ЧАСТЬ Ⅰ: Аналог эпоксиэйкозатриеновой кислоты, нацеленный на почки, EET-F01, уменьшает воспаление, окислительный стресс и нефротоксичность, вызванную цисплатином.

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Джон Д. Имиг, доктор медицинских наук Абдул Хе Хан и др.

1. Введение

Заболевание почек у онкологических больных и выживших стало серьезной проблемой здравоохранения и продолжает резко обостряться [1-3]. Новые методы лечения рака повышают показатели излечения и время выживания, но частыми последствиями являются связанные с терапией нарушения водно-электролитного баланса и острое повреждение почек, прогрессирующее до хронического заболевания почек [3–5]. Противораковые препараты, ингибиторы тирозинкиназы рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFRI) и производные платины также могут вызывать тяжелое повреждение почек, что значительно снижает их эффективность и безопасность [3–5]. Существует значительная клиническая потребность в новых методах лечения для эффективного лечения и остановки заболевания почек у онкологических больных. Эта проблема здравоохранения привела к развитию, эволюции и появлению узкой специальности — онко-нефрологии [5]. Современные методы лечения только замедляют потерю функции почек или вообще не приносят пользы [2,5,6]. Срочно нужны новые подходы. Наши текущие исследования направлены на борьбу с этой новой областью рака, и мы сосредоточены на разработке аналогов эпоксиэйкозатриеновой кислоты (EET) для защиты почек от токсичности, связанной с терапией рака.

биофлавоноиды таблеткиа такжецистанхезафункция почек

Аналоги EET основаны на фармакофорной части EET и разработаны с улучшенной растворимостью и устойчивостью к самоокислению и метаболизму растворимой эпоксидгидролазой (sEH) [7,8]. Предыдущие исследования показали, что синтетические аналоги EET защищают почки при некоторых патологических состояниях, таких как гипертония,нефротоксичностьи волчаночный нефрит [9-13]. Аналоги EET уменьшают повреждение почек при этих болезненных состояниях за счет сосудорасширяющего, мочегонного, противовоспалительного, антиоксидантного и антиапоптотического действия [10-13]. Эти исследования наглядно продемонстрировали, что подход, основанный на ЭЭТ, позволяет бороться с поражением почек при патологических ситуациях различной этиологии. В последнее время были предприняты попытки разработать аналоги ЭЭТ, обладающие уникальным свойством нацеливаться на почки. Новая форма аналога EET, нацеленного на почки, была разработана и синтезирована путем конъюгации фармакофора EET с фолиевой кислотой.ЭЭТ-F01). В настоящем исследовании мы исследовали способностьЭЭТ-F01для нацеливания на почки по сравнению с аналогом EET, EET-A. EET-FO1 и EET-A сравнивали по их способности снижать вызванное цисплатином повреждение почек. Наконец, это исследование дополнительно определило защитные, противовоспалительные и антиоксидантные свойства почек.ЭЭТ-F01.

преимущества цистанхезапочка

2. Результаты

2.1. ЭЭТ-F01Цели ткани почек

Химические структуры для EET-A и EET-FO1 представлены на рисунке 1. Чистота для EET-A иЭЭТ-F01 was >95% по данным ЯМР. В остром исследовании на животных равные дозы по массе EET-A иЭЭТ-F01вводили внутривенно в течение 6 ч с последующим забором плазмы и почечной ткани. Мы продемонстрировали 5-кратно более высокий уровень плазмыЭЭТ-F01по сравнению с EET-A через 6- ч непрерывного введения (рис. 1). Интересно, что мы также продемонстрировали, что после 6- часов непрерывного введения содержание EET-A в почках почти не определялось по сравнению сЭЭТ-F01содержимое в почках (рис. 1). Эти данные демонстрируют, чтоЭЭТ-F01нацелен на почки.

Рисунок 1. Сравнение EET-F01 и EET-A в плазме и почках после внутривенного введения в течение 6 часов.Верхняя панель: Химические структуры для EET-A иЭЭТ-F01. Левая панель: концентрация EET-FO1 и EET-A в плазме. Правая панель: уровни в почкахЭЭТ-F01и ЭЭТ-А. Данные выражены как среднее ± стандартная ошибка среднего, n=3/группа.

2.2. ЭЭТ-F01Защищает от цисплатинаНефротоксичность

В отдельной серии экспериментов группам крыс предварительно вводилиЭЭТ-F01и EET-A в течение двух дней до индукции цисплатиновой нефропатии, а затем дополнительно обрабатывали тестируемыми соединениями в течение еще 5 дней. Защитное действие на почкиЭЭТ-F01и EET-A определяли по уровням BUN, содержанию NAG в моче и уровням KIM-1 в моче.ЭЭТ-F01был так же эффективен, как EET-A, в снижении BUN, NAG, KIM-1 и гистологического повреждения почек через пять дней после индукции цисплатиномнефротоксичность(Фигура 2). Затем было проведено гистологическое исследование для дальнейшей оценки нефротоксичности цисплатина. Введение цисплатина приводило к повреждению канальцев, проявляющемуся вакуолизацией и десквамацией клеток почечного эпителия, а также образованием тяжелых внутриканальцевых белковых цилиндров как в корковом, так и в медуллярном отделах почек. ЭЭТ-А иЭЭТ-F01лечение защищало почки от цисплатинанефротоксичностьу крыс (рис. 2).ЭЭТ-F01был эффективен при дозе 20 мг/кг/сут и при 10-более низкой дозе 2 мг/кг/сут, несмотря на то, что его молекулярная масса почти в 2 раза больше из-за фолиевой кислоты по сравнению с EET-A. Эти данные наглядно демонстрируют, чтоЭЭТ-F01нацеливается на почки и обеспечивает более низкую, но все же эффективную дозу. Таким образом, мы разработали аналог EET для почек,ЭЭТ-F01, что демонстрирует отличный потенциал в качестве терапевтического средства при заболеваниях почек.

Преимущества цистанхе пустынной

Рисунок 2. Повреждение почек, вызванное цисплатином, уменьшается при лечении EET-F01 и EET-A.Левая панель: азот мочевины крови (BUN). Средняя панель: мочевая N-ацетил- -(D)-глюкозаминидаза (NAG). Правая панель: молекула повреждения почек-1 (KIM-1) у крыс, которым вводили цисплатин, получавших носитель, EET-FO1 или EET-A. Нижняя панель: репрезентативные микрофотографии окрашивания периодической кислотой-Шиффа (PAS), изображающие вакуолизацию и десквамацию почечных эпителиальных клеток наряду с тяжелым образованием внутриканальцевых белковых цилиндров тубулярных цилиндров в срезах почек в разных экспериментальных группах.*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;t=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.data="" expressed="" as="" mean="" ±sem,="" n="">

2.3. EET-F01 и EET-A уменьшают почечное воспаление и окислительный стресс в цисплатинеНефротоксичность

Уровни экспрессии мРНК почечного IL-6 и TNFo показали 4-кратное увеличение индуцированного цисплатиномнефротоксичность. ЭЭТ-F01и лечение EET-A снижало воспалительные почечные гены IL-6 и TNF на 30-50 процентов в цисплатиненефротоксичность(Рисунок 3). У крыс, получавших цисплатин, наблюдается повышенная почечная экспрессия маркерных генов окислительного маркера NADPH-оксидазы, субъединиц p47phox, p67phox, gp91phox и NOX4. Уровни TBARS в почечной ткани были повышены во время индуцированного цисплатиномнефротоксичность. Это вызванное цисплатином усиление окислительного стресса было ослаблено 60-100 процентов наЭЭТ-F01и лечение EET-A (рис. 4 и 5). Эти данные показывают, чтоЭЭТ-F01так же эффективен, как EET-A, в снижении воспаления и окислительного стресса в цисплатиненефротоксичность.

Рисунок 3. Воспаление почек при нефротоксичности цисплатина уменьшается при лечении EET-F01 и EET-A.ОТ-ПЦР-анализ экспрессии мРНК IL-6(левая панель) и TNF (правая панель).*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean±sem,="" n="">

2.4. EET-A не увеличивает рост опухоли

Использование аналогов EET может способствовать метастазированию рака при длительном введении [14,15]. Хотя текущий терапевтический подход предполагает введение аналогов EET в течение короткого периода времени для предотвращения индуцированного цисплатиномнефротоксичность, мы оценили долгосрочные эффекты EET-A на рост опухоли линии клеток рака молочной железы человека, MBA-MB-231, у бестимусных мышей. Объем и вес опухоли увеличивались с одинаковой скоростью у мышей, получавших носитель или EET-A, в течение трехнедельного периода (фиг. 6). Гистологическая оценка опухолей не выявила каких-либо изменений в клеточной гиперплазии или пролиферации у мышей, получавших EET-A. Эти данные демонстрируют, что EET-A не усиливает рост опухоли.

Рисунок 4. Почечный окислительный стресс при нефротоксичности цисплатина снижается при лечении EET-F01 и EET-A.ОТ-ПЦР-анализ экспрессии мРНК (a) p47phox, (b) p67phox, (c) gp91phox, (d) NOX4.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">	Рисунок 5. Вещества, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой в почках (TBARS), при нефротоксичности цисплатина снижаются при лечении EET-F01 и EET-A.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">

Рисунок 6. Рост опухоли линии клеток рака молочной железы человека, MBA-MB-231, у бестимусных мышей не изменяется при лечении EET-A.Левая панель: объем опухоли. Правая панель: масса опухоли у мышей с опухолями MBA-MB-231, получавших носитель (контроль) или EET-A. Нижняя панель: репрезентативные микрофотографии окрашивания периодической кислотой-Шиффа (PAS), изображающие аналогичную гиперплазию и пролиферацию опухоли в опухолях молочной железы человека. Данные выражены как среднее ± стандартная ошибка среднего, n=5 мышей и n=10 опухолей/группа.

НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, ЧТОБЫ ЧАСТЬ Ⅱ

цистанхе на хинди