапсов. Это подтверждает организацию кластеров как центрально-окружающих структур. D. То же, что и в C, но для правого нейрона DAN-i1. E, Схематический рисунок центрально-окружающей структуры (вверху) и увеличенное изображение соединений в центре (внизу). Различные надписи над диаграммами указывают на попарную значимость (U-критерий Манна-Уитни, p, 0.05, с поправкой по Бонферрони-Холму). Все статистические тесты и их результаты представлены вместе с исходными данными на рисунке расширенных данных 1-1.

цистанхе фарма специальный

Хендель, 2006 г.; Шлейер и др., 2011, 2013, 2015a,b, 2018; Паисиос и др., 2017). Поэтому мы задались вопросом, может ли оптогенетическая активация DAN при обучении и во время теста выполнять эти две функции. Мы начали с использования драйверного штамма 58E02- Gal4, который покрывает DAN-i1 плюс два DAN, иннервирующих другие отделы медиальной доли (рис. 5A, B) (Rohwedder et al., 2016), и UAS-ChR{ {14}}XXL в качестве эффекторного штамма (Dawydow et al., 2014). 58E02-DAN активировались либо в паре, либо без пары с запахом при обучении, а разница в предпочтениях запаха в последующем тесте на припоминание использовалась для количественной оценки ассоциативных связей.Памятьчерез ИП. Мы наблюдали положительные показатели PI, указывающие на ассоциативный аппетит.Памятьв экспериментальном генотипе, тогда как генетический контроль, гетерозиготный либо только по трансгенному эффектору, либо по конструкции-драйверу, не показалПамять(Рис. 6A, верхние диаграммы, закрашенные черным цветом) (Rohwedder et al., 2016). Таким образом, активация 58E02-DAN во время обучения может служить сигналом вознаграждения для ассоциативныхПамятьформирование.

Затем мы повторили эксперимент, но также активировали 58E02-DAN во время теста на припоминание. При этом уменьшаются значения PI (т. е. уменьшаетсяПамять-основанный поиск) примерно до половины (рис. 6А, верхние диаграммы, закрашенные синим цветом; повторение этого результата см. на рис. 6С). Важно отметить, что, как и в случае естественного вознаграждения (рис. 1B) (Schleyer et al., 2011, 2015a,b), активация 58E02-DAN не влияла на врожденное обонятельное поведение (рис. 6A, внизу). Таким образом, активация 58E02- DAN также может обеспечить сигнал о резком прекращении поиска во время теста на припоминание.

Предыдущие эксперименты показали, что три 58E02- DAN могут давать те же два сигнала в качестве естественного вознаграждения (т. е.

Рисунок 5. Характер экспрессии трансгена драйверных штаммов 58E02-DAN и 864-DAN. A, B, Предыдущий анализ драйверной линии 58E02-DAN, основанный на выворачивании, идентифицировал нейроны DAN-h1, DAN-i1 и DAN-j1 (также называемые pPAM1, pPAM3 и pPAM4), как а также один дополнительный нейрон вне тела гриба (Rohwedder et al., 2016). Эта закономерность была подтверждена: штамм-драйвер был скрещен либо с (A1-A5) pJFRC-10xUAS-IVS-mCD8::GFP, либо с (B1-B4) UAS-ChR{{ 27}}XXL. A1, B1, сигнал антитела a-GFP или a-ChR соответственно. A2, B2, Сигнал фонового окрашивания через антитела а-FASII или а-HRP соответственно. A3, B3, слияние соответствующих сигналов. A4, B4, Частичная z-проекция показывает сильную иннервацию медиальной доли грибовидного тела. A5, Иннервация латерального отростка не обнаружена (стрелка). C, D. Сообщается, что драйверный штамм 864-DAN сильно экспрессируется в DAN-i1 (Saumweber et al., 2018). Здесь мы скрестили его либо с (C1-C5) pJFRC-10xUAS-IVS-mCD8::GFP, либо с (D1-D4) UAS-ChR2-XXL. C1, D1, сигнал антитела a-GFP или a-ChR соответственно. C2, D2, Сигнал фонового окрашивания через антитела а-FASII или а-HRP соответственно. C3, D3, слияние соответствующих сигналов. C4, D4, Частичная z-проекция показывает сильную иннервацию i-компартмента в обоих полушариях (стрелки), подтверждая экспрессию в DAN-i1. C5. Как сообщалось ранее (Saumweber et al., 2018), драйверный штамм иногда экспрессируется в дополнительных нейронах, но если это так, то обычно только в одном полушарии мозга и в нейронах, различающихся по идентичности между препаратами. Относительно чаще всего мы наблюдали нейрон MBON-d1, иннервирующий латеральный отросток в одном полушарии (стрелка). У нескольких животных, использованных для нашего группового анализа, такая стохастическая дополнительная экспрессия вряд ли вызовет систематические эффекты.

сигнал вознаграждения во время обучения и сигнал завершения поиска во время теста на припоминание). Однако остается неясным, передает ли каждый из трех DAN оба сигнала, или же существует разделение труда, при котором разные DAN отвечают за сигнал вознаграждения и сигнал завершения поиска. Поэтому мы выбрали расщепленный драйверный штамм Gal4 864, который поддерживает сильную и надежную экспрессию трансгена только в одном из DAN, покрытых 58E02-DAN, нейроне DAN-i1, в обоих полушариях ( Рис. 5C, D) (Saumweber et al., 2018). Активация ассоциативной 864-ДАН в процессе обучения установила положительные показатели работоспособности (т.е.Памятьпоиск на основе; Рис. 6B, верхние диаграммы, закрашенные черным цветом) (Saumweber et al., 2018). Активация 864-DAN также во время теста отзыва прекратила этоПамятьпоиск на основе (рис. 6B, верхние диаграммы, закрашенные синим цветом). Три независимых набора данных подтверждают наблюдение за снижением настройки поиска (рис. 6D–F). Активация 864-DAN не влияла на врожденное обонятельное поведение (рис. 6B, внизу).

Ранее было обнаружено, что активность DAN между обучением и тестом на припоминание (т. е. в течение периода удержания) способствует забыванию у взрослых D. melanogaster (Berry et al., 2012, 2015; Shuai et al., 2015; Aso). и Рубин, 2016). Поэтому мы задались вопросом, будет ли в нашей парадигме активность 864-DAN способствовать забыванию, а не резкому прекращению поиска на основе памяти и выходу из памяти.Памятьнетронутый. Чтобы проверить эту возможность, личинок, как и прежде, обучали, но перед отзывом

Рисунок 6. Активация одних и тех же нейронов может установитьПамятьи прекратить его отзыв. A Top, личинки были обучены с помощью запаха, представленного либо в паре, либо без пары с активацией 58E02-DAN синим светом. В тесте на припоминание положительные значения PI в экспериментальном генотипе, но не в генетическом контроле, указывают на усвоенное поисковое поведение, основанное на ассоциативной памяти запаха (крайний левый график). Таким образом, во время обучения активация 58E02-DAN может опосредовать сигнал вознаграждения.ПамятьПоиск экспериментального генотипа на основе анализа был снижен, когда 58E02-DAN также активировался синим светом во время теста на припоминание (крайний левый график, закрашенный синим цветом). Таким образом, активация 58E02 также может дать сигнал завершения поиска. Размер выборки: 16, 15, 17, 18, 15, 18. Внизу: личинки тестировались на врожденное предпочтение запаха либо в отсутствие, либо в присутствии синего света. Все генотипы одинаково сильно предпочитали запах в обоих условиях, что позволяет предположить, что активация 58E02-DAN не влияла на врожденное предпочтение запаха. Размер выборки: 24 каждая. B. То же, что и в A, но с активацией 864-DAN синим светом. Верх, Положительный PI, и, таким образом,Памятьпоиск, наблюдался только у экспериментального генотипа и только при проведении теста на припоминание в темноте. Размер выборки: 19, 19, 19, 19, 19, 20. Внизу активация 864-DAN не влияла на врожденное предпочтение запаха. Размеры выборки: 16 каждая. C, В повторении эксперимента, показанного на A (вверху) для экспериментального генотипа, личинки показалиПамятьПоиск в темноте. Когда 58E02-DAN был активирован синим светом во время теста на припоминание, этот поиск был отключен. Размеры образцов: 15, 16. D, В повторении эксперимента, показанного на B (вверху) для экспериментального генотипа, личинки проявлялиПамятьПоиск в темноте. Когда 864-DAN был активирован во время теста отзыва, этот поиск был прекращен. Размер выборки: 28, 28. E, В следующей повторности D тест проводился на чашке Петри с внутренним диаметром 9 см вместо 15 см.Памятьпоиск на основе во время теста на припоминание наблюдался в темноте и, в этом случае, был частично подавлен через активацию 864-DAN. Размер выборки: 22, 22. F, Личинки были обучены дифференциальной версии эксперимента с двумя запахами, с использованием н-амилацетата, разбавленного 1:50, и неразбавленного 1-октанола. Тест отзыва проводили на чашке Петри с внутренним диаметром 9 см.Памятьпоиск на основе наблюдался в темноте и был отключен с помощью активации 864-DAN. Размер выборки: 26, 26. Различные надписи над диаграммами указывают на попарную значимость (U-критерий Манна-Уитни, p,0.05, скорректированный по Бонферрони-Холму). * Значимость от нуля (одновыборочный знаковый критерий, p, 0.05, с поправкой по Бонферрони-Холму). ns: Незначительность во всех экспериментальных условиях (критерий Крускала-Уоллиса, стр. 0,05). Все статистические тесты и их результаты представлены вместе с исходными данными на рисунке расширенных данных 1-1.

Рис. 7. Активация 864-DAN между обучением и тестом на припоминание не способствует забыванию или угасанию. Группу личинок обучали, как показано на рисунке 6. Затем личинок выдерживали либо в темноте, либо при синем свете в течение 3 мин (ожидание) и впоследствии тестировали. Когда этот тест на припоминание проводился в темноте,Памятьпоиск на основе наблюдался независимо от условий освещения и, следовательно, независимо от активности 864-DAN на этапе ожидания (левый и средний прямоугольники). Мы подтвердили, что и после такого периода ожидания активация 864- DAN во время теста отзыва прекращается.Памятьоснованный на поиске (график справа). Размер выборки: 25, 24, 19. B, То же, что и в A, но на этот раз с запахом, присутствующим в течение периода ожидания. Размер выборки: 28 каждая. Различные надписи над диаграммами указывают на парную значимость (U-критерий Манна-Уитни, p, 0.05, с поправкой по Бонферрони-Холму). *Значимость от нуля (одновыборочный знаковый критерий, р=0,05, с поправкой по Бонферрони-Холму). Все статистические тесты и их результаты представлены вместе с исходными данными на рисунке расширенных данных 1-1.

цистанхе фарма специальный