Изучение ломтиков Cistanche Deserticola и винного продукта, обработанного паром из Cistanche Deserticola

Различие химических компонентов и биологической активности ломтиков сырых продуктов и винного продукта паровой обработки из Cistanche

Контактное лицо: emily.li@wecistanche.com

Ин Чжан, 1, 2 Юэу Ван, 3 Сун Ян, 1 Юньфэн Сяо, 3 Хайбинь Гуань, 2 Синь Юэ, 2 Сяоцинь Ван, 2 и Сянгри Ли 1

Абстрактный

Как известное китайское лекарственное средство на травах,Цистанхе пустыннаяиспользовался для лечения синдрома почечной недостаточности в Китае в течение тысяч лет. Оба сырых продуктаЛомтики цистанхе пустынной(УЗО) и егоПродукт паровой обработки вина(WSCD) используются клинически для различных эффектов. В этом исследовании влияние процесса пропаривания вина (SPW) наЦистанхе пустыннаяна химический состав и биологические эффекты были исследованы. Анализ главных компонентов (PCA) и количественный анализ были использованы для изучения различий в химическом составе. Эффекты питания почек также были исследованы, чтобы сравнить различия между RCD (ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД (Продукт паровой обработки вина). Результаты PCA показали, что очевидное разделение было достигнуто в RCD.(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД (Продукт паровой обработки вина). Результаты количественного анализа показали, что WSCD имеет более высокие количества общих полисахаридов, общих PhG, изоактеозида и османтусида B, чем RCD.(ломтики цистанхе пустынной), тогда как содержание 2'-ацетилактеозида и актеозида снижалось после СПВ. Сравнение RCD и WSCD по биологической активности показало, что оба могут восстанавливать уровень половых гормонов в модели недостаточности почек-ян и улучшать антиоксидантный эффект. ВССД(Продукт паровой обработки вина)было намного лучше в увеличении веса внутренностейпочкаи семенных пузырьков. Результаты показали, что SPW изменил свои химические компоненты и усилил свою биологическую активность.

1. Введение

Цистанхе пустыннаяявляется обычной традиционной китайской медициной и обычно используется в качестве тонизирующего средства в Китае и Японии в течение многих лет, широко известный как «женьшень пустыни».Цистанхе пустыннаябыл впервые отмечен как высший сорт в «Травяной классике Материи медики Шэньнуна (Shen Nong Ben Cao Jing)» примерно в 100 г. до н.э. и использовался для лечения различных заболеваний, включая почечную недостаточность, импотенцию, женское бесплодие, болезненные лейкорея, обильная метроррагия (белые) , ощущение холода в пояснице и коленях и хронические запоры у пожилых людей [1]. К настоящему времени выделено несколько основных компонентов, таких как полисахариды [2, 3], фенилэтаноидные гликозиды (ФГ) [1, 4], иридоиды [1] и лигнаноиды [1, 5]. Показано, что среди них основными биологически активными компонентами являются ФГ и полисахариды.Цистанхе пустынная[6–9]. Современные фармакологические эксперименты доказали, что Cistanche Deserticola может усиливать выработку тестостерона и защищать сперму, стимулировать пролиферацию клеток и повышать выживаемость клеток, проявляя выраженную активность в отношении сексуальной потенции, улучшения памяти, омоложения, удаления свободных радикалов и нейропротекции [10]. –13].

Чтобы снизить токсичность и/или усилить эффект, большинство традиционных китайских трав следует обрабатывать перед назначением. Традиционные технологические этапы включают очистку, водную обработку (измельчение в воде, приготовление на пару и обжаривание) и огневую обработку (перемешивание с вином, уксусом, солью или медом) [14]. В процессе могут изменяться химические компоненты: может изменяться относительное содержание некоторых компонентов или образовываться новые компоненты [15]. ПроцессЦистанхе пустыннаяимеет долгую историю иЦистанхе пустыннаяследует обрабатывать путем замачивания в рисовом вине, пропаривания, как описано в Китайской фармакопее (издание 2015 г.) [16]. В соответствии с теорией традиционной китайской медицины (ТКМ) доказано влияние СПВ на меридиан почек [17]. ВССД(Продукт паровой обработки вина)впервые задокументировано в «Трактате Лэй Гонг о приготовлении и кипячении Материи медики (Лей Гун Пао Чжи Лунь)» во времена Северной и Южной династий Китая. WSCD лучше использовать для лечения почечной недостаточности и защиты спермы, как записано в «Taiping Shenghui Fang» китайской династии Сун. Однако сравнительных исследований химических компонентов между УЗО не проводилось.(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)уже.

Современные фармакологические исследования показали, что WSCD может тонизировать почки для обеспечения эссенции путем стимуляции оси гипоталамус-гипофиз-гонады в различной степени и используется для лечения дефицита в почках, такого как дефицит Ян почек [18]. Однако до настоящего времени различия в биологической активности между RCD(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)не исследованы. Недавно, чтобы облегчить экспериментальные исследования, модель животных с недостаточностью почек-ян была продублирована путем инъекции крысам высокой дозы гидрокортизона, у которых у крыс будут проявляться симптомы, очень напоминающие симптомы, описанные при дефиците почек-ян ТКМ [19, 20]. . Крысы с дефицитом Ян почек всегда имеют некоторые симптомы, такие как потеря веса, снижение потребления пищи, слабость, повышенное потребление воды и снижение активности. На этой животной модели были обнаружены различия эффектов питания почек между RCD и WSCD и даже раскрыта научная сущность традиционного китайского процесса.

Цистанхе пустынная выполняет множество функций.

2. Материалы и методы

2.1. Материалы и химикаты

Стандартные вещества, такие как актеозид, изоактеозид, эхинакозид, цистанозид А и 2'-ацетилактеозид, были приобретены у Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Шанхай, Китай). Цистанозид F, цистанозид C, османтузид B и тубулозид B были приобретены у Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Чэнду, Китай). Чистота всех стандартов не менее 98%. Метанол и ацетонитрил для ВЭЖХ были приобретены у Aladdin Chemistry Inc. (Шанхай, Китай). Деионизированную воду получали с использованием системы MilliQ50 SP Reagent Water System (Бедфорд, Массачусетс, США) для приготовления образцов и мобильных растворов. Все другие органические растворители, использованные в этом исследовании, были аналитической чистоты и приобретены у Shanghai Chemical Co. Ltd (Шанхай, Китай).

2.2. Коллекция образцов

все сырьеЦистанхе пустынная(7 партий образцов) были собраны Медицинским университетом Внутренней Монголии в провинциях Внутренняя Монголия и Нинся. Все были идентифицированы какЦистанхе пустыннаяYC Ma Сяо-цинь Ван, профессор кафедры фармакогнозии Медицинского университета Внутренней Монголии. Образец ваучера был передан на хранение в Фармацевтическую школу Медицинского университета Внутренней Монголии. После сбора соцветияЦистанхе пустыннаябыли удалены, стебли были нарезаны и высушены при комнатной температуре воздухом, а затем срезы были случайным образом разделены на две группы в каждой партии: одна RCD(ломтики цистанхе пустынной)а другой используется для подготовки WSCD(Продукт паровой обработки вина).

ВССД(Продукт паровой обработки вина)были приготовлены в лаборатории в соответствии с китайской фармакопеей (издание 2015 г.) [16], что означает, что нарезанный RCD(ломтики цистанхе пустынной)замачивали в рисовом вине в закрытой посуде на 6 ч до мягкости, пропаривали на водяной бане еще 12 ч до почернения поверхности и сушили при комнатной температуре на воздухе.

2.3. Анализ главных компонентов (PCA)

Анализ главных компонентов (PCA) — это сложный метод, широко используемый для уменьшения размеров многомерных задач. Это уменьшает размерность исходного набора данных, объясняя корреляцию между большим количеством переменных с точки зрения меньшего числа основных факторов без значительной потери информации. В этом исследовании различия между RCD(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)были выполнены методом PCA без учителя с использованием программного обеспечения SIMCA 13.0 на основе относительных площадей пиков в хроматографии ВЭЖХ. С помощью PCA было обнаружено влияние основных химических веществ на классификацию среди различных образцов.

2.4. Базовые приготовления

2.4.1. Подготовка экстракта для животных

УЗО(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)были отобраны из проб, собранных и подготовленных, как описано в разделе 2.2.

Сушеный и нарезанный RCD(ломтики цистанхе пустынной)измельчали ​​в порошок с помощью измельчителя (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), точно взвешивали 1,0 кг и вымачивали в 50-процентном этаноле в течение 30 минут, а соотношение растения/этанола составляло 1/ 10 (вес/вес). Затем дважды экстрагировали с обратным холодильником по 1 ч каждый раз. Два экстракта объединяли и фильтровали, и этанол извлекали при пониженном давлении при 60°С. Общий неочищенный экстракт ФГ высушивали в вакууме при 60°С и очищали макропористой смолой. Наконец, экстракт PhGs RCD был получен и точно взвешен.

Экстракт PhG из WSCD(Продукт паровой обработки вина)был получен по той же процедуре, что и выше.

Осадок после экстрагирования ФГ подсушивали на воздухе и дважды декоктировали по 1,5 ч каждый раз 20-кратным количеством воды. Два экстракта объединяли и центрифугировали при 4000 об/мин в течение 10 мин, супернатант концентрировали и осаждали 95%-ным этанолом. После центрифугирования осадок сушили в вакууме при 60°С. Наконец, полисахаридный экстракт RCD(ломтики цистанхе пустынной)было получено и точно взвешено.

Экстракт полисахарида WSCD(Продукт паровой обработки вина)был получен по той же процедуре, что и выше.

PhG и полисахаридные экстракты RCD(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)представляли собой смешанные суспензии в воде соответственно при пероральном лечении крыс.

2.4.2. Подготовка проб для определения ФГ

Экстракты PhG в разделе 2.4.1 были точно взвешены как 0,15 г и экстрагированы ультразвуком с 50% водным раствором метанола 5{9}} мл в течение 40 минут. После охлаждения потерю веса восполняли 50-процентным метанолом. Все образцы и растворители перед анализом фильтровали через мембрану 0,45 мкм. Содержание четырех PhG в RCD(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)определяли с помощью ВЭЖХ, а общее количество PhG определяли с помощью УФ-спектрофотометрии.

2.4.3. Подготовка проб для определения полисахаридов

Экстракты полисахаридов в разделе 2.4.1 были точно взвешены как 0,10 г и экстрагированы ультразвуком с 50 мл горячей воды в течение 40 минут; после охлаждения потерю веса восполняли водой. Все образцы и растворители перед анализом фильтровали через мембрану 0,45 мкм.

2.5. Хроматографические условия ВЭЖХ и определение четырех PhG

Хроматографическое разделение проводили на ВЭЖХ-системе UltiMate 300{{40}} (Thermo Fisher Scientific, США), оснащенной двухградиентным насосом, отсеком колонки и детектор DAD. Данные были собраны и обработаны с использованием системы хроматографических данных ChromeLeon. Образцы разделяли на Agilent Zorbax SB-C18 (25{45}} мм × 4,6 мм, 5 мкм) с защитной колонкой C18 (4,6 мм × 12,5 мм, 5 мкм). Подвижная фаза состояла из ацетонитрила (А) и 0,1% раствора фосфорной кислоты (В) при скорости потока 1 мл/мин. Градиент элюирования следующий: начальный 0–13 мин, линейное изменение от AB (5:95, об./об.) до AB (15:85, об./об.); 13–25 мин, линейный переход на АВ (20:80, об/об); 25–43 мин, линейный переход к АВ (25:75, об/об). Длина волны детектора контролировалась при 330 нм. Температура колонки была установлена ​​на уровне 30 градусов, а объем вводимой пробы составлял 10 мкл [21]. Исходный раствор, содержащий четыре эталонных стандарта, был приготовлен путем растворения эталонных стандартов в 50-процентном метаноле до конечной концентрации 0,20 мг/мл для 2-ацетилактеозида, 0,20 мг/мл для актеозида, 0,05 мг/мл для османтусида В, и 0,10 мг/мл для изоактеозида. Затем раствор разбавляли до пяти различных концентраций в трех повторностях для построения калибровочных кривых. Содержание пробы выражали в г/кг сырой массы.

Изучение ломтиков цистанхе пустынной и винного продукта, обработанного паром из цистанхе пустынной

2.6. Определение общего количества PhG

Суммарные ФГ определяли методом УФ-спектрофотометрии при длине волны 330нм на спектрофотометре UV1000 (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). Исходный раствор готовили путем растворения стандартов эхинакозида в 50-процентном метаноле до конечной концентрации 0,10 мг/мл, а затем разбавляли до пяти различных концентраций в трех повторностях для построения калибровочных кривых.

2.7. Определение полисахаридов

Определение полисахаридов проводили фенол-сернокислотным методом. В пробирку объемом 20 мл со стеклянной пробкой помещали 1 мл раствора пробы, добавляли 1 мл 6-процентного раствора фенола и 5 мл концентрированной серной кислоты и встряхивали в течение 5 мин. Смесь переносили на кипящую водяную баню на 10 мин и охлаждали до комнатной температуры для обнаружения в ультрафиолете. Ультрафиолетовое поглощение контролировали при 480 нм на спектрофотометре UV1000. Эталонный стандарт безводной D-глюкозы точно взвешивали и растворяли в дистиллированной воде до конечной концентрации 0,10 мг/мл. Затем раствор разбавляли до пяти различных концентраций в трех повторностях для построения калибровочных кривых.

2.8. Эксперименты на животных

2.8.1. Животные и жилье

Половозрелые самцы крыс SD (180-200 г) были приобретены на экспериментальной животноводческой ферме Xinglong (Пекин) (возраст: 6 недель), и лицензия на лабораторное животное была SCXK (Jing):2016-0003. Все процедуры с животными были одобрены Комитетом по исследованию животных Медицинского университета Внутренней Монголии и проводились в соответствии с рекомендациями Национального института здравоохранения в отношении принципов ухода за животными (2004 г.). Всех животных содержали в барьерной системе с регулируемой температурой 21–23°С и относительной влажностью 40–65% при 12-часовом цикле темнота/свет. Крысам давали пищу и воду ad libitum, и они акклиматизировались к вышеуказанной среде в течение недели.

2.8.2. Дозировка и отбор проб

Крыс переносили в индивидуальные метаболические клетки и произвольно делили на 6 групп (= 10 в каждой группе). Им вводили внутримышечно 15 мг/кг сукцината гидрокортизона натрия (приобретенного у Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай) в течение 2 недель, за исключением группы 1, которой вводили равный объем физиологического раствора. На 14-й день были собраны данные о массе тела, потреблении пищи, потреблении воды, объеме мочи и спонтанной активности в течение 5 минут, чтобы убедиться, что модель дефицита почек-ян была успешной. С 15-го дня 6 групп лечили следующим образом: 1-я и 2-я группы (модельная группа, М) обрабатывались равным объемом дистиллированной воды, 3-я группа (PhGs экстракт RCD(ломтики цистанхе пустынной)группу, PR) обрабатывали 0,42 г/кг экстракта PhGs RCD, что равнялось примерно 1,8 г/кг сырогоЦистанхе пустыннаяи остальные группы были такими же, группа 4 (PhGs экстракт WSCD(Продукт паровой обработки вина)группа, PW) получали дозу 0,49 г/кг экстракта PhG WSCD(Продукт паровой обработки вина), группа 5 (полисахаридный экстракт RCD(ломтики цистанхе пустынной)группу SR) обрабатывали 0,18 г/кг полисахаридным экстрактом RCD, а группу 6 - (полисахаридным экстрактом WSCD(Продукт паровой обработки вина)группу SW) лечили дозой 0,22 г/кг полисахаридного экстракта WSCD. Всем крысам проводили перфузию желудка в сутки. После месячного лечения крысам отказывали в пище в течение 12 ч до забора крови. На следующий день всех крыс анестезировали и умерщвляли. Во время тестирования крыс взвешивали один раз в неделю для корректировки дозировки и снова взвешивали перед умерщвлением. Образцы крови собирали в пробирку Эппендорфа с 10-процентным раствором ЭДТА-2Na. Сыворотку отделяли центрифугированием при 2000 об/мин в течение 15 мин и хранили при -80 градусах для дальнейшего использования. Кроме того, удаляли и быстро взвешивали почки, яички, придатки яичек, предстательную железу и семенные пузырьки. После взвешивания яички замораживали в жидком азоте для определения СОД и МДА.

2.9. Анализ гормонального и антиоксидантного действия

Уровень тестостерона (Т) и эстрадиола (Е2) определяли в Центре контроля качества Циндао Кечуан радиоиммунным и колориметрическим методом. Замороженные яички взвешивали и смешивали с 20-кратным количеством холодного физиологического раствора (W/W). Гомогенат яичка, полученный гомогенатом ткани в бане со льдом, центрифугировали для получения надосадочной жидкости. Содержание СОД и МДА яичка определяли наборами СОД и МДА согласно инструкции.

2.10. Статистический анализ

Значимость различий между группами сравнивали с помощью одностороннего теста ANOVA, за которым следовал критерий Шеффе с пределом значимости 0.05 с использованием программного обеспечения SPSS 25.0. Все данные были выражены как среднее ± стандартное отклонение (SD) (n=3).

3. Результаты

3.1. Анализ изменений ФГ после ИПР с использованием АФК

Для сравнения изменений PhGs после SPW в качестве характеристических пиков были выбраны и идентифицированы 9 хроматографических пиков. Их структуры показаны на рис. 1, относительные площади пиков которого рассчитаны для количественного выражения. Хроматограмма ВЭЖХ, показанная на рис. 2, свидетельствует об изменении относительного содержания основных ФГ во время СПВ. PCA-анализ относительных площадей пиков 9 компонентов был получен для различения различных образцов. УЗО(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)были далеки друг от друга на графике баллов (рис. 3(а)), что указывало на то, что выборки были разделены на два кластера. Так что считается, что содержание химических составляющих было разным. Чтобы дополнительно найти потенциальные химические маркеры для различения, был проведен расширенный статистический анализ для создания графика нагрузки Bi (рис. 3 (b)). Пики 2, 3, 4, 6 и 7 уменьшатся после SPW, а пики 5, 8 и 9 увеличатся, и все они были наиболее важными компонентами, позволяющими отличить RCD.(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина). Относительное содержание пика 1 не сильно меняется после СПВ.

Рисунок 1. Химическая структура PhG вЦистанхе пустыннаяЮК Ма.

Рис. 2. ВЭЖХ-хроматограмма стандартного вещества (а), RCD(ломтики цистанхе пустынной)(б) и ВССД(Продукт паровой обработки вина)(с). Пики: (1) цистанозид F, (2) эхинакозид, (3) цистанозид A, (4) актеозид, (5) изоактеозид, (6) цистанозид C, (7) 2'-ацетилактеозид, (8) османтузид B, и (9) тубулозид В.

Рисунок 3. График оценки PCA (a) и график нагрузки Bi (b) RCD.(ломтики цистанхе пустынной)(зеленый кружок) и WSCD (красный кружок). RCD и WSCD были разделены на два кластера. Пики 2, 3, 4, 6 и 7 являются наиболее важными компонентами для различения RCD и WSCD, которые будут уменьшаться во время SPW; пики 5, 8 и 9 также являются наиболее важными компонентами различий между RCD и WSCD.(Продукт паровой обработки вина), который будет увеличиваться во время SPW.

3.2. Содержание общих полисахаридов и ФГ изменилось после СПВ.

Как показано на рисунке 3(b), 8 компонентов (5, 8 и 9 увеличились, а 2, 3, 4, 6 и 7 уменьшились) значительно изменились и оказали большое влияние на кластеризацию выборки. Среди них изоактеозид и османтузид B увеличились больше всего, в то время как 2'-ацетилактеозид и актеозид уменьшились больше всего. Так, методом ВЭЖХ определяли содержание изоактеозида, османтусида В, 2'-ацетилактеозида и актеозида. Как показано на рисунке 1, пик 4 представляет собой актеозид, пик 5 представляет собой изоактеозид, пик 7 представляет собой 2'-ацетилактеозид, а пик 8 представляет собой османтузид B. Общее количество PhG в RCD(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)были определены с использованием УФ-метода, а общие полисахариды были проведены с использованием фенол-сернокислотного метода, результаты представлены в таблице 1, изоактеозид, османтузид В, общие полисахариды и PhG в WSCD значительно увеличились по сравнению с RCD. 2'-ацетилактеозид и актеозид значительно уменьшились.

Таблица 1 Содержание полисахаридов и ФГ в РКС(ломтики цистанхе пустынной)и ВСКД(Продукт паровой обработки вина)(мг/г) (n=3).

Примечание. Существенные отличия от УЗО(ломтики цистанхе пустынной)были обозначены как *p < 0.05.

3.3. Создана модель почечно-янского дефицита, индуцированного гидрокортизоном

По сравнению с нормальной группой после 2-недельного внутримышечного введения 15 мг/кг гидрокортизона натрия сукцината масса тела, потребление пищи и спонтанная активность значительно снизились (P<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

Таблица 2 Показатели изменились после внутримышечного введения гидрокортизона натрия сукцината, (n=10).

Примечание. Достоверные различия с группой N обозначали как^# p<>

Рисунок 4 Уровни Т и Е2: (а) уровень Т и (б) уровень Е2. Достоверные различия с группой М обозначали как^∗р < 0.05.="" достоверные="" различия="" с="" группой="" n="" обозначали="">^#р < 0.05.

3.4. Влияние экстрактов на средний вес и индекс внутренних органов

Всех крыс и их внутренности взвешивали, а затем рассчитывали средний индекс внутренностей.

По сравнению с группой N, в группе М значительно уменьшился вес внутренностей почек, семенных пузырьков, придатка яичка и яичка, что также указывало на то, что модель дефицита почки-ян, вызванная гидрокортизоном, была успешно создана. По сравнению с группой М вес всех наблюдаемых внутренних органов увеличился в группе PW и SR, в группе PR увеличился вес яичка, придатка яичка, семенного пузырька и предстательной железы, а в группе SW увеличился вес почки, яичка, придатка яичка, и семенных пузырьков. По сравнению с группами PR, группа PW была лучше в почках, семенных пузырьках и предстательной железе. Не было существенной разницы между группами СР и СВ по массе яичка, придатка яичка, семенного пузырька и предстательной железы. Результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3 Вес внутренностей (г) (n=10).

Примечание. Достоверные различия с группой М обозначали как^∗р < 0.05.="" достоверные="" различия="" с="" группой="" n="" обозначали="">^#р < 0.05.

По сравнению с группой Н, в группе М были снижены внутренние индексы почек, яичка, придатка яичка и семенного пузырька. По сравнению с группой М, в группе PW и SR были повышены индексы почек, яичек, предстательной железы и семенных пузырьков, в группах PR - индекс яичек, предстательной железы и семенных пузырьков, а в группе SW - повышен индекс почек, яичка и семенного пузырька. По сравнению с группами PR, группа PW была лучше в почках, семенных пузырьках и предстательной железе. Группы SW и SR имели одинаковый индекс почек, яичек, семенных пузырьков и придатков яичек. Результаты представлены в таблице 4.

Таблица 4. Средний индекс внутренних органов (г/100 г) (n=10).

Примечание. Достоверные различия с группой М обозначали как^∗р < 0.05.="" достоверные="" различия="" с="" группой="" n="" обозначали="">^#р < 0.05.

3.5. Влияние экстракта на уровень гормонов (T и )

Как показано на рисунке 4, по сравнению с группой М уровни Т и Е2 во всех лечебных группах (группы PW, PR, SW и SR) значительно увеличились (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Влияние экстрактов на антиоксидантный эффект

СОД является важным антиоксидантным ферментом. МДА является продуктом перекисного окисления липидов и является индикатором, отражающим степень оксидантного повреждения. Содержание СОД и МДА отражает степень окислительной и антиоксидантной способности. Как показано на рисунке 5, по сравнению с группой М антиоксидантный эффект во всех группах лечения (PW, PR, SW и SR) был усилен. В группе SW было больше всегоантиоксидантэффект.

Рисунок 5. Содержание МДА и СОД: (а) содержание МДА и (б) содержание СОД. Достоверные различия с группой М обозначали как^∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>

4. Дискуссия

Перед клиническим применением необработанные материалы должны быть подвергнуты традиционным китайским технологическим процессам. Пропаривание является одним из традиционных подходов к обработке некоторых китайских лекарственных трав, что придает им черный цвет в результате реакции Майяра [22], увеличивает количество некоторых биологически активных компонентов [23] и фармакологическую активность. ВССД(Продукт паровой обработки вина)как один из продуктов процесса лучше с точки зрения питания почек по сравнению с РЦД(ломтики цистанхе пустынной)как указано в издании Китайской фармакопеи 2015 года. В этом исследовании результаты PCA показали, что SPW изменил химический профиль RCD.(ломтики цистанхе пустынной). Более того, 8 компонентов в PhG значительно изменились. Общее количество PhG, общее количество полисахаридов, изоактеозид и османтузид B увеличились больше всего, в то время как 2'-ацетилактеозид и актеозид уменьшились после SPW. Результаты показали, что SPW может изменить химические составляющие RCD.(ломтики цистанхе пустынной). Содержание ФГ с 1,3,4-тризамещенными глюкопиранозильными фрагментами (такими как актеозид, 2'-ацетилактеозид и цистанозид С) уменьшалось в WSCD.(Продукт паровой обработки вина), однако концентрация их изомеров с 1,3,5-тризамещенным глюкопиранозильным фрагментом (таких как изоактеозид и тубулозид Б) увеличилась, что свидетельствует о возможном превращении химических компонентов во время СПВ, и реакция гидролиза будет одной из причин. Предлагаемые пути трансформации показаны на рисунке 6. Увеличение содержания полисахаридов после SPW также было зарегистрировано в женьшене [24].

Рис. 6. Предлагаемые пути трансформации PhG в Cistanche Deserticola YC Ma во время SPW.

Цистанхе пустыннаябыло задокументировано, что он укрепляет почки и обращает вспять снижение уровня тестостерона, а также обладает антиоксидантным и противовоспалительным действием [25], а PhG и полисахариды были двумя основными биологически активными компонентами цистанхе пустынной. В качестве ФГ изоактеозид и османтузид В обладали антиоксидантным и противовоспалительным действием [26, 27]. Итак, сравнение фармакологических эффектов на уровень тестостерона и антиоксидантного действия RCD и WSCD(Продукт паровой обработки вина)был изучен. В модели индуцированного гидрокортизоном дефицита почки-ян нарушалась эндокринная система и резко снижался уровень половых гормонов в крови. В этом исследовании результаты анализа половых гормонов показали, что оба RCD(ломтики цистанхе пустынной)и WSCD могли значительно повысить уровень Т и Е2, и как PhG, так и полисахариды показали улучшение половых гормонов. WSCD был лучше, чем RCD(ломтики цистанхе пустынной), особенно в группах извлечения PhGs. Результаты индексов внутренностей показали, что как PhG, так и полисахариды могут улучшить вес внутренностей и их индексы веса. В группах экстрактов PhG WSCD(Продукт паровой обработки вина)лучше, чем RCD, в увеличении веса и индексов почки и семенного пузырька. Кроме того,Цистанхе пустыннаяоказывает выраженное антиоксидантное действие, особенно экстракт полисахаридов группы с ВСЦД. Как обсуждалось выше, оба УЗО(ломтики цистанхе пустынной)и WSCD может улучшить синдром дефицита почек-ян; однако WSCD лучше, чем RCD, в повышении уровня T, E2, веса и индексов придатка яичка и яичка. Результаты изучения фармакологических эффектов показали, что СПВ изменил химический состав ФГ и увеличил содержание полисахаридов, что, в свою очередь, повысило уровень половых гормонов и усилилоантиоксидантэффект.

5. Вывод

Исследование должно было выявить изменение PhG, общих полисахаридов и фармакологический эффект при RCD.(ломтики цистанхе пустынной)и WSCD на крысах с дефицитом почек-ян, особенно на уровне гормонов и антиоксидантном действии. Это исследование показало, что обработка традиционных китайских трав может изменить их химический состав и повлиять на их биологическую активность. Также подтверждается, что сырые продукты и продукты переработки прописывались в клинике по-разному.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Вклад авторов

Ин Чжан и Сун Ян разработали эксперименты. Ин Чжан, Юэу Ван и Юньфэн Сяо провели сбор и подготовку образцов. Ин Чжан проанализировал данные и подготовил документ. Сянгри Ли и Сяоцинь Ван отвечали за руководство исследованием. Все авторы участвовали в написании и предоставлении отзывов о статье. Все авторы прочитали и одобрили окончательный документ.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантами от Процедур обработки для подготовленных кусочков китайских наркотиков-сырцов (№ YP-PZ-2014). Особая благодарность Wenjia Qu и Tianying Jia за их большую помощь в сбореЦистанхе пустынная.

использованная литература

1. Ю. Цзян и П.-Ф. Ту, «Анализ химических компонентов видов Cistanche», Journal of Chromatography A, vol. 1216, вып. 11, стр. 1970–1979, 2009.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

2. В. Чжао, Х. Ян, З.-Ю. Лян, Ю.-Дж. Чжан и X.-Q. Цзяо, «Структурный анализ водорастворимого полисахарида SPA, выделенного из стебляЦистанхе пустыннаяМа», Химический журнал китайских университетов, том 26, № 3, стр. 461–463, 2005 г.

Посмотреть в: Академия Google

3. К. Донг, Ж. Яо, Ж.-Н. Фанг и К. Дин, «Структурная характеристика и иммунологическая активность двух экстрагируемых холодной водой полисахаридов изЦистанхе пустыннаяЮ. К. Ма, «Исследование углеводов», т. 342, № 10, стр. 1343–1349, 2007 г.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

4. Х.-М. Ву и П.-Ф. Ту, «Выделение и характеристика -(1→6)-глюканов изЦистанхе пустынная, "Журнал азиатских исследований натуральных продуктов", том 7, № 6, стр. 823–828, 2005 г.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

5. Кошикова Б., Эбрингерова А., Наран Р. Характеристика лигнин-углеводных фракций, выделенных из древесного паразита.Цистанхе пустыннаяYC Ma., Holzforschung, т. 53, № 1, стр. 33–38, 1999.

Посмотреть в: Академия Google

6. G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu и C. Li, «Тубулозид B из Cistanche salsa спасает нейронные клетки PC12 от индуцированных ионами 1-метил-4-фенилпиридиния апоптоз и окислительный стресс, "Planta Medica, vol. 68, нет. 11, стр. 966–970, 2002.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

7. Дэн М., Ж.-Ю. Чжао, X.-D. Ю, П.-Ф. Ту, Ю. Цзян и З.-Б. Li, «Защитное действие тубулозида B на апоптоз, индуцированный TNF-альфа, в нервных клетках», Acta Pharmacologica Sinica, vol. 25, нет. 10, стр. 1276–1284, 2004.

Посмотреть в: Академия Google

8. X. Geng, L. Song, X. Pu и P. Tu, «Нейропротекторные эффекты фенилэтаноидных гликозидов из Cistanches salsa против 1-метил-4-фенил-1,2,3 6- Тетрагидропиридин (MPTP)-индуцированная дофаминергическая токсичность у мышей C57, "Биологический и фармацевтический бюллетень", том. 27, нет. 6, стр. 797–801, 2004.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

9. H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng и ZH Wang, «Эхинакозид предотвращает снижение стриарных внеклеточных уровней моноаминовых нейротрансмиттеров у крыс с поражением 6- гидроксидофамина», Journal of Ethnopharmacology, vol. . 114, нет. 3, стр. 285–289, 2007.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

10 J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia и R. Zheng, «Фармакологическая активность и механизмы действия природных фенилпропаноидных гликозидов», Die Pharmazie, vol. 58, нет. 11, стр. 767–775, 2003.

Посмотреть в: Академия Google

11. G. Fu, H. Pang, YH Wong, «Природные фенилэтаноидные гликозиды: потенциальные возможности для новых терапевтических средств», Current Medicinal Chemistry, vol. 15, нет. 25, стр. 2592–2613, 2008.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

12. Х.-З. Ван, X.-F. Ван и Л.-Ю. Ву, «Улучшение памяти мышей о фенилэтаноидных гликозидахЦистанхе пустынная, "Китайский фармакологический бюллетень", № 19, стр. 41-42, 2002 г.

Посмотреть в: Академия Google

13. Ж.-Х. Се и К.-Ф. Ву, «Влияние спиртового экстрактаЦистанхе пустыннаяо содержании моноаминовых нейротрансмиттеров в мозге крыс, «Китайские традиционные и травяные лекарства», № 24, стр. 417–419, 1993.

Посмотреть в: Академия Google

14. Х. Ву и К.-Дж. Ху, Дисциплина процесса китайской медицины, Народное медицинское издательство, Пекин, Китай, 2012 г.

15. З. З. Чжао, З. Т. Лян, К. Чан и др., «Уникальная проблема стандартизации китайской materia medica: обработка», Planta Medica, vol. 76, нет. 17, стр. 1975–1986, 2010.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

16. Фармакопея Китая, Фармакопея Китайской Народной Республики, 2015 г., том. IV, Фармакопея Китайской Народной Республики, Пекин, Китай, 2015.

17. Ж.-М. Чен, Просветительский учебник по Materia Medical, издательство Ancient Books Press по традиционной китайской медицине, Пекин, Китай, 2009 г.

18. Б.-Р. Ли и Ю.-К. Она, «Влияние тонизирующих препаратов для почек на ось гипоталамус-гипофиз-гонады (HPG)», Журнал традиционной китайской медицины, №. 7, стр. 63–65, 1984.

Посмотреть в: Академия Google

19. М. Чен, Л. Чжао и В. Цзя, «Метабономическое исследование биохимических профилей животных моделей, индуцированных гидрокортизоном», Журнал исследований протеома, том. 4, нет. 6, стр. 2391–2396, 2005.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

20. К. Чен и Н.-Ю. Йи, «Животные модели и лекарства от дефицита Инь и дефицита Ян», в «Экспериментальной методологии фармакологических исследований в традиционной китайской медицине», издательство «Народное здоровье», Пекин, Китай, 1993.

Посмотреть в: Академия Google

21. З.-Г. Ма, З.-Л. Ян, П. Ли и К.-Х. Ли, «Одновременное определение восьми фенилэтаноидных гликозидов в различных видах рода Cistanche с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии», Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, vol. 31, нет. 18, стр. 2838–2850, 2008.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

22. Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song и A. Lu, «Реакция Майяра, связанная с процессом пропаривания корня Polygonum multiflorum», Planta Medica, vol. 75, нет. 1, стр. 84–88, 2009 г.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

23. В.-Т. Чанг, Ю. Х. Чой, Р. Ван Дер Хейден и др., «Традиционная обработка сильно влияет на состав метаболитов путем гидролиза в корнях Rehmannia glutinosa», Chemical & Pharmaceutical Bulletin, vol. 59, нет. 5, стр. 546–552, 2011.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

24. Ю. Джин, Ю.-Дж. Ким, Ж.-Н. Jeon et al., «Влияние белого, красного и черного женьшеня на физико-химические свойства и гинзенозиды», Plant Foods for Human Nutrition, vol. 70, нет. 2, стр. 141–145, 2015.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

25. Т. Ван, X.-Y. Чжан и В.-Ю. Се, "Цистанхе пустыннаяЮ. К. Ма, «Пустынный женьшень»: обзор, «Американский журнал китайской медицины», том 40, № 6, стр. 1123–1141, 2012 г.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

26. С.-Ю. Нам, Х.-Ю. Ким, М.-С. Ю и др., «Противовоспалительное действие изоактеозида из Abeliophyllum distichum», Иммунофармакология и иммунотоксикология, том. 37, нет. 3, стр. 258–264, 2015.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

27. С. Чае, Дж. С. Ким, К. А. Канг и др., "Антиоксидантная активность изоактеозида из Clerodendron trichotomum", Журнал токсикологии и гигиены окружающей среды, часть А. Текущие проблемы, том. 68, нет. 5, стр. 389–400, 2005.

Посмотреть на: Сайт издателя|Google ученый

Из: Доказательная дополнительная и альтернативная медицина / 2019 / Статья

Том 2019|ID статьи 2167947|https://doi.org/10.1155/2019/2167947