Сравнительное исследование антивозрастных свойств и механизма действия: ресвератрол и ограничение калорийности Ⅱ

Влияние ресвератрола и CR на экспрессию мРНК SIRT1, p53 и Foxo3a в тканях стареющих крыс

Условия окислительного стрессачасто индуцируют экспрессию и активность SIRT1. SIRT1 модулирует функции ключевых факторов выживания, включая p53 и Foxo3a [9]. Чтобы определить влияние ресвератрола и CR на уровни мРНК SIRT1, p53 и Foxo3a у стареющих крыс, индуцированных D-Gal, были проведены количественные анализы ОТ-ПЦР. По сравнению с соответствующей группой отрицательного контроля уровни экспрессии мРНК SIRT1 и Foxo3a были значительно снижены, но уровень p53 был значительно повышен в группе D-Gal (P < 0.01; рис. 9A и 9Б). Кроме того, одновременное лечение ресвератролом или CR с D-gal у крыс вызывало увеличение уровней экспрессии мРНК SIRT1 и Foxo3a, но снижало уровни p53 по сравнению с контрольной группой (P < 0,05). Однако, по сравнению с лечением CR, уровень экспрессии мРНК SIRT1 был значительно повышен в печени, получавшей высокую дозу ресвератрола плюс D-gal, уровень экспрессии мРНК p53 был значительно снижен в печени и мозге, получавших высокую дозу ресвератрола плюс D-гал. гал группа (P <0,05).

Нажмите здесь, чтобы получить антивозрастные добавки Cistanche

Влияние ресвератрола и CR на экспрессию основного SIRT1-ассоциированного белка в тканях головного мозга стареющих крыс

FOXO3a и p53, которые регулируются SIRT1, являются нижестоящими молекулами SIRT1. Одновременно активность SIRT1 регулируется вышестоящими молекулами, например, DBC1 (известной также как KIAA1967), AROS (известной также как RPS19BP1) и супрессором опухоли HuR (известной также как ELAVL1) [9, 10] . Чтобы определить влияние ресвератрола и CR на уровни белка p53, FOXO3a, HuR, AROS и DBC1 у крыс, вызванных D-Gal, были проведены анализы вестерн-блоттинга. По сравнению с соответствующей группой отрицательного контроля уровни экспрессии белков FOXO3a, AROS и HuR были значительно снижены, но уровни p53 и DBC1 были значительно повышены в группе D-gal (P < 0.01 ; рис. 10). Кроме того, одновременное лечение ресвератролом или CR с D-gal у крыс вызывало увеличение экспрессии белков FOXO3a, AROS и HuR, но снижало уровни p53 и DBC1 по сравнению с контрольной группой (P <0,05). Однако по сравнению с лечением CR уровень экспрессии белка HuR был значительно повышен, но уровень DBC1 был значительно снижен в головном мозге группы, получавшей высокую дозу ресвератрола плюс D-гал (P <0,05). Не было различий между группой ресвератрол плюс D-gal и группой CR плюс D-gal в уровнях экспрессии белка p53, FOXO3a и AROS (P > 0,05).

Экспрессия FOXO3a и p53 в тканях мозга и печени

Статус экспрессии FOXO3a и p53 определяли в тканях головного мозга и печени с помощью иммуногистохимии. Иммуногистохимический анализ FOXO3a и p53 показал, что экспрессия FOXO3a в тканях мозга и печени была значительно снижена, а экспрессия p53 значительно повышена в группе D-Gal по сравнению с группой отрицательного контроля (P <0.{{13} }5, рис. 11). Кроме того, одновременное лечение ресвератролом или CR с D-gal у крыс вызывало увеличение экспрессии FOXO3a, но снижало экспрессию p53 по сравнению с контрольной группой (P < 0,05). Однако не было различий между группой ресвератрол плюс D-gal и группой CR плюс D-gal в экспрессии p53 и FOXO3a (P > 0,05).

ОБСУЖДЕНИЕ

Основной химический процесс, лежащий в основе старения, был впервые описансвободнорадикальная теория старения[11] иокислительный стресссчитается основным фактором нормального процесса старения.Инициатор свободных радикалов AAPHпривык квызвать окислительный стресси создать модель окислительногоклеточное старение, вызванное стрессомв клетках IMR-90 человека [12, 13]. Преимущества этого метода заключаются в том, что AAPH термически разлагается догенерировать радикалыбез биотрансформаций и ферментов, а скоростьрадикальное поколениеможно легко контролировать, регулируя концентрацию инициатора [12]. было обнаружено, что AAPHингибировать размножение человекаклеток IMR- 90 в зависимости от концентрации и времени. Результаты показали, что 2-дневная инкубация с AAPH (1 мМ) значительно увеличивала процент положительных соотношений SA-Gal, популяцию апоптотических клеток, снижала экспрессию мРНК SIRT1 и индуцировала увеличенную и уплощенную морфологию. Это указывало на то, что окислительный стресс, вызванный AAPH, приводит к старению клеток IMR-90. Основываясь на этой модели клеточного старения, лечение 10 мкМ ресвератрола более эффективно ингибировало старение и апоптоз, вызванное AAPH, чем лечение CR.

Животная модель D-gal является международно признанной моделью старения животных и широко используется в областиантивозрастные лекарства. D-gal представляет собой физиологическое питательное вещество, которое обычно метаболизируется D-галактокиназой и галактозо-1-фосфатом у животных. Однако избыток D-gal, который не метаболизируется указанными выше ферментами, а накапливается в клетках, приводит к окислительному стрессу и повреждению клеток [14]. Таким образом, длительное введение D-gal вызывает изменения, напоминающие естественное старение у животных, такие как сокращение продолжительности жизни, когнитивная дисфункция, нейродегенерация, окислительный стресс, снижение иммунных ответов и усиленное образование конечных продуктов гликирования (AGE) [15]. Настоящее исследование показало успешное создание миметической модели старения, о чем свидетельствуют заметные нарушения обучения и памяти, продукция МДА, накопление липофусцина, снижение Т-АОС и СОД и снижение активности теломеразы в головном мозге. Между тем, лечение ресвератролом или CR защищало крыс, индуцированных D-gal, от окислительного стресса за счет повышения активности антиоксидантных ферментов, снижения уровня продуктов перекисного окисления липидов и поддержания баланса окислительной и антиоксидантной систем. В поведенческих тестах и ​​тестах активности теломеразы лечение ресвератролом или CR может обратить вспять вызванные D-gal когнитивные нарушения и активность теломеразы. Более того, у стареющих модельных крыс, получавших высокие дозы ресвератрола, наблюдалось относительно более значительное влияние на поведение, чем у крыс, получавших CR.

Рисунок 11: Иммуногистохимический анализ экспрессии p53 (A, B) и FOXO3a (C, D) в тканях печени (A, C) и головного мозга (B, D) стареющих крыс. Увеличение составляло 20×. NG, группа отрицательного контроля; MG, группа управления моделью; RESL, группа низких доз ресвератрола; RESH, группа высоких доз ресвератрола; CR, группа ограничения калорийности

Исследования показали, что CR, сокращение потребления питательной пищи на 10–40 процентов, можетзамедляют старение и увеличивают продолжительность жизниТаким образом, один обычно используемый уровень CR (сокращение потребления пищи на 40 процентов) был применен к крысам группы CR в настоящем исследовании. Тем не менее, некоторые исследования показали отсутствие положительного влияния CR на продолжительность жизни естественно стареющих приматов [16]. Точно так же, хотя было показано, что лечение ресвератролом индуцирует эффекты, подобные CR, наэнергетический обмени метаболический профиль у людей с ожирением [17], он не улучшал метаболическую функцию у женщин без ожирения с нормальной толерантностью к глюкозе [18]. Причина различий между этими исследованиями не ясна, но может быть, что CR и ресвератрол работают над восстановлением гомеостаза у людей с нарушенным метаболизмом и в меньшей степени у здоровых людей, что согласуется с известными функциями SIRT1 в исследованиях на животных [19]. Таким образом, для сравнения омолаживающей активности ресвератрола или CR применялись крысиные модели старения, вызванные D-gal, а не модели естественно стареющих крыс.

SIRT1, (NAD плюс)-зависимая деацетилаза, привлекла большое внимание из-за ее многочисленных ролей в увеличении продолжительности жизни, устойчивости к стрессу и уменьшении апоптоза [20, 21]. Накопление исследований убедительно свидетельствует о том, что SIRT1 был ключевой целью ресвератрола и CR [22]. Существует огромное количество нижестоящих молекул SIRT1, включая p53, Foxo1, Foxo3, Foxo4 и E2F1, которые регулируются SIRT1. Одновременно активность SIRT1 регулируется вышележащими молекулами, например, p53, HIC1, E2F1, DBC1, HuR и AROS. Резкий отказ от питательных веществ активирует программу транскрипции на промоторе SIRT1, которая управляется факторами транскрипции Foxo3a и p53. Поскольку р53 подавляет экспрессию гена SIRT1, его удаление с помощью Foxo3a активирует транскрипцию SIRT1 [23]. DBC1 и AROS были недавно описаны как прямые негативные и позитивные регуляторы активности SIRT1 соответственно, HuR проявляет эффект снижения уровня экспрессии SIRT1 в стареющих стареющих клетках [9, 10].

CRзамедляет старение и увеличивает среднюю и максимальную продолжительность жизниу различных видов, включая крыс, мышей, рыб, мух, червей и дрожжей. Однако такие строгие диетические программы у свободноживущих людей вызвали этические и методологические проблемы [24]. В настоящее время увеличение продолжительности жизни может быть более важным, чем просто продление продолжительности жизни. Недавние исследования показывают, что ресвератрол является одним из наиболее мощных стимуляторов активности SIR2 среди всех растительных полифенолов [25] и влияет на продолжительность жизни через механизмы, аналогичные тем, что наблюдаются при ограничении калорий. Эти результаты показали, что CR и ресвератрол обладают сходной активностью в восстановлении уровней экспрессии мРНК SIRT1, увеличении экспрессии белков FOXO3a, AROS и HuR и снижении уровней p53 и DBC1. Между тем, многочисленные ряды убедительных доказательств указывают на благотворное влияние ресвератрола на неврологическую, печеночную и сердечно-сосудистую системы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Культура клеток, стресс и лечение

Штамм диплоидных фибробластов человека IMR-90 был получен от ATCC. Клетки выращивали в минимально необходимой среде (MEM) (Gibco, Великобритания) с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS) (Gibco) при 37°С в 5% CO2. После достижения слияния клетки высевали в 6-луночные культуральные планшеты. Через день клетки обрабатывали в течение 48 ч 1 мМ 2,2'-азобис(2-амидинопропан)дигидрохлорида (AAPH) (Sigma, США), разведенного в МЕМ плюс 10% FBS. 48-часовая инкубация со свободнорадикальным инициатором AAPH создает модель клеточного старения, вызванного окислительным стрессом [12, 13]. Контрольные клетки инкубировали только в культуральной среде. После обработки AAPH IMR-90 промывали холодным фосфатно-солевым буфером (PBS) с pH 7,4 и инкубировали со свежей культуральной средой или культуральной средой, содержащей ресвератрол (группа ресвератрола) или MEM с добавлением 3% FBS (группа CR) в течение дополнительные 48 часов до сбора урожая.

Активность окрашивания SA-gal

Появление биомаркеров старения (снижение пролиферативного потенциала и увеличение окрашивания SA-gal) проверяли [26] со дня после обработки. Затем клетки окрашивали согласно инструкции производителя набора для окрашивания SA-gal (CST, США). После окрашивания исследовали не менее 300 клеток в нескольких полях и подсчитывали SA-gal-положительные клетки. Эти эксперименты повторяли трижды, а результаты представляли в виде средних значений со стандартными отклонениями (SD). Чтобы избежать неспецифического окрашивания, возможно, из-за слияния клеток, гистохимическое окрашивание SA-gal проводили с субконфлюэнтными клетками.

Анализ с помощью сканирующей электронной микроскопии

Клетки выращивали на покровных стеклах в 6-луночных культуральных планшетах, как описано выше. После обработки ресвератролом и CR покровные стекла удаляли с планшетов, затем клетки фиксировали в 2,5-процентном фосфатно-буферном глутаральдегиде и затем фиксировали в 1-процентном забуференном четырехокиси осмия. Фиксированные образцы погружали в трет-бутиловый спирт после обезвоживания через градуированную серию этанола. Образцы лиофилизировали из трет-бутилового спирта, затем покрывали золотом методом выпаривания с помощью устройства для автоматического нанесения тонкого покрытия (JFC-1600, JEOC, Япония) и исследовали с помощью сканирующего электронного микроскопа (JEOL, JSM{{11}). }LV, Япония).

Апоптотический анализ

После инкубации с ресвератролом или CR все клетки собирали с трипсином и дважды промывали PBS с последующим ресуспендированием в 400 мкл буфера для связывания аннексина V. Затем клетки окрашивали в соответствии с инструкцией производителя набора для выявления апоптоза клеток Annexin V-FITC (BestBio, Китай). Проточный цитометр FACSCalibur (Becton-Dickinson, Сан-Хосе, Калифорния) использовали для обнаружения флуоресценции, и процент апоптотических клеток рассчитывали с помощью внутренней системы программного обеспечения FACSCalibur. Для каждой дорожки анализировали приблизительно 104 клетки.

Процедуры для животных

Самцы крыс-альбиносов Wistar весом примерно 200 ± 10 г были получены из Центра экспериментальных животных Медицинского колледжа Тунцзи Хуачжунского университета науки и технологий (SCXK 2010-0009). Животные акклиматизировались в течение 2 недель перед введением дозы в Центре экспериментальных животных Хубэйского университета китайской медицины, в течение этого времени они имели свободный доступ к пище и воде без ограничений. После акклиматизации отобрали 50 крыс и разделили на пять групп по десять человек в каждой. Животных содержали в соответствии с национальными рекомендациями и протоколами, утвержденными Институциональным комитетом по этике животных (IAEC).

Группа I (группа отрицательного контроля) крысы получали только носитель (1 мл/кг массы тела 0,9% физиологического раствора) в течение 6 недель. Группа II (модельная контрольная группа) крысы получали D-gal (200 мг/кг массы тела, Sigma Chemical, Сент-Луис, Миссури) в течение 6 недель. Группа III (группа с низкой дозой ресвератрола) крысы получали D-gal и ресвератрол (50 мг/кг массы тела), растворенные в 5-процентном диметилсульфоксиде (ДМСО) в течение 6 недель. Группа IV (группа с высокой дозой ресвератрола) крысы получали D-gal и ресвератрол (100 мг/кг массы тела). Крысы группы V (группа CR) получали D-gal и CR (диета, калорийность которой была на 40% ниже, чем у крыс, получавших ad libitum [27]) в течение 6 недель. D-gal вводили внутрибрюшинно, тогда как ресвератрол вводили перорально на протяжении всего эксперимента. Крыс забивали в последний день лечения, затем кровь, сыворотку и органы сразу собирали для биоанализа или хранили при -80°С для дальнейшего использования.

Поведенческие тесты

Тест водного лабиринта Морриса был разработан для оценки способности крыс к пространственному обучению и памяти через 6 недель после травмы [28]. Тест в водном лабиринте Морриса состоял из 4-дневного обучения и тренировки памяти, а также испытания зонда на 5-й день. Животных обучали в круглом бассейне (диаметром 155 см) с визуальными сигналами. Спасательная платформа (9,0 см в диаметре) была погружена на 1,0 см ниже поверхности воды в бассейне, температура которой поддерживалась при 25 ± 2 градуса. Платформа оставалась в центре северо-западного квадранта в течение 4-дневного периода обучения. Каждый день крыс обучали одному утреннему и одному дневному блоку. Крыса свободно плавала, пока не нашла платформу в течение 120 с. В случае неудачи его помещали на платформу на 10 с. Регистрировали задержку выхода (нахождение затопленной спасательной платформы) и скорость плавания. Испытание зонда проводили, удаляя платформу и позволяя каждой крысе свободно плавать в бассейне в течение 120 с. Количество пересечений платформы в тренированном квадранте (где платформа была удалена) регистрировалось с помощью компьютеризированной видеосистемы. Версия водного лабиринта с видимой платформой не выполнялась после того, как наблюдалась значительная разница в скорости плавания между крысами, получавшими D-gal и носитель.

Обнаружение биологических индикаторов, связанных с окислительным стрессом

Уровни МДА, СОД и Т-АОС в крови и тканях определяли фотометрически в соответствии с протоколом производителя с использованием коммерчески доступных наборов для ферментативного анализа (Нанкинский институт биоинженерии Цзяньчэн, город Нанкин, КНР). Все эксперименты, описанные в этом разделе, были выполнены в трех повторностях для получения среднего значения и стандартного отклонения.

Уровень липофусцина определяли по методу Сохала [29]. Вкратце, мы взвешивали 200 мг коры головного мозга, добавляли 2 мл хлороформ-метанолового (2:1) экстракта, гомогенизировали и фильтровали, затем промывали остаток экстрактом, объединяли фильтраты, добавляли экстракт до 5 мл и измеряли интенсивность флуоресценции на флуоресцентном спектрометре. Длина волны излучения составляла 435 нм, а длина волны возбуждения — 365 нм. Спектрофлуориметр стандартизировали, чтобы получить отклонение 50 при вышеуказанных длинах волн с раствором 1 мкг/мл бисульфата хинина в 0,1 М H2SO4. Результаты выражали в относительных единицах флуоресценции/мл хлороформа/г веса влажной ткани.

Обнаружение активности TE

Для экстракции теломеразы приблизительно 30 мг ткани дважды промывали ледяным PBS и, наконец, гомогенизировали примерно в 150 мл PBS. Активность TE измеряли с использованием наборов TE ELISA в соответствии с инструкциями производителя (Nanjing Sen Beijia Biological Technology Co., Ltd., Нанкин, Китай). Пределы чувствительности анализов составляли 0,8 МЕ/л для ТЭ.

ОТ-ПЦР-анализ

Уровни экспрессии мРНК SIRT1, Foxo3 и p53 в тканях печени и головного мозга анализировали с помощью анализа ОТ-ПЦР. Суммарную РНК экстрагировали тризолом, а их количество и чистоту оценивали на ультрамикроспектрофотометре (Thermo Fisher Scientific, США) по измерению оптической плотности при 260 и 280 нм. После количественного определения кДНК синтезировали с использованием набора FastQuant RT (Tiangen Biotech, Пекин, Китай) в соответствии с инструкциями производителя. Уровни экспрессии мРНК SIRT1, Foxo3, p53 измеряли с помощью ОТ-ПЦР с использованием TIANGEN SuperReal PreMix Plus (Tiangen Biotech, Пекин, Китай) со специфическими праймерами (таблица 2). Количественную ПЦР в реальном времени проводили с помощью системы ПЦР LightCycler 480 градусов (Roche, Базель, Швейцария), используя 20 мкл в качестве общего объема каждой реакции. Амплификацию ПЦР начинали с 15-минутной денатурации при 95°С, затем следовали 40 циклов при 95°С в течение 10 с, 59-63°С (температура отжига) в течение 20 с и 72°С в течение 30 с, и завершающая инкубация при 72°С. градус за 5 мин. Полученное пороговое число циклов каждого гена (значение Ct) нормировали на кратность относительных изменений по уравнению метода 2-∆∆CT [30].

Таблица 2: Список праймеров

Вестерн-блот анализ

Уровни экспрессии белков p53, FOXO3a, HuR, RPS19BP1 и DBC1 в тканях головного мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Общий белок тканей головного мозга экстрагировали с использованием RIPA Lysis Buffer (Beyotime, Китай) согласно инструкции производителя. Концентрацию белка определяли с помощью набора BCA Protein Assay Kit (Beyotime, Китай). 5 мг белков разделяли с помощью 12-процентных SDS-полиакриламидных гелей и переносили на мембрану PVDF ({8}},45 мкм, Millipore, США). Блоты блокировали 5-процентным обезжиренным молоком в TBS, затем инкубировали в течение ночи при 4 градусах с соответствующим разведением первичных антител: анти-p53 (SC- 6243, Santa Cruz Biotechnology), анти-FOXO3a (#12829, Cell Signaling Technology), анти-HuR (#12582, Cell Signaling Technology), анти-AROS (Ab201091, abcam), анти-DBC1 (#5857, Cell Signaling Technology), анти- - действие (AC004, ABclonal Technology) . После промывки мембран для удаления избытка первичных антител их инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре с соответствующими вторичными антителами в разведении 1:2000-1:5000 (AC004 или AS003, ABclonal Technology). Мембраны промывали 3 раза, а затем визуализировали с использованием субстрата для вестерн-блоттинга Pierce ECL (Thermo Scientific). -действие использовалось в качестве внутреннего контроля.

Иммуногистохимия

Образцы тканей фиксировали в 10-процентном нейтральном забуференном формалине в течение 1 ч после хирургического удаления и заливали в парафин по стандартной методике. Затем фиксированные образцы, залитые парафином, разрезали на срезы толщиной 5- мкм, которые депарафинизировали в ксилоле, регидратировали в этаноле и подвергали микроволновой обработке для обнаружения антигена. Соответствующим образом разбавленные первичные антитела, анти-p53 (SC-6243, Santa Cruz Biotechnology) и анти-FOXO3a (#12829, Cell Signaling Technology), инкубировали в течение 60 минут при комнатной температуре во влажной камере. Затем предметные стекла промывали в PBS и впоследствии инкубировали со вторичным антителом против антикроличьего антитела и визуализацией HRP (концентрация 1:300, #074-1506, KPL). Затем препараты промывали и срезы проявляли в ферментно-субстратном растворе диаминобензидина (DAB, Sigma). Изображения иммуногистохимически окрашенных срезов получали с помощью цифрового микроскопа Olympus (IX-73P1F, Olympus, Япония).

статистический анализ

Результаты выражали как среднее значение ± стандартное отклонение по крайней мере для трех независимых экспериментов и анализировали с использованием программного обеспечения SPSS 18.0. Групповые различия в латентности побега и скорости плавания в тренировочном задании в водном лабиринте Морриса анализировали с помощью двустороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с повторными измерениями, факторами были лечение и день тренировки. Другие данные были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки. Значение P менее 0,05 считалось значимым.

ВЫВОДЫ

Ресвератрол и CR проявляли одинаковую омолаживающую активность как in vitro, так и in vivo, о чем свидетельствует их способность ингибировать вызванное AAPH старение и апоптоз, а также восстанавливать возрастные когнитивные нарушения, вызванные введением D-gal. Их механизмы против старения включали повышение активности TE, уменьшение окислительного повреждения и регуляцию пути SIRT1. В целом, 10 мкМ ресвератрола in vitro и высокая доза ресвератрола in vivo продемонстрировали относительно более сильную антивозрастную активность и стимулирование уровней SIRT1. Эти результаты указывают на потенциал ресвератрола как миметика CR.

Сокращения

AAPH, 2,2'-азобис(2-амидинопропан)дигидрохлорид; AMPK, протеинкиназа, активируемая аденозинмонофосфатом; ANOVA, дисперсионный анализ; AROS, активный регулятор SIRT1; CR, ограничение калорийности; DBC1, делетированный при раке молочной железы 1; D-гал, D-галактоза; FBS, эмбриональная бычья сыворотка; Foxo3a, вилочная коробка 3a; HuR, Hu антиген R; MEM, минимальная основная среда; PBS, фосфатно-солевой буфер; PGC-1, коактиватор G-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом-1; РЕС, ресвератрол; SA-gal, связанная со старением -галактозидаза; SD, стандартные отклонения; SIRT1, регулятор информации о глушении; ТЕ, теломераза.

Вклад автора

Концепция и дизайн исследования: Ган Чен; сбор, анализ и интерпретация данных: Хуан Ли, Ся Чун Чжан, Йи-Мей Лю; получение финансирования и критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания: Ган Чен, Ке-Ли Чен; написание рукописи: Хуан Ли. Все авторы прочитали и одобрили публикацию этой рукописи. БЛАГОДАРНОСТЬ И ФИНАНСИРОВАНИЕ

Эта работа финансировалась Китайским фондом постдокторских наук (2016M601237), проектом Фонда естественных наук (81373704, 30873292).

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Отсутствие конфликта интересов у всех участвующих авторов.

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Рамис М.Р., Эстебан С., Мираллес А., Тан Д.С., Рейтер Р.Дж. Ограничение потребления калорий, ресвератрол и мелатонин: роль SIRT1 и влияние на старение и связанные с ним заболевания. Механическое старение Dev. 2015 г.; 146–148: 28–41.

2. Colman RJ, Beasley TM, Kemnitz JW, Johnson SC, Weindruch R, Anderson RM. Ограничение калорийности снижает возрастную смертность и смертность от всех причин у макак-резусов. Нац коммун. 2014; 5:3557.

3. Сохал Р.С., Вайндрух Р. Окислительный стресс, ограничение калорий и старение. Наука. 1996 год; 273: 59–63.

4. Testa G, Biasi F, Poli G, Chiarpotto E. Ограничение калорий и миметики диетического ограничения: стратегия улучшения здорового старения и долголетия. Курр Фарм Дез. 2014; 20:2950–77.

5. Лейн М.А., Рот Г.С., Инграм Д.К. Миметики ограничения калорийности: новый подход к биогеронтологии. Методы Мол Биол. 2007 г.; 371:143–9.

6. Баур Дж.А., Пирсон К.Дж., Прайс Н.Л., Джеймисон Х.А., Лерин С., Калра А., Прабху В.В., Аллард Дж.С., Лопес-Ллуч Г., Льюис К., Пистелл П.Дж., Пусала С., Беккер К.Г. и др. Ресвератрол улучшает здоровье и выживаемость мышей на высококалорийной диете. Природа. 2006 г.; 444: 337–42.

7. Лагуж М., Аргманн С., Герхарт-Хайнс З., Мезиан Х., Лерин С., Дауссин Ф., Мессадек Н., Милн Дж., Ламберт П., Эллиотт П., Гени Б., Лааксо М., Пуигсервер П. и др. Ресвератрол улучшает функцию митохондрий и защищает от метаболических заболеваний, активируя SIRT1 и PGC-1альфа. Клетка. 2006 г.; 127:1109–22.

8. Howitz KT, Bitterman KJ, Cohen HY, Lamming DW, Lavu S, Wood JG, Zipkin RE, Chung P, Kisielewski A, Zhang LL, Scherer B, Sinclair DA. Низкомолекулярные активаторы сиртуинов увеличивают продолжительность жизни Saccharomyces cerevisiae. Природа. 2003 г.; 425:191–6.

9. Квон Х.С., Отт М. Взлеты и падения SIRT1. Тенденции биохимических наук. 2008 г.; 33: 517–25.

10. Брукс С.Л., Гу В. Как SIRT1 влияет на обмен веществ, старение и рак? Нат Рев Рак. 2009 г.; 9:123–8.

11. Харман Д. Свободнорадикальная теория старения. Мутат Ре. 1992 год; 275: 257–66.

12. Mayo JC, Tan DX, Sainz RM, Lopez-Burillo S, Reiter RJ. Окислительное повреждение каталазы, индуцированное пероксильными радикалами: функциональная защита мелатонином и другими антиоксидантами. Свободный Радик Рез. 2003 г.; 37: 543–53.

13. Hubackova S, Krejcikova K, Bartek J, Hodny Z. Передача сигналов IL1- и TGF-Nox4, окислительный стресс и реакция на повреждение ДНК являются общими чертами репликативного, онкоген-индуцированного и лекарственно-индуцированного паракринного старения Bystander. '. Старение (Олбани, штат Нью-Йорк). 2012 г.; 4: 932–51. https://doi.org/10.18632/aging.100520.

14. Cui X, Zuo P, Zhang Q, Li X, Hu Y, Long J, Packer L, Liu J. Хроническое системное воздействие D-галактозы вызывает потерю памяти, нейродегенерацию и окислительное повреждение у мышей: защитные эффекты R{{ 2}}липоевая кислота. J Neurosci Res. 2006 г.; 84: 647–54.

Попросить больше:

Электронная почта: wallence.suen@wecistanche.com WhatsApp: плюс 86 15292862950