Uplc-q-orbitrap hrms в сочетании с молекулярной стыковкой для изучения материальной основы горького вкуса и ароматических отношений в Cistanchia desertica

Абстрактный

 

Основываясь на ультрапроизводительной жидкой хроматографии-квадруполе-электростатической поля Orbitrap высокого разрешения масс-спектрометрии (HRM UPLC-Q-Orbitrap) и молекулярная стыковка, горькие вкусовые вещества экстракта Cistanchis Deserticola были исследованы для того, чтобы заложить исследовательскую основу для развития и исправления вкуса, и для того, чтобы инвестировать свою связь с горькой вкусом. Во-первых, UPLC-Q-Orbitrap HRMs использовался для характеристики составляющих C. deserticola, и было идентифицировано 69 химических компонентов. Молекулярная стыковка этих химических компонентов с рецептором с горьким вкусом привела к скрининге 20-гоночных веществ, в том числе 6 гликозидов фенилетанола, 5 флавоноидов, 3 фенольных кислот, 2 циклоалкенил эфирных терпенов, 2 щелодов и 2 других компонента. Экстракты того же происхождения были собраны из того же места происхождения, а вещества с горьким представлены исследованы с помощью молекулярной стыковки. Другие компоненты, девять партий свежих образцов C. deserticola были собраны из разных месяцев одного и того же происхождения, делились на разные месяцы и разные части, а количественное значение горечи образцов определяли методом электронного языка, а содержимое шести компонентов в образцах (Pineconotyloside, Trichothecene Glycoside, Tubulin-a-strichototecece glichototecece glichototecece glycototecece glycototecece glichotecece glycototeceece glycototocece glycototecece. jinshihuaoside, and jingnipinoside) were determined by high performance liquid chromatography (HPLC), and total phenylethanol glycosides in the samples were determined by the UVvisible spectrophotometric method. фотометрический метод для определения содержания общих фенилетанол гликозидов, общих полисахаридов, общих алкалоидов, общих флавоноидов и общих фенольных кислот в образцах и будет сочетаться с анализом хемометрики на этом основании и подтвержден с помощью анализа корреляции Пирсона, а также наоборот в сфере, а также наоборот в области сборов в сфере, и наименьшие в сфере, а также наоборот. Deserticola, которые были согласованы с результатами молекулярной стыковки; И, наконец, с горько-презривающими веществами в качестве объекта исследования.

CISTANCHIS DESERTICOLA экстракт

 

Наконец, сетевой фармакологический прогноз и анализ были проведены с горьким веществом в качестве цели, и была исследована связь между мишенью горького вещества и горькой эффективностью. Результаты показали, что ключевыми мишенями биологического вещества были EGFR, PIK3CB и PTK2, и что горьким веществом может проявлять горькую эффективность посредством акцента на соответствующих мишенях заболевания, что означает, что горькая субстанция C. desertica является материальной основой горькой эффективности. In conclusion, this study showed that the phenylethanol glycosides, mainly pinealoside, mauritiana glycoside and gibbe rellin, are the material basis of the bitter taste of C. desertica, and the molecular docking technology has a guiding role in the screening of bitter substances in traditional Chinese medicine, and that the bitter substances of C. desertica have the effect of bitterness, which is a good basis for the "taste-efficacy" of Традиционная китайская медицина в будущем. Горькие вещества в C. Desertica имеют горький вкус и эффект, которые предоставит идеи и ссылки для будущих исследований по отношению к IP между вкусом и эффектом в традиционной китайской медицине

 

 

 

Ключевые слова CISTANCHIS DESERTICOLA экстракт; Uplc-q-orbitrap hrms; сетевая фармакология; молекулярная стыковка; электронный язык; горькие вещества;Вкусные отношения

 

Cistanche Deserticola YC MA.является многолетним корневым паразитом семейства Orobanchaceae, рода Cistanche, обычно известного как Desert Cistanche [1]. Травяная классическая классика Шеннонга заявляет, что Cistanch - сладкий и слегка теплый. Тем не менее, это на самом деле имеет постоянный и легкий горький вкус после того, как его взяли. «Вкус» пяти ароматов традиционной китайской медицины был первоначально определен на основе фактического вкуса лекарства при вкусе, но потому, что вкус лекарства тесно связан с его эффектом, он постепенно превращался в объяснение и суммирование эффекта лекарства с помощью «аромата» [2]. Cistanche записан во многих классических древних медицинских книгах. Он обладает последствиями питания почки и пополнения сущности, увлажнения кишечника и облегчения запоров. С древних времен он использовался для лечения заболеваний, связанных с дефицитом почек, включая сексуальную дисфункцию, женское бесплодие, потерю сущности и крови, болезненность талии и колени, сухой кишечник и запоры и т. Д. [3]. Горечь традиционной китайской медицины является одним из пяти вкусов теории традиционной китайской медицины и является важной теоретической основой для руководства клиническим использованием традиционной китайской медицины. Горечь - один из пяти вкусов традиционной китайской медицины. Его характеристики являются чистотыми, сушки и укреплением [4], и он играет важную роль в управлении клиническим использованием традиционной китайской медицины. Большинство традиционных китайских лекарств и традиционных препаратов китайской медицины имеют горький вкус. Традиционная китайская медицина считает, что горькие ароматизирующие вещества (далее называемые горькими веществами) в горьких лекарствах являются эффективными веществами [5]. Тем не менее, отношения между горькими веществами в традиционных китайских лекарствах и их горькой эффективностью до сих пор неясны. По -прежнему не хватает соответствующих научных исследований о том, имеют ли горькие вещества в горьких традиционных китайских лекарствах горькую эффективность. Cistanche содержит различные химические компоненты, в основном гликозиды фенилетанола, циклопентановые эфирные терпены, лигнаны и их гликозиды, сахары и т. Д. Кроме того, он также содержит флавоноиды, фенольные кислоты, алкалоиды, волатильные масла, аминокислоты, неорганические перевозки и другие компоненты. Среди них соединения гликозида фенилетанола считаются основными эффективными компонентами в Cistanch [7]. У Cistanche Deserticola два сезона сбора урожая: весна и осень. Исследования показали, что содержание полисахарида в пружине Cistanche Deserticola является низким, содержание гликозида фенилетанола высокое, а вкус горький, но его антиоксидантная способность сильна [8]. Можно видеть, что его горькие компоненты имеют определенную корреляцию с эффективностью препарата, но материальная основа горького вкуса Cistanche Deserticola до сих пор неясна, что может ограничить его дальнейшее развитие.

Чтобы исследовать горькую основуCistanche Deserticolaand its relationship with bitter efficacy (taste-effect relationship), this study took Cistanche deserticola extract as the research object, and screened out the bitter substances in Cistanche deserticola by ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry (UPLC-Q-Orbitrap HRMS) technology and molecular docking; содержание основных горьких лекарственных компонентов определялиВысокоэффективная жидкая хроматография (ВЭЖХ)и содержание каждой основной категории горьких веществ определяли с помощью ультрафиолетовой спектрофотометрии. Степень горечи оценивалась с помощью электронного языка, а горькие компоненты были обнаружены в сочетании с хемометрией; и технология сетевой фармакологии использовалась для выполнения пути KEGG и анализа обогащения по целям горьких веществ в традиционной китайской медицине, а мишени горьких веществ коррелировали с мишенями их горькой эффективности, чтобы исследовать взаимосвязь между горькими веществами и горькой эффективностью в традиционной китайской медицине. Идеи исследований показаны на рисунке 1. Это исследование полностью использовало методы современных технологий для изучения вкусовой информации Cistanche Deserticola, выявляя ее горькую материальную основу и отношения вкуса. Ожидается, что он предоставит ссылку на научный анализ материальной основы вкуса традиционной китайской медицины и предоставит основу для глубокого и точного развития и использования ресурсов Cistanche Deserticola, что делает пять ароматизаторов более четкими, более объективными и стандартизированными, научно объясняющими научные знаменитости теории горечь и предоставления истинности и существующих в стиле. Китайская медицина.

 

 

Рис. 1 Путь изучения взаимосвязи между веществами с горечь и горькой эффективностью экстрактов Cistanche Deserticola

 

1 материалы

1.1 Лекарственные материалы

Свежие образцы Cistanche Deserticola были собраны в Aksu, Синьцзян, с апреля по декабрь 2023 года. Образцы были идентифицированы Ли Мингджи, фармацевтом в больнице округа Шайя, так как высушенные мясистые стебли со шкалами листьев Cistanche Deserticola, завода Genus Cistanche в семействе Oriobanchaceae. Образцы ваучеров хранились в фармацевтической лаборатории Медицинского университета Синьцзян. Образцы очищали от примесей, нарезали свежие и бланшированные в воде в течение 5 минут в соответствии с литературой, а затем обрабатывали, высушены на 60 градусов, раздавлены и просеяли через сито {3}}, см. Таблицу 1.

 

Образцы таблиц Информация о Cistanch Deserticola

 

Нет.	Код	Время коллекции	Предварительная обработка перед сушкой	Сайт обнаружения
1	M1	2023-04-10	Целый - ломтики растений	Целое растение
2	M2	2023-05-08	Целый - ломтики растений	Целое растение
3	M3	2023-06-15	Целый - ломтики растений	Целое растение
4	M4	2023-07-10	Целый - ломтики растений	Целое растение
5	M5	2023-08-11	Целый - ломтики растений	Целое растение
6	M6	2023-09-10	Целый - ломтики растений	Целое растение
7	M7	2023-10-09	Целый - ломтики растений	Целое растение
8	M8	2023-11-14	Целый - ломтики растений	Целое растение
9	M9	2023-12-10	Целый - ломтики растений	Целое растение
10	P1	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Верхний эпидермис
11	P2	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Верхняя кора
12	P3	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Верхняя Питу
13	P4	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Средний эпидермис
14	P5	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Средняя кора
15	P6	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Средняя Пикат
16	P7	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Нижний эпидермис
17	P8	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Нижняя кора
18	P9	2023-08-11	Раздел - конкретные срезы	Нижняя пика

 

1.2 Базы данных и программное обеспечение

Tcmsp (https://tcmspw.com/tcmsp.php), genecards (https://www.genecards.org), Omim (https://www.omim.org), Uniprot (https://www.uniprot.org), pdb (http://www.rcsb.org), String (https://string-db.org), pubchem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/), David (https://david.ncifcrf.gov/), Alphafold Structor (https://alphafold.ebi.ac.uk/), Alphafold2 и Autodockvina (https://alphafold.ebi.ac.uk/) использовали для молекулярной стыковки. IBM SPSS Statistis 25 использовалась для анализа Pearson. Программное обеспечение: Анализ серой ассоциации был выполнен с использованием онлайн-сайта SPSSPRO (https://www.spsspro.com), ортогональный дискриминационный анализ наименьших квадратов (OPLS-DA) был выполнен с использованием программного обеспечения SIMCA14.1, а анализ сетевой фармакологии был выполнен с использованием программного обеспечения Cytoscape.

 

1.3 инструменты и реагенты

Vanquish Ultra-High Performance Liquid Chromatograph, Orbitrap Exploris 120 Масс-спектрометр с высоким разрешением (Thermofisher Scientific, США); Sa -402 b Электронный язык (Insent, Japan); Lc -20 высокопроизводительный жидкий хроматограф (Shimadzu, Japan); УФ-видимый спектрофотометр (Shanghai Youke Instrument Co., Ltd.); Электронный баланс AUW2200 (Shimadzu Philippines Factory); SK250 Ultrasonic Cleaner (Shanghai Kedao Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); DHG -9246 Электрическая постоянная температурная сушка (Shanghai Jinghong Expermental Equipment Co., Ltd.); Plusel+chorusl Ultraure Water Instrual (Veolia, France).
Эхинакозид эталонного вещества (чистота, превышающая или равна 98%, количество партий PCL-#-A003), вербаскозид (чистота, превышающая или равна 98%, партийное число PCL-#-M235), тубулозид A (чистота больше или равна 99%, номеру PCL-#-T003), Scutellar (Purity Greater, Purity Bighater, Purity Bighite, Purity Bighite, Purity Purity Purity, Purity Purity, Purity, равной 99%. PCL-#-D005) и изовалькозид (чистота, которая больше или равна 98%, партийный номер PCL-#-I236) были приобретены у Sichuan Puxi'ao Standard Material Technology Co., Ltd.; Справочные вещества генипозид (чистота, превышающая или равна 98%, партийное число WP23120502), рутин (чистота, больше или равна 98%, партийное число WP32110405), галлевой кислоты (чистота больше или равна 98%, партийное число WP32140706) и BETAINE (PURITY, чем или равное 98%, Bath -Batter, Bath -Batch, Bath -Bath Number, Bath -Batch, Bath Num, Batch, Bath, Bath, Bath Number, Batch, Bath Number, Batch, Bath, Bath, Bath Number, Batch Number, Batch, Bath, Bath, Bath Number, Bath. WP33654874) были приобретены у Sichuan Weikeqi Biotechnology Co., Ltd.; Соль Reinstein, безводная глюкоза (аналитическая степень), ацетонитрил, метанол (хроматографический уровень) и фосфорная кислота были приобретены у Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.