Синергетическое противовоспалительное действие фукоидана ламинарии японской и экстракта цистанхе трубчатой
Mar 03, 2022
Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com
Абстрактный
противовоспалительное средстводействие фукоидана иЦистанхе трубчатая Экстракт (CT) исследовали в системе культивирования макрофагов Vitro и в модели воспаления воздушных мешочков, индуцированного каррагинаном in vivo.Цистанхе тубулозаЭкстракт ингибировал продукцию оксида азота активированными клетками макрофагов RAW 264.7, в то время как фукоидан был неактивен. Модель воспаления воздушных мешочков in vivo, индуцированная каррагинаном экссудация сосудов и повышенные концентрации оксида азота и простагландина E2 в экссудатах синергетически подавлялись совместным введением фукоидана илиЦистанче Ттубулосаизвлекать. Кроме того, комбинированная терапия существенно уменьшала воспаление тканей. Однако синергетического эффекта противвоспалительныйклеточная инфильтрация, хотя фукоидан и КТ(Цистанхе трубчатая)каждый экстракт заметно уменьшал количество клеток. Поэтому предполагается, что фукоидан блокирует инфильтрациювоспалительныйклеток, а КТ(Цистанхе трубчатая) ингибирует активацию клеток, и их комбинированное лечение может быть многообещающим кандидатом для облегчения различных типов воспаления.
Ключевые слова: каррагинан, воспаление, фукоидан, экстракт цистанхе трубчатой.
В качестве иммунного ответа на чужеродные антигены макрофаги выделяют провоспалительные цитокины, такие как фактор некроза опухоли- (TNF-), интерлейкин -1 (IL-1), IL-6 и другие. [1,2]. Такие цитокины индуцируют хемотаксический приток гранулоцитов, моноцитов, лимфоцитов и тучных клеток в поврежденную ткань, что способствует удалению антигена и восстановлению ткани [3,4]. Однако чрезмерная инфильтрация и активация клеток усугубляют повреждение тканей, приводя к отеку (сосудистой экссудации) и боли, которые являются хорошо известными явлениями воспаления.
TNF- является важным фактором для индукции экспрессии гена синтазы оксида азота (iNOS) в нескольких клеточных линиях. Активация iNOS приводит к продукции оксида азота (NO) [5-7], который не только модулирует несколько физиологических функций, таких как бактерицидная и сосудорасширяющая. но также вызывает воспаление [8,9]. После повреждения ткани расщепление фосфолипазами фосфолипидов клеточной мембраны приводит к образованию арахидоновой кислоты. Арахидоновая кислота далее расщепляется циклооксигеназой (ЦОГ) до простагландинов (ПГ) [10]. Избыточное количество PGE2, образованного ЦОГ-II, индуцирует несколько цитокинов воспаления. Поскольку и NO, и PGE2 действуют как основные факторы, вызывающие воспаление и боль, пути TNF- и COX-II-PGE2 являются основными потоками воспалительного процесса, которые ингибируются кортикостероидами и нестероидными препаратами.противовоспалительное средствопрепаратов (НПВП) соответственно [10,11].
Несмотря на то, что существует несколько стероидов и НПВП для лечения воспалительных заболеваний, эти препараты могут оказывать неблагоприятное воздействие на иммунную систему, желудочно-кишечный тракт, почки, печень, центральную нервную систему, кровяное давление и сердечно-сосудистую систему [12-14 ]. Поэтому необходимо свести к минимуму неблагоприятные эффекты химических терапевтических средств, заменив их или используя в сочетании с натуральными продуктами.
Фукоидан, сульфатно-полисахаридный комплекс из широко распространенных во многих странах морских водорослей, таких как Laminaria japonica и Cladosiphonokamuranus, долгое время использовался в качестве терапевтического средства в восточной медицине. В предыдущих исследованиях было продемонстрировано, что фукоидан обладает антиоксидантным, антикоагулянтным, противораковым ипротивовоспалительное средстводеятельности [15,16]. Соответственно, благотворное влияние фукоидана на воспалительные заболевания, ишемию, иммунную дисфункцию и опухоли привлекает внимание исследователей [17,18]. С другой стороны,Цистанхе трубчатая(CT) также широко используется для традиционной медицины в Китае. Сообщалось, что экстракт CT снижает продукцию TNF-α и IL -4, которые являются основными факторами продукции NO в воспалительном пути [19].
Такие предыдущие результаты побудили нас исследовать комбинированную эффективность фукоидана и КТ.(Цистанхе трубчатая)экстракт на 2 основных пути воспаления. Чтобы выяснить механизм действия, мы проанализировали NO и PGE2 в экссудатах от каррагинано-индуцированного воспаления воздушных мешков [20].
Материалы и методы
Материалы
Полуочищенный фукоидан и водный экстракт ЦТ(Цистанхе трубчатая)были получены от Misuba RTech Co., Ltd. (Асан, Корея). Экстракт фукоидана и ЦТ хранили при 4°С, смешивали (1:3) и растворяли в очищенной воде перед применением и вводили перорально в объеме 5 мл/кг.
Культура клеток и количественное определение NO
Клеточная линия мышиных макрофагов RAW 264.7 была приобретена в Американской коллекции типовых культур (Манассас, США) и культивирована в среде Игла, модифицированной Дульбекко (Sigma, Сент-Луис, США), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки и антибиотики [100 ЕД/мл пенициллина ( Sigma) и 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma)]. Клетки инкубировали во влажной атмосфере с 5% СО2 при 37oC.
Для оценки эффектов фукоидана и КТ(Цистанхе трубчатая)экстракта на секрецию клеток NO, RAW 264.7 (1×106 кл/мл) инкубировали с фукоиданом или экстрактом CT (1–320 мкг/мл) в течение 5 мин с последующим введением интерферона- (ИФН- , 10 ЕД/мл) и липополисахарида (ЛПС, 10 мкг/мл) в течение 24 часов. В наших предварительных исследованиях было подтверждено, что обработка IFN-plus LPS для активации клеток RAW 264.7 не влияла на жизнеспособность клеток до 24 часов и что фукоидан и экстракт CT не были цитотоксическими до 1 мг/мл. В качестве индикатора NO измеряли концентрацию нитрита (NO2–), продукта окисления NO. Культуральную среду смешивали с равным объемом реактива Грисса (1 % сульфаниламида, 0,1 % нафтилэтилендиамида в 2,5 % фосфорной кислоты) [21] и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин. Концентрацию нитрита анализировали при 540 нм, где NaNO2 использовали для построения стандартной кривой.
Животные и лечение
Самцы мышей ICR (возраст 7 недель) были приобретены у Daehan Biolink (Ымсон, Корея) и помещены в комнату с постоянными условиями окружающей среды (22±2ºC; 40-70% относительной влажности; 12-часовой световой день). -темновой цикл;150-300 яркость в люксах). Гранулированный корм и очищенная вода были доступны без ограничений. Все эксперименты на животных были одобрены Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Национального университета Чунгбук (CBNU), Корея, и проводились в соответствии со Стандартными операционными процедурами (СОП) Центра лабораторных исследований животных, CBNU.
Мышей (n=8/группа) перорально лечили фукоиданом (18 или 54 мг/кг), CT(Цистанхе трубчатая)экстракт (54 или 162 мг/кг) или их смесь (18 плюс 54, 54 плюс 162 или 90 плюс 270 мг/кг) 1 раз в сутки в течение 7 дней. Низкие дозы фукоидана (18 мг/кг) и экстракта СТ (54 мг/кг) были получены из расчетных доз для человека 100 мг/тело (70 кг) и 300 мг/тело после преобразования площади поверхности в массу тела (км{{14). }} для человека/км=3 для мыши) соответственно. Высокие дозы фукоидана и экстракта CT были установлены в 3 раза, по отдельности или в смеси, а самая высокая доза смеси была зафиксирована в 5 раз для оценки максимального синергетического эффекта.
В 1-й день фукоидана и КТ(Цистанхе трубчатая)экстракта, мышам подкожно вводили 10 мл стерильного воздуха в заднюю часть, чтобы сформировать мешочек [22,23]. Через 2 и 5 дней в мешок повторно вводили 5 мл воздуха. Через час после последней обработки в пакет вводили 1 мл каррагинана (1% в физиологическом растворе; Sigma) или его носителя (физиологический раствор).
Анализы экссудата
Воздушный мешок промывали 1 мл холодного физиологического раствора через 6 часов после инъекции каррагинана и регистрировали чистый объем лаважной жидкости. Общее количество воспалительных клеток, нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов определяли с помощью счетчика Колтера. Концентрации NO и PGE2 определяли с помощью реактива Грисса (Sigma) и иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием набора корреляционного ИФА (Assay Designs, Ann Arbor, AnnArboUSA) соответственно.
Гистопатологическое исследование
Ткань, выстилающая мешок, удалялась и фиксировалась в нейтральном растворе формалина. Предметные стекла тканей, залитые парафином, окрашивали гематоксилин-эозином и исследовали под световым микроскопом на наличие воспалительных поражений.
статистический анализ
Результаты представлены как среднее ± стандартная ошибка. Сравнения экспериментальных групп проводились с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующей коррекцией по критерию Тьюки. P-значение<0.05 was="" considered="" statistically="">
Полученные результаты
Культура клеток RAW 264.7 in vitro, обработка IFN- и LPS значительно увеличивали продукцию NO (рис. 1). Предварительная обработка фукоиданом (1–320 мкг/мл) не влияла на высвобождение NO из клеточной линии макрофагов (рис. 1А). Для сравнения, КТ(Цистанхе трубчатая)экстракт (32–320 мкг/мл) значительно подавлял продукцию NO, что свидетельствует опротивовоспалительное средствоактивность (рис. 1B).
Инъекция каррагинана в воздушный мешок мыши заметно увеличила объем экссудата внутри мешочка (рис. 2). Такая повышенная экссудация была ослаблена лечением фукоиданом (18 мг/кг) и ХТ.(Цистанхе трубчатая)экстракт (54 и 162 мг/кг). Примечательно, что комбинированное лечение фукоиданом и КТ(Цистанхе трубчатая)экстракт дополнительно уменьшал объем экссудата по сравнению с отдельными эффектами, хотя комбинации с более высокими дозами (54 плюс 162 мг/кг и 90 плюс 270 мг/кг) не проявляли дополнительной эффективности по сравнению с комбинацией с самой низкой дозой (18 плюс 54 мг/кг). (Рисунок 2А). Содержание NO в мешочке также резко увеличилось после инъекции каррагинана (рис. 2В). По сравнению с мягким эффектом фукоидана КТ(Цистанхе трубчатая)экстракт заметно снижал концентрацию NO. Комбинированное лечение фукоиданом и экстрактом CT дополнительно снижало уровень NO дозозависимым образом. Точно так же повышенное содержание PGE2 синергетически подавлялось комбинированной терапией фукоиданом и CT.(Цистанхе трубчатая)экстракт (рис. 2C). Параллельно с медиаторами воспаления в мешочке количество воспалительных клеток резко увеличилось при инъекции каррагинана: в 37,8, 4,8 и 24,1 раза по сравнению с контрольными уровнями нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов соответственно (таблица 1). . Однако фукоидан и CT(Цистанхе трубчатая)Экстракт значительно уменьшал воспалительную клеточную инфильтрацию, в которой фукоидан несколько превосходил экстракт СТ. Неожиданно не было достигнуто синергетического эффекта в отношении воспалительной клеточной инфильтрации при совместном введении фукоидана и ХТ.(Цистанхе трубчатая)извлекать.
Судя по инфильтрации воспалительных клеток в экссудате, в подкожной клетчатке, окружающей воздушные мешки, обнаруживались тяжелые воспалительные поражения (рис. 3). Наблюдалось огромное количество клеток в утолщенной подкожной ткани, подвергшейся воздействию каррагинана (рис. 3В), по сравнению с почти нормальными характеристиками у контрольных животных (рис. 3А). Такие воспалительные поражения значительно уменьшались при лечении фукоиданом (рис. 3C и 3D) или КТ.(Цистанхе трубчатая)экстракт (рис. 3E и 3F). Примечательно, что более высокие противовоспалительные эффекты были получены при комбинированной терапии фукоиданом и ХТ.(Цистанхе трубчатая)извлечение (рис. 3G-3I)
Обсуждение
Используя in vivo каррагинан-индуцированную модель воспаления воздушных мешочков, введение воздуха в спину грызунов вызывает пролиферацию клеток, которые расслаиваются на поверхности полости с образованием структуры, похожей на синовиальную оболочку. В этой модели инъекция индуцированной каррагинаном воспалительной клеточной инфильтрации увеличивала экссудат, что свидетельствует о просачивании сосудов. Воздушный мешок служит резервуаром воспалительных клеток и медиаторов, которые можно легко измерить в жидкости, которая скапливается локально.
Хорошо известно, что среди разнообразных медиаторов воспаления, которые могут индуцировать сосудистую проницаемость, NO и PGE2 являются основными факторами, участвующими в патогенезе многих воспалительных заболеваний [24,25]. Они также известны как медиаторы индукции и восприятия боли [10,11]. iNOS, которая экспрессируется и активируется в различных типах клеток путем стимуляции TNF- и/или LPS во время воспаления, продуцирует высокие стойкие концентрации NO [3, 5-7]. NO является важной регуляторной молекулой в различных физиологических функциях, таких как вазодилатация, приводящая к утечке из сосудов [8,9].PGE2, который образуется из арахидоновой кислоты через ЦОГ, способствует развитию многих воспалительных заболеваний [26,27] и перепроизводство PGE2 в ответ на различные воспалительные стимулы связано с повышением уровня ЦОГ-II и прогрессированием воспаления [28]. Таким образом, пути TNF- -NO и COX-II-PGE2 считаются двумя основными потоками воспалительных процессов, которые блокируются ингибиторами iNOS (кортикостероиды) и COX (НПВП) соответственно [22,29].
В настоящем исследовании совместное введение фукоидана и CT(Цистанхе трубчатая)экстракт уменьшал объем экссудата в мешочке, предполагая, что они обладают подавляющей активностью против просачивания сосудов (рис. 2А). В сравнении с индивидуальными эффектами каждого фукоидана и CT(Цистанхе трубчатая)экстракта, комбинированное лечение еще больше увеличилось, что означает синергетическое действие двух соединений. Такие синергетические эффекты между фукоиданом и экстрактом CT были подтверждены их активностью в отношении уровней NO и PGE2 в экссудате (рис. 3B и 2C).
Интересно, однако, что было подтверждено, что фукоидан не ингибирует напрямую активацию макрофагов в анализе in vitro (рис. 1А). Точно так же ингибирующий потенциал фукоидана в отношении накопления NO и PGE2 в биопробе был относительно ниже, чем у CT.(Цистанхе трубчатая)экстракт (рис. 2B и 2C). Такой механизм действия фукоидана отличается от прямой инактивации клеток экстрактом СТ (рис. 1Б). Для сравнения, фукоидан проявлял высокую эффективность в ингибировании воспалительной клеточной инфильтрации в карманах (таблица 1). Фукоидан превосходил экстракт CT в блокировании миграции нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов в места повреждения тканей, вызванные каррагинаном. Интересно, что синергетического антимиграционного эффекта, свидетельствующего о различных механизмах действия фукоидана и экстракта CT, не наблюдалось: т. е. фукоидан блокирует инфильтрацию воспалительных клеток, в то время как CT(Цистанхе трубчатая)Экстракт ингибирует активацию клеток.
Полиморфноядерные клетки, особенно нейтрофилы, являются основными клеточными компонентами, рекрутируемыми в острые очаги воспаления, индуцированные каррагинаном. Кроме того, последующие воспалительные клетки, такие как макрофаги и лимфоциты, также играют центральную роль в воспалительном процессе, секретируя цитокины [22,30,31]. При предварительной обработке фукоиданом или CT(Цистанхе трубчатая)экстракта, количество лейкоцитов, которые мигрировали в воздушные мешочки с инъекцией каррагинана, было заметно подавлено. Этот результат согласовывался с эффектом, который был бы получен кортикостероидами, такими как дексаметазон, но не НПВП, включая индометацин [23,30]. Поэтому предполагается, что фукоидан и CT(Цистанхе трубчатая)Экстракт частично обладает свойствами стероидов.
Помимо блокирующего действия на хемотаксис воспалительных клеток, ХТ(Цистанхе трубчатая)Экстракт подавлял активацию макрофагов. Это было подтверждено его ингибирующим действием на NO in vitro и in vivo, который является основным медиатором воспаления, продуцируемым макрофагами. Таким образом, эффект КТ(Цистанхе трубчатая)экстракта на макрофагах может быть связано с подавлением экспрессии мРНК и/или прямым ингибированием активности iNOS в этих клетках.
PGE2 также является одним из основных медиаторов воспаления. Он нарастает параллельно отеку тканей, который подавляется НПВП, ингибиторами ЦОГ [21,22]. Каррагинан может увеличить продукцию PGE2, индуцируя мРНК COX-II и белок COX-II в экссудате мешочка [32]. В этой модели каррагинан значительно увеличивал количество PGE2 и существенно подавлял его с помощью КТ.(Цистанхе трубчатая)извлекать. Интересно отметить, что этот результат согласовывался с эффектом, который можно было бы получить с помощью НПВП индометацина [23]. Таким образом, из результатов следует, что экстракт CT обладает дополнительным свойством НПВП. В совокупности считается, что CT(Цистанхе трубчатая)Экстракт оказывал как кортикостероидное, так и НПВП-подобное действие в модели воспаления, вызванного каррагинаном, и что фукоидан усиливалпротивовоспалительное средствоэффекты экстракта СТ путем блокирования инфильтрации воспалительных клеток.
Хотя определение точного механизма действия требует дальнейшего изучения, смесь фукоидана и CT(Цистанхе трубчатая) Экстракт заметно ослаблял воспалительные признаки, блокируя пути TNF-NO и COX-II-PGE2 при воспалении воздушных мешочков, вызванном каррагинаном. Эти данные свидетельствуют о том, что комбинированное лечение фукоиданом и КТ(Цистанхе трубчатая)Экстракт может быть многообещающим кандидатом для облегчения различных типов воспаления, которые реагируют на кортикостероиды или НПВП.
использованная литература
1. День Р. Побочные реакции на ингибиторы ФНО- при ревматоидном артрите. Ланцет 2002; 359(9306): 540-541.
2. Фельдманн М., Бреннан Ф.М., Майни Р.Н. Роль цитокинов при ревматоидном артрите. Annu Rev Immunol 1996; 14: 397-400.
3. Эйглер А., Синха Б., Хартманн Г., Эндрес С. Укрощение ФНО: стратегии сдерживания этого провоспалительного цитокина. Immunol Today 1997;18(10): 487-492.
4. Эршлер В.Б., Келлер Э.Т. Связанная с возрастом повышенная экспрессия -6гена интерлейкина, болезни позднего возраста и слабость. Анну Рев Мед2000; 51: 245-270.
5. Адамс В., Нерхофф Б., Спэте У., Линке А., Шульце П.С., Баур А., Гилен С., Хамбрехт Р., Шулер Г. Индукция экспрессии iNOS в скелетных мышцах с помощью IL -1 и активации NFκB: исследование in vitro и in прижизненное исследование. Cardiovasc Res 2002; 54(1): 95-104.
6. Xie QW, Whisnant R, Nathan C. Промотор мышиного гена, кодирующего кальций-независимую синтазу оксида азота, обеспечивает индуцируемость интерфероном и бактериальным липополисахаридом. J ExpMed 1993; 177(6): 1779-1784.
7. Yui Y, Hattori R, Kosuga K, Aizawa H, Hiki K, Kawai C. Очистка синтазы оксида азота из крысиных макрофагов. Дж. БиолХим, 1991; 266(19): 12544-12547.
8. Marletta MA, Yoon PS, Iyengar R, Leaf CD, Wishnok JS. Окисление L-аргинина макрофагами до нитритов и нитратов: оксид азота является промежуточным продуктом. Биохимия 1998; 27(24): 8706-8711.
9. Монкада С., Палмер Р.М., Хиггс Э.А. Оксид азота: физиология, патофизиология и фармакология. Фармакол, ред. 1991 г.; 43(2):109-142.
10. Панг Л., Холт Дж. Р. Цитотоксичность по отношению к макрофагам тетрандрина, антисиликозного алкалоида, сопровождающаяся гиперпродукцией простагландинов. Биохим Фармакол 1997; 53(6): 773-782.
11. Hunskaar S, Hole K. Формалиновый тест на мышах: диссоциация между воспалительной и невоспалительной болью. Боль 1987; 30:103-114.
12. Лестер Р.С., Ноулз С.Р., Шир Н.Х. Риски системного применения кортикостероидов. Дерматол Клин 1998; 16(2): 277-288.
13. Лихтенштейн Д.Р., Сингал С., Вулф М.М. Нестероидныйпротивовоспалительное средстволекарств и желудочно-кишечного тракта. Обоюдоострый меч. артрит ревматоидный 1995; 38(1): 5-18.
14. Мукерджи Д., Ниссен С.Е., Тополь Э.Дж. Риск сердечно-сосудистых событий, связанный с селективными ингибиторами ЦОГ-2. ЯМА 2001; 286(8):954-959.
15. Фельдман С.К., Рейнальди С., Шторц К.А., Серезо А.С., Дамонт Э.Б. Противовирусные свойства фракций фукоидана из Leathesiadifformis. Фитомедицина 1999; 6(5): 335-340.
16. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Потенциальная антиоксидантная и антикоагулянтная способность низкомолекулярных фракций фукоидана, извлеченных из Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
17. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan улучшает почечный кровоток на ранней стадии почечной ишемии/реперфузионного повреждения у крыс. JPhysiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
18. Li N, Zhang Q, Song J. Токсикологическая оценка фукоидана, извлеченного из Laminaria japonica, у крыс Wistar. Food ChemToxicol 2005; 43(3): 421-426.
19. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Ингибирующее действие актеозида, выделенного из Cistanche tubulosa, на высвобождение химического медиатора и продукцию воспалительных цитокинов клетками RBL-2H3 и KU812. Планта Мед 2010; 76(14): 1512-1518.
20. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB.Противовоспалительное средствовлияние этанольного экстракта дягиля гигантского на модель воспаления каррагинан-воздушного мешочка. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
21. Хевель Дж.М., Марлетта М.А. Анализ синтазы оксида азота. МетодыEnzymol 1994; 233: 250-258.
22. Romano M, Faggioni R, Sironi M, Sacco S, Echtenacher B, DiSanto E, Salmona M, Ghezzi P. Индуцированное каррагинаном острое воспаление в синовиальной модели воздушного мешка мыши. Роль фактора некроза опухоли. Медиаторы Inflamm 1997; 6(1): 32-38.
23. Уоллес Дж. Л., Чепмен К., Макнайт В. Лимитедпротивовоспалительное средствоэффективность ингибирования циклооксигеназы-2 при воспалении каррагинан-воздушного мешка. Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
24. Гусланди М. Оксид азота и воспалительные заболевания кишечника. Евро Джей Клин Инвест 1998; 28(11): 904-907.
25. Ritchlin CT, Haas-Smith SA, Li P, Hicks DG, Schwarz EM. Механизмы TNF- - и RANKL-опосредованного остеокластогенеза и резорбции костей при псориатическом артрите. J Clin Invest 2003;111(6): 821-831.
26. Minghetti L. Циклооксигеназа-2 (ЦОГ-2) при воспалительных и дегенеративных заболеваниях головного мозга. J Neuropathol Exp Neurol 2004;63(9): 901-910.
27. St-Onge M, Flamand N, Biarc J, Picard S, Bouchard L, DussaultAA, Laflamme C, James MJ, Caughey GE, Cleland LG, BorgeatP, Pouliot M. Характеристика образования простагландина E2 посредством циклооксигеназы (ЦОГ){ {3}} путь в нейтрофилах человека. Biochim Biophys Acta 2007; 1771(9): 1235-1245.
28. Чой Ю. Х., Пак Х.И.Противовоспалительное средствоэффекты спермидина на липополисахарид-стимулированные клетки микроглии BV2. J Biomed Sci2012; 19:31.
29. Уоллес Дж.Л., Чепмен К., Макнайт В. Лимитедпротивовоспалительное средствоэффективность ингибирования циклооксигеназы-2 при воспалении каррагинан-воздушного мешка. Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
30. Оливейра де Мело Х., да Консейсао Торрадо Труити М., Мускара М.Н., Болонхейс С.М., Дантас Х.А., Капарроз-Ассеф С.М., Куман Р.К., Берсани-Амадо К.А.Противовоспалительное средствоактивность сырого экстракта и фракций листьев Nectandra falcifolia. Биол Фарм Булл 2006; 29(11): 2241-2245.
31. Занардо Р.С., Бранкалеоне В., Диструтти Э., Фиоруччи С., Чирино Г., Уоллес Дж.Л. Сероводород является эндогенным модулятором воспаления, опосредованного лейкоцитами. FASEB J 2006; 20(12): 2118-2120.
32. Masferrer JL, Zweifel BS, Manning PT, Hauser SD, Leahy KM, Smith WG, Isakson PC, Seibert K. Селективное ингибирование индуцибельной циклооксигеназы 2 in vivoпротивовоспалительное средствои неулькоэрогенные. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91(8): 3228-3232.
