Влияние времени контрлатеральной нефрэктомии и ишемических состояний на фиброз почек после одностороннего ишемически-реперфузионного повреждения почки Ⅱ
Oct 27, 2023
Полученные результаты
Протокол 1: влияние интервала между контралатеральной нефрэктомией и ИРИ на переход ОПП в ХБП. Выживаемость снижалась с увеличением интервала между контралатеральной нефрэктомией и ИРИ.
Как упоминалось в эксперименте 1, продолжительность ишемии была зафиксирована на уровне 24 минут при центральной температуре тела 37°C в uIRI. Мы наблюдаем влияние времени контралатеральной нефрэктомии после uIRI на выживаемость мышей. Данные показали, что в группе на 7-й день (контралатеральная неповрежденная почка была удалена через 7 дней после uIRI) все восемь мышей выжили. В группе 10-го дня одна мышь умерла на следующий день после контралатеральной нефрэктомии с выживаемостью 87,5%. В группе 14-го дня одна мышь умерла в первый день после контралатеральной нефрэктомии, а две мыши умерли через два дня после контралатеральной нефрэктомии с выживаемостью 62,5%. Эти результаты показали, что выживаемость мышей постепенно снижалась по мере расширения контрлатеральной нефрэктомии, когда два других влияющих фактора были зафиксированы (рис. 2 (А)).
НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, ЧТОБЫ ПОЛУЧИТЬ ТРАВЯНОЙ СОСТАВ ЦИСТАНШЕ ДЛЯ ПОЧЕК
Функция почек ухудшалась по мере увеличения интервала между контрлатеральной нефрэктомией и ИРИ.
По сравнению с контрольной группой SCr и BUN были значительно выше у всех мышей после контралатеральной нефрэктомии (p < {{0}},05), что указывает на то, что все они страдали от повреждения почек. Более того, уровни SCr и АМК увеличивались с увеличением интервала между контрлатеральной нефрэктомией и uIRI (p <0,05) (рис. 2(B,C))
Гистологическое повреждение почек ухудшалось с увеличением интервала между контралатеральной нефрэктомией и ИРИ.
Окрашивание HE продемонстрировало, что ткань почек в группе имитации была структурно нормальной через 8 недель после uIRI. Во всех группах ИРИ в почках было выявлено несколько патологических изменений после ОПП (рис. 3(А)), включая различную степень вакуольной дегенерации эпителиальных клеток канальцев, отслойку щеточной каймы, очаговый дезинтеграционный некроз, расширение просвета некоторых канальцев и почечную недостаточность. отек тубулярных эпителиальных клеток различной морфологии. Кроме того, некоторые клубочки были сморщены и склерозированы, с гиперплазией мезангиальных клеток и расширенной капсулой Боумена. Воспалительная клеточная инфильтрация также наблюдалась в интерстиции почек. Оценки патологического повреждения канальцев и клубочков поврежденной почки были выше, чем при имитации (p < 0.05), что указывает на то, что uIRI с контралатеральной нефрэктомией значительно повредил почку. Оценка патологического повреждения почек увеличивалась по мере продолжения контралатеральной нефрэктомии (p <0,05) (рис. 3(B,C)). Эти данные указывают на то, что патологическое повреждение почек постепенно увеличивается по мере расширения контрлатеральной нефрэктомии после УИРИ.
Рисунок 2. Влияние временных интервалов между контралатеральной нефрэктомией и односторонним ишемически-реперфузионным повреждением (uIRI) на выживаемость и функцию почек. Левую почку подвергали ИРИ на 0 день, а резекцию правой почки проводили в разные моменты времени (день 7, день 10 и день 14) с продолжительностью ишемии, установленной на уровне 24 минут с основная температура тела зафиксирована на уровне 37°С при ишемии почки. (А): Выживаемость мышей в каждой группе оценивали и представляли в процентах. (B и C): Функцию почек оценивали по креатинину сыворотки (SCr) и азоту мочевины крови (АМК). n=5–8/группа. р <0,05.
Рисунок 3. Влияние временных интервалов между контралатеральной нефрэктомией и односторонним ишемически-реперфузионным повреждением (uIRI) на гистологическое повреждение почки. Левую почку подвергали ИРИ на день 0, а резекцию правой почки проводили в разные моменты времени (день 7, день 10 и день 14) с продолжительностью ишемии, зафиксированной на уровне 24 минут с основная температура тела фиксировалась на уровне 37°С при ишемии почки. Гистологическое повреждение почек определяли путем окрашивания гематоксилин-эозином (HE). (A): Репрезентативное окрашивание HE поврежденной почки, которое показало типичные гистопатологические особенности патологических изменений после ОПП, включая различную степень вакуольной дегенерации эпителиальных клеток канальцев, отслойку щеточной каймы, очаговый дезинтеграционный некроз, расширение просвета некоторых канальцев (#). ), отек эпителиальных клеток почечных канальцев различной морфологии и инфильтрация воспалительными клетками (%). Некоторые клубочки были морщинистыми и склерозированными, с гиперплазией мезангиальных клеток (&) и расширенной капсулой Боумена (увеличение 400). (B): Полуколичественная оценка повреждения канальцев. (C): Полуколичественная оценка повреждения клубочков. n=5–8/группа. р <0,05.
Фиброз почек ухудшался по мере увеличения интервала между контралатеральной нефрэктомией и массой почки.
Трансформация ОПП в ХБП обычно характеризуется фиброзом почек [19], а снижение массы почек является макроскопическим индикатором фиброза почек [2]. Поэтому мы измерили вес почек (вес почек, калиброванный по массе тела), чтобы предварительно изучить влияние временных интервалов между ИРИ и отсроченной контрлатеральной нефрэктомией на переход ОПП в ХБП. По сравнению с группой имитации, во всех группах uIRI наблюдалось значительное снижение веса почек (p < 0,05), что указывает на то, что у всех мышей в группах uIRI наблюдался фиброз почек. Разница в весе почек значительно изменилась, когда разница во временном интервале между контралатеральной нефрэктомией и uIRI составляла 3 дня, а вес почки постепенно уменьшался по мере увеличения времени интервала (рис. 4 (A)).
Окраска трихромом по Массону.
Трихромное окрашивание по Массону проводили для дальнейшего наблюдения влияния временных интервалов между контралатеральной нефрэктомией и uIRI на фиброз почек. В группе имитации не наблюдалось значительного интерстициального фиброза почек, тогда как фиброзные изменения в почках разной степени во всех группах uIRI наблюдались через 8 недель после uIRI (рис. 4 (B)). Полуколичественный анализ фиброзной площади показал, что фиброзная площадь почки в группах uIRI была значительно увеличена по сравнению с таковой в группе плацебо (p < 0.05), что указывает на то, что Модель перехода ОПП ХБП была успешно реализована. Более того, по мере отсрочки контралатеральной нефрэктомии фиброз почки становился все более выраженным (p < 0,05), что указывает на то, что степень фиброза почки существенно менялась, когда интервал между контралатеральной нефрэктомией и УИРИ составлял 3 дня. С увеличением временного интервала между контралатеральной нефрэктомией и ИРИ степень фиброза почки еще больше усугублялась (рис. 4(В)).
Рисунок 4. Влияние временных интервалов между контралатеральной нефрэктомией и односторонним ишемически-реперфузионным повреждением (uIRI) на фиброз почек. Левую почку подвергали ИРИ на 0 день, а резекцию правой почки проводили в разные моменты времени (день 7, день 1 0 и день 14) с продолжительностью ишемии, установленной на уровне 24 минут с основная температура тела зафиксирована на уровне 37°С при ишемии почки. Фиброз почек оценивали по массе почек, окраске трихромом по Массону и экспрессии фибронектина (FN), коллагена I (COL-I) и а-актина гладких мышц (а-SMA). (A): Вес почек к весу тела. (B): Репрезентативное окрашивание трихромом Массона поврежденной почки, которое показало типичные фиброзные изменения (%) (увеличение 200). (C): Полуколичественный анализ фиброзной области, обнаруженный с помощью трихромного окрашивания по Массону. (D): Количественный анализ RT-PCR на экспрессию FN в почках. (E): Количественный анализ RT-PCR на экспрессию COL-I в почках. (F): Репрезентативные изображения вестерн-блоттинга для FN, COL-I и a-SMA. (G): Гистограмма, показывающая экспрессию белка FN, нормализованную b-актином. (H): Гистограмма, показывающая экспрессию белка COL-I, нормализованную b-актином. I: Гистограмма, показывающая экспрессию белка a-SMA, нормализованную b-актином. n=5–8/группа. р <0,05.
Накопление внеклеточного матрикса (ECM).
Интерстициальный фиброз почек характеризуется отложением ЕСМ [2], таких как FN и COL-I, в интерстициальной области почки. Вестерн-блоттинг и ОТ-ПЦР-анализ показали, что экспрессия FN и COL-I в почках была значительно увеличена во всех группах uIRI по сравнению с группой плацебо (p < 0.05), что указывает на что все почки претерпели фиброзные изменения. Уровни экспрессии FN и COL-I в почках были выше при отсрочке контралатеральной нефрэктомии (p <0,05) (рис. 4(D-H)).
Миофибробласты в почках.
Фиброз почек характеризуется накоплением миофибробластов и последующим образованием ЕСМ [20]. a-SMA использовали для определения количества миофибробластов через 8 недель после ИРИ. Вестерн-блот-анализ показал, что экспрессия a-SMA в тканях почек значительно увеличилась во всех группах uIRI по сравнению с группой плацебо (p < 0,05), что указывает на то, что миофибробластов было явно больше в почках всех травмированных. мыши. Экспрессия a-SMA была выше при отсрочке резекции контралатеральной почки (p <0,05) (рис. 4(F,I)). Эти результаты показали, что количество миофибробластов в ткани почки после uIRI значительно изменилось за 3 дня между uIRI и контрлатеральной нефрэктомией и что количество миофибробластов постепенно увеличивалось с более длительными интервалами.
Протокол 2: влияние температуры тела во время ишемии на переход ОПП-ХБП
Выживаемость снижалась с увеличением внутренней температуры тела во время ишемии.
Как упоминалось в эксперименте 2, чтобы исследовать влияние внутренней температуры тела во время ишемии на переход ОПП-ХБП, продолжительность ишемии была зафиксирована на уровне 24 минут, а контралатеральная неповрежденная почка была удалена через 14 дней после uIRI. Данные показали, что в группе 36°С (центральная температура тела мышей во время ишемии контролировалась на уровне 36°С) одна мышь умерла в первый день после контралатеральной нефрэктомии, а выживаемость составила 87,5%. В группе с 36,5 С две мыши умерли в первые 2 дня после контралатеральной нефрэктомии с выживаемостью 75%. По сравнению с группой 36,5 С, на второй день после контрлатеральной нефрэктомии погибла еще одна мышь с выживаемостью 62,5% в группе 37 С. В группе 37,5 С, за исключением трех мышей, погибших в первые 2 дня после контралатеральной нефрэктомии, одна мышь умерла через 3 дня после контралатеральной нефрэктомии с выживаемостью 50%. В дополнение к тому, что произошло в группе 37,5 С, одна мышь умерла через 5 дней после контрлатеральной нефрэктомии в группе 38 С, а выживаемость составила 37,5%. Эти результаты показали, что выживаемость мышей постепенно снижается с увеличением внутренней температуры тела во время ишемии (рис. 5 (А)).
Функция почек ухудшалась с повышением внутренней температуры тела во время ишемии.
По сравнению с группой имитации, uIRI приводил к значительному увеличению SCr и АМК во всех группах uIRI (p < {{0}}.05), что позволяет предположить, что у всех мышей в группах uIRI развилось Почечная недостаточность после контралатеральной нефрэктомии. Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что SCr и АМК мышей увеличивались с увеличением ишемической температуры тела на 0,5 C, но статистической разницы не было (p > 0,05). , что позволяет предположить менее выраженные изменения функции почек с разницей центральной температуры в 0,5°С при ишемии. Однако SCr и АМК значительно увеличивались, когда внутренняя температура тела увеличивалась на 1 °С или выше во время ишемии (p <0,05), что позволяет предположить, что функция почек значительно изменилась при разнице внутренней температуры тела на 1 °С во время ишемии. Функция почек ухудшалась более значительно с увеличением ишемической температуры тела (рис. 5(B,C)).
Повреждение ткани почки усугубляется с повышением внутренней температуры тела во время ишемии.
По данным окрашивания HE структура ткани почек мышей в контрольной группе была нормальной. Патологические изменения, вызванные ИРИ, наблюдались во всех группах пользователей, такие как различная степень вакуолярной дегенерации эпителиальных клеток канальцев, отслойка щеточной каймы, некроз очаговой дезинтеграции, расширение просвета некоторых канальцев и отек эпителиальных клеток почечных канальцев с различной морфологией, а также в виде сморщенных и склеротических клубочков, гиперплазии мезангиальных клеток и расширенной капсулы Боумена, инфильтрации воспалительных клеток в интерстиции почек (рис. 6 (А)).
Оценка патологического повреждения почечных канальцев и клубочков показала, что по сравнению с группой имитации патологическое повреждение почек во всех группах uIRI было значительно более тяжелым (p < {{0}}.05. ), что позволяет предположить, что очевидное патологическое поражение почек появилось во всех группах uIRI и что модель ОПП-ХБП была успешно разработана. Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что наблюдалось увеличение показателей патологического повреждения почек с повышением внутренней температуры тела на 0,5°С во время ишемии, но это не имело статистической значимости (p > 0,05), в то время как почки патологическое повреждение достоверно возрастало при повышении внутренней температуры тела на 1°С и выше при ишемии (р < 0,05) (рис. 6(Б,В)). Эти результаты показали, что гистопатологическое повреждение почки значительно изменилось при разнице внутренней температуры тела в 1°С во время ишемии и постепенно увеличивалось с увеличением внутренней температуры тела во время ишемии.
Фиброз почек ухудшается с увеличением внутренней температуры тела во время ишемии. Вес почки.
По сравнению с группой имитации, uIRI вызывал значительное снижение веса почек во всех группах uIRI, а у мышей с разной ишемической температурой тела развивался фиброз почек разной степени. Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что снижение массы почек не имело существенной разницы, когда внутренняя температура тела увеличивалась на {{0}},5 C во время ишемии (p > 0).{{ 7}}5), что позволяет предположить, что разница в 0,5°С внутренней температуры тела во время ишемии не оказывает существенного влияния на изменение массы почки. Когда внутренняя температура тела в период ишемии имела разницу в 1°С, масса почки значительно менялась (p <0,05) и постепенно снижалась по мере повышения ишемической температуры тела (рис. 7(А)).
Рисунок 7. Влияние температуры тела во время ишемии на фиброз почек у мышей с uIRI и отсроченной контралатеральной нефрэктомией. Левую почку подвергали ИРИ в день 0, а резекцию правой почки проводили при различных температурах тела (36°С, 36,5°С, 37°С, 37,5°С и 38°С) с временем ишемии левой почки. почку фиксировали на 24 минуте, а правую почку удаляли через 14 дней после ИРИ левой почки. Фиброз почек оценивали по массе почек, окраске трихромом по Массону и экспрессии фибронектина (FN), коллагена I (COL-I) и актина гладких мышц (a-SMA). (A): Вес почек к весу тела. (B): Репрезентативное окрашивание трихромом Массона поврежденной почки, которое показало типичные фиброзные изменения (%) (увеличение 200). (C): Полуколичественный анализ фиброзной области, обнаруженный с помощью трихромного окрашивания по Массону. (D): Количественный анализ RT-PCR на экспрессию FN в почках. (E): Количественный анализ RT-PCR на экспрессию COL-I в почках. (F): Репрезентативные изображения вестерн-блоттинга для FN, COL-I и a-SMA. (G): Гистограмма, показывающая экспрессию белка FN, нормализованную b-актином. (H): Гистограмма, показывающая экспрессию белка COL-I, нормализованную b-актином. (I): Гистограмма, показывающая экспрессию белка a-SMA, нормализованную b-актином. n=3–7/группа. р <0,05. НС: незначительно.
Окраска трихромом по Массону.
Через 8 недель после uIRI результаты окрашивания трихромом по Массону показали, что по сравнению с группой имитации площадь фиброза почечных тканей во всех группах uIRI была значительно увеличена (p < 0.05), что указывает на то, что фиброзный исход наблюдался во всех группах uIRI. Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что площадь фиброза почек увеличивалась, но без статистической значимости, когда внутренняя температура тела увеличивалась на 0,5 C во время ишемии (p > 0.{{10} }5), что позволяет предположить, что разница в 0,5°С в температуре тела во время ишемии не оказывает существенного влияния на фиброз почек. На каждое повышение внутренней температуры тела на 1 градус во время ишемии площадь интерстициального фиброза почек значительно увеличивалась (p < 0,05), что указывает на то, что повышение внутренней температуры тела на 1 градус во время ишемии оказывает значительное влияние на интерстициальный фиброз почек и фиброз почек. постепенно ухудшалось с увеличением внутренней температуры тела во время ишемии (рис. 7(B,C)).
ЕСМ в ткани почки. Данные показали, что по сравнению с группой плацебо экспрессия FN и COL-I в тканях почек во всех группах uIRI была значительно увеличена (p < 0.05), что согласовывалось с Результаты окраски по Массону. Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что экспрессия FN и COL-I в тканях почек увеличивалась на 0,5 C при повышении внутренней температуры тела во время ишемии, но статистически значимой разницы не было (p > {{8). }}.05), что указывает на то, что разница в температуре ядра тела на 0,5°С во время ишемии не оказывает существенного влияния на отложение внеклеточного матрикса, в то время как экспрессия FN и COL-I значительно увеличивается при увеличении температуры тела на 1°С. внутреннюю температуру тела при ишемии (р < 0,05), причем они имели более выраженное повышение с повышением температуры тела. В заключение отметим, что отложение ЕСМ или фиброз в тканях почек увеличивается с более высокой внутренней температурой тела во время ишемии (рис. 7 (D–H)).
Миофибробласты в ткани почек.
По сравнению с группой имитации, экспрессия a-SMA в почечной ткани во всех группах uIRI была значительно увеличена (p < 0.05), что позволяет предположить, что количество миофибробластов было значительно увеличено во всех группах uIRI. . Сравнение между двумя группами с соседними температурами показало, что экспрессия a-SMA в почках увеличивалась, когда внутренняя температура тела увеличивалась на 0,5 C во время ишемии, но существенной разницы не было (p > 0). .05), что позволяет предположить, что разница в 0,5°С ишемической температуры тела не оказывает существенного влияния на изменения миофибробластов почек. Более того, экспрессия a-SMA в тканях почек значительно увеличивалась при повышении ишемической температуры тела на 1°C, а увеличение экспрессии a-SMA было более значимым при повышении температуры тела (p < 0,05), что позволяет предположить, что миофибробласты значительно изменились при разница внутренней температуры тела при ишемии составляла 1°С и более. Наряду с повышением внутренней температуры тела при ишемии постепенно увеличивалось количество миофибробластов в тканях почек (рис. 7(F,I)).
Протокол 3: влияние продолжительности ишемии на переход ОПП-ХБП
Выживаемость снижалась по мере увеличения продолжительности ишемии. Как упоминалось в эксперименте 3, чтобы исследовать влияние продолжительности ишемии на переход ОПП-ХБП, ишемизированную температуру тела фиксировали на уровне 37°C во время uIRI, а контралатеральную почку удаляли 14 дней после uIRI. Результаты показали, что в группе 21 мин (продолжительность ишемии 21 мин) одна мышь умерла через 1 и 2 дня после удаления контралатеральной почки соответственно с выживаемостью 75%, а еще одна мышь умерла через 2 дня после контралатеральной нефрэктомии. в группе 24 мин с выживаемостью 62,5%. В группе 27-минут четыре мыши, две мыши, одна мышь и одна мышь умерли через 1 день, 3 дня, 5 дней и 7 дней соответственно после контралатеральной нефрэктомии, а выживаемость составила {{ 18}}%. Аналогично, пять мышей, две мыши и одна мышь умерли через 1 день, 2 дня и 3 дня после контралатеральной нефрэктомии в 30--минутной группе, а выживаемость составила 0%. Это указывало на то, что выживаемость снижалась по мере увеличения продолжительности ишемии, поскольку все мыши в группе 27 минут и группе 30- минут умерли через 7 дней и 3 дня соответственно после контралатеральной нефрэктомии (рис. 8 (A)).
Функция почек снижается с увеличением продолжительности ишемии.
Данные показали, что по сравнению с фиктивной группой как в группе 21 мин, так и в группе 24 мин наблюдалось значительное увеличение SCr и АМК (p < 0.05), что указывает на снижение функции почек. По сравнению с группой 21 мин, в группе 24 мин наблюдалось более выраженное увеличение SCr и АМК (p < 0,05), что указывало на то, что функция почек значительно изменилась с 3-минутной разницей в продолжительности ишемии и более очевидным снижением функции почек. можно было наблюдать при более длительной ишемии (рис. 8(B,C)).
Рисунок 8. Влияние продолжительности ишемии на выживаемость и функцию почек у мышей с uIRI и отсроченной контралатеральной нефрэктомией. Левую почку подвергали ИРИ на день 0, а резекцию правой почки проводили при различной продолжительности ишемии (21 минута, 24 минута, 27 минут и 30 минута) с фиксированной внутренней температурой тела. при 37°С во время ишемии почки, а правую почку удалили через 14 дней после ИРИ левой почки. (А): Выживаемость мышей в каждой группе оценивали и представляли в процентах. (B и C): Функцию почек оценивали по креатинину сыворотки (SCr) и азоту мочевины крови (АМК). n=5–6/группа. р <0,05.
Гистопатологическое повреждение почек ухудшается с увеличением продолжительности ишемии
По данным окрашивания HE структура ткани почек мышей в контрольной группе была нормальной. По сравнению с группой имитации, в группе 21 мин и в группе 24 мин наблюдались патологические изменения разной степени, включая вакуольную дегенерацию эпителиальных клеток канальцев, отслоение щеточной каймы, очаговый некроз дезинтеграции, расширение просвета некоторых канальцев, отек эпителиальных клеток почечных канальцев с различной морфологией. , сморщенные и склеротические клубочки, гиперплазия мезангиальных клеток и расширенная капсула Боумена, а также инфильтрация воспалительных клеток в интерстиции (рис. 9 (А)). Оценки патологического повреждения почечных канальцев и клубочков были значительно выше как в группах 21 мин, так и в группах 24 мин по сравнению с группой имитации (p < 0.05), что указывает на то, что значительное патологическое повреждение почек развилось у обе группы пользователей. Кроме того, в группе 24 мин наблюдались более высокие показатели патологического повреждения почек и более тяжелое патологическое повреждение по сравнению с группой 21 мин (p <0,05) (рис. 9(B,C)), что позволяет предположить, что патологическое повреждение почек имело значительные изменения при 3 минимальная разница в продолжительности ишемии. Чем больше длительность ишемии, тем тяжелее патологическое поражение почки.
Фиброз почек ухудшался при увеличении продолжительности ишемии. Вес почки.
По сравнению с фиктивной группой, как в 21-минутной, так и в 24-минутной группах наблюдалось значительное снижение массы почек (p < 0.05), а в 24-минутной группе наблюдалось более заметное снижение массы почек. по сравнению с группой 21 мин (p <0,05). Это показало, что 3-минутная разница в продолжительности ишемии привела к значительному изменению веса почки, и более очевидное снижение веса почки можно увидеть при большей продолжительности ишемии (рис. 10 (А)).
Окраска трихромом по Массону. Окрашивание трихромом по Массону и полуколичественный анализ фиброзной площади показали, что в группе имитации не было значительных интерстициальных фиброзных изменений, тогда как в интерстиции почек наблюдались различные степени фиброзных изменений как в 21-минутной, так и в 24-минутной группах (p < { {3}}.05). По сравнению с группой 21 мин, группа 24 мин имела более высокую степень фиброза почечной ткани (p <0,05), что указывает на то, что фиброз почек значительно изменяется при 3-минутной разнице в продолжительности ишемии и что более тяжелый фиброз почки становится более тяжелым при более длительной ишемии. продолжительность (рис. 10(B,C)).
ЕСМ в ткани почки. Вестерн-блоттинг и RT-PCR-анализ показали, что по сравнению с фиктивной группой экспрессия FN и COL-I значительно увеличилась как в 21-минутной, так и в 24-минутной группах (p < 0.05). , что указывает на то, что ECM, индуцированный IRI, значительно увеличился в группах uIRI, а почки подверглись значительному прогрессированию фиброза. По сравнению с группой 21 мин экспрессия FN и COL-I была более выражена в ткани почек в группе 24 мин (p < 0,05), что указывает на то, что отложение ЕСМ в тканях почек значительно изменилось с разницей в 3 мин. продолжительность ишемии и отложение внеклеточного матрикса увеличивались с увеличением продолжительности ишемии (рис. 10 (D-H)).
Миофибробласты в ткани почек. Вестерн-блот-анализ показал, что по сравнению с группой имитации экспрессия a-SMA почек в группах через 21 и 24 минуты значительно увеличилась (p < 0.05), что указывает на то, что миофибробласты наблюдалось значительное увеличение почек в группах uIRI и значительное прогрессирование фиброза. Экспрессия a-SMA значительно увеличивалась с увеличением продолжительности ишемии на 3 минуты (p <0,05), а при увеличении продолжительности ишемии обнаруживалось больше миофибробластов (рис. 10(F,I)).
Рисунок 9. Влияние продолжительности ишемии на гистологическое повреждение почек у мышей с uIRI и отсроченной контралатеральной нефрэктомией. Левую почку подвергали ИРИ в день 0, а резекцию правой почки проводили при различной продолжительности ишемии (21 минута, 24 минута, 27 минут и 30 минута) с фиксированной внутренней температурой тела. при 37°С во время ишемии почки, а правую почку удалили через 14 дней после ИРИ левой почки. Гистологическое повреждение почек определяли путем окрашивания гематоксилин-эозином (HE). (A): Репрезентативное окрашивание HE поврежденной почки, которое показало типичные гистопатологические особенности патологических изменений после ОПП, включая различную степень вакуольной дегенерации эпителиальных клеток канальцев, отслойку щеточной каймы, очаговый дезинтеграционный некроз, расширение просвета некоторых канальцев (#). ), отек эпителиальных клеток почечных канальцев различной морфологии и инфильтрация воспалительными клетками (%). Некоторые клубочки были морщинистыми и склерозированными, с гиперплазией мезангиальных клеток (&) и расширенной капсулой Боумена (увеличение 400). (B): Полуколичественная оценка тубулоинтерстициального повреждения. (C): Полуколичественная оценка повреждения клубочков. n=5–6/группа. р <0,05.
Служба поддержки Wecistanche - крупнейшего экспортера цистаншей в Китае:
Электронная почта:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Телефон:+86 15292862950
Магазин для получения дополнительных технических характеристик:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
