Отвар Tongluo Digui лечит повреждение почек у крыс с диабетом, способствуя аутофагии подоцитов

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ХАНЬ Цзяжуй, ЧЖАН Ягэ, ШИ Сюцзе, ПЭН Зинин, СИН Юйфэн, ПАН Синьсинь

Абстрактный

ЗАДАЧА:

Исследовать влияние отвара Tongluo Digui на повреждение почек и индуцированную стрептозотоцином аутофагию подоцитов у крыс с диабетом.

МЕТОДЫ:

Самцов крыс Sprague-Dawley случайным образом разделили на шесть групп: нормальные, модельные, получавшие отвар Tongluo Digui (высокая, средняя и низкая дозы) и получавшие валсартан. Стрептозотоцин вводили внутрибрюшинно, чтобы воспроизвести модель животных с диабетом. Через 8 недель оценивали протеинурию для установления модели диабетической нефропатии. Лекарства вводили ежедневно внутрижелудочным путем. Через 16 недель после введения через желудочный зонд определяли 24-часовую концентрацию белка в моче, концентрацию глюкозы в крови, сывороточный креатинин и концентрацию азота мочевины. Затем крыс забивали, почки собирали и окрашивали периодической кислотой-Шиффом для оценки патологических изменений в клубочках, включая клубочковые подоциты, с помощью просвечивающей электронной микроскопии. Для определения экспрессии белков нефрина, подоцина, p62, беклина -1, LC3Ⅱ/Ⅰ и p-mTOR/mTOR в тканях почек использовали вестерн-блот-анализ.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ:

По сравнению с экспериментальной группой отвар Tongluo Digui был связан со снижением концентрации белка в моче в течение 24 часов, уровня глюкозы в крови, гемоглобина A1c, креатинина сыворотки, концентрации азота мочевины, общего белка сыворотки и альбумина. При этом мезангиальное брыжеечное уширение и слияние отростков стопы были уменьшены, базальная мембрана клубочков существенно не утолщена, а количество подоцитов и количество аутофагосом в подоцитах увеличено. Кроме того, экспрессия белков нефрина, подоцина, LC3Ⅱ и беклина -1 в ткани почек повышалась, в то время как экспрессия белка р62 подавлялась, а фосфорилирование mTOR ингибировалось.

ВЫВОД:

Отвар Tongluo Digui может ингибировать прогрессирование диабетической нефропатии, ингибируя фосфорилирование mTOR, тем самым усиливая аутофагию для защиты подоцитов и уменьшая протеинурию.

Ключевые слова:Диабетические нефропатии; аутофагия; подоцит; Отвар Тонлуо Дигуи

преимущества стебля цистанхезафункция почек

ВВЕДЕНИЕ

Диабетическая нефропатия (ДН) — одно из тяжелых микрососудистых осложнений диабета, при котором 30% -40 процентов пациентов с диабетом страдают от заболевания почек. С ростом заболеваемости диабетом ДН стала основной причиной терминальной стадии почечной недостаточности во всем мире.1 Это тяжелое экономическое бремя как для семьи, так и для общества.

Повреждение подоцитов является важной причиной прогрессирования ДН. Как окончательно дифференцированная клетка, аутофагия играет важную роль в поддержании физиологической функции подоцитов.2,3 В нормальном физиологическом состоянии внутри подоцитов существует высокая степень аутофагии, которая удаляет поврежденные белки и органеллы.4 Однако при диабете В окружающей среде аутофагия подоцитов ингибируется, что позволяет предположить, что аутофагия подоцитов играет важную роль в патогенезе ДН.5 ДН относится к категориям «Сяо Ке», «Гуань Гэ» и «отеку» в традиционной китайской медицине. Теория традиционной китайской медицины состоит в том, что застой крови иИнь недостатокявляются наиболее важными причинами ДН.6 Поэтому лечение ДН должно способствовать циркуляции крови и питать Инь, и для этого был создан отвар Тонлуо Дигуй. Ранее мы обнаружили, что отвар Tongluo Digui оказывает благотворное влияние на лечение ДН. В этом исследовании мы стремились использовать стрептозотоциновую (STZ)-индуцированную модель крыс DN 1 для оценки влияния отвара Tongluo Digui на повреждение почек, аутофагию и сигнальный путь mTOR. Мы также исследовали основной молекулярный механизм отвара Tongluo Digui в замедлении прогрессирования ДН и представили доказательства клинической профилактики и лечения ДН.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Животные

Специфически свободные от патогенов (SPF) крысы Sprague-Dawley [n=60, самцы, (150 ± 10) г; номер квалификационного сертификата: SCXK (Yu) 2017-0001] были приобретены в Хэнаньском экспериментальном центре животных (Чжэнчжоу, Китай). Стандартный световой цикл (14 часов света, 10 часов ночи), температура в помещении (23 ± 2) градуса, влажность (40 процентов -50 процентов), содержание (три животных в клетке) и кормление (стерилизованный корм и питьевая вода). Эксперимент был завершен в лаборатории Центра клеточной визуализации Хэнаньской больницы традиционной китайской медицины (Чжэнчжоу, Китай). Все эксперименты проводились в соответствии с руководством по уходу и использованию лабораторных животных, опубликованным Национальным институтом здравоохранения.

Наркотики

Капсулы валсартана (Val) были приобретены у Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Пекин, Китай). Отвар Tongluo Digui состоит из Shuichi (Hirudo) 12 г, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 г, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 г, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 г, Danggui (Radix Angelicae Sinensis) 30 г, Zexie (Корневище Alismatis) 10 г, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 г, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 г. Китайские травы были приобретены в Хэнаньской больнице традиционной китайской медицины (Чжэнчжоу, Китай).

Экспериментальная дизайн

Крыс случайным образом разделили на шесть групп, каждая из которых состояла из 10 крыс: контрольная группа (Ctrl), модельная группа DN (STZ), модель DN с группой лечения Val (Val), модель DN с группой лечения высокой дозой отвара Tongluo Digui (HTL). , модель DN с группой лечения средней дозой отвара Tongluo Digui (MTL) и модель DN с группой лечения низкой дозой отвара Tongluo Digui (LTL). Шесть групп крыс умерщвляли через 16 недель после введения через желудочный зонд и сбора почек.

Val (10 мг·кг-1·d-1) и отвар Tongluo Digui в трех различных дозах вводили через зонд один раз в день в течение 16 недель. Вводимые дозы были основаны на уравнении преобразования для доз лекарств между животными и людьми. Доза для крыс (мг/кг)=доза для взрослого человека (мг/кг) × коэффициент пересчета (6,25). Группам, получавшим высокие, средние и низкие дозы отвара Tongluo Digui, вводили через желудочный зонд 5,4, 2,7 и 1,35 г·кг - 1 · день - 1 соответственно. Крыс взвешивали еженедельно. Мочу 24-ч собирали с использованием метаболических клеток в конце 0, 12 и 24 недель. После окончания лечения (через 24 недели) крыс анестезировали подкожной инъекцией хлоралгидрата, собирали образцы ткани почек и крови и хранили при -80°С. Крысы имели свободный доступ к обычному рациону лабораторных животных и чистой воде (за исключением случаев, описанных ниже).

цистанхе растение

Создание модели DN

STZ (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) использовали для индукции диабета, как описано ранее.7 Все 60 крыс имели ограниченный доступ к воде в течение 12 часов до экспериментов. Из них 50 крысам однократно внутрибрюшинно вводили СТЗ 60 мг/кг, растворенный в цитратном буфере (0,1 моль/л, рН 4,5). Диабет был подтвержден измерением концентрации глюкозы в крови через 72 часа после инъекции СТЗ. Животные с концентрацией глюкозы выше или равной 16,7 ммоль/л в течение трех дней подряд считались больными диабетом. Через 8 недель крыс помещали в отдельные метаболические клетки и собирали мочу в течение 24 ч для измерения микроальбумина мочи (ЭМА). Модель DN была подтверждена при получении ЭАЭ выше или равной 30 мг/24 часа.

Биохимические показатели

Анализы сыворотки и мочи использовали для оценки почечной функции животных. Мочу крыс оценивали с помощью метаболической клетки. Образцы крови крыс были получены с использованием метода разрезания хвоста.8 Образцы сыворотки и мочи замораживали при температуре -80 градусов до использования. Концентрации креатинина сыворотки, азота мочевины крови, альбумина и белка в моче измеряли радиоиммуноанализом. Уровни гемоглобина A1c (HbA1c), С-пептида и инсулина измеряли с использованием набора ELISA HbA1c (Crystal Chem INC, Элк-Гроув-Виллидж, Иллинойс, США), набора для определения С-пептида (Kainuo Bio Ltd., Пекин, Китай) и инсулина. Набор Elisa (Merck Millipore Co., Ltd., Бедфорд, Массачусетс, США) в соответствии с инструкциями производителя соответственно. Мочевую кислоту, общий сывороточный белок (ОБ), альбумин (АЛБ), аланинаминотрансферазу (АЛТ) и аспартатаминотрансферазу (АСТ) у крыс определяли с помощью автоматического биохимического анализатора.

Гистопатологическое исследование

Фиксированную формалином ткань почки заливали в парафин, делали срезы толщиной 3-4 мкм и окрашивали периодической кислотой-Шиффом (PAS). Морфологические изменения в ткани почек, включая пролиферацию мезангиальных клеток, клеточную инфильтрацию и изменения мезангиального матрикса, исследовали для каждого окрашенного среза с помощью световой микроскопии (NIKON D3100) (× 400).

Просвечивающий электронный микроскоп

ПЭМ использовали для наблюдения за морфологией подоцитов и мезангиальных клеток в ткани почек. Свежие ткани почек разделяли на блоки (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Вестерн-блот анализ

Общий белок экстрагировали из почечной ткани буфером для лизиса белка (Solarbio Biotech, Пекин, Китай). Концентрацию белка в супернатанте определяли с помощью набора для анализа BCA (Solarbio Biotech, Пекин, Китай, PC0020). Образцы, содержащие 40 мкг белка, разделяли с помощью электрофореза в 12-процентном SDS-полиакриламидном геле (SDS PAGE) (Applygen, Пекин, Китай, B1004), а затем переносили на мембрану нитроцеллюлозного фильтра (Solar bio Biotech, Пекин, Китай). После блокировки 5-процентным обезжиренным молоком при комнатной температуре в течение 2 ч, -актин (Proteintech, артикул: 60008-1-lg), LC3II/I (Ab cam, артикул: ab48394), P62 (Proteintech, артикул: 18420-1-AP), beclin-1 (белковая технология, номер позиции: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, номер позиции: #5536), mTOR (CST, номер позиции: # 2983), нефрин (Abcam, номер позиции: ab58968) и подоцин (каждый белок, номер позиции: 20384 -1-AP) добавляли и инкубировали при 4 градусах в течение ночи. Затем эту смесь пять раз промывали TBS плюс 0,05% Tween -20 (Solar bio Biotech, Пекин, Китай) (TBS-T) в течение 5 минут перед добавлением вторичного антитела (1∶2000) перед инкубацией при комнатной температуре. температура в течение 1 ч, пятикратная промывка TBST в течение 5 мин, проявление цвета с усиленной хемилюминесценцией (ECL, Millipore, Billerica, MA, USA) и экспонирование с использованием программного обеспечения ImageJ для полосового анализа оттенков серого.

статистический анализ

Данные анализировали с использованием программного обеспечения SPSS (IBM SPSS Statistics для Windows, версия 23.0. 2014, Армонк, штат Нью-Йорк, США). Различия между группами проверяли с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующим тестом Тьюки. Данные выражали как среднее значение ± стандартное отклонение. P <0,05 считался="">

лютеолин

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Защитное действие отвара Tongluo Digui на почки крыс с ДН

Биохимические показатели, такие как глюкоза в крови, гликированный гемоглобин, креатинин сыворотки, концентрация азота мочевины в крови и концентрация белка в моче {{0}} часов, измерялись через 16 недель после введения через зонд. (Таблица 1). Результаты показали, что по сравнению с нормальной группой показатели глюкозы в крови, гликированного гемоглобина, креатинина в сыворотке, концентрации азота мочевины в крови, концентрации белка в моче в 24-часов, TP и ALB были значительно выше в экспериментальной группе (P < {{="" 7}}.01),="" что="" указывает="" на="" то,="" что="" в="" модельной="" группе="" была="" нарушена="" функция="" почек.="" в="" группе,="" принимавшей="" val,="" концентрация="" креатинина="" в="" сыворотке="" и="" концентрация="" белка="" в="" моче="" за="" 24="" часа="" были="" снижены="" (p=""><0,05). кроме="" того,="" в="" группе="" высоких="" доз="" отвара="" tongluo="" digui="" наблюдалось="" значительное="" снижение="" концентрации="" глюкозы="" в="" крови,="" hba1c,="" креатинина="" в="" сыворотке="" и="" концентрации="" азота="" мочевины,="" а="" также="" 24-часовой="" экскреции="" с="" мочой="" (p=""><0,01). эти="" эффекты="" были="" дозозависимыми.="" достоверных="" различий="" в="" уровнях="" мочевой="" кислоты,="" инсулина,="" алт="" и="" аст="" в="" каждой="" группе="" крыс="" не="" было.="" в="" совокупности="" наши="" результаты="" показали,="" что="" отвар="" tongluo="" digui="" облегчал="" повреждение="" почек="" и="" улучшал="" почечную="" функцию="" у="" крыс="" dn="" дозозависимым="">

Изменения в почечной патологии крыс DN оценивали с помощью окрашивания PAS после обработки отваром Tongluo Digui (рис. 1). По сравнению с нормальной группой наблюдалось значительное увеличение мезангиальных клеток клубочков и мезангиальной стромы наряду с расширением мезангиальной области в модельной группе. Мезангиальная площадь клубочков увеличивалась при каждом из трех уровней дозы отвара Tongluo Digui и в группе Val. Кроме того, в этих четырех группах лечения ширина мезангиального матрикса уменьшилась по сравнению с экспериментальной группой, а площадь мезангиального клубочка в группе, принимавшей высокие дозы отвара Tongluo Digui, была меньше, чем в группе, получавшей Val. Эти результаты показали, что отвар Tongluo Digui задерживает прогрессирование гломерулярных поражений ДН.

Влияние отвара Tongluo Digui на повреждение гломерулярных подоцитов у крыс с DN

Вестерн-блот-анализ использовали для определения экспрессии маркерных белков подоцитов нефрина и подоцина (рис. 2). По сравнению с нормальной группой экспрессия обоих белков в модельной группе была значительно снижена (P < 0.01),="" что="" указывает="" на="" повреждение="" подоцитов.="" кроме="" того,="" экспрессия="" нефрина="" и="" подоцина="" повышалась="" в="" группах="" отвара="" tongluo="" digui="" по="" сравнению="" с="" экспериментальной="" группой="" (p=""><>

Влияние отвара Tongluo Digui на аутофагию гломерулярных подоцитов у крыс с DN

Изменения аутофагосом в гломерулярных подоцитах наблюдались при ТЭМ (рис. 3). Результаты показали аутофагосомы в гломерулярных подоцитах нормальной группы. В модельной группе отсутствовали аутофагосомы подоцитов, также исчезли ножки подоцитов. В трех дозовых группах отвара Tongluo Digui и в группе валсартана мы наблюдали гломерулярные аутофагосомы подоцитов, что позволяет предположить, что отвар Tongluo Digui усиливает аутофагию подоцитов у крыс с DN. Вестерн-блоттинг использовали для обнаружения экспрессии связанных с аутофагией белков P62, беклина -1 и LC3 Ⅱ (рис. 4). По сравнению с нормальной группой экспрессия беклина-1 и LC3Ⅱ в модельной группе была значительно снижена (P <{8}}.01), в="" то="" время="" как="" экспрессия="" p62="" была="" значительно="" повышена="" (p="">< 0.01).="" эти="" результаты="" показали,="" что="" аутофагия="" была="" ослаблена="" у="" крыс="" с="" dn.="" по="" сравнению="" с="" экспериментальной="" группой="" группа,="" получавшая="" отвар="" tongluo="" digui="" с="" высокой="" дозой,="" имела="" повышенную="" экспрессию="" беклина="" -1="" и="" lc3ⅱ="" (p=""><0,05), а="" также="" пониженную="" экспрессию="" p62.="" вместе="" эти="" результаты="" показали,="" что="" почечный="" защитный="" эффект="" отвара="" tongluo="" digui="" у="" крыс="" с="" дн="" может="" быть="" связан="" с="" усилением="" аутофагии="" в="" почечных="">

Отвар Tongluo Digui усиливает аутофагию гломерулярных подоцитов у крыс с DN путем ингибирования фосфорилирования mTOR.

Ингибирование фосфорилирования mTOR усиливает аутофагию (рис. 5). По сравнению с нормальной группой фосфорилирование mTOR в экспериментальной группе было повышено (P <{1}}.01), тогда="" как="" в="" группах="" отвара="" tongluo="" digui="" оно="" было="" ингибировано="" (p=""><0,05). это="" свидетельствует="" о="" том,="" что="" отвар="" tongluo="" digui="" усиливает="" аутофагию="" подоцитов,="" ингибируя="" активацию="" сигнального="" пути="" mtor.="" предыдущие="" исследования="" показали,="" что="" аутофагия="" защищает="" подоциты="" и="" улучшает="" функцию="">

ОБСУЖДЕНИЕ

ДН в основном характеризуется такими признаками и симптомами, как наличие белка в моче, высокий уровень глюкозы в крови, полидипсия, полифагия и полиурия. Симптомы аналогичны симптомам традиционной китайской медицины, такие как «Сяо Кэ», «Гуань Гэ» и «отек». Возникновение и развитие ДН неотделимо от патологической основы дефицита Инь и застоя крови.6 При развитии дефицита Инь и застоя крови почки постепенно повреждаются, что приводит к потере белка с мочой, что в дальнейшем приводит к образованию микротромбов и фиброз почки. Пациенты с ДН неизбежно страдают терминальной стадией почечной недостаточности.11

Отвар Tongluo Digui был создан Чжаном Бинхоу, известным врачом традиционной китайской медицины, и на основе его многолетнего опыта лечения DN.12, 13 Отвар Tougluo Digui состоит из Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Дихуан (Radix Rehmanniae), Хуанци (Radix Astragali Perparata), Дангуй (Radix Angelicae Sinensis), Зе Се (Корневище частушествующего), Дахуан (Radix et Rhizoma Rhei), Гансио (Radix Glycyrrhizae). Среди них Shuizhi (Hirudo) и Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) являются препаратами монарха, которые, как мы полагаем, играют роль в питании Инь и стимулировании кровообращения при ДН. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) улучшает иммунитет организма и секреторное состояние и замедляет старение.14 Shuizhi (Hirudo) обладает антикоагулянтным, противоопухолевым, противовоспалительным и антифибротическим действием среди других фармакологических действий и может улучшать работу почек. патологические изменения при ДН приводят к значительному снижению концентрации креатинина в сыворотке и концентрации азота мочевины в крови, а также к уменьшению экскреции белка с мочой.15,16 При ДН повреждение подоцитов играет важную роль в фильтрационном барьере базальной мембраны клубочков и в формировании протеинурии.17 Нефрин и оба подоцина представляют собой белки поровой мембраны на поверхности подоцитов. Два белка взаимодействуют с образованием комплекса, играющего ключевую роль в функционировании барьера клубочковой фильтрации.18 Аномальное распределение экспрессии белка приводит к разной степени протеинурии.19 при экскреции белка с мочой и нарушении функции почек в течение 24 часов. Кроме того, окрашивание PAS показало, что количество мезангиальных клеток и мезангиального матрикса увеличилось в модельной группе, что указывает на то, что модель была успешно установлена. Различные дозы отвара Tongluo Digui снижали 24-часовую концентрацию белка в моче и концентрацию креатинина в сыворотке и улучшали почечную патологию у крыс с DN с уменьшенным количеством мезангиальных клеток и матрикса. Вестерн-блоттинг показал, что экспрессия нефрина и подоцина в группе отвара Tongluo Digui была выше по сравнению с таковой в экспериментальной группе, что указывает на то, что эта формула задерживает прогрессирование ДН у крыс, защищая подоциты.

Аутофагия представляет собой путь деградации лизосомальных белков в клетках и играет решающую роль в выведении поврежденных или сверхэкспрессированных белков, которые поддерживают гомеостаз и целостность клеток. Аутофагия является неотъемлемой частью лизосомального гомеостаза подоцитов при диабете, и усиление аутофагии может уменьшить повреждение подоцитов. .5 После специфического нокаута связанного с аутофагией гена Atg5 в подоцитах мыши постепенно демонстрировали повсеместную агрегацию белков, повреждение митохондрий и активность аутофагии в подоцитах; подоциты повреждались, ножки отростков исчезали и сливались, что свидетельствовало о сохранении аутофагии. Поддержание нормальной функции подоцитов имеет важное значение.21,22 В этом исследовании мы исследовали влияние отвара Tongluo Digui на аутофагию в гломерулярных подоцитах с помощью ПЭМ и вестерн-блоттинга. ТЭМ показала, что количество аутофагосом подоцитов в каждой группе дозы отвара Tongluo Digui увеличивалось по сравнению с модельной группой. Более того, вестерн-блоттинг показал экспрессию связанных с аутофагией белков LC3, беклина -1 и p62. По сравнению с экспериментальной группой экспрессия LC3Ⅱ и беклина -1 была значительно увеличена в группе, получавшей отвар Tongluo Digui, в то время как экспрессия белка p62 была значительно снижена. Эти данные показали, что отвар Tongluo Digui повышает уровень аутофагии в клубочковых подоцитах.

Белок-мишень рапамицина (mTOR) является одним из основных регуляторов аутофагии.23 Он широко распространен в корковом и мозговом веществе почек и играет роль в развитии повреждения подоцитов ДН.24,25 В условиях высокого уровня глюкозы и стресса mTOR активируется и фосфорилируется, что приводит к фосфорилированию нижестоящих мишеней и ингибированию аутофагии. Liu et al [26] продемонстрировали, что ингибитор mTOR, рапамицин, специфически связывается с киназой mTOR и ингибирует активность mTOR, усиливает аутофагию подоцитов и защищает функцию почек. Мы обнаружили, что фосфорилирование mTOR было усилено в модельной группе и что отвар Tongluo Digui ингибировал этот процесс, что позволяет предположить, что отвар Tongluo Digui усиливает аутофагию в подоцитах и ​​может ингибировать активацию сигнального пути mTOR.

Таким образом, отвар Tongluo Digui может ингибировать аутофагию в подоцитах, защищать клубочковые подоциты, поддерживать целостность мембраны клубочковой фильтрации, снижать 24-часовую экскрецию белка с мочой и задерживать прогрессирование ДН путем ингибирования активации mTOR. Эти данные позволяют лучше понять защитный эффект отвара Tongluo Digui при ДН, однако основной механизм еще предстоит выяснить.

что такое цистанхепри заболеваниях почек

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА
1 Тещ ГХ. Диабетическая нефропатия - это иммунное расстройство? Клин науки 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Ли Дж.Дж., Квак С.Дж., Юнг Д.С. и др. Биология подоцитов при диабетической нефропатии. Почечное международное приложение, 2007 г.; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Аутофагия подоцитов: потенциальная терапевтическая мишень для предотвращения прогрессирования диабетической нефропатии. J Диабет Res 2017; 2017(4): 1-6.
4 Мизушима Н., Комацу М. Аутофагия: обновление клеток и тканей. Сотовый 2011; 147(4): 728-741.
5 Тагава А., Ясуда М., Куме С. и др. Нарушение аутофагии подоцитов усугубляет протеинурию при диабетической нефропатии. Диабет 2016; 65(3): 755-767.
6 Сунь К., Се К.Ю., Мэн К.Г. Изучение закона распространения ТКМ синдрома диабетической нефропатии. Пекин Чжун И Яо Да Сюэ Сюэ Бао 2015; 38(4): 266-270.
7 Шкудельски Т. Механизм действия аллоксана и стрептозотоцина на В-клетки поджелудочной железы крысы. Физиол Рез 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Эффективность отвара Qingre Lishi Yishen при гломерулярном фиброзе иммуноглобулиновой нефропатии A в модели крыс. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Лу М.К., Гонг С.Г., Гуань К.Л. mTOR в функции подоцитов: эффективен ли рапамицин при диабетической нефропатии? Клеточный цикл 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Хартлебен Б., Гедель М., Мейер-Шлезингер С. и др. Аутофагия влияет на восприимчивость к гломерулярным заболеваниям и поддерживает гомеостаз подоцитов у стареющих мышей. Джей Клин Инвест 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li CY, Cui WP, et al. Обзор трав традиционной китайской медицины для лечения диабетической нефропатии. J Диабет Res 2016; 2016: 5749857.
12 Чжао В.Дж., Цай З., Мэн И. и др. Применение метода питающей почки Инь Чжан Бинхоу в лечении хронического заболевания почек. Пекин Чжун И Яо 2016; 35(4): 341-343.
13 Дуань Ю.Ф., Чжан Х.Б. Введение опыта применения профессора Чжан Бинхоу. Синь Чжун И 2012; 44 (4): 147-149.
14 Юй С.Дж., Чен С.Х., Лу Г.Ю. Обзор исследований по фармакодинамике черепахового панциря «Зийин Бушен». Дан Дай И Сюэ, 2009 г.; 15(10): 15-17.
15 Панг XX, Тонг И, Ли Х.П., Хан младший. Успехи исследований пиявки и ее экстрактов в лечении диабетической нефропатии. Гуан Мин Чжун И 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Успехи исследований пиявок и их активных ингредиентов в лечении диабетической нефропатии Zhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Ход исследований механизма истощения подоцитов при диабетической нефропатии. J Диабет Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Передача сигналов нефрина в подоцитах: обновленный взгляд на регуляцию сигналов на щелевой диафрагме и за ее пределами. Front Endocrinol (Лозанна) 2018; 9: 302.
19 Яакко П., Карл Т. Молекулярный состав барьера клубочковой фильтрации. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Нобору М., Бет Л., Ана Мария С., Клионски Д.Дж. Аутофагия борется с болезнями посредством клеточного самопереваривания. Природа 2008; 451(7182): 1069.
21 Ленуар О., Ясик М., Энрике С. и др. Эндотелиальная клетка
и аутофагия подоцитов синергетически защищают от диабет-индуцированного гломерулосклероза. Аутофагия 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Илатовская Д.В., Левченко В., Лоуинг А., Шуйский Л.С., Палыгин О., Старущенко А. Повреждение подоцитов при диабетической нефропатии: последствия ангиотензин Ⅱ-зависимой активации каналов TRPC. Научный представитель 2015 г .; 5: 17637.
23 Рабанал-Руиз Ю., Оттен Э.Г., Корольчук В.И. mTORC1 как основной путь к аутофагии. Очерки Биохим 2017; 61 (6): 565-584.
24 Ким Ю.С., Гуан К.Л. mTOR: фармакологическая мишень для регуляции аутофагии. Джей Клин Инвест 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z, et al. Триптолид восстанавливает аутофагию, облегчая диабетический почечный фиброз через путь miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR. Мол Тер Нуклеиновые Кислоты 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Защитное действие рапамицина на клеточную аутофагию в почечных тканях крыс с диабетической нефропатией через сигнальный путь mTORS6K1-LC3 Ⅱ. Рен Фэйл 2018; 40(1): 492-497.