Эффекты пародонтологического лечения у пациентов с пародонтитом и почечной недостаточностью: пилотное исследование Ⅰ
Jun 25, 2024
Абстрактный:Пародонтит ихроническая болезнь почекобахронические воспалительные заболеванияи имеют некоторые общие факторы риска. Целью этого 3-месячного пилотного исследования было выяснить, полезна ли нехирургическая пародонтальная терапия при клинических, биохимических и микробиологических условиях у пациентов с пародонтитом и почечной недостаточностью.Почечная недостаточностьпациенты с пародонтитом средней и тяжелой степени были набраны из двух больниц. Группа лечения получала нехирургическое пародонтологическое лечение, а контрольная группа получала только инструкции по гигиене полости рта. Оценка результатов проводилась через 1 и 3 месяца после лечения. Для анализа данных на уровне пациента использовались непараметрические тесты. Оценки на уровне пародонта анализировались с помощью t-критерия Стьюдента и парного t-критерия. Статистическая значимость была установлена на уровне p-значения < 0,05. Всего исследование завершили 11 субъектов. Существенной разницы между группами по смертности от всех причин не было.сердечно-сосудистые события, события заражения, системные параметры и сывороточные биомаркеры. По сравнению с контрольной группой клинические параметры пародонта, уровень интерлейкина-1 (IL-1) в жидкости десен и количество патогенов в пародонте показали значительное улучшение в группе лечения. Нехирургическое пародонтологическое лечение не изменило системные результаты у пациентов с почечной недостаточностью, но изменило местную микросреду.
НОВЫЕ ТРАВЫ ДЛЯПАРОДОНТИТ И ХРОНИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ ПОЧЕК
Ключевые слова: безоперационное пародонтологическое лечение; почечный диализ; почечная недостаточность
1. Введение
Пародонтит — хроническое воспалительное заболевание, вызывающее поражение тканей пародонта вследствие бактериальной инфекции [1]. Пародонтальные патогены, такие как Porphyromonas gingi valis (P. gingivalis), Treponema denticola (T. denticola) и Tannerella forsythia (T. forsythia), накапливаясь на поверхности зубов, могут вызывать не только локальную, но и системную воспалительную реакцию [2,3]. Выявление системной продукции провоспалительных цитокинов, происходящих из области пародонта, может также усугубить тяжесть системных заболеваний, включая сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ), диабет, хроническую болезнь почек (ХБП), ревматоидный артрит, хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ) и т. д. [4].
ХБП характеризуется нарушением функции почек и связанными с этим осложнениями [5]. Терминальная стадия болезни почек (ТПН), наиболее тяжелая форма ХБП, определяется у пациентов с расчетной скоростью клубочковой фильтрации (рСКФ) < 15 мл/мин на 1,73 м2 и необходимостью регулярного диализа [5,6]. Высокая распространенность ХБП обременяет финансовые расходы и систему здравоохранения на Тайване и во всем мире [7]. ХБП связана с персистирующим и хроническим системным воспалением, которое увеличивает риск сердечно-сосудистых заболеваний, особенно у пациентов с диабетом [8]. Между тем, сердечно-сосудистые заболевания являются наиболее распространенной причиной смертности пациентов с ХБП.
О связи между пародонтитом и ХБП сообщалось в течение последнего десятилетия [9,10]. Оба заболевания имеют хронические воспалительные характеристики и имеют некоторые общие факторы риска [10]. Повышенные системные воспалительные цитокины, такие как интерлейкин-1 (IL-1), интерлейкин-6 (IL-6), C-реактивный белок (CRP) и фактор некроза опухоли. (TNF-), которые были связаны с пародонтитом, были зафиксированы в предыдущих исследованиях [11,12]. Это может вызвать дисфункцию эндотелия сосудов и дальнейшие сердечно-сосудистые события [13,14]. Недавний консенсусный отчет предполагает, что пародонтологическое лечение может снизить системную воспалительную реакцию и частоту сердечно-сосудистых событий [13].
До сих пор были опубликованы ограниченные рандомизированные контролируемые клинические исследования (РКИ), сравнивающие результаты у пациентов с ТХПН после нехирургического пародонтологического лечения или без него [15,16]. До сих пор существует большая неопределенность во взаимосвязи между вмешательством при пародонтите и риском осложнений ХБП. Поэтому в этом исследовании мы стремились изучить клинические, биохимические и микробиологические эффекты нехирургического лечения пародонта у пациентов с пародонтитом и тХПН.
2. Материалы и методы.
2.1. Дизайн исследования
Это пилотное исследование в течение 3-месяца, проводившееся в больнице Тайбэйского медицинского университета (TMUH) и больнице Шуан-Хо, входящей в состав TMU (TMU-SHH), с сентября 2017 года по декабрь 2019 года. Для распределения включенных участников была проведена рандомизация. по списку, созданному компьютером. Только врачи и сотрудники исследования знали о назначении группы, т.е. группы лечения или контрольной группы. Этическое одобрение было получено от TMU-JIRB Тайбэйского медицинского университета (N201604007). Исследование было проведено в соответствии с Хельсинкской декларацией и рекомендациями CONSORT.
2.2. Участники-пародонтологи
В качестве предварительного исследования все пациенты, находящиеся на гемодиализе, которые были хорошо информированы и подписали информированное согласие в отделениях гемодиализа двух больниц, были отправлены на стоматологический осмотр на предмет соответствия требованиям. Критерии включения были следующими: поддержание гемодиализа три раза в неделю в течение не менее 3 месяцев [17]; возраст 20 и старше 20 лет; не менее 5 естественных сохраняемых зубов; и генерализованный пародонтит от умеренной до тяжелой степени в соответствии с критериями AAP/CDC [18]. Критериями исключения были: активная инфекция на фоне лечения антибиотиками в течение последних 4 недель для предотвращения влияния антибиотиков на исходное состояние [19]; не может получить стоматологическое лечение или пройти весь курс исследования. Пациенты с другими системными заболеваниями, такими как диабет или сердечно-сосудистые заболевания, не были исключены из этого исследования. Мы собрали демографическую и медицинскую информацию из электронных записей в двух больницах. Медицинская информация включала исходное артериальное давление, индекс массы тела (ИМТ), дату проведения диализа, историю болезни, курение и результаты лабораторных исследований.
2.3. Пародонтологическое обследование
Участники прошли полное пародонтологическое обследование исходно и через 3 месяца. Дополнительное периодонтальное обследование в группе лечения проводилось через 4–6 недель после лечения. Были собраны следующие 5 параметров пародонта: индекс зубного налета, глубина зондирования пародонта (PD), глубина рецессии десны (REC), потеря клинического прикрепления (CAL) и кровотечение при зондировании (BOP). Были записаны шесть точек измерения на зуб для индекса зубного налета, PD, REC, CAL и BOP. Пародонтальный зонд (PQ-W, Hu-Friedy, Чикаго, Иллинойс, США) использовался для осмотра пародонта двумя опытными пародонтологами.
2.4. Пародонтологическое вмешательство
Субъекты в обеих группах прошли сбор данных и инструкции по гигиене полости рта в начале исследования и через 3 месяца. Перед осмотром пародонта и назначением лечения для профилактики инфекций назначали амоксициллин (2 г) [20]. В группе лечения субъекты получали стандартную нехирургическую пародонтальную терапию для удаления наддесневой и поддесневой биопленки и зубного камня сертифицированными пародонтологами. Повторную оценку состояния пародонта проводили через 4–6 недель после лечения. В попытке искоренить или снизить уровень этиопатогенных бактерий в оставшихся глубоких карманах, поддесневую доставку геля миноциклина (Sun Star, Осака, Япония) проводили в участки пародонтального кармана с глубиной оставшегося больше или равной 5 мм [21].
2.5. Биохимическое исследование
Были взяты образцы крови для биохимического анализа крови. Биомаркеры воспаления, включая высокочувствительный СРБ (вч-СРБ), TNF-, IL-1, IL-6 и пентраксин 3 (PTX3) в сыворотке и жидкости десневой борозды (GCF), измерялись исходно и 3-посещения в месяц [22,23]. Образцы GCF были собраны с помощью полосок Periopaper (HARCO Electronics, Ирвин, Калифорния, США) из самого глубокого пародонтального кармана. По методике нашего предыдущего исследования [24] перед отбором проб исследуемую зону высушивали на воздухе и изолировали марлей. Первую бумажную полоску помещали в десневой карман на 1 мм поддеснево на 5 с и сразу выбрасывали, чтобы избежать загрязнения слюной. Вторую бумажную полоску вставляли в выбранное место еще на 30 секунд. Оставшуюся бумажную полоску погружали в 200-мкл контейнер с фосфатно-солевым буфером и хранили при -80 ◦C. Обычные биохимические анализы крови анализировались в центральной лаборатории больницы. Уровни цитокинов анализировали с помощью ELISA с использованием коммерчески доступных наборов (R&D Systems, Миннеаполис, Миннесота, США).
2.6. Микробиологический анализ
Образцы поддесневой биопленки были взяты из 3 самых глубоких участков пародонта с использованием стерильной пародонтальной кюретки при исходном уровне и 3-месячных визитах в обеих группах. Затем образцы поддесневой биопленки суспендировали в буфере TE, перемешивали на вортексе и обрабатывали ультразвуком. ДНК экстрагировали из образцов поддесневой биопленки. Образцы поддесневой биопленки смешивали с буфером RDD и бензоназой и инкубировали при 37 ◦C в течение 30 минут с последующим расщеплением протеиназой K и инкубировали в течение 30 минут при 56 ◦C [25,26]. Затем их гомогенизировали в лизирующем буфере. Очистку ДНК проводили с использованием набора QIAamp DNA Microbiome Kit (Qiagen) в соответствии с инструкциями производителя. Затем была проведена амплификация гена 16S рРНК и конструирование библиотеки в соответствии с протоколами, предоставленными Illumina. Набор Nextera XT Index использовался для добавления адаптеров секвенирования Illumina и штрих-кодов с двойным индексом к мишеням ампликонов. Количественное определение и качество библиотек секвенирования проверяли с помощью анализатора QSep100 (BiOptic Inc., Нью-Тайбэй, Тайвань). Наконец, библиотеки были нормализованы и объединены в эквимолярном соотношении и секвенированы на платформе Illumina Miseq с химическим составом V3.
2.7. 16. Анализ последовательности гена S-рРНК
Предварительная обработка необработанных ридов включает удаление универсальных праймеров и некачественных оснований с помощью программы Cutadapt (v1.18) [27]. Затем парные чтения обрабатывались и анализировались с помощью рабочего процесса DADA2/phyloseq в среде R. Таксономическое присвоение предполагаемых вариантов последовательностей ампликонов (ASV) выполнялось с использованием справочной базы данных SILVA (v132) с минимальной достоверностью начальной загрузки 80 [28]. Множественное выравнивание последовательностей ASV было выполнено с помощью DECIPHER (v2.8.1), а филогенетическое дерево было построено с использованием RAxML (v8.2.11) [29,30]. Таблица частот, таксономия и информация о филогенетическом дереве были использованы для создания объекта phyloseq для последующего анализа бактериального сообщества с использованием phyloseq (v1.24.2) [31]. Индексы -разнообразия рассчитывались с использованием функции оценки богатства из пакета phyloseq. Пакет R GUniFrac использовался для расчета различных вариантов расстояний UniFrac путем определения несходства сообществ между группами (-разнообразие) [32]. Анализ обогащения микробиоты проводился с использованием метода размера эффекта линейного дискриминантного анализа (LDA) и визуализировался в виде кладограммы с помощью GraPhlAn [33,34].
Нашими основными исходами были смертность от всех причин, сердечно-сосудистые (СС) события и инфекционные события. Заранее определенные вторичные исходы включали гемоглобин A1c (HbA1c), сердечную функцию и оценку периферических сосудов. Кроме того, были собраны параметры пародонта, воспалительные биомаркеры сыворотки/GCF и поддесневые микробы.
