Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Дочерняя онкологическая больница Синьцзянского медицинского университета, Урумчи 830011, Китай; 2. Фармацевтический колледж Синьцзянского медицинского университета, Урумчи 830054, Китай)

Абстрактный:Цель: изучить взаимосвязь структура-активность фенилэтаноидных гликозидов в растениях цистанхе сальса на антиоксидантную активность. Методы: С помощью систем анализа DPPH • антиоксидантная активность шести фенилэтаноидных гликозидов из растенийЦистанхеsalsa было решено исследовать взаимосвязь между антиоксидантной активностью и структурными характеристиками фенилэтаноидных гликозидов. Результаты. Антиоксидантная активность фенилэтаноидных гликозидов носила вариантный характер с дозозависимым эффектом. Последовательность силы антиоксидантной активности шести компонентов оказалась следующей.2 ^Ацетилактеозид > Актеозид Тубулозид BN Изоактеозид > Эхинакозид > Цистанозид А. Заключение. Антиоксидантная активность фенилэтаноидных гликозидов связана с количеством фенольных гидроксилов, стерическими затруднениями, 2-ацетилом на средней глюкопиранозе и расположением фенольного гидроксила. Кроме того, это может быть связано с j3-ненасыщенным кетоном фенол-2-пропенила.

Ключевые слова: Cistanche salsa (Ca Mey.) G, Beck; фенилэтаноидные гликозиды; Антиоксидантная активность; Структура-деятельность; DPPH

Эхинакозид

Традиционная китайская медицинаЦистанхеэто Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, высушенный мясистый стебель с чешуей и листьями. Впервые он был опубликован в «Материа Медика Шэнь Нуна». Частота встречаемости является самой высокой, уступая только женьшеню в антивозрастных и антивозрастных рецептах китайской медицины, и он имеет репутацию «женьшеня пустыни». Фенилэтановые гликозиды являются характерными компонентамиЦистанхерод растений. В настоящее время из этого рода выделено более 30 таких соединений. Фармакологические исследования в основном дали понять, что эти соединения являются основной материальной основой дляЦистанхепроявлять фармакологическую активность).

Дибензопикриловый радикал (DPPH •) является относительно стабильным свободным радикалом со свободным электроном на его N. Метанольный раствор DPPH- имеет фиолетовый цвет с максимальным пиком поглощения при 517 нм. Когда есть поглотитель свободных радикалов, его поглощение постепенно исчезает из-за его одноэлектронного спаривания. Его степень обесцвечивания количественно связана с количеством электронов, которые он принимает. Таким образом, использование спектрофотометрии для определения изменения поглощения DPPH после реакции с раствором образца можно использовать для проверки способности образца удалять свободные радикалы и сопротивляться окислению (3). В настоящее время имеются сообщения об антиоксидантных исследованиях гликозидов фенетилового спирта в пюре из баклажанов в отношении удаления свободных радикалов, но отсутствует анализ взаимосвязи структура-активность между его антиоксидантными свойствами и активными веществами. В этой статье метод анализа свободных радикалов DPPH впервые используется для проверки антиоксидантной активности 6 мономеров гликозидов фенетилового спирта в Rouhuanrong. На основании структурных характеристик и результатов определения активности этих соединений предварительно предполагаются гликозидные компоненты фенетилового спирта. Взаимосвязь структура-активность антиоксидантной активности.

1 Аппаратура и материалы

Эхинакозид, цистанхе гликозид А,вербаскозид, изовербазин гликозид, 2,-ацетилвербаскозид, эталонное вещество антоцианина В трубчатого (выделено и приготовлено из Cistanche salsa, данные УФ, ИК, ЭИ-мс/ч-ЯМРJ3c-ЯМР соответствуют литературным данным, содержание определяется по площади ВЭЖХ метод нормализации, чистота более 95 процентов, структурная формула представлена ​​на рисунке 1 и в таблице 1); Дифенил-пикриловый радикал (DPPH •) был приобретен у Sigma; прочие реагенты Все отечественной чистоты.

Многофункциональный полноволновой детектор биологической активности SpectraMax M5 (Anthos Co., Австрия), 96-планшет с лунками для культивирования (Costar), электронные весы AB104-N] Mettler-Toledo Instr. (Шан Хай) ООО]

Рисунок 1. Структурные формулы шести фенетаноилгликозидов в цистанхе.

Таблица 1 Заместители в 6 соединениях фенэтанолгликозида в цистанхе

Примечание: Ac представляет собой ацетил, Cf представляет собой транс-кофеоил, Glc * pD-глювиоланозу, а Rha представляет собой aL-рамнозу.

2 Приготовление тестового раствора

DPPH • Приготовьте исходный раствор с концентрацией 1,3 x 10'2моль/л с этанолом, храните его в холодильнике, разбавьте исходный раствор этанолом до 1-3 xl{{7} }^моль/л непосредственно перед использованием; 6 видов гликозидов фенетилового спирта Эталонное вещество и витамин С готовят в виде раствора с концентрацией 0.05-50.0 ptg/мл с этанолом.

актеозид

3 метода и результаты

3. 1 Метод. Сначала в лунки для образцов вносят по 10 мкл образца, в лунки для контрольных проб добавляют 10 мкл этанола, а затем добавляют 190 мкл DPPH • с концентрацией 1,3 х 10^моль/л и помещают в лунки. темноте при комнатной температуре в течение 30 минут. Используйте многофункциональный полноволновой детектор биологической активности SpectraMax M5 для измерения поглощения (A) при 517 нм. Каждое поглощение измеряли 3 раза параллельно и брали среднее значение. Скорость клиренса рассчитывается следующим образом: скорость клиренса (в процентах)=(пустой образец-A)/холостой образец x 100 процентов.

3.2 Результаты Результаты определения представлены в Таблице 2. Из Таблицы 2 видно, что шесть гликозидов фенетилового спирта в различных концентрациях обладают разной степенью нейтрализующего действия на DPPH • и их способность поглощать свободные радикалы имеет значительную дозу. связь эффекта с концентрацией. Гликозид на DP PH • Величина эффекта очистки увеличивается с увеличением концентрации.

Таблица 2 Скорость клиренса проб с различной концентрацией на DPPH • («=3)

Примечание. Положительным контролем является аскорбиновая кислота (витамин С), номер образца 7.

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>Цистанхе гликозид А. Эффекты шести гликозидов фенетилового спирта в той же концентрации, что и витамин С в положительном контроле, немного ниже, чем у витамина С.

вербаскозид

4. Дискуссия

Результаты этого исследования также подтвердили, что гликозиды фенетилового спирта обычно обладают антиоксидантной активностью. Анализируя и сравнивая их химические структуры, вербаскозид, гликозид изо-вербазин, гликозид 2'-ацетилвербазин и трубчатый анортозит B являются гликозидами, в то время как эхинакозид ицистанхеА — триглицериды с большими стерическими затруднениями. Эффект повышенного стерического затруднения делает эхинакозид и соланакозид А труднодоступными для свободных радикалов, поэтому их антиоксидантная способность относительно слаба; структурное различие между эхинакозидом и стриатом: эхинакозид А состоит только в том, что R5 первого представляет собой фенольную гидроксильную группу, а последний представляет собой метоксигруппу. О-фенольная гидроксильная группа считается важной функциональной группой для антиоксидантной активности. Гидроксильная группа дифенола исчезает, и антиоксидантный эффект значительно снижается. Путем анализа структуры соединения и объединения результатов измерений делается вывод, что антиоксидантная активность фенетилгликозидов в пасте из баклажанов связана с количеством агликонов и фенольных гидроксильных групп в фенилакрилоильной группе, положением соединения фенольной гидроксильную группу, размер стерического затруднения соединения и центральную глюкозу 2 Существует определенная связь между замещением ацетильной группы в положении, которое также может быть связано с фрагментом структуры ненасыщенного кетона а,/3 на стирольную ацильную группу, но она мало связана с положением замещения фенилакрилоильной группы.

DPPH • является относительно стабильным свободным радикалом с центром на N, с сильным поглощением при 517 нм. После добавления тестируемого вещества путем определения изменения поглощения при 517 нм после • реакции радикалов DPPH с раствором образца можно проверить способность образца поглощать свободные радикалы и оказывать антиокислительное действие. Эксперименты показывают, что использование DPPH • для создания модели повреждения свободными радикалами in vitro не требует сложного оборудования и дорогих реагентов. Он прост и удобен в использовании, чувствителен, надежен и воспроизводим. Это хороший метод для скрининга поглотителей свободных радикалов.

В настоящее время витамин С признан высокоактивным и широко используемым антиоксидантом. Поэтому в этом эксперименте витамин С был выбран в качестве положительного контроля антиоксидантной способности гликозидов фенэтилового спирта в нейтрализации свободных радикалов.

использованная литература

[1] Лэй Ли, Сун Чжихун, Ту Пэнфэй. Исследования химических компонентов цистанхе Прогресс исследований [J]. Китайская травяная медицина, 2003, 34 (5): 473476.

[2] Сун Чжихун, Лэй Ли, Ту Пэнфэй. Прогресс в исследованиях фармакологической активности растений цистанхе[J]. Китайская травяная медицина, 2003 г., 34(9): Прилагается 16-18.

[3] Сюй Шэньхун, Ханг Ху. Простой метод скрининга поглотителей свободных радикалов [J]. Китайская травяная медицина, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Фу Жун, Чжу Цзювэй. Определение антиоксидантной активности Chuanling, Rhodiola Rosea и Huang Zhi с помощью дифенилпиридиновой радикальной спектрофотометрии [J]. Журнал Даляньского университета легкой промышленности, 2004 г., 23 (2) ): 114-117.