Влияние нутрицевтики на основе фруктов и овощей на биомаркеры воспаления и окислительного статуса в плазме здорового населения: плацебо-контролируемое, двойное слепое и рандомизированное клиническое исследование

Почта для связиtina.xiang@wecistanche.comЧтобы получить больше информации

Абстрактный: Имеются научные доказательства положительного эффектаполифенолыиз растительной пищи навоспаление а такжеокислительныйстатус. Цель настоящего исследования заключалась в том, чтобы выяснить, снижает ли лечение нутрицевтиками с высоким содержанием полифенолов плазматическую концентрацию некоторыхокислительныйа такжевоспалительныйбиомаркеры в здоровой популяции. Было отобрано и стратифицировано по полу сто восемь субъектов в группе вмешательства (n {{0}}) и в группе плацебо (n=55). Девяносто два субъекта завершили исследование после двух 16-недельных периодов лечения, разделенных четырехнедельным периодом вымывания. Результаты выявили статистически значимые различия у субъектов, получавших полифенольный экстракт, по сравнению с плацебо: снижение уровня гомоцистеина, окисленных липопротеинов низкой плотности (OxLDL), TNF-, sTNFR1 и С-реактивного белка (CRP). Наиболее значительное снижение наблюдалось для OxLDL (с 78,98 ± 24,48 до 69,52 ± 15,64; p < 0.05)="" и="" crp="" (с="" 1,5="" 0="" ±="" 0.="" 33="" до="" 1,39="" ±="" 0,37;="" p="">< 0,05),="" оба="" демонстрируют="" значительные="" различия="" по="" сравнению="" с="" плацебо="" (p="">< 0,001).="" кроме="" того,="" катехоламины="" повышались="" после="" введения="" исследуемого="" продукта,="" особенно="" в="" случае="" дофамина="" (с="" 15,43="" ±="" 2,66="" до="" 19,61="" ±="" 5,73;="" p="">< 0,05).="" следовательно,="" потребление="" нутрицевтика="" на="" основе="" фруктов="" и="" овощей="" с="" высоким="" содержанием="" полифенолов,="" по-видимому,="" улучшает="" параметры,="" связанные="" с="" пользой="" для="" здоровья="">окислительныйа такжевоспалительныйбиомаркеры), включая заметные изменения в экспрессии катехоламинов.

Ключевые слова: полифенол; биомаркеры; окислительный стресс; фрукты; овощ; нутрицевтический

1. Введение

В научной литературе документально подтверждена роль диеты в профилактике неинфекционных заболеваний, таких как ожирение, сердечно-сосудистые заболевания, рак и всех причин смерти, особенно за счет потребления фруктов и овощей из-за высокого содержания в них биоактивных соединений, в основном полифенолов [1]. ,2]. Существует обратная зависимость между средиземноморской диетой, характеризующейся высоким потреблением продуктов, богатых полифенолами, за счет потребления продуктов и напитков, богатых полифенолами, таких как фрукты, овощи, какао, чай и кофе, и риском развития всех причин. смертность [3,4]. Несмотря на то, что было продемонстрировано, что потребление 800 г/день фруктов и овощей снижает риск сердечно-сосудистых заболеваний и смертности от всех причин, а 600 г/день снижает риск рака, ВОЗ и несколько руководств по питанию по-прежнему рекомендуют 400 г/день [5]. Однако большая часть населения не достигает даже установленного органами здравоохранения минимума, который эквивалентен пяти порциям фруктов и овощей в день [6,7]. Преимущества, связанные со здоровым образом жизни, известны во всем мире, и появляются новые продукты, которые предлагают возможность включения вышеупомянутых биологически активных соединений в виде добавок / нутрицевтиков, что помогает достичь рекомендаций по питанию [8].

Кроме того, в связи с прогрессирующим старением населения среди других факторов, таких как питание и образ жизни, наблюдается ускоренный рост нейродегенеративных заболеваний, при этом основным показателем является БА, распространенность которого удваивается каждые 20 лет. Из-за воздействия и социальных издержек, связанных с этим, было проведено множество исследований взаимосвязи между потреблением фруктов и овощей как вкладом антиоксидантов, которые снижаютокислительныйповреждение на уровне головного мозга [9].

Полифенолы вырабатываются растениями в качестве вторичных метаболитов в качестве защитного механизма от неблагоприятных условий (среди прочего, от паразитов, климата или загрязнения) [10] и образуют широкую группу биоактивных фитохимических веществ, включая фенольные кислоты, стильбены, лигнаны, фенольные спирты и флавоноиды [11,12]. Они обеспечивают потенциальные эффекты в профилактике и лечении ряда патологий, таких как сердечно-сосудистые заболевания, рак, сахарный диабет, старение и нейродегенеративные заболевания [13] за счет нескольких биоактивностей (кардиопротекторная активность, анти-воспалительныйактивности, омолаживающей активности, антиоксидантной активности, противоопухолевой активности, противомикробных эффектов, нейропротекторных эффектов, легочно-защитных эффектов, почечно-защитных эффектов, профилактики остеопороза и защиты от УФ-облучения) [14]. Полифенолы ослабляютвоспалениепутем подавления про-воспалительныйфакторов транскрипции от взаимодействия с белками, участвующими в экспрессии генов и клеточной передаче сигналов [15]. Сосудорасширяющая, вазопротекторная, антитромботическая, антилипемическая, антисклеротическая, противовоспалительная и антиапоптотическая способность полифенолов является следствием их оздоровительных свойств [12], учитывая, что полифенолы являются основным источником антиоксидантов (в 10 раз выше, чем у витаминов). С и в 100 раз выше, чем у витамина Е и каротиноидов) [16]. Фактически, кверцетин, мирицетин и кемпферол являются флаванолами, флавоноидами с самой высокой способностью нейтрализовать свободные радикалы, поскольку их структура фенольной группы способна захватывать неспаренные электроны АФК, образуя нейтрализованные реактивные частицы [17]. Однако концентрация полифенолов в плазме сильно зависит от химической структуры и источника питания, поэтому для получения всех связанных с этим преимуществ целесообразно их длительное употребление [12].

Цель текущего клинического испытания состояла в том, чтобы оценить, способно ли длительное потребление большого количества полифенолов в составе нутрицевтиков на основе фруктов и овощей улучшать биомаркеры, связанные своспалениеа такжеокислительныйстатус у здоровых людей, которые не потребляют рекомендуемое количество фруктов и овощей. Кроме того, здоровое не пожилое население было предметом нескольких интервенционных исследований, которые связывали потребление фруктов и овощей и уровни катехоламинов как переменные, связанные с когнитивными функциями [27, 28, 34].

2. Результаты

2.1. Изучаемая популяция

Всего в это исследование было включено 108 субъектов (в таблице 1 представлены их демографические данные), разделенных на две однородные группы (N1 и N2). Наконец, после перехода и потери для последующего наблюдения 92 субъекта (N 1=48, N 2=44) ​​завершили вмешательство и были включены в окончательный статистический анализ, как показано на рисунке 1.

2.2. Плазматические биомаркеры

Средние значения и стандартные отклонения всех биомаркеров, проанализированных у всех субъектов, как на исходном уровне, так и в конце вмешательства после приема полифенольного экстракта (EXT) или приема плацебо (PLA), представлены в таблице 2.

Что касается профиля липидов, изменения холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) в зависимости от типа потребляемого продукта были значительными. Значения ЛПВП значительно снизились после потребления PLA (∆4,52 мг/дл; p<0.05),while increased="" significantly="" in="" the=""><0.05).additionally, the="" difference="" between="" both="" groups="" was="" also="" statistically="" significant="" at="" the="" end="" of="" the=""><0.05). finally,="" total="" cholesterol="" and="" triglycerides="" values="" did="" not="" show="" significant="" differences="" throughout="" the="" intervention="" after="" pla="" or="" ext="">
Regarding the vitamins analyzed, a slight increase in vitamin B12 was observed in both groups, as well as small non-significant variations in vitamin E values, as shown in Table2(p>0.05). Например, уровень витамина B12 менялся после приема внутрь как в группах PLA, так и в группах EXT; однако значимых различий обнаружено не было (p=0,43 и p=0,20 соответственно). В случае витамина Е значения различались в группах PLA (p=0,98) и EXT (p=0,91). значимые различия наблюдались либо для витамина B12 (p=0,205), либо для витамина E (p=0,974).

Что касается значений катехоламинов, то основным результатом было значительное увеличение дофамина (∆4,18 пг/мл; p<0.001)after consumption="" of="" ext="" with="" respect="" to="" pla="" (p="0.22)," showing="" significant="" differences="" between="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" intervention=""><0.001). a="" significant="" increase="" in="" norepinephrine="" values="" was=""><0.05), with="" an="" increase="" of="" ∆="" 39.21="" pg/ml="" in="" the="" ext="" group,="" not="" observed="" in="" the="" pla="" group="" (p="0.72)." there="" was="" no="" signifificant="" difference="" between="" the="" groups="" at="" the="" end="" of="" the="" study.="" analyzing="" the="" cortisol="" and="" adrenaline="" values,="" no="" signifificant="" differences="" were="" observed="" in="" any="" group="" during="" the="" intervention,="" nor="" at="" the="" end="" of="" the="">

Функцию щитовидной железы определяли гормоны Т3, Т4 и ТТГ. Во время вмешательства было отмечено, что значения гормона Т3 значительно снизились в обеих группах (p < 0.05).="" значения="" гормона="" т4="" варьировались="" по-разному,="" значительно="" увеличиваясь="" в="" группе,="" принимавшей="" фла="" (∆="" 0,57="" мкг/л;="" p="">< 0,001),="" и="" незначительно="" снижаясь="" в="" группе="" ext="" (∆="" 0,47="" мкг/л).="" ).="" при="" этом="" значения="" гормона="" ттг="" оставались="" постоянными="" после="" употребления="" обоих="" продуктов.="" сравнивая="" эволюцию="" трех="" гормонов="" между="" группами="" в="" конце="" исследования,="" не="" наблюдалось="" существенных="" различий="" для="" т3="" (р="0,195)," т4="" (р="0,195)" или="" ттг="" (р="">

Для определения безопасности исследуемых продуктов были проанализированы трансаминазы (GOT, GPT и GAMMA GT) с целью оценки функции печени субъектов, не наблюдая значительных изменений (p > 0,05) ни в одном вышеупомянутых ферментов печени после употребления продукта или плацебо. Поэтому можно предположить, что прием продуктов безопасен.

3. Обсуждение

Как отмечалось выше, данные, полученные в настоящей рукописи, отражают некоторые различия между методами лечения. Однако в исходных условиях существенных различий между группами не наблюдалось, что усиливает значительные изменения, полученные после употребления продукта.

Плазматический гомоцистеин считается показателем сердечно-сосудистого риска, который можно изменить с помощью упражнений и диеты. Кроме того, хорошо известен его высокий нейропротекторный эффект [35,36]. Однако кажется, что пища обеспечивает постоянный запас питательных веществ для поддержания оптимального метаболизма гомоцистеина [37]. В нашем исследовании гомоцистеин значительно снизился после употребления продукта, как и в предыдущих исследованиях [22,38]. Таким образом, потребление полифенолов в больших дозах помогает снизить уровень гомоцистеина, что можно рассматривать как кардиозащитную способность. В свою очередь липидный профиль, общий холестерин и триглицериды не изменялись на протяжении всего вмешательства. Однако следует отметить, что уровень холестерина ЛПВП в плазме значительно увеличился после употребления продукта и снизился после приема плацебо. Эти изменения в плазматических липопротеинах подтверждают представление о кардиопротекторной способности исследуемого продукта.

Основным открытием настоящего исследования было значительное снижение OxLDL вместе с повышением уровня холестерина HDL после постоянного потребления экстракта, богатого полифенолами, по сравнению с плацебо. Эти результаты согласуются с предыдущими исследованиями, подтверждающими, что полифенолы защищают от атеросклероза, тем самым подавляя пролиферацию гладкой мускулатуры сосудов [12,39,40]. OxLDL является одним из немногих параметров, признанных Европейским агентством по безопасности пищевых продуктов (EFSA) в рамках заявления о функции, и, по-видимому, является подходящей переменной результата для обоснования заявлений о пользе для здоровья, связанных со снижением окислительного повреждения липидов. 41,42]. Кроме того, OxLDL способствует адгезии моноцитов к эндотелиальным клеткам через механизм, независимый от экспрессии ICAM-1 и VCAM-1, образуя пенистые клетки [43]. Однако этого не происходит с ЛПНП [44]. Это связывание осуществляется через определенные рецепторы, такие как CD36. OxLDL является лигандом для PPAR и повышает экспрессию CD36, способствуя поглощению OxLDL макрофагами [45] и, следовательно, способствуя развитию атеросклероза посредством активации иммунной системы [46]. Интересно, что OxLDL способствует эндотелиальной дисфункции и атеросклерозу, тем самым снижая сердечно-сосудистый риск [47,48].

В свою очередь, обработка исследуемым продуктом приводила к плазматической редукции СРБ, белка острой фазы, синтезируемого в печени, опосредованного другими цитокинами, особенно ИЛ-1 и ИЛ-6 [49]. Высокий уровень СРБ коррелирует с повышенным риском сердечно-сосудистых событий даже у здоровых людей [50]. В нескольких исследованиях была обнаружена связь между концентрациями СРБ и сердечно-сосудистыми событиями, такими как острый инфаркт миокарда, инсульт и прогрессирование окклюзионной болезни периферических артерий [51, 52]. Хотя полученные уровни СРБ находятся в пределах нормальных значений для здорового человека, снижение этих уровней свидетельствует о пригодности полифенолов в этом отношении.

Более того, иммунно-воспалительный маркер TNF- значительно снизился после употребления экстракта. TNF- является провоспалительным цитокином, который значительно экспрессируется в жировой ткани, а также в лейкоцитах, эндотелиальных и мышечных клетках [53], участвует в эндотелиальной дисрегуляции, стимулирует миграцию моноцитов и макрофагов, индуцирует экспрессию молекул адгезии [54]. Фактически увеличение TNF- может происходить в рационе с низкой концентрацией каротинов, что может объяснить наблюдаемое снижение уровней TNF- [55]. Поэтому имеет смысл, что в нашем исследовании он снижает свою ценность после употребления продукта из-за высокого содержания каротинов в продукте.

Экстракт полифенолов, использованный в настоящем исследовании, был протестирован в нескольких интервенционных исследованиях с разным временем употребления и в разных группах населения, что привело к противоречивым результатам. При проведении {{0}}недельного вмешательства у обученных мужчин, принадлежащих к австрийским специальным полицейским силам, сообщалось о значительном снижении (p < 0,001)="" концентрации="" карбонильных="" групп="" в="" белках="" и="" tnf-="" на="" 16-й="" и="" 28-й="" неделях.="" .="" отличие="" от="" нашего="" исследования="" заключалось="" в="" том,="" что="" в="" их="" исследовании="" образцы="" были="" получены="" на="" 4,="" 8,="" 16="" и="" 28="" неделе.="" примечательно,="" что="" значения="" увеличивались="" до="" 8="" недели="" и="" снижались="" с="" 16="" недели="" и="" далее="" [56].="" в="" ходе="" восьминедельного="" вмешательства="" у="" лиц="" старше="" 40="" лет="" с="" избыточной="" массой="" тела="" и="" ожирением="" сообщалось="" о="" значительном="" снижении="" общего="" холестерина,="" холестерина="" лпнп="" и="" фно-,="" чего="" не="" было="" достигнуто="" при="" применении="" плацебо;="" тем="" не="" менее,="" не="" было="" обнаружено="" существенных="" различий="" в="" crp,="" stnfr1="" или="" oxldl="" [57].="" оба="" результата,="" по-видимому,="" подтверждают,="" что="" длительное="" потребление="" полифенолов,="" как="" и="" в="" нашем="" исследовании="" (16="" недель),="" связано="" с="" большей="" эффективностью="" против="" воспаления.="" в="" другом="" восьминедельном="" вмешательстве="" у="" женщин="" с="" ожирением="" наблюдались="" значительные="" улучшения="" в="" нескольких="" маркерах="" окисления="" белков,="" таких="" как="" карбонильные="" белки,="" oxldl="" (p="0,015)" и="" общее="" окисление="" липидов="" всех="" липидов.="">воспалительныймаркеров, было отмечено значительное снижение TNF- (p=0,011). Исходно значения TNF- были выше установленного диапазона в группах плацебо и экстракта; в конце вмешательства они оставались повышенными в группе плацебо и снижались до нормальных значений в группе, принимавшей продукт [58]. Наконец, эффективность экстракта также была проверена на нездоровых субъектах, сообщая о снижении OxLDL после трехмесячного периода потребления заядлыми курильщиками [59].

Что касается катехоламинов, то после употребления исследуемого продукта наблюдалось значительное повышение уровня норадреналина и особенно дофамина. Однако достоверных изменений кортизола и адреналина не наблюдалось ни в одной из групп. Несмотря на то, что в некоторых предыдущих исследованиях сообщалось о снижении уровня кортизола в плазме [60] или слюне [61] после приема полифенолов, это не является обычным явлением, и значения редко демонстрируют значительные изменения [62–64] относительно приема полифенолов. Тот факт, что значения как адреналина, так и кортизола не увеличились, означает, что адренергический ответ, связанный с потреблением продукта, не развился. Норадреналин и дофамин также повышены у пожилых пациентов с нейродегенеративными заболеваниями [65,66] и связаны с тревогой [67] и улучшением когнитивных функций [68]. Более того, норадреналин тесно связан с вниманием, а также с бдительностью [69,70]. Результаты, полученные в настоящем исследовании в отношении дофамина и норадреналина, могут быть связаны с улучшениями на когнитивном уровне, наблюдаемыми в другой публикации [71]. Таким образом, мы можем утверждать, что потребление полифенолов повышает уровень бдительности и внимания, что коррелирует с результатами на уровне когнитивных тестов [71].

Ограничение настоящего клинического исследования, как описано Di Lorenzo et al. [10] в систематическом исследовании биодоступности полифенолов, заключается в том, что включение здоровых субъектов в клинические испытания затрудняет оценку значительных различий в биомаркерах, которые изменяются при патологических состояниях. Другие ограничения этого исследования включают тот факт, что метаболиты фенольных соединений в продукте не определялись, кроме содержания витамина Е или индивидуальной реакции, что могло повлиять на биодоступность и биоактивность полифенолов [72].

Важно помнить, что добровольцы настоящего исследования являются здоровыми субъектами, а биомаркеры воспаления, которые мы определили, находятся в пределах нормальных значений в плазме. Таким образом, различия, наблюдаемые в пределах нормальных значений этих биомаркеров, несмотря на то, что они статистически значимы, не бросаются в глаза с клинической точки зрения. Однако, если исследуемый продукт достиг статистически значимых изменений у здоровых людей, эти изменения могут быть еще более значительными у пациентов с аномальными значениями [73,74], поскольку полифенолы в продукте помогут хотя бы частично бороться с агентом, вызывающим это нарушение. уровня в плазме [75].

Следовательно, будущие исследования могут быть сосредоточены на рассмотрении этих аспектов как у здоровых, так и у нездоровых групп населения.

4. Материалы и методы

4.1. Пробный дизайн

Это исследование состояло из рандомизированного, перекрестного, двойного слепого, стратифицированного по полу и плацебо-контролируемого клинического исследования для оценки эффективности ежедневного потребления инкапсулированного нутрицевтика (Juice Plus plus Premium®, The Juice Plus plus Company, Collierville). , Теннесси, США) на основе различных фруктов и овощей на биомаркеры воспаления и окислительного статуса плазмы крови. Вмешательство длилось 36 недель — два периода по 16 недель, разделенные периодом вымывания продолжительностью 4 недели. Во время вмешательства испытуемые четыре раза (в начале и в конце каждой фазы) приходили в лабораторию, получая образцы крови натощак. В начале каждой фазы продукт (EXT или PLA) доставлялся субъектам, а в конце каждой фазы субъекты должны были вернуть упаковки исследователям для количественного определения оставшихся продуктов.

Каждый субъект подписал документ об информированном согласии, и ему был присвоен цифровой код в порядке поступления; впоследствии сторонний исследователь провел рандомизацию с использованием вычисляемого генератора (Epidat v4.1 Epi-dat, Испания), назначив испытуемых в одну из групп. Ни исследователи, ни испытуемые не знали, к каким группам принадлежали испытуемые. И продукт, и плацебо были отмечены кодами, предоставленными компанией-дистрибьютором, и классифицированы как A и B, и только в конце исследования исследователи были уведомлены о том, какой код соответствует продукту, а какой — плацебо. Протокол был одобрен Комитетом по институциональному обзору Католического университета Сан-Антонио Мурсии (UCAM) (дата: 24 ноября 2017 г.; код: CE111072). Это исследование проводилось в соответствии со Стандартами надлежащей клинической практики и в соответствии с Хельсинкской декларацией. Исследование было зарегистрировано на сайте www.clinicaltrials.gov (по состоянию на 11 июня 2020 г.) (идентификатор CFE/JU/44-17). Антонио Мурсийский (UCAM). Соблюдено действующее европейское законодательство о защите персональных данных (Регламент (ЕС) 2016/679).

4.2. Участники

Субъекты должны были соответствовать всем критериям включения (подписать форму информированного согласия, ИМТ от 18,5 до 35 кг/м2, не иметь хронических заболеваний, не употреблять более трех порций фруктов и овощей в день и возраст от 18 лет). и 65 лет) и не соответствуют ни одному из критериев исключения (нахождение на медикаментозном или фармакологическом лечении, прием поливитаминов, аллергия на фрукты или овощи, соблюдение диеты, вегетарианство или веганство, курение, употребление более 3 стаканов алкоголя ( вино или пиво) в день, будучи беременной, перенесшей серьезную операцию за последние три месяца, имея проблемы со сном и сдав 0,5 л крови за последние три месяца). После проверки критериев включения/исключения к исследованию приступили в общей сложности 108 человек обоего пола. Была предпринята проверка, чтобы гарантировать, что субъекты продолжали соответствовать критериям на протяжении всех посещений отделения с помощью опроса средиземноморского индекса образа жизни (MEDLIFE) для оценки пищевых привычек и физической активности [76]. Во время вмешательства 16 субъектов были потеряны для последующего наблюдения, поэтому

количество субъектов, завершивших исследование, составило 92, демографические данные которых представлены в таблице 1.

4.3. Дополнение к тесту

Исследуемый продукт и плацебо имели одинаковые характеристики, и оба были произведены и предоставлены компанией The Juice Plus plus Company, Collierville, TN, USA. Презентация была представлена ​​в виде инкапсулированных фармацевтических продуктов белого цвета, представленных во флаконах, различающихся только кодом. После завершения исследования исследователям сообщили, какой код относится к продукту, а какой к плацебо. Различия в коммерческом продукте заключались в том, что он состоял из приема трех разных типов капсул в день - двух смешанных ягод, двух смешанных фруктов и двух смешанных овощей, каждая из которых была в отдельной бутылке. По этой причине, а также для того, чтобы иметь возможность производить аналогичный продукт и плацебо, было решено производить капсулы, содержащие смесь трех вышеупомянутых капсул (ягоды, фрукты и овощи), при этом ежедневное потребление для этого исследования составляло шесть капсулы — три перед завтраком и три во второй половине дня, запивая водой.

Исследуемый продукт поставлялся в непрозрачных белых капсулах и содержал порошок фруктового, овощного и ягодного сока и мякоть яблока, апельсина, ананаса, клюквы, персика, вишни ацеролы, свеклы, чернослива, финика, манго, моркови, петрушки, капусты, брокколи, капуста, шпинат, рисовые отруби, помидоры, листья артишока, черника, ежевика, черная смородина, черника, клюква, виноград конкорд, бузина, экстракт виноградных косточек, экстракт зеленого чая, корень имбиря, малина, какао, гранат, натуральная смесь токоферолов ( , δ, , -токоферолы, -токоферол подсолнечника), натуральная смесь каротиноидов (лютеин, -каротин, ликопин, астаксантин), пектин цитрусовых, биофлавоноиды цитрусовых, цедра лимона, карбонат кальция, чесночный порошок, спирулина, смесь натуральных ферментов, диоксид кремния , стеарат магния растительного происхождения, тангеретин и Lactobacillus acidophilus. Суточная доза 6 капсул содержит 2,91 мг каротина, 18,7 мг витамина Е, 159 мг витамина С, 318 мкг фолиевой кислоты, 6,1 мг глютеина, 1 мг ликопина и 0,15 мг астаксантина. Плацебо состояло из микрокристаллической целлюлозы, рисового крахмала, вегетарианской капсулы (целлюлозы), стеарата магния и искусственных красителей (FD&C желтый №6 и FD&C синий №1).

Полифенольная характеристика продукта была выполнена в предыдущем исследовании Bresciani et al. с помощью УВЭЖХ-QqQ-MS, показывая в общей сложности 119 полифенольных соединений различных семейств фенолов, включая флавонолы, такие как кемпферол и кверцетин, антоцианы и флавоны [77]. Что касается биодоступности, знание биодоступного количества полифенолов более интересно, чем общее количество, поскольку во многих ситуациях наиболее распространенные полифенолы не являются наиболее активными для организма [78]. По этой причине Брешиани и соавт. оценили биодоступность продукта, обнаружив, что из 92 наблюдаемых молекул в плазме было идентифицировано только 20 циркулирующих метаболитов, все они представляют собой остатки сульфата, глюкуронида или глицина, появляющиеся в плазме в разное время в зависимости от места абсорбции в желудочно-кишечный тракт [79].

4.4. Переменные исследования

В ходе исследования все переменные анализировались четыре раза: в начале и в конце каждой фазы 16-недельного потребления продукта. Во время исследования испытуемым не разрешалось начинать или модифицировать какое-либо гормональное лечение, а также вносить какие-либо существенные изменения в диету или физическую активность, которые могли повлиять на переменные исследования.

Измерения образцов крови

Субъекты должны были прибыть после 12-часового периода голодания, разрешая прием воды только в предыдущие 3 часа. За 24 часа до экстракции запрещалось выполнять упражнения средней и высокой интенсивности. Образцы крови собирали из локтевой вены в пробирку для сбора крови k3E/K3EDTA (3 мл) и пробирки для сбора крови с гелем сыворотки и активатором свертывания (5 мл) *3. Перед отправкой в ​​лабораторию (Laboratorios MUNUERA SL Murcia, Испания) центрифугировали только пробирки для забора крови с гелем сыворотки и активатором свертывания (4500 об/мин, 5 мин, 4 ◦C). Биомаркеры, проанализированные для каждой переменной, включали: (а) Провоспалительные биомаркеры: OxLDL (нг/мл) по данным анализа ELISA в образцах сыворотки, TNF- (пг/мл) и sNTFR1 (нг/мл) по результатам конкурентного ELISA (марка диагностики DRG), СРБ (мг/л) методом мутнометрического иммуноанализа (PETIA) и гомоцистеин (пг/мл) на анализаторе BN ProSpec® (в соответствии с протоколом, представленным в наборе Siemens N Latex HCYOPAX 03); (b) витамины: витамин Е (мкг/мл) по данным ВЭЖХ с хроматографом JASCO (PU-980 IntelligentPLC-Plus) и колонкой Betasil-C18 (размер частиц 5 мкм, 250 × 4,6 мм), соединенной с флуоресцентной колонкой JASCO. детектор (FP-920 Intelligent Fluorescense Detector) и витамин B12 (пг/мл) методом хемилюминесценции с коммерческими иммуноанализами с использованием автоматизированного оборудования Centaur XPSiemens Diagnostics (Siemens Healthcare SA); (в) катехоламины: кортизол (мкг/л) с использованием метода хеминесцентного анализа с иммуноанализом Immulite 2000 (DPC, Gwynedd, RU) и норадреналин (пг/мл), адреналин (пг/мл) и дофамин (пг/мл) с помощью ВЭЖХ с потоком 0,5 мл/мин, Тº 35 ◦С, чувствительность 20, потенциал 0,7, подвижная фаза ацетонитрил–вода, обращенная фаза С18 с использованием n электрохимического детектора; г — гормоны щитовидной железы: Т3 (мкг/л), Т4 (мкг/л) и ТТГ (мЕд/л) на автоматизированном оборудовании CentaurXP Siemens Diagnostics (Siemens Healthcare SA); (e) иммунный статус: IgA (мг/л) с использованием метода турбидиметрии с тестом Monolab. В качестве реагентов использовали Трис-буфер (20 ммоль/л), ПЭГ 8000 и pH 8,3 в качестве разбавителя и козью сыворотку, античеловеческий IgA и pH 7,5 в качестве антитела.

4.5. Статистический анализ

Непрерывные переменные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD) на исходном уровне и в их эволюции с применением теста Колмогорова-Смирнова для проверки нормального распределения дискретных данных. Анализ проводился для всех субъектов, участвовавших в исследовании, в период потребления как продукта, так и плацебо. Для количественных переменных сравнение t-критерия Стьюдента было проведено между двумя ветвями исследования. Чтобы проанализировать различия между группами (EXT и PLA) в эволюции различных переменных, был проведен анализ дисперсии повторных измерений со временем как внутрисубъектным фактором. Таким образом, были установлены различия для каждой анализируемой переменной с учетом этих факторов. Для апостериорного анализа был проведен тест Бонферрони. Значимые различия сравнивались (с возможностью допущения равенства дисперсии или нет). В наборе статистических тестов был выбран уровень значимости 0,05. Статистический анализ проводили с помощью программного обеспечения SPSS 24 (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс, США).

5. Выводы

Наше исследование показало, что постоянное потребление полифенольного экстракта на основе ягод, фруктов и овощей здоровым населением, которое не употребляет рекомендуемое количество фруктов и овощей в день, улучшает окислительный статус и воспаление за счет улучшения нескольких биомаркеров крови, особенно OxLDL, CRP и HDL-холестерин, а также улучшают значения катехоламинов, особенно дофамина.

Вклад авторов: приобретение финансирования, MPZ и JM; расследование, Р.А. и Дж.М.; методология, RA, J.A.C., RX-M., BC, DV, MPZ и JM; администрирование проекта, JM; надзор, Дж. М.; проверка, JM; написание — рецензирование и редактирование, Р.А., Дж.А.К. и Дж.М. Все авторы прочитали и согласились с опубликованной версией рукописи.
Финансирование: это исследование финансировалось компанией Juice Plus. Компания никогда не участвовала в разработке или управлении полученными данными.
Заявление Институционального наблюдательного совета. Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями Хельсинкской декларации, одобренной Комитетом по этике Католического университета Сан-Антонио в Мурсии (UCAM) (дата: 24 ноября 2017 г.; код: CE111702).
Заявление об информированном согласии: Информированное согласие было получено от всех субъектов, участвовавших в исследовании.

Заявление о доступности данных: Не требуется.
Благодарности: Авторы благодарят испытуемых за участие в исследовании, а также компанию JuicePlus за поддержку и продвижение исследования.
Конфликт интересов: Авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов в отношении настоящей рукописи.
Наличие образца: не применимо.

использованная литература

1. Ауне, Д.; Джованнуччи, Э.; Боффетта, П.; Фаднес, LT; Кеум, Н .; Норат, Т .; Гринвуд, округ Колумбия; Риболи, Э.; Ваттен, LJ; Тонстад, С. Потребление фруктов и овощей и риск сердечно-сосудистых заболеваний, общего рака и смертности от всех причин - систематический обзор и метаанализ доза-реакция проспективных исследований. Междунар. Дж. Эпидемиол. 2017, 46, 1029–1056. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
2. Славин Ю.Л.; Ллойд, Б. Польза для здоровья фруктов и овощей. Доп. Нутр. 2012, 3, 506–516. [Перекрестная ссылка]
3. Трессерра-Римбау, А.; Римм, Э.Б.; Медина-Ремон, А.; Мартинес-Гонсалес, Массачусетс; Лопес-Сабатер, MC; Ковас, Мичиган; Корелла, Д.; Салас-Сальвадо, Х.; Гомес-Грация, Э.; Лапетра, Дж.; и другие. Потребление полифенолов и риск смертности: повторный анализ исследования PREDIMED. БМС Мед. 2014, 12, 77. [Перекрестная ссылка]
4. Трессерра-Римбау, А.; Римм, Э.Б.; Медина-Ремон, А.; Мартинес-Гонсалес, Массачусетс; де ла Торре, Р.; Корелла, Д.; Салас-Сальвадо, Х.; Гомес-Грация, Э.; Лапетра, Дж.; Арос, Ф.; и другие. Обратная связь между обычным потреблением полифенолов и частотой сердечно-сосудистых событий в исследовании PREDIMED. Нутр. Метаб. Кардиовас. Дис. 2014, 24, 639–647. [Перекрестная ссылка]
5. Бломхофф Р.; Андерсен, Л.Ф.; Иверсен, ПО; Йоханссон, Л.; Smeland, S. Kostråd для å fremme folkehelsen og forebygge kroniske syk dommer. Методол. Витенск. kunnskapsgrunnlag 2011. Доступно в Интернете: https://www.helsedirektoratet.no/rapporter/kostrad for-a-fremme-folkehelsen-og-forebygge-kroniske-sykdommer-metodologi-og-vitenskapelig-kunnskapsgrunnlag/Kostr процент C3 процент A5d процент 2{{52 }}для процентов 20 процентов C3 процентов A5 процентов 20fremme процентов 20folkehelsen процентов 20og процентов 20forebygge процентов 20kroniske процентов 20sykdommer процентов 20 процентов E2 процентов 80 процентов 93 процентов 2 0methodologi процентов 20og процентов 20vitenskapelig процентов 20kunnskapsgrunnlag.pdf/_ /attachment/inline/2a6293e0-169e-41bd-a872-f3952dbb22c2:0d09926111d614e6059e804b7f9b21c17bd0c1cd/Kostr процентов C3 процентов A5d процентов 20for процентов 20 процентов C2 процентовen процентов A5 процентов 20fogmeels forebygge процентов 20kroniske процентов 20sykdommer процентов 20 процентов E2 процентов 80 процентов 93 процентов 20methodologi процентов 20og процентов 20vitenskapelig процентов 20kunnskapsgrunnlag.pdf (по состоянию на 11 января 2021).
6. Бентон, Д.; Янг, Х.А. Роль фруктовых соков в достижении рекомендуемого 5-суточного потребления фруктов и овощей. Нутр. 2019, 77, 829–843. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
7. Ли, Ю.; Чжан, Д.; Паган, Дж. А. Социальные нормы и потребление фруктов и овощей в районах Нью-Йорка. J. Городское здоровье, 2016 г., 93, 244–255. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
8. Сачдева В.; Рой, А .; Бхарадваджа, Н. Текущие перспективы нутрицевтиков: обзор. Курс. фарм. Биотехнолог. 2020, 21, 884–896. [Перекрестная ссылка]
9. Роман, ГК; Джексон, RE; Гадхия, Р.; Роман, А.Н.; Рейс, Дж. Средиземноморская диета: роль длинноцепочечных ω-3 жирных кислот в рыбе; полифенолы во фруктах, овощах, злаках, кофе, чае, какао и вине; пробиотики и витамины в профилактике инсульта, возрастного снижения когнитивных функций и болезни Альцгеймера. Преподобный Нейрол. 2019, 175, 724–741. [Перекрестная ссылка]
10. Ди Лоренцо, К.; Коломбо, Ф.; Бьелла, С.; Стокли, К.; Рестани, П. Полифенолы и здоровье человека: роль биодоступности. Питательные вещества 2021, 13, 273. [CrossRef]
11. Манах, К.; Уильямсон, Г.; Моран, К.; Скальберт, А .; Ремези, К. Биодоступность и биоэффективность полифенолов у человека. I. Обзор 97 исследований биодоступности. Являюсь. Дж. Клин. Нутр. 2005, 81, 230С–242С. [Перекрестная ссылка]
12. Киньонес, М.; Мигель, М .; Александр, А. Полифенолы, встречающиеся в природе соединения, оказывающие благотворное влияние на сердечно-сосудистые заболевания. Нутр. Хосп. 2012, 27, 76–89. [Перекрестная ссылка]
13. Ли, С.; Тан, HY; Ван, Н.; Ченг, Ф .; Хонг, М .; Фэн Ю. Потенциал и механизм действия полифенолов при лечении заболеваний печени. Оксид. Мед. Клетка. Лонгев. 2018, 2018, 8394818. [Перекрестная ссылка]
14. Ли, А.; Ли, С .; Чжан, Ю .; Сюй, X .; Чен, Ю .; Ли, Х. Ресурсы и биологическая активность природных полифенолов. Питательные вещества 2014, 6, 6020–6047. [Перекрестная ссылка]
15. Группа экспертов EFSA по пищевым добавкам и источникам питательных веществ, добавляемым в пищу (ANS). Оценка риска для женщин пери- и постменопаузального возраста, принимающих пищевые добавки, содержащие изолированные изофлавоны. EFSA J. 2015, 13, 4246. [CrossRef]
16. Райс-Эванс, Калифорния; Миллер, Н. Дж. Антиоксидантная активность флавоноидов как биологически активных компонентов пищи. Биохим. соц. Транс. 1996, 24, 790–795. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
17. Коркина Л.Г.; Афанасьев Е.Б. Антиоксидантные и хелатирующие свойства флавоноидов. Доп. Фармакол. 1996, 38, 151–163.
18. Дорджгочу, Т.; Гао, Ю.-Т.; Чоу, В.-Х.; Шу, Х .; Ян, Г .; Кай, В.; Ротман, Н.; Кай, Х .; Ли, Х .; Дэн, X .; и другие. Основной метаболит F2-изопростана в моче может быть более чувствительным биомаркером окислительного стресса, чем сам изопростан. Являюсь. Дж. Клин. Нутр. 2012, 96, 405–414. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
19. Сантилли, Ф.; Д'Ардес, Д.; Дави Г. Окислительный стресс при хронических сосудистых заболеваниях: от предсказания к профилактике. Васкул. Фармакол. 2015, 74, 23–37. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
20. McGuire, S. Министерство сельского хозяйства США и Министерство здравоохранения и социальных служб США, рекомендации по питанию для американцев, 2010 г. Вашингтон, округ Колумбия: типография правительства США, январь 2011 г. Adv. Нутр. 2011, 2, 293–294. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

21. Барони, Л.; Бонетто, К.; Риццо, Г.; Бертола, К.; Каберлотто, Л.; Баззерла, Г. Связь между когнитивными нарушениями и статусом витамина B12, фолиевой кислоты и гомоцистеина у пожилых людей: ретроспективное исследование. Дж. Болезнь Альцгеймера. Дис. 2019, 70, 443–453. [Перекрестная ссылка]
22. Самман, С.; Сивараджа, Г.; Человек, JC; Ахмад, З.И.; Петоч, П.; Caterson, ID Смешанный фруктово-овощной концентрат повышает уровень антиоксидантных витаминов и фолиевой кислоты в плазме и снижает уровень гомоцистеина в плазме у мужчин. Дж. Нутр. 2003, 133, 2188–2193. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
23. Мэн, Х.; Ли, Ю .; Чжан, В .; Чжао, Ю .; Ниу, X .; Го, Дж. Взаимосвязь между когнитивными нарушениями и гомоцистеином у населения с дефицитом B12 и фолиевой кислоты в Китае: поперечное исследование. Медицина 2019, 98, e17970. [Перекрестная ссылка]
24. Лин, Ф.; Пей, Л.; Чжан, В.; Хан, В .; Цзян, С.; Лин, Ю.; Донг, Б.; Цуй, Л.; Li, M. Ox-LDL индуцирует апоптоз эндотелиальных клеток и миграцию макрофагов, регулируя фосфорилирование кавеолина -1. Дж. Селл. Физиол. 2018, 233, 6683–6692. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
25. Колдер, ПК; Альберс, Р.; Антуан, Ж.-М.; Блюм, С .; Бурде-Сикар, Р.; Фернс, Джорджия; Фолкертс, Г.; Фридманн, PS; Фрост, Г.С.; Guarner, F. Процессы воспалительных заболеваний и их взаимодействие с питанием. бр. Дж. Нутр. 2009, 101, 1–45. [Перекрестная ссылка]
26. Карлсен А.; Паур, И.; Бён, СК; Сахи, А.К.; Борге, Г.И.; Серафини, М .; Эрлунд, И.; Лааке, П.; Тонстад, С .; Бломхофф, Р. Черничный сок модулирует концентрацию в плазме маркеров воспаления, связанных с NF-κB, у субъектов с повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний. Евро. Дж. Нутр. 2010, 49, 345–355. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
27. Гонсалвеш, CFL; Сантос, MC; Джинабреда, MG; Фортунато, RS; Карвалью, DPd; Фрейтас Феррейра, AC Флавоноид рутин увеличивает поглощение йодида щитовидной железой у крыс. PLoS ONE 2013, 8, e73908. [Перекрестная ссылка]
28. Манчини, А.; Марторана, GE; Магини, М .; Феста, Р .; Раймондо, С .; Сильвестрини, А .; Николотти, Н.; Морденте, А .; Меле, MC; Миджиано, ГТР; и другие. Окислительный стресс и метаболический синдром: влияние диеты, обогащенной природными антиоксидантами, на резистентность к инсулину. клин. Нутр. ЭСПЕН 2015, 10, e52–e60. [Перекрестная ссылка]
29. Джулиани, К.; Ногучи, Ю.; Хари, Н.; Наполитано, Г.; Татоне, Д.; Буччи, И.; Пиантелли, М .; Монако, Ф.; Кон, Л.Д. Флавоноид кверцетин регулирует рост и экспрессию генов в клетках щитовидной железы крысы FRTL-5. Эндокринология 2008, 149, 84–92. [Перекрестная ссылка]
30. Канадзава, К.; Сакакибара, Х. Высокое содержание дофамина, сильного антиоксиданта, в банане Кавендиш. Дж. Агрик. Пищевая хим. 2000, 48, 844–848. [Перекрестная ссылка]
31. Пармар, Х.С.; Кар, А. Защитная роль экстрактов кожуры Mangifera indica, Cucumis melo и Citrullus vulgaris при химически индуцированном гипотиреозе. хим. биол. Взаимодействовать. 2009, 177, 254–258. [Перекрестная ссылка]
32. Рахман, М.М.; Итиянаги, Т .; Комияма, Т .; Сато, С .; Кониши, Т. Влияние антоцианов на вызванный психологическим стрессом окислительный стресс и статус нейротрансмиттеров. Дж. Агрик. Пищевая хим. 2008, 56, 7545–7550. [Перекрестная ссылка]
33. Грауманн Р.; Париж, И.; Мартинес-Альварадо, П.; Романк, П.; Перес-Пастене, К.; Карденас, СП; Марин, П .; Диас-Грез, Ф.; Кавьедес, Р.; Кавьедес П. Окисление дофамина до аминохрома как механизм нейродегенерации дофаминергических систем при болезни Паркинсона. Возможная нейропротекторная роль DT-диафоразы. пол. Дж. Фармакол. 2002, 54, 573–580. [В паблике]
34. Цзян, X.; Хуанг, Дж.; Песня, Д.; Дэн Р.; Вэй, Дж .; Чжан, З. Увеличение потребления фруктов и овощей связано со снижением риска когнитивных нарушений и деменции: метаанализ. Фронт. Стареющие нейроски. 2017, 9, 18. [CrossRef] [PubMed]
35. Бораи, И. Х.; Эзз, МК; Ризк, МЗ; Али, ХФ; Эль-Щербини, М.; Матлуб, А.А.; Фуад, Г.И. Терапевтическое воздействие полифенолов виноградных листьев на некоторые биохимические и неврологические маркеры болезни Альцгеймера, вызванной AlCl(3). Биомед. Фармацевт. 2017, 93, 837–851. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
36. Цзэн, В.; Ли, Ф .; Сян, Т .; Ван, В .; Ма, С .; Ян, К.; Чен, Х .; Xiang, H. Влияние пищевых групп на общий гомоцистеин в плазме для конкретных генотипов MTHFR C677T у населения Китая. Мол. Нутр. Еда Рез. 2017, 61. [CrossRef] [PubMed]
37. Гангули П.; Алам С.Ф. Роль гомоцистеина в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Нутр. Дж. 2015, 14, 6. [CrossRef]
38. Упадья, Х.; Прабху, С .; Прасад, А .; Субраманиан, Д.; Гупта, С.; Goel, A. Рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, многоцентровое клиническое исследование для оценки эффективности и безопасности экстракта Emblica Officinalis у пациентов с дислипидемией. Дополнение БМК. Альтерн. Мед. 2019, 19, 27. [CrossRef] [PubMed]
39. Булотта, С.; Челано, М .; Лепор, С.М.; Монтальчини, Т .; Пуджиа, А .; Руссо, Д. Благотворное влияние фенольных компонентов оливкового масла олеуропеина и гидрокситирозола: внимание на защиту от сердечно-сосудистых и метаболических заболеваний. Дж. Пер. Мед. 2014, 12, 219. [Перекрестная ссылка]
40. Осакабе, Н.; Баба, С .; Ясуда, А .; Ивамото, Т .; Камияма, М .; Такидзава, Т .; Итакура, Х .; Кондо, К. Ежедневное потребление какао снижает восприимчивость липопротеинов низкой плотности к окислению, что было продемонстрировано на здоровых людях-добровольцах. Свободный Радик. рез. 2001, 34, 93–99. [CrossRef] 41. Мартини, Д.; Росси, С .; Бьясини, Б.; Заварони, И.; Бедоньи, Г.; Муски, М.; Прунети, К.; Пассери, Г.; Вентура, М.; Ди Нуццо, С.; и другие. Заявленные эффекты, переменные исхода и методы измерения заявлений о пользе для здоровья, предложенные в соответствии с Регламентом Европейского сообщества 1924/2006 в рамках защиты от окислительного повреждения и здоровья сердечно-сосудистой системы. Нутр. Метаб. Кардиовас. Дис. 2017, 27, 473–503. [Перекрестная ссылка] [PubMed]
42. Терк, Д.; Брессон, Ж.-Л.; Берлингейм, Б.; Дин, Т .; Фэйрвезер-Тейт, С.; Хейнонен, М .; Хирш-Эрнст, К.И.; Мангельсдорф, И.; Макардл, Х.Дж.; Наска, А .; и другие. Руководство по научным требованиям к заявлениям о пользе для здоровья, связанным с антиоксидантами, окислительным повреждением и здоровьем сердечно-сосудистой системы: (редакция 1). EFSA J. Eur. Пищевая безопасность Аут. 2018, 16, e05136. [Перекрестная ссылка]
43. Двиведи, А.; Ангард, EE; Носитель, MJ Адгезия моноцитов, опосредованная окисленным ЛПНП, к эндотелиальным клеткам не включает NFkappaB. Биохим. Биофиз. рез. коммун. 2001, 284, 239–244. [Перекрестная ссылка]
44. Куинн, МТ; Партасарати, С.; Фонг, LG; Стейнберг, Д. Окислительно модифицированные липопротеины низкой плотности: потенциальная роль в рекрутировании и удержании моноцитов/макрофагов во время атерогенеза. проц. Натл. акад. науч. США 1987, 84, 2995–2998. [Перекрестная ссылка] [PubMed]