Антидепрессивное и когнитивное действие традиционной китайской травы цистанхе Ⅰ
Jun 23, 2022
Абстрактный
Более десяти процентов людей страдают хотя бы от одного эпизода депрессии и связанных с ней психических расстройств в течение жизни, а депрессия и связанные с ней психические расстройства являются одной из самых серьезных проблем общественного здравоохранения в мире. Теория множественных систем утверждает, что дисрегуляция множественных систем лежит в основе патогенеза депрессии и связанных с ней психических расстройств, и срочно необходимы новые методы лечения, основанные на теории дисрегуляции множественных систем. В данном исследовании изучалось антидепрессивное действие отвара из травыЦистанхе пустыннаяYCMa иЦистанхе трубчатаябыл осмотрен. траваЦистанхеотвар значительно сократил период неподвижности в тесте подвешивания мыши за хвост. Мыши, получавшие отвар травы, показали улучшение способности к пространственному обучению и памяти в тесте водного лабиринта Морриса. В группах, получавших отвар травы, наблюдалась сниженная активность моноаминоксидазы (МАО); концентрация дофамина (DA) в головном мозге повышалась, что указывает на то, что траваЦистанхеотвар улучшал нервную возбудимость; концентрация кортикостерона в сыворотке (CORT) была снижена, что свидетельствует о том, что снижение уровня стресса принесло пользу мышам. Таким образом, эффективность антидепрессанта и механизм действиятрадиционная китайская траваЦистанхебыли изучены в данном исследовании. траваЦистанхепоказали потенциал для разработки в качестве дополнительной и альтернативной терапии депрессии.
1. Введение
Депрессия и связанные с ней аффективные расстройства, по оценкам, от 12 до 17 процентов населения испытывают по крайней мере один эпизод в жизни, являются одной из основных причин психических расстройств и считаются одной из основных проблем общественного здравоохранения во всем мире. Особое значение имеет то, что значительная часть пациентов с депрессией страдает от потери памяти, проблем с концентрацией внимания, снижения энергии или утомляемости, потери интереса или удовольствия от хобби и занятий, а также от проблем со сном, раннего пробуждения или пересыпания. Хотя нейронные субстраты аномалий при депрессии и родственных синдромах неясны, общепризнано, что нарушение нейропластичности и клеточной устойчивости приводит к патофизиологии депрессии, и успешное лечение может зависеть от вмешательства на уровне нейротрансмиттеров. Подход к лечению депрессии в основном основан на классической гипотезе моноаминовой системы, которая утверждает, что нарушение регуляции моноаминов, особенно серотонина (5-HT) и норэпинефрина (NE), способствует патогенезу депрессии и вмешательству нейротрансмиттерной системы в дофамин. агонисты и дофамин-норадренергические модуляторы могут облегчить симптомы большого депрессивного расстройства. Хотя антидепрессанты широко назначаются, лечебная эффективность антидепрессантов сомнительна, а побочный эффект нельзя игнорировать, поскольку значительная часть пациентов не реагирует на манипуляции с моноаминовой системой. В последнее время новые теории патогенеза депрессии показывают, что множественные системы, включая пути воспаления, пути окислительного стресса, гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую (ГГН) ось, метаболическую и биоэнергетическую системы, нейротрофические пути, глутаматную систему, опиоидную систему и холинергической системы, тесно связаны с возникновением депрессии. Имеющиеся данные показывают, что множественное целевое вмешательство дает более высокую эффективность, чем одно целевое вмешательство. Срочно необходимы новые методы лечения, основанные на теории множественной системной дисрегуляции.
Поиск более подробной информации о преимуществах Cistanche
Сообщается, что растительные продукты потребляет более половины населения США; Интерес и спрос на травы или растительные продукты в качестве дополнительного способа лечения депрессии растут во всем мире. Обнаружено, что многие лекарственные растения демонстрируют благотворное действие при депрессии. Травы, которые, как сообщается, обладают эффектом подавления депрессии и улучшения когнитивных функций, включают облепиху,Гинкго билоба,Перец черный,зверобой продырявленный,Грифония простолистная. Комбинированное введение феруловой кислоты и пиперина показало синергетический антидепрессантоподобный эффект у мышей за счет воздействия на моноаминергическую систему. Альбифлорин характеризовался высоким избирательным сродством к рецепторам и транспортерам нейротрансмиттеров и значительно увеличивал внеклеточные концентрации 5-HT и NE в гипоталамусе свободноподвижных крыс. Лекарственное растениеМелисса лекарственнаяЛ. купировал депрессивное поведение мышей, оказывая влияние на уровень серотонинергических нейротрансмиттеров. Эти травы или отвары, разработанные в качестве альтернативных средств от депрессии, помогают облегчить симптомы депрессии и обеспечивают новый источник для разработки антидепрессантов. траваЦистанхевиды, распространенные в засушливых землях и пустынях северной части Китая, являются травами традиционной китайской медицины и широко используются в Китае для лечения различных заболеваний уже более 1,000 лет. Многократная эффективность травыЦистанхеотвар колеблется между афродизиаком [14], иммуностимулирующие [15], антиоксидантный [16] и гепатопротекторное [17] характеристики.С. пустынныйотвары индуцируют тестикулярные стероидогенные ферменты [18], способствуют эректильной реакции полового члена и сокращают латентный период эректильной реакции у кастрированных крыс [19]. траваЦистанхеСообщалось, что он подавляет активность дофаминергических нейронов, регулируя ингибиторные апоптозные гены и нейротрофические факторы.20].С. тубулозаотвары корректировали когнитивную дисфункцию, вызванную A 1-42 за счет блокирования отложения амилоида и восстановления функции холинергических и дофаминергических нейронов гиппокампа [21]. Нейропротекторное свойство травЦистанхеподразумевает терапевтический потенциал при когнитивных заболеваниях. Депрессия является распространенным смешанным типом эмоциональных реакций с забывчивостью и снижением когнитивных функций в качестве общих симптомов.22]. траваЦистанхеобычно использовался в традиционной китайской медицине для лечения забывчивости; кроме того, недавний отчет показывает, что раннее введение кукурузной муки с добавлениемС. тубулозаполезен для увеличения продолжительности жизни и улучшения обонятельного обучения и памяти у беспозвоночныхдрозофиламодель [23]. Эти факты указывают на улучшающее когнитивные функции свойство травы.Цистанхе; здесь, в этом исследовании, мы впервые охарактеризовали антидепрессивное свойство и его связь с деятельностью по улучшению когнитивных функций в модели млекопитающих путем регуляции моноаминовой системы и оси HPA. Освещая антидепрессивное свойство и предварительный механизм травыЦистанхеможет расширить спектр применения травыЦистанхе, который может быть разработан как альтернативное средство от депрессии.
2. Материалы и методы антидепрессивной функции цистанхе
2.1. Растительное сырье и приготовление отвара цистанхе
С. пустынныйYCMa был получен из Ней-Монгольской автономной области, Китай;С. тубулозабыл получен из Синьцзян-Уйгурского автономного района, Китай. Перед отваром траву (С. пустынныйYCMa илиС. тубулоза) проверяли на содержание эхинакозида и вербаскозида с помощью ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии) (Милфорд, Массачусетс, Уотерс, США), и подходящий продукт (согласно Фармакопее Китайской Народной Республики) использовали для экспериментов на животных. . Отвар был получен на основе метода выпаривания воды, разработанного Исследовательским центром пищевой и медицинской инженерии Министерства государственного образования Университета Сунь Ятсена. СушеныйЦистанхе пустынная125 г YCMa измельчали и просеивали через 120-сетчатое сито, затем порошок растворяли в 3 л сверхчистой воды, нагревали при 1{9}}0 градусах в течение 2 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и просеивали. ; супернатант рециркулировали. Затем осадок растворяли в 2 л сверхчистой воды, затем нагревали в течение 1,5 ч и охлаждали, как указано выше, для повторного использования супернатанта; затем осадок использовали для повторного использования супернатанта. Содержимое всего супернатанта обогащали на роторно-вакуумных испарителях при 60°; наконец, концентрацию неочищенного лекарственного средства устанавливали равной 0,5 г/мл, и продукт хранили при температуре -20°С.
2.2. Анализ эхинакозида и вербаскозида методом ВЭЖХ
ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) использовали для измерения качественного и количественного анализа эхинакозида и вербаскозида; вербаскозид (чистота > 93 процентов) и эхинакозид (чистота > 93 процентов) были приобретены в Национальном институте контроля пищевых продуктов и лекарственных средств (Пекин, Китай) и использовались в качестве стандартного контроля.
2.3. Уход за животными и проведение экспериментов на цистанхе
Субъектами были SPF (свободные от специфических патогенов) самцы мышей Kunming весом 21–25 граммов, предоставленные Медицинским экспериментальным центром животных провинции Гуандун. Животных содержали в пластиковых клетках (по десять на клетку); Условия окружающей среды были установлены следующим образом: влажность 40~70 процентов, комнатная температура 21 ± 1 градус и период свет-темнота 12 часов: 12 часов. Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике животных Университета Сунь Ятсена.
2.4. Тест на подвешивание за хвост на цистанхе
Тест на подвешивание за хвост проводили в соответствии с протоколом, описанным Cryan et al. [24] с небольшими изменениями. Вкратце, на 21-й день мышей подвешивали за хвост с помощью металлической виселицы, привязанной нейлоновым катетером, с головой на высоте 50 мм от пола. Мышей подвешивали на крючок на липких лентах в 10-20 мм от конца хвоста и акустически и визуально изолировали вагонкой. Регистрировали движения тела мыши, дыхательные движения не учитывали. Перед днем эксперимента мышей вывешивали на 8 мин для адаптации.
2.5. Тест водного лабиринта Морриса на цистанхе
Тест водного лабиринта проводили по описанию Vorhees et al. [25–27] с помощью устройства, разработанного Китайской академией медицинских наук. Использовался круглый бассейн (диаметром 150 см), заполненный водой (26 ± 1 градус; высота края (расстояние от поверхности воды до края стены): 10 см), круглая спасательная платформа (диаметр: 11 см, расстояние между центром платформы и бассейном). стенка: 27 см) погружали на 1–1,5 см ниже поверхности воды, а зону тестирования освещали непрямым светом (50 ± 10 лк), чтобы избежать отражений. Были использованы четыре начальных местоположения: север, юг, восток и запад. Для теста на пространственное обучение животных обучали ежедневно в 9-11 дни в фиксированном начальном месте. Латентный период побега измеряют, чтобы показать пространственную память и способность к обучению мышей. Если мыши не могли найти платформу или забраться на нее, мышей выводили на платформу и оставались там в течение 10 с. После отдыха в течение 60 с начинался следующий сеанс тренировки. Данные, полученные в ходе последнего теста на пространственное обучение, использовались в качестве базового значения для моделирования. На 23–28-е сутки выполнялись локационная проба и пространственное зондирование. Тест на плавание в месте длился 6 дней и проводился в 13 часов, животных помещали в воду головой к стенке бассейна по часовой стрелке и регистрировали латентный период (в течение 2 мин). После того, как был проведен тест навигации по месту, платформа была удалена. Мышей помещали в воду головой к стене бассейна в случайном месте, и регистрировали след движения и частоту, с которой мыши переплывали место, где находилась платформа, в течение 2 минут. След движения регистрировали многофункциональным автономным регистратором движений мышей (YLS-1A, Yiyan Technology, Цзинань, Китай).
2.6. Обнаружение активности МАО
Активность МАО измеряли с использованием набора для обнаружения МАО (A034, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Нанкин, Китай), и определение проводили в соответствии с протоколом производителя. Получен гомогенат ткани головного мозга; 500μл смешали с 300μл Агента 1 и 300μл Агента 2, инкубируют 3 ч при 37°С, затем последовательно добавляют 300μл. Агента 3, 3 мл Агента 4 и встряхивают 2 мин. Реакционную смесь центрифугировали при 3{5}} об/мин в течение 10 мин и определяли оптическую плотность надосадочной жидкости с помощью спектрофотометра ультрафиолетового и видимого спектра (Lambda 25, PerkinElmer, США) с использованием возбуждающего света с длиной волны 242 нм.
2.7. Иммуноферментный анализ нейротрансмиттеров, АКТГ и КОРТ
Набор для определения дофамина (DA), норадреналина (NE) и 5-гидрокситриптамина (5-HT) для иммуноферментного анализа (ELISA) был приобретен у BLUE GENE, Шанхай. Наборы для обнаружения ELISA были куплены у Qiyun Biotech, Гуанчжоу.
Процедуры таковы: эксперимент проводился при комнатной температуре. Покройте лунки титрационного микропланшета из ПВХ захватывающим антителом при концентрации 1–10.μконцентрация г/мл в карбонатно-бикарбонатном буфере (pH 9,6). Закройте планшет и инкубируйте в течение ночи при 4 градусах; промывают планшет PBS/твином 3 раза, а сайты неспецифического связывания блокируют блокирующим раствором; затем промыть планшет с PBS/tween 3 раза. Стандарты и образцы разбавляют блокирующим раствором и 100μл. добавляют в лунку планшета, планшет закрывают и инкубируют при 37°С в течение 1 ч. Добавить 100μl разведенное детектирующее антитело и инкубировать планшет при 37°С в течение 1 ч; промыть планшет с PBS/Tween 3 раза. Добавить 50μл раствора для проявления окраски и держите планшет вдали от света и инкубируйте его при комнатной температуре в течение 15 мин; 50μl стоп-буфер добавляется для остановки реакции. Измерьте оптическую плотность (ОП) для каждой лунки с помощью устройства для чтения микропланшетов, установленного на 405 нм, за 30 мин.
2.8. Статистический анализ
Все данные были представлены как среднее ± SEM (стандартная ошибка среднего), достоверное различие было проанализировано с помощью t-критерий или однофакторный дисперсионный анализ с последующим множественным критерием диапазона Дункана с использованием SPSS 16.0, а также различия между группами сP< 0.05 считались статистически значимыми.