Выбор и характеристика ингибиторов тирозиназы из корневища Atractylodis Macrocephalae на основе соотношения спектр-активность и молекулярного докинга

Copyright © 2021 Yong-Qin Liu et al. 2is — это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы.

Цистанхеимеет функцию стимулирования выработки коллагена, который может повысить эластичность и блеск кожи и помочь восстановить поврежденные клетки кожи.ЦистанхеФенилэтанолгликозиды оказывают значительное подавляющее действие на активность тирозиназы, и показано, что эффект на тирозиназу представляет собой конкурентное и обратимое ингибирование, что может обеспечить научную основу для разработки и использования отбеливающих ингредиентов в Cistanche. Следовательно, цистанхе играет ключевую роль в отбеливании кожи. Он можетингибировать выработку меланинадля уменьшения обесцвечивания и тусклости; и способствуют выработке коллагена для улучшения эластичности и сияния кожи. Из-за широкого признания этих эффектов цистанхе многие продукты для отбеливания кожи начали добавлять растительные ингредиенты, такие как цистанхе, для удовлетворения потребительского спроса, тем самым увеличивая коммерческую ценность цистанхе вотбеливание кожипродукты. Таким образом, роль цистанхе в отбеливании кожи имеет решающее значение. Его антиоксидантный эффект и эффект выработки коллагена могут уменьшить обесцвечивание и тусклость,улучшить эластичность и блеск кожи, и таким образом добиться отбеливающего эффекта. Кроме того, широкое применение цистанхе в продуктах для отбеливания кожи свидетельствует о том, что его роль в коммерческой ценности нельзя недооценивать.

Нажмите на органический цистанхе для отбеливания

Запросите дополнительную информацию: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Atractylodis macrocephalus Rhizoma (AMR) — это известное средство классической китайской традиционной медицины (CTM), которое на протяжении тысячелетий использовалось в качестве тонизирующего средства при многих заболеваниях. В древнем Китае его использовали в качестве прикорма для красоты во дворце. В предварительных исследованиях была обнаружена функция отбеливания кожи и значительное ингибирующее действие на тирозиназу (TYR), которая является реактивным ферментом в составе меланина AMR, и о соответствующих исследованиях редко сообщалось. В этом исследовании высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) вместе с частичным регрессионным анализом методом наименьших квадратов (PLS) применялась для изучения согласованности между химическими составляющими и ингибирующей активностью 11 партий AMR в отношении активности TYR. Результаты PLS показали, что хроматографические пики 11 (атрактиленолид III) и 15 могут быть важными эффективными ингредиентами для ингибирования активности TYR, что подтверждается зависимостью спектр-активность. Кроме того, ингибирующая активность атрактиленолида III в отношении TYR была подтверждена тестом in vitro с использованием -арбутина, служившего в качестве положительного контрольного препарата.результаты теста in vitro и молекулярного докинга показали, что атрактиленолид III обладает высокой ингибирующей активностью в отношении TYR и может связываться с остатками в каталитическом кармане TYR.таким образом, биоанализ, молекулярный докинг и отношения спектр-активность подходят для установления связи качества образцов с фармацевтическими активными ингредиентами. А наше исследование заложило бы теоретическую основу для применения водных экстрактов АМР в отбеливающей косметике.

1. Введение

Тирозиназа (TYR), называемая также полифенолоксидазой, представляет собой полифункциональный гликозилированный медьсодержащий фермент, широко присутствующий в организме животных, растений и микроорганизмов [1–3]. В присутствии молекулярного кислорода тирозин сначала катализируется TYR для окисления до дофа, а затем дополнительно окисляется до допахинона, который изомеризуется с образованием пигмента допа. Пигмент дофа в конечном итоге образует меланин с участием СО2 и ТРП-2, которые вызывают различные кожные заболевания, такие как гиперпигментация, меланодермия, веснушки и пигментные пятна [4, 5]. TYR играет жизненно важную роль, поскольку он является критическим ферментом и ферментом рестрикции в процессе композиции меланина [6–8]. Пигментные пятна и меланома заметно увеличивались при увеличении активности и количества TYR [9]. В настоящее время ингибиторы TYR получили широкое внимание в связи с их латентным использованием в качестве гипопигментирующих агентов [10].

Atractylodis macrocephalus rhizoma (AMR), сухое корневище Atractylodes macrocephalaKoidz., является одним из китайских растительных лекарственных средств, включенных в Китайскую фармакопею [11–15]. В древнем Китае AMR был выбран для формирования знаменитой классической формулы для отбеливания, называемой «Семь белых мазей», и использовался в качестве дополнительной пищи для красоты во дворце [16]. Сообщалось, что AMR в основном содержит сесквитерпеноиды и тритерпеноиды (включая атрактиленолид I, атрактиленолид II и атрактиленолид III), полиацетилены, кумарины и фенилпропаноиды, флавоноиды и флавоноидные гликозиды, полисахариды, стероиды, бензохиноны и другие компоненты [17, 18]. Однако о его влиянии на отбеливание кожи и активных ингредиентов сообщалось редко.изучение взаимосвязи спектр-активность было применено для изучения их актуальности.

Исследование связи спектр-активность может не только обойти недостаток разделения между химическими ингредиентами и фармакодинамикой, но и в достаточной степени связать отпечатки пальцев с фармакодинамикой с помощью математической модели [19, 20].ЧтВзаимосвязь спектр-активность исследует связь между отпечатком пальца и фармакодинамикой, чтобы предложить надежный метод прояснения материальной базы китайской фитотерапии [21].отпечатки пальцев обычно устанавливали методами ВЭЖХ, УЭЖХ, ГХ, ГХ-МС и ЖХ-МС [19, 22–24]. Данные «фармакодинамики» обычно получают модели [25].методы обработки данных, в основном включают анализ основных компонентов (PCA), частичный регрессионный анализ методом наименьших квадратов (PLS), ортогональный частичный дискриминантный анализ методом наименьших квадратов (OPLS-DA), канонический корреляционный анализ (CCA) и реляционный анализ Грея (GRA) обычно [26–29].

Для выяснения компонентов АМР, вносящих вклад в ингибирующую активность TYR [30, 31], методом ВЭЖХ были установлены фингерпринты 11 партий АМР; фармакодинамическую ингибирующую активность TYR in vitro оценивали биохимическим ферментативным методом. 2е эффективные соединения были выбраны с помощью модели соотношения спектр-активность, которая была установлена ​​путем корреляции пиков отпечатков пальцев с фармакодинамическими данными. Кроме того, активные вещества будут проверены с помощью тестов in vitro и экспериментов по молекулярной стыковке. Это исследование могло бы заложить теоретическую основу для применения АМР в качестве средства для лечения пигментных заболеваний кожи и разработки его в качестве дополнения к отбеливающим косметическим средствам.

2. Материалы и методы

2.1. Химикаты и материалы.Метанол (более или равный 99,5 процента) был куплен у Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. (Шанхай, Китай). Фосфорная кислота (более или равная 99 процентам) была приобретена у Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd. (Чэнду, Китай). Ацетонитрил был куплен у Tiandi Reagent Co., Ltd. (США). Атрактилоды III (более или равные 98 процентам), фосфатный буфер, тирозиназа и L-тирозин были куплены у Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. (Пекин, Китай). -Арбутин (больше или равно 99,7 процента) был приобретен в Китайской академии идентификации продуктов питания и лекарств. Тирозиназу и L-тирозин перед использованием растворяли в фосфатном буфере (рН 6,8). Атрактилозу III и -арбутин растворяли в 50%-ном метаноле (об./об.).чистую воду закупали у компании Hangzhou Wahaha Baili Food Co., Ltd. (Ханчжоу, Китай). Колонка Comix C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм) была приобретена у Guangzhou Philemon Scientific Instrument Co., Ltd. (Гуанчжоу, Китай).

2.2. Растительные материалы.Было собрано 11 партий лекарственных образцов УПП, которые представлены в таблице 1.вышеперечисленные образцы были аутентифицированы профессором Ронгуй Цинь (Фармацевтическая школа Медицинского университета Гуйчжоу).

2.3. Добыча.Кусочки трав каждого образца (около 10 г) точно взвешивали и затем помещали в круглодонную колбу, добавляя воду и кипятя с обратным холодильником для получения экстракта. Продукты сушили при пониженном давлении с получением водного экстракта АМР. 2en, водные экстракты AMR (около 30,00 мг) точно взвешивали и растворяли в 50-процентном метаноле (об./об.).

2.4. Анализ ВЭЖХ.Колонка для обращенно-фазовой хроматографии Comix C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм).подвижная фаза 0.1% фосфорная представляла собой смесь кислой воды (А)-ацетонитрила (В); система элюирования разработана и указана в таблице 2.следующая скорость была зафиксирована на уровне 0,6 мл/мин. 2e температура колонки была 30 градусов.Длина волны ПА составляла 210 нм.объем инъекции составлял 30 мкл.

Метод обнаружения был подтвержден тестом на прецизионность, тестом на воспроизводимость и тестом на стабильность.

2.5. Хемометрический анализ.В этом исследовании информация об общих пиках отпечатков пальцев 11 партий AMR была импортирована в программное обеспечение SIMCA14.1 для HCA, PCA и OPLS-DA.

2.6. Тест ингибирования TYR in vitro. экстракты AMR растворяли в фосфатном (рН 6,8) буфере, хранили при 4°С и затем использовали для анализа фермента.

В этом исследовании L-тирозин использовали в качестве субстрата для определения ингибирования активности TYR.реакционные растворы готовили в соответствии с таблицей 3 и определяли скорость ингибирования AMR на активность TYR. Сначала реакционные растворы помещали на водяную баню при 37° на 10 мин. Во-вторых, раствор TYR сразу добавляли к реакционным растворам Т2 и Т4. Во-вторых, реакционные растворы реагировали при постоянной температуре водяной бани 37 градусов в течение 10 минут после полного перемешивания. Наконец, значения поглощения реакционных растворов сразу же измеряли при 475 нм. Степени ингибирования (в процентах) получали из уравнения: степень ингибирования (в процентах) =[(AT2-AT1)-(AT4-AT3)]/(AT2-AT1) × 100 процентов.

2.7. Анализ взаимосвязи спектр-активность. Программное обеспечение «Хроматографическая система оценки сходства отпечатков пальцев китайской традиционной медицины, издание 2012 г. A» использовалось для настройки времени удерживания каждого пика, а площадь пика (PA) была обработана путем выравнивания.n, были получены количественные данные.Уравнение регрессии PLS было создано с помощью программного обеспечения SIMCA14.1; в качестве независимой переменной (X) принимали площадь пика, а в качестве зависимой переменной (Y) устанавливали скорость ингибирования TYR.

2.8. Ингибирующий эффект Atractylodes III на TYR и молекулярный докинг.Чтобы подтвердить ингибирующее действие атрактиленолида III на TYR, были проведены тесты ферментативной активности in vitro с -арбутином, выступающим в качестве положительного контрольного препарата.

Программа AutoDock4.2 использовалась для моделирования стыковки. Кристаллическая структура Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X) была принята за трехмерную структуру TYR [32]. Мы провели моделирование докинга TYR к Atractylodes III. Для стыковки с AutoDock Vina размер сетки был рассчитан на (x, y, z) =(16, 12, 14), а центр сетки был рассчитан на (x, y, z) { {10}} (-10,348, -28,279, -45,925). В каждой процедуре моделирования прогресс с параметрами по умолчанию осуществляется из AutoGrid и AutoDock. Ламарковский генетический алгоритм (LGA) был принят для определения наиболее подходящей ориентации связывания лиганда.

3. Результаты и их обсуждение

3.1. Валидация методологии.Для аналитического метода были подтверждены точность, воспроизводимость и стабильность. При проверке прецизионности точность относительного времени удерживания (RRT) и относительной площади пика (RPA) не превышала {{0}},02 процента и 4 процента в относительном стандартном отклонении соответственно; сходство равнялось 1. Повторяемость RRT и RPA составляла менее 0,11 процента и 4 процента RSD, а сходство было больше или равно 0,998. Стабильность оценивали путем тестирования одного образца раствора, хранившегося при температуре окружающей среды в лаборатории через 0, 6, 8, 12 и 18 часов. ОСО RRT и RPA обычных пиков были менее 0,1% и 4% соответственно; сходство составило более 0,999.Результаты показали, что экспериментальная система AMR для анализа отпечатков пальцев является устойчивой и надежной.

3.2. Установление отпечатков пальцев ВЭЖХ и анализ подобия.Отпечатки пальцев эталонных веществ Atractylodes III представлены на рисунке 1 (a). Образец AMR показал благоприятную сегрегацию среди своих пиков (рис. 1(b)). В идеальных условиях были получены ВЭЖХ-отпечатки 11 различных партий образцов AMR (рис. 1(c)), и было рассчитано сходство. Результаты подобия показаны в Таблице 4, которая показала, что все значения подобия 11 образцов превышали 0,8, указывая на то, что все образцы были схожи по химическому составу. Шестнадцать общих пиков наблюдали путем сравнения их времени удерживания в УФ-спектре. Пик 11 был идентифицирован как Atractylodes III по эталонным веществам. ОСО PA 16 обычных пиков составляли от 1,18% до 58,68% (таблица 5). Эти результаты свидетельствовали о том, что содержание химических веществ в УПП из разных производственных зон было разным.

3.3. Хемометрический анализ

3.3.1. ХКА. HCA применяли для выявления УПП из разных производственных зон на основе разных кластеров и сходства отпечатков пальцев. В качестве индикатора использовали общую площадь пика в 11 партиях AMR, а кластерный анализ выполняли с помощью программного обеспечения SIMCA14.1. Результаты показаны на рисунке 2. Образцы 11 партий AMR были разделены на 3 категории, когда расстояние между классами находилось в диапазоне от 20 до 30, из которых S4, S8, S9, S1 и S3 были сгруппированы в категории I, а S7 был были сгруппированы в категорию II, а S2, S5, S10, S6 и S11 были сгруппированы в категорию III.

3.3.2. СПС. В этом исследовании был рассчитан PCA 11 партий AMR; в 16 основных компонентах совокупный вклад дисперсии первых пяти основных компонентов составил 91,3%.матрица оценок первых двух компонентов будет использоваться для анализа, поскольку кумулятивная дисперсия превысила 65,9 процента.поэтому, при отсутствии какой-либо информации, построить двумерную плоскость главного компонента, чтобы абсцисса была главным компонентом, а ордината - другим главным компонентом. Затем 11 образцов были спроецированы на 2D-плоскость так, чтобы наблюдалось их естественное сгущение (рис. 3(а)). Было установлено, что S4, S8, S9, S1 и S3 имеют очевидные классификации, S7 можно разделить на один тип, а S2, S5, S10, S6 и S11 можно разделить на другой тип.результат PCA соответствовал результату HCA.

Каждая точка на диаграмме нагрузки представляет собой хроматографический пик, который отражает вклад каждого хроматографического пика в комплексный эффектосновные компоненты.весовое значение переменных можетотражают корреляцию между химическим составоми образец в наибольшей степени.дальше отпроисхождение диаграммы нагрузки, тем больше переменнаямасса.результат показан на рисунке 3(b), который предполагаетчто хроматографические пики 9, 11 (атрактиленолид III),и 12 оказали большее влияние на первый главный компонент. Однако хроматографические пики 4, 5, 6, 15 и 16оказало большее влияние на второй главный компонент. Этопоказали, что вышеуказанные хроматографические пики могут иметьбольшее влияние на классификацию.

3.3.3. ОПЛС-ДА.11 образцов были разделены на две группы: S1, S3, S4, S8 и S9 были первой группой, а S2, S5, S6, S7, S10 и S11 были второй группой.общая информация о пиках всех образцов была импортирована в программное обеспечение SIMCA14.1 для OPLS-DA. R2 X и R2 Y характеризуют объяснительную способность модели к матрицам x и y по отдельности, а Q2 характеризует предсказательную способность модели.результаты показали, что значения R2 X, R2 Y и Q2 были 0,939, 0,992 и 0,583 соответственно, все из которых превышали {{ 9}}.5, что указывает на то, что модель могла различать две группы выборок и лучше подходила и предсказывала при обработке данных. Его можно использовать для различения УПП из разных производственных зон (рис. 4(а)).

профиль переменных, важных для проекции (VIP) в модели OPLS-DA, может отражать вклад каждого хроматографического пика в образец.Значения VIP 16 хроматографических пиков отражали мощность воздействия на каждый образец AMR. На основе принципа отбора, согласно которому значение VIP было больше 1,0, а планка погрешности была меньше, чем исходное значение (рис. 4(b)), были выбраны 4 важных хроматографических пика, которые были расположены в следующем порядке: пик 1 > пик 6 > пик 16 > пик 5.

результаты анализа диаграммы нагрузки показаны на рисунке 4(c), который показал, что положения вышеупомянутых 4 важных хроматографических пиков были далеко от начала координат. Было высказано предположение, что 4 хроматографических пика значительно повлияли на классификацию УПП, и эти компоненты, представленные 4 хроматографическими пиками, могут быть основными маркерными компонентами каждого образца.

3.4. Оценка ингибирующей активности AMR на TYR in vitro.Ингибирующее действие АМР из разных районов производства на активность TYR определяли биохимическим ферментативным методом.влияние образцов на активность TYR приведено в таблице 6. Каждый образец с концентрацией 10 мг/мл мог ингибировать активность TYR, а фармакологическая активность заметно отличалась, среди которых скорость ингибирования S5 была самой высокой, тогда как S6 была самой низкой.

3.5. Анализ взаимосвязей спектр-эффект. В этой статье PLS применялся для анализа зависимости спектр-активность.Коэффициент частичной регрессии и значение VIP показаны на рисунках 5(a) и 5(b), которые показали, что хроматографические пики 1, 2, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 15 и 16 положительно коррелируют с ингибирование активности TYR, но хроматографические пики 3, 4, 8, 12, 13 и 14 отрицательно коррелировали с ними. Среди хроматографических пиков, положительно коррелирующих с ингибированием активности TYR, значения VIP хроматографических пиков 11 (Atractylodes III) и 15 превышали 1, что указывает на то, что эти два компонента значительно влияют на ингибирование активности TYR.

3.6. Ингибирующий эффект Atractylodes III на TYR и молекулярный докинг.Ингибирующее действие Atractylodes III на активность TYR определяли биохимическим ферментативным методом in vitro с -арбутином в качестве положительного контроля.результаты показали, что степени ингибирования атрактилодеса ​​III и -арбутина в отношении активности TYR составляли 63,68 ± 2,36 процента и 94,85 ± 0,35 процента, соответственно, при концентрации образцов 1 мг/мл.

Молекулярный докинг использовали для изучения механизма связывания Atractylodes III, взаимодействующего с TYR (рис. 6(a)–6(c)).Сайт связывания грибной тирозиназы состоит из узкой неглубокой полости с двумя ионами меди (Cu2 плюс ), каждый из которых стабилизирован тремя гистидиновыми остатками (например, His 61) в активном центре фермента. В этом исследовании Atractylodes III представляет собой небольшое молекулярное соединение, расположенное в активном центре фермента и взаимодействующее с окружающими остатками (His 244, Phe 264, Ala 286, His 263, Val 283, His 259, His 85, Asn 260). Примечательно, что Atractylodes III образует стабильную водородную связь с Asn 260 с длиной связи 1,9 ˚ A.

4. Выводы

В этом исследовании был установлен систематический метод, соединяющий отпечатки пальцев ВЭЖХ с хемометрическим анализом, чтобы различать образцы AMR из разных источников, а отбеливающий эффект AMR был подтвержден методом биохимических ферментов. Соотношения спектр-эффект показали, что хроматографические пики 1, 2, 5, 6, 9, 10, 11, 15 и 16 положительно коррелировали с эффектом ингибирования AMR на активность TYR, среди которых пики 11 (атрактиленолид III) и 15 могли быть важные активные компоненты. Между тем, атрактиленолид III обладает высокой ингибирующей активностью в отношении TYR в тесте in vitro, и результат молекулярного докинга показал, что его механизм может быть связан со связыванием аминокислотных остатков в каталитической капсуле TYR.таким образом, эти результаты доказали, что биоанализ, молекулярная стыковка и отношения спектр-активность подходят для установления связи качества образцов с фармацевтическими активными ингредиентами.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Раскрытие информации

Юн-Цин Лю и Чан-Янь Сюй считаются соавторами.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в данном исследовании.

Вклад авторов

Юн-Цин Лю и Чанг-Янь Сюй внесли свой вклад в работу.

Благодарности

Это исследование было спонсировано Программой обучения инновациям и предпринимательству для студентов колледжей в провинции Гуйчжоу (№ 20195200925).

Рекомендации

[1] Ю.-Л. Ван, Г. Ху, К. Чжан и др., «Скрининг и характеристика ингибиторов тирозиназы из Salvia miltiorrhiza и Carthamus tinctorius с помощью анализа зависимости спектр-эффект и молекулярного докинга», Journal of Analytical Methods in Chemistry, vol. 2018 г., ID статьи 2141389, 10 страниц, 2018 г.

[2] HX Cui, FF Duan, SS Jia, FR Cheng и K. Yuan, «Антиоксидантная и ингибирующая тирозиназу активность масел семян Torreya grandis fort. ex Lindl», BioMed Research International, vol. 2018 г., ID статьи 5314320, 10 страниц, 2018 г.

[3] Y. Tian, ​​Z. Zhang, N. Gao, P. Huang и FY Wu, «Люминесцентный анализ без меток для мониторинга активности тирозиназы и скрининга ингибиторов с помощью реагирующих наночастиц координационного полимера лантанидов», Spectrochimica Acta Part A: Молекулярная и биомолекулярная спектроскопия, том. 228, 2020.

[4] H. Liu, B. Liu, P. Huang, Y. Wu, FY Wu и L. Ma, «Колориметрическое определение тирозиназы на основе металлизации серебра in situ, катализируемой наночастицами золота», MikroChim Acta, vol. 187, нет. 10, с. 551, 2020.

[5] DC Franco, GS de Carvalho, PR Rocha, R. da Silva Teixeira, AD da Silva и NR Raposo, «Ингибирующее действие аналогов ресвератрола на активность тирозиназы грибов», Molecules (Базель, Швейцария), vol. 17, нет. 10, стр. 11816–11825, 2012.

[6] Х. Х. Ким, Дж. К. Ким, Дж. Ким, С.-Х. Юнг и К. Ли, «Характеристика кофеилхиновых кислот из эпизодов thunbergianus и их ингибирующая активность в отношении меланогенеза», ACS Omega, vol. 5, нет. 48, стр. 30946–30955, 2020.

[7] F. Pintus, D. Span`o, A. Corona и R. Medda, «Антитирозиназная активность экстрактов Euphorbia characias», PeerJ, vol. 3, с. е1305, 2015.

[8] M. Shi, Y. Zhang, M. Song, Y. Sun, C. Li, and W. Kang, «Скрининг маркерных компонентов в Psoralea corylifolia L. с помощью соотношения спектр-эффект и детонации компонентов». опубликовано UPLC-MS (2), «Международный журнал молекулярных наук», том. 19, нет. 11, 2018.

[9] Г.-Х. Ван, К.-Ю. Чен, Т.-Х. Tsai et al., «Оценка ингибирующей тирозиназу и антиоксидантной активности экстрактов корней дягиля даурского для ферментации четырех различных пробиотических бактерий», Journal of Bioscience and Bioengineering, vol. 123, нет. 6, стр. 679–684, 2017.

[10] YS Lin, HJ Chen, JP Huang et al., «Кинетика ингибирующей активности тирозиназы с использованием экстрактов листьев винограда Viti», BioMed Research International, vol. 2017 г., ID статьи 5232680, 5 стр., 2017 г.

[11] С. Ян, Дж. Чжан, Ю. Ян и др., «Стратегия, основанная на сетевой фармакологии, для исследования фармакологических механизмов Atractylodes macrocephala Koidz. для лечения хронического гастрита», Frontiers in Pharmacology, vol. 10, с. 1629, 2019.

[12] Х.-Р. Ян, Дж. Юань, Л.-Х. Лю, В. Чжан, Ф. Чен и К.-К. Дай, «Флуоресцентное накопление сесквитерпеноидов, вызванное эндофитной Pseudomonas, опосредованное гибберелловой кислотой и жасмоновой кислотой, в проростках Atractylodes macrocephala Koidz», Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC), vol. 138, нет. 3, стр. 445–457, 2019.

[13] Л. Ху, С. Чен, Дж. Ян и Л. Го, «Географическая аутентификация традиционной китайской медицины Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu) с использованием анализа стабильных изотопов и многоэлементного анализа», Rapid Communications in Mass Spectrometry, vol. . 33, нет. 22, стр. 1703–1710, 2019.

[14] Х. Ли и Г. Ян, «Полный хлоропластный геном Atractylodes macrocephala Koidz. (Asteraceae),» Митохондриальная ДНК, часть B, том. 5, нет. 3, стр. 2060-2061, 2020.

[15] С. Гу, Л. Ли, Х. Хуанг, Б. Ван и Т. Чжан, «Противоопухолевая, противовирусная и противовоспалительная эффективность эфирных масел из Atractylodes macrocephala Koidz», Произведено с использованием различных методов обработки, молекулы , том. 24, нет. 16, 2019.

[16] J. Wang, L. Peng, M. Shi, C. Li, Y. Zhang и W. Kang, «Взаимосвязь спектрального эффекта и удаление компонентов в основании дягиля даурского с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии-Q». исполнительный гибридный масс-спектрометр с квадрупольно-орбитальной ловушкой, "Molecules", vol. 22, нет. 7, 2017.

[17] Б. Чжу, К.-Л. Чжан, Дж.-В. Хуа, В.-Л. Ченг и Л.-П. Цинь, "традиционное использование, фитохимия и фармакология Atractylodes macrocephala Koidz.: обзор, «Журнал этнофармакологии», том 226, стр. 143–167, 2018.

[18] Ю.-Ю. Фэн, Х.-Ю. Джи, X.-D. Донг и А.-Дж. Лю, «Спирторастворимый полисахарид из Atractylodes macrocephala Koidz индуцирует апоптоз клеток Eca-109», Carbohydrate Polymers, vol. 226, ID статьи 115136, 2019.

[19] В. Ли, Ю. Чжан, С. Ши и др., «Взаимосвязь спектрального эффекта антиоксидантной и тирозиназной активности с последователями Malus pumila с помощью UPLC-MS/MS и метода нокаута компонентов», Food and Chemical Токсикология, т. 1, с. 133, ID статьи 110754, 2019.

[20] Б. Сюй, Дж. Гао, С. Чжао, Ю. Ли, Ю. Ду и Х. Пан, "взаимосвязь спектрального эффекта между отпечатком пальца ВЭЖХ и бодрящим кровью и растворяющим застоем листьев боярышника», Chromatographia, том 83, № 3, стр. 409–421, 2020.

[21] Y. Feng, Z. Jing, Y. Li и др., «Скрининг анафилактоидных компонентов инъекции Shuang Huang Lian путем анализа взаимосвязей спектр-эффект в сочетании с UPLC-TOF-MS», Biomedical Chromatography, vol. 33, нет. 2, номер статьи e4376, 2019 г.

[22] X. Jiang, L. Tao, C. Li et al., «Группировка, взаимосвязь спектрального эффекта и антиоксидантные соединения китайского прополиса из разных регионов с использованием многофакторного анализа и автономного анализа анти-DPPH», Molecules, vol. . 25, нет. 14, 2020.

[23] Ю. Чжао, Х.-М. Ю, Х. Цзян, Г.-Х. Цзоу и Б. Ван, «Взаимосвязь спектрального эффекта между отпечатками пальцев высокоэффективной жидкостной хроматографии и противовоспалительной активностью Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv», Journal of Chromatography B, vol. 1104, стр. 11–17, 2019.

[24] Чжоу X., Ли Ю., Чжан М. и др., «Взаимосвязь спектрального эффекта между отпечатками пальцев UPLC и противораковым эффектом Si Jun Zi Tang», Основанная на доказательствах дополнительная и альтернативная медицина, том. 2019 г., ID статьи 7282681, 9 страниц, 2019 г.

[25] X. Sun, Q. Zhao, Y. Si и др., «Биоактивная структурная основа протеогликанов из Sarcandra glabra, основанная на зависимости спектр-эффект», Journal of Ethnopharmacology, vol. 259, ID статьи 112941, 2020.

[26] С. Гао, Х. Чен и X. Чжоу, «Исследование зависимости спектр-эффект ингибирующей активности Ligustrum lucidum в отношении ксантиноксидазы», ​​Journal of Separation Science, vol. 42, нет. 21, стр. 3281–3292, 2019.

[27] J. Tan, J. Liu, H. Wang и др., «Идентификация компонентов, активирующих кровь, в таблетке Xueshuan Xinmaining на основе зависимости спектр-эффект и сетевого фармакологического анализа», RSC Advances, vol. 10, нет. 16, стр. 9587–9600, 2020.

[28] Дж. Чжан, Т. Чен, К. Ли и др., «Скрининг активных ингредиентов розмарина на основе зависимости спектрального эффекта между отпечатком UPLC и сосудорасширяющей активностью с использованием трех хемометрических показателей», Journal of Chromatography B, vol. 1134-1135, номер статьи 121854, 2019 г.

[29] Ю. Чен, Г. Пан, В. Сюй и др., «Исследование взаимосвязи спектр-эффект между отпечатками пальцев ВЭЖХ и антиоксидантной активностью Sabia parviflflora», Journal of Chromatography B, vol. 1140, ID статьи 121970, 2020.

[30] М. Ляо, П. Ян, X. Лю и др., «Взаимосвязь спектр-эффект для противоопухолевой активности шиконинов и шиконофуранов в лекарственном Zicao с помощью УВЭЖХ-МС/МС и хемометрических подходов», Журнал Хроматография B, vol. 1136, ID статьи 121924, 2020.

[31] JH Wu, YT Cao, HY Pan и LH Wang, «Идентификация противоопухолевых компонентов в яде жабы с помощью анализа соотношения спектр-эффект и исследования его фармакологического механизма», Molecules, vol. 25, нет. 18, 2020.

[32] J. Tang, J. Liu и F. Wu, «Молекулярные исследования стыковки и биологическая оценка производных 1,3,4-тиадиазола, несущих фрагменты основания Шиффа в качестве ингибиторов тирозиназы», ​​Bioorganic Chemistry, vol. 69, стр. 29–36, 2016.