Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com

Абстрактный:Растущая забота о здоровье в целом стимулирует глобальный рынок натуральных ингредиентов не только в пищевой промышленности, но и в косметической сфере. В этом исследовании проводится скрининг потенциальных косметических применений водных экстрактов из трех исландскихводорослис, создаваемые импульсными электрическими полями (ИЭП). Экстракты, полученные с помощью PEF из Ulva lactuca, Alaria esculenta и Palmaria palmata, сравнивали с традиционной экстракцией горячей водой с точки зрения содержания полифенолов, флавоноидов и углеводов. Более того,антиоксидантсвойства и ферментативную ингибирующую активность оценивали с использованием анализов in vitro. PEF продемонстрировал результаты, аналогичные традиционному методу, демонстрируя несколько преимуществ, таких как его нетермический характер и более короткое время экстракции. значение 12 098,7 мкг QE/г сух.в.) соединений, также демонстрирующих самый высокийантиоксидантемкости. Кроме того, экстракты Alaria esculenta проявляли превосходную антиферментативную активность (76,9, 72,8, 93,0 и 100 процентов для коллагеназы, эластазы,тирозиназаи гиалуронидазы соответственно) для их использования в продуктах для отбеливания кожи и антивозрастных средствах. Таким образом, наше предварительное исследование предполагает, что экстракты на основе исландской Alaria esculenta, производимые PEF, могут быть использованы в качестве потенциальных ингредиентов для натуральных косметических и космецевтических составов.

Ключевые слова:макроводоросли; ульва молочная; алария эскулента; пальмария пальчатая; Экстракция с помощью PEF; биологически активные соединения; зеленая экстракция; натуральные ингридиенты; космецевтика

цистанхе отбеливающие натуральные ингредиенты

1. Введение

В последние годы спрос на новые биологически активные соединения с потенциальной пользой для здоровья значительно увеличился. Многие исследовательские группы уделяют особое внимание исследованиям морских организмов, таких как макроводоросли, для поиска новых и устойчивых источников природных соединений для применения в агропищевой промышленности, фармакологии, пищевых продуктах и, в последнее время, в области косметики [1,2]. . Макроводоросли представляют собой большую и неоднородную группу фотосинтезирующих организмов, характеризующихся огромным биоразнообразием и сложным биохимическим составом. В соответствии с их химической структурой и содержанием пигмента макроводоросли можно разделить на три линии, включая бурые водоросли (Phaeophyceae), красные водоросли (Rhodophyta) и зеленые водоросли (Viridiplantae). Соединения водорослей хранятся внутри клеточной цитоплазмы или связаны с клеточными мембранами; таким образом, разрушение клеток имеет решающее значение для повышения ценности биомассы водорослей. Кроме того, состав клеточной стенки сильно различается между видами водорослей, начиная от крошечных мембран и заканчивая многослойными сложными структурами, что затрудняет восстановление продуктов водорослей [3]. В целом морские водоросли являются отличными источниками полисахаридов, белков, липидов и широкого спектра вторичных метаболитов, таких как фенольные соединения, терпеноиды, каротиноиды, пигменты и производные азота [4–6]. Хотя первичные метаболиты имеют решающее значение, последние данные показали, что содержание вторичных метаболитов определяет биологическую активностьводорослиэкстракты [7].

Растущая забота об общем здоровье и благополучии, а также осведомленность о вредных химических веществах в повседневных продуктах стимулируют глобальный рынок натуральных и органических ингредиентов [8]. За последние годы сознание потребителей в отношении предпочтения натуральных ингредиентов и экологически чистых продуктов распространилось от пищевой промышленности до индустрии косметики и средств личной гигиены [9]. Кроме того, в нынешнем контексте глобального потепления и экологических проблем растет осведомленность общественности об экологических проблемах. В свете этих текущих опасений потребители обратили свой интерес на экологически чистые, здоровые и не содержащие химикатов продукты. В результате косметическая промышленность в настоящее время заменяет токсичные химические вещества и вредные ингредиенты новыми и натуральными ценными соединениями для производства «химически чистых» косметических продуктов [10].

Косметика традиционно определяется как продукты, предназначенные для нанесения на тело человека для очищения, украшения или повышения привлекательности, не влияющие на структуру или функции тела. Однако новые тенденции и недавние требования потребителей способствовали разработке новых продуктов, обеспечивающих множество преимуществ при минимальных усилиях. Термин космецевтика в настоящее время часто используется для описания косметических продуктов с биологически активными ингредиентами, которые, как утверждается, обладают лечебными или лекарственными свойствами [11]. Космецевтика обычно содержит функциональные ингредиенты, такие как витамины, фитохимические вещества, ферменты,антиоксидантыи/или эфирные масла [12]. Поскольку широкий спектр этих биоактивных соединений был обнаружен в макроводорослях, исследование новыхводорослиs и экстракты морских водорослей оказались перспективной областью космецевтических и косметических исследований [13,14].

Ряд вторичных метаболитов, полученных изводорослиизвестны своим ценным полезным для здоровья воздействием на кожу, таким как фотозащита, увлажнение,антиоксидантпротивовоспалительные и регенеративные свойства [15]. Основываясь на этих полезных эффектах, водоросли включают в космецевтические продукты, такие как солнцезащитные средства, средства против старения, а также для предотвращения гиперпигментации, а полисахариды используются для увлажнения кожи и предотвращения сухости [16]. Во время старения белки внеклеточного матрикса подвержены чрезмерной активности протеолитических ферментов, таких как коллагеназы и эластазы, что приводит к видимым изменениям кожи, таким как морщины или потеря эластичности кожи. Многообещающим подходом к предотвращению внешнего старения кожи является ингибирование активности коллагеназы и эластазы природными соединениями. Экстракты растений были широко исследованы, и было обнаружено, что они обладают антиколлагеназной и антиэластазной активностью [17]. Однако имеется мало информации об ингибирующей ферментативной активности экстрактов морских водорослей.

Наиболее часто применяемые методы экстракции для выделения биоактивных веществ из морских водорослей основаны на традиционных методах. Тем не менее, использование традиционных методов имеет несколько недостатков, таких как использование больших объемов органических растворителей, более длительное время экстракции, высокие температуры, проблемы с селективностью, высокие энергетические потребности и соэкстракция нецелевых или мешающих соединений [18]. Следовательно, потенциальный интерес представляют новые методы экстракции, основанные на принципах зеленой химии [19].

Импульсное электрическое поле (ИМП) представляет собой новую, нетепловую и энергоэффективную технологию обработки пищевых продуктов [20]. ИЭП включает приложение импульсов электрического поля, как правило, высокого напряжения (диапазон кВ) и короткой продолжительности (микро- или наносекунды) к изделию, помещенному между двумя электродами [21]. Применение электрических импульсов вызывает образование обратимых или необратимых пор в клеточных мембранах, определяемых как электропорация или электропермеабилизация, что, следовательно, способствует быстрой диффузии растворителей и усилению массопереноса внутриклеточных соединений [22]. Недавние приложения были сосредоточены на использовании импульсной электрической энергии в качестве метода экстракции (экстракция с помощью PEF) из био-, пищевых и сельскохозяйственных продуктов [23]. При обработке PEF можно получить экстракты более высокой чистоты, увеличить скорость извлечения биологически активных соединений, таких как полифенолы, каротиноиды или антоцианы, а также исключить использование органических растворителей и сократить время экстракции [24,25]. Обработка PEF успешно применялась для извлечения ценных соединений из различных морских источников, таких как белки [26–28], углеводы [29,30], липиды [31,32] и пигменты, такие как каротиноиды, хлорофиллы или фикоцианины [22,33]. ,34] из микроводорослей и водорослей.

Таким образом, основная цель настоящего исследования заключалась в оценке потенциального косметического применения экстрактов PEF из трех видов макроводорослей, произрастающих в Исландии: U. lactuca (зеленые макроводоросли), A. esculenta (бурые макроводоросли) и P. palmata (красные макроводоросли). . В попытке разработать органические и натуральные ингредиенты для экологически чистых рецептур экстракция с помощью PEF была предложена в качестве экологически чистой альтернативы традиционной экстракции органическим растворителем. После процесса экстракции водныйводорослиЭкстракты характеризовались содержанием полифенолов, флавоноидов и углеводов. Более того,антиоксидантсвойства и ферментативную ингибирующую активность оценивали с использованием анализов активности in vitro. Результаты, представленные здесь, послужат основой для улучшения понимания бурых, красных и зеленых макроводорослей для производства активных ингредиентов для инновационных составов косметических продуктов, содержащих биологически активные соединения, выделенные из природных и устойчивых источников.

2. Результаты и обсуждение

2.1. Экстракция с помощью PEF для переработки биомассы исландских водорослей

Результаты показывают, что электропроводность была самой высокой в ​​суспензии, приготовленной из A. esculenta, за которой следуют P. palmata и U. lactuca (p < {{0}},05)="" (таблица="" 1).="" однако="" влияние="" типа="" лечения="" не="" было="" выявлено="" как="" значимое="" (p=""> 0,05). Измерение электропроводности успешно использовалось другими авторами для оценки эффективности воздействия ФЭП на биологические ткани для высвобождения внутриклеточных ионных веществ в результате повышенной проницаемости клеточных мембран [35–37].

В нашем исследовании результаты не показали более сильного высвобождения этих веществ под действием PEF, поскольку изменения проводимости, вызванные обработкой экстракцией, имели тенденцию быть самыми высокими в суспензиях HW. Предыдущие исследования пришли к выводу, что начальная проводимость внеклеточной среды влияет на эффективность электропорации, но нет единого мнения о том, существует ли положительная или отрицательная связь между этими двумя факторами [38]. Различия в проводимости и характеристиках материала могут усложнить сравнение. В нашем исследовании была обнаружена большая разница между проводимостью суспензий A. esculenta и двух других видов, что не отражалось на степени изменения проводимости при экстракционной обработке. Было установлено, что содержание золы в бурых водорослях может составлять более 50% их сухого веса [39] и состоит в основном из ионов, что может частично объяснить высокую проводимость суспензий A. esculenta по сравнению с двумя другими видами.

Результаты показывают, что pH в суспензии U. lactuca был ниже, чем у двух других видов, но явных эффектов от типа экстракции не наблюдалось. Температуру повышали с 22 ± 1°С до обработки, до 95°С ГВ (для всех видов), до 36,0 ± 1,0 ◦С, 46,3 ± 0. 6 ◦C и 51.0 ± 1 ◦C по PEF в суспензиях A. esculenta, P. palmata и U. lactucas. Та же тенденция наблюдалась для групп, получавших ПЭФ, которые затем дополнительно нагревались ГВ. Повышение температуры было вызвано преобразованием электрической энергии в тепловую (омический нагрев) в суспензии при обработке ИЭП. Известно, что уровень повышения температуры пропорционален приложенному току, но обратно пропорционален проводимости. Это может объяснить, почему P. palmata и U. lactuca достигли более высокой температуры во время обработки PEF, хотя их проводимость ниже, чем у A. esculenta.

2.2. Спектры поглощения в ультрафиолетовом и видимом диапазонах экстрактов исландских водорослей

Изученные морские водоросли различаются по спектральным профилям (рис. 1), что позволяет предположить, что состав и потенциал УФ-поглощения различаются между видами. Однако тип метода экстракции не оказывал заметного влияния на УФ-спектры поглощения; экстракты морских водорослей показали одинаковые профили поглощения независимо от метода экстракции.

УФ-спектры поглощения зеленой водоросли U. lactuca показали заметный пик в УФ-В диапазоне (280–320 нм) (рис. 1а), в то время как экстракты бурой водоросли A. esculent не показали четкого образования зоны поглощения (рис. 1в). ). Однако результаты показали более сильное поглощение при 220 нм в экстрактах A. esculenta по сравнению с U. lactuca и P. palmata, что, как предполагается, является результатом высокого содержания фенольных соединений в A. esculenta (таблица 2). Максимум поглощения в этом диапазоне связан со связью между фенольными соединениями и альгинатами. Предполагается, что эта взаимосвязь сохраняет способность фенольных соединений поглощать УФ-излучение с течением времени [40].

Более интересным открытием было то, что результаты, полученные для экстрактов красных водорослей P. palmata поглощала часть УФ-А излучения (320–400 нм). Известно, что красные водоросли накапливают фотозащитные соединения, способные поглощать ультрафиолетовое излучение, такие как микоспориноподобные аминокислоты (МАА), которые поглощают именно в этой специфической УФ-области [41]. P. palmata преуспевает в УФ-спектре поглощения с заметными пиками между 320 и 340 нм в соответствии с присутствием МАК, поглощающих в этом диапазоне [42], таких как палитинол (пик поглощения при 332 нм), астерина -330 (пик поглощения при 330 нм), порфира-334 (пик поглощения при 334 нм) и другие [43]. Поскольку известно, что условия экстракции, такие как тип растворителя, влияют на эффективность экстракции, результаты настоящего исследования сравнивали с предыдущими исследованиями по экстракции MAA водой из P. palmata. В этих исследованиях пики максимума поглощения были обнаружены при 325–330 нм [44], как и в настоящем исследовании. Поэтому можно предположить, что пики, наблюдаемые между 320 и 340 нм, могут быть связаны с присутствием МАК.

Различия в спектрах поглощения между 350 и 700 нм объясняются наличием различных вспомогательных пигментов в соответствующих фотосистемах зеленых, бурых и красных макроводорослей, хлорофилла-b (450–500 нм), фукоксантина (400–500 нм) и фикоэритрина. (600–650 нм) соответственно [45]. Концентрация водорастворимых соединений в экстрактах оказывала более сильное влияние. Следовательно, закономерность, отражающая различия в пигментах между видами водорослей, в настоящем исследовании не проявлялась.

2.3. Общее содержание фенолов, флавоноидов и углеводов в экстрактах исландских водорослей

Общее содержание фенолов вводорослиs колебались от 1592 до 9368 мкг GAE/г сухой массы (таблица 2). Бурая водоросль A. esculenta показала наибольшее количество (p < 0.05)="" фенольных="" соединений="" (среднее="" значение="" 8869,7="" мкг="" gae/г="" сухой="" массы),="" за="" ней="" следует="" p.="" palmata="" (среднее="" значение="" 1806,2="" мкг).="" эгэ/г="" сух.="" массы)="" и="" u.="" lactuca="" (среднее="" значение="" 1750,7="" мкг="" эгэ/г="" с.в.)="" (значительных="" различий="" между="" экстрактами="" p.="" palmata="" и="" u.="" lactuca="" не="" было)).="" для="" каждого="" вида="" морских="" водорослей="" содержание="" полифенолов="" не="" различалось="" в="" зависимости="" от="" метода="" экстракции,="" за="" исключением="" u.="" lactuca,="" результаты="" которого="" показали,="" что="" наиболее="" эффективным="" методом="" была="" гв="" (p="">< 0,05).="" однако="" следует="" выделить="" преимущества="" pef,="" включая="" его="" нетермическую="" природу,="" более="" короткое="" время="" экстракции="" (10="" мин="" против="" 45="" мин)="" и="" экологичный="">

Среди трех групп водорослей бурые макроводоросли содержат большее количество полифенолов, чем красные и зеленые макроводоросли. Результаты согласуются с ранними исследованиями [46,47], в которых сообщалось, что бурые (например, A. esculenta и Saccharina latissma) виды водорослей имеют более высокое содержание фенолов, чем красные (P. palmata) и зеленые виды (например, U. lactuca). Это было поддержано другими авторами [48], которые пришли к выводу, что среднее содержание полифенолов видоспецифично (A. esculenta > S. latissma > P. palmata), а содержание фенолов у A. esculenta более чем в три раза выше, чем у других видов ( A. esculenta: 37 мг эквивалентов флороглюцина (PGE)/г сухой массы, S. latissma: 8 мг PGE/г сухой массы, P. palmata: 5 мгGAE/г сухой массы). Кроме того, в том же исследовании авторы сообщили, что содержание полифенолов меняется в зависимости от сезона, в то время как пространственные вариации (водоросли были собраны в Норвегии, Франции и Исландии) показали незначительный эффект. Например, Гейгер и др. (2020) обнаружили значительное влияние сезонных колебаний содержания полифенолов в A. esculenta: более 300 мг GAE/г DW осенью по сравнению с менее 20 мг GAE/г DW весной. Флоротаннины из семи бурых морских водорослей, коммерчески собираемых в Бретани (Франция), обнаруженные с помощью 1 H ЯМР и анализов in vitro: временные вариации и потенциальная ценность в косметических применениях. Наши образцы были собраны в июле (U. lactuca и A. esculenta) и в ноябре (P. palmata). В исследовании Роледы [48] среднее содержание A. esculenta из Тронхейма, Норвегия (не собранной в Исландии) летом составляло 40 мг ЭГЭ/г сухой массы и P. palmata из Исландии, а осенью – 4 мг ЭГЭ/г сухой массы. Более высокие значения, полученные по сравнению с нашим исследованием, могут быть объяснены используемой экстракционной средой (80:20 ацетон:вода), что, вероятно, приводит к более высоким выходам экстракции. Более высокое содержание полифенолов обнаружено также в экстрактах A. esculenta при использовании смеси этанола и воды (50:50) с ультразвуком [49]. Однако при использовании той же экстракционной среды и классической экстракции растворителем было сообщено, что A. esculenta содержит 44,1 мг GAE/100 г сухой массы неводных экстрактов [50], что относительно похоже на наблюдаемое в настоящем исследовании.

Среднее содержание флавоноидов зависит от вида (A. esculenta > U. lactuca > P. palmata; (p < 0.{{10}}5) (табл. 2). флавоноидов наблюдали в экстрактах A. esculenta (среднее значение 12098,7 мкг ХЭ/г сухой массы), в то время как более низкое содержание было обнаружено в U. lactuca (среднее значение 4152,4 мкг ХЭ/г сухой массы), а минимальное содержание было определено в экстрактах P. palmata ( среднее значение 905,8 мкг QE/г сухой массы). Подобно поведению, обнаруженному для общего содержания фенолов, тип технологии экстракции не оказал существенного влияния на содержание флавоноидов (p > 0,05), за исключением U. lactuca. Результаты показали, что HW и комбинация обоих методов (PEF плюс HW) были наиболее эффективными методами экстракции флавоноидов из U. lactuca (p < 0,05).

Существует множество исследований содержания флавоноидов в наземных растениях, но исследования содержания флавоноидов в водорослях немногочисленны [51], особенно у видов, изучаемых в настоящей работе. А именно, исследование Ummat et al. [49] сообщили, что ультразвуковая экстракция увеличивает восстановление флавоноидов во всех 11водорослиs (включая A. esculenta) по сравнению с обычной экстракцией растворителем с использованием смеси 50-процентного этанола. В другом исследовании флавоноиды были количественно определены в метанольных экстрактах четырех видов Ulva (Ulva clathrata, Ulva linza, Ulva flexuosa и Ulva кишечная), выращенных в разных частях северного побережья Персидского залива на юге Ирана; содержание флавоноидов в экстрактах водорослей варьировало от 8 до 33 мг РЭ/г сухой массы [52]. Однако предыдущие исследования той же исследовательской группы выявили заметные изменения химических компонентов в зависимости от времени года и условий окружающей среды [53]. Таким образом, немного сложно получить полный обзор библиографии этих биологически активных соединений вводорослиs, из-за отсутствия доступных опубликованных исследований, а также из-за изменений в содержании флавоноидов под влиянием условий выращивания и географического положения.

Mean carbohydrate content of produced extracts was also species-specific (P. palmata >U. lactuca > A. esculenta; p < 0.05)="" (табл.="" 2).="" содержание="" колебалось="" от="" 44,8="" до="" 510="" мг="" glue/gdw="" в="" зависимости="" от="" вида="" водорослей.="" морские="" водоросли="" содержат="" большое="" количество="" полисахаридов,="" выполняющих="" важные="" функции="" для="" клеток="" макроводорослей,="" включая="" структурную="" поддержку="" и="" запасание="" энергии.="" например,="" основная="" часть="" клеточных="" стенок="" красных="" и="" бурых="" водорослей="" представлена="" ​​сульфатированными="" галактанами,="" известными="" как="" агар,="" альгинат="" и="" каррагинан="" [54].="" redalgae="" p.="" palmata="" показал="" самое="" высокое="" содержание="" углеводов="" (среднее="" значение="" 441="" мгglue/г="" сухой="" массы).="" результаты="" согласуются="" с="" предыдущими="" исследованиями,="" в="" которых="" сообщается="" о="" самой="" высокой="" концентрации="" полисахаридов="" у="" видов="" palmaria="" [55].="" более="" того,="" mutripah="" et="" al.="" [56]="" описали="" общее="" содержание="" углеводов="" в="" p.="" palmata,="" равное="" 469="" мг/г="" сухих="" водорослей,="" что="" относительно="" похоже="" на="" наблюдаемое="" в="" настоящем="">

Зеленые макроводоросли U. lactuca показали содержание до 249,5 мг GluE/г сухой массы в зависимости от использованного метода экстракции (табл. 2). Согласно литературным данным, U. lactuca содержит водорастворимую и нерастворимую целлюлозу, соответствующую структурным полисахаридам, с основным компонентом, называемым ульван, который составляет от 9 до 36 процентов сухой массы биомассы [57]. Ульван в основном состоит из сульфатированной рамнозы, уроновых кислот (глюкуроновой кислоты и идуроновой кислоты) и ксилозы. Из-за его полярной природы растворимость водно-водных растворов ульвана повышается при экстракции при высоких температурах (80–90 ◦C) [58]. Температура экстракции могла быть причиной того, что общее содержание углеводов в экстрактах U. lactuca, полученных традиционной экстракцией горячей водой и комбинацией обоих методов (PEF плюс HW), было выше (p < 0,05),="" чем="" содержание,="" полученное="" при="" использовании="" только="">

С другой стороны, другие авторы подчеркивают важность сезонных колебаний содержания полисахаридов. Например, Schiener et al. утверждают, что выявляют сезонные колебания и предсказывают наилучшее время сбора ламинарии. Анализ сезонного состава A. esculenta показал, что максимальные значения углеводов совпадали с пониженными концентрациями белка, золы, полифенолов и влаги [39]. По мнению авторов, эти отношения, которые различаются в зависимости от сезона и вида, могут использоваться отраслями для максимизации урожайности целевых растений.водорослисоставные части.

2.4. Антиоксидантные свойства экстрактов исландских водорослей

Среди неочищенных экстрактов трех видов водорослей A. esculenta обладала самой высокой активностью по удалению DPPH (p < {{0}},05)="" с="" эффектом="" очистки="" выше="" 90="" процентов="" (таблица="" 3).="" по="" сравнению="" с="" другими="" в="" стандартных="" растворах="" a.="" esculenta="" продемонстрировал="" сравнимую="" очистительную="" активность="" с="" 100="" мкг/мл="" аскорбиновой="" кислоты="" (87,9%),="" галловой="" кислоты="" (91,0%)="" и="" -токоферола="" (87,9%).="" наши="" результаты="" согласуются="" с="" недавними="" исследованиями="" [50],="" в="" которых="" также="" сообщается="" о="">антиоксидантактивность экстрактов A. esculenta. Удивительно, но нет существенных различий вантиоксидантактивность наблюдалась между различными протестированными методами экстракции (p > 0,05). Ожидалось, что экстракты PEF будут демонстрировать лучшие антиоксидантные свойства, чем экстракты, полученные с помощью традиционной горячей экстракции, поскольку другие исследования показали, что экологически чистые методы (такие как экстракция с помощью микроволнового излучения или ферментативная экстракция) могут эффективно предотвращать разложение биоактивных соединений, проявляя более высокую антиоксидантную активность [59]. ,60].

Способностьводорослиэкстракты для восстановления ионов трехвалентного железа (Fe3 плюс) до ионов двухвалентного железа (Fe2 плюс) и способность удалять радикал ABTS также изучали методами FRAP и ABTS соответственно. Результаты FRAP показали тенденции, сходные с DPPH, показывая, что A. esculenta обладает самой сильной способностью восстанавливать ионы трехвалентного железа (Fe3 плюс) до двухвалентного (Fe2 плюс) среди неочищенных экстрактов трех видов водорослей (p < 0.="" {{6}="" }5).="" однако="" для="" abts="" было="" обнаружено="" другое="" поведение.="" экстракты="" всех="" морских="" водорослей="" показали="" схожую="" способность="" удалять="" радикал="" abts="" (p=""> 0,05), что указывает на то, что эти виды, вероятно, содержат некоторые эффективные соединения, ответственные за его очищающую активность.

В целом известно, что бурые водоросли обладают более высокимантиоксидантпотенциал по сравнению с красными и зелеными семействами [61]. Наши результаты также показали, что водные экстракты A. esculenta продемонстрировала эффективную антиоксидантную активность в отношении удаления свободных радикалов и снижения мощности, что позволяет предположить, что A. esculenta потенциально может быть источником природных антиоксидантов. Высокая антиоксидантная активность экстрактов A. esculenta может быть связана с высоким содержанием фенольных соединений, определенных в экстрактах бурых водорослей. Во многих исследованияхантиоксидантактивность экстрактов водорослей была приписана фенольным соединениям, демонстрируя положительную корреляцию между содержанием фенолов и способностью к очистке, в основном, с DPPH [62,63]. Аналогичные результаты корреляции были получены в текущем исследовании для экстрактов A. esculenta (более подробное обсуждение см. в разделе 2.6. Корреляции между химическими соединениями и биологически активными свойствами).

2.5. Ферментативное ингибирующее действие экстракта исландских водорослей

исландскийводорослиЭкстракты s продемонстрировали положительное ингибирующее действие на все протестированные ферменты (таблица 4), открывая новые возможности для использования природных ферментативных ингибиторов из ресурсов водорослей. Насколько нам известно, это первый случай, когда ферментативно-ингибирующая активность исландскоговодорослиэкстракты, произведенные PEF, были протестированы.

2.5.1. Активность ингибирования коллагеназы

Экстракты A. esculenta продемонстрировали положительное ингибирование коллагеназы в диапазоне от 68 до 91 процента, в то время как экстракты P. palmaria и U. lactuca показали незначительное ингибирование коллагеназы (таблица 4). Экстракт горячей воды A. esculenta показал 71,1% ингибирующей активности коллагеназы, что было выше, чем у стандартного раствора эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) (63,2%), и сравнимо с положительным стандартом, обеспечиваемым коммерческим набором ферментов (74,9%). Вывод заключался в том, что экстракты A. esculenta, полученные с помощью PEF, показали ингибирование аколлагеназы на 91 процент, проявляя даже более высокую активность, чем ингибитор, поставляемый из коммерческого набора. Следует подчеркнуть, что эта активность наблюдалась только в водных экстрактах, полученных с помощью PEF, а не при комбинации PEF и HW. Такое поведение можно объяснить возможностью того, что процесс горячей воды может оказывать негативное влияние на соединения, ответственные за ингибирование активности коллагеназы. Однако для объяснения этих результатов необходимы дополнительные исследования из-за сложности сырых экстрактов водорослей. Вышеупомянутая исследовательская группа в настоящее время работает над идентификацией ингибирующих молекул в экстрактах A. esculenta, чтобы лучше понять эти положительные эффекты, вызываемые PEF.

Результаты, касающиеся ингибирования коллагеназы экстрактами A. esculenta, согласуются с предыдущими данными, в которых A. esculenta используется в коммерческих экстрактах из-за его антивозрастного эффекта. Деградация коллагена происходит с возрастом из-за активности коллагеназы, что приводит к появлению морщин на коже. Ингибирование коллагеназы природными соединениями представляет собой интересную возможность для продуктов против старения. Например, SEPPIC, поставщик ингредиентов для косметической промышленности, предлагает липофильный экстракт A. esculenta (Kalpariane® AD) [64].

2.5.2. Ингибирующая активность эластазы

Только неочищенные экстракты A. esculenta ингибировали эластазу, демонстрируя активность, превышающую 7% ингибирования (таблица 4). Однако антиэластазная активность экстрактов A. esculenta статистически не отличалась в зависимости от метода экстракции (p > 0,05). По сравнению с растворами кверцетина, хорошо известным ингибитором эластазы, который показал 100-процентное ингибирование при 1 мМ и 58,7 % при 0,5 мМ, эффективность экстрактов A. esculenta была высокой.

Эластаза представляет собой фермент протеиназы, который может снижать уровень эластина, разрывая определенные пептидные связи. Следовательно, ингибирование активности эластазы в слое дермы может быть использовано для поддержания эластичности кожи [65]. Многие растительные экстракты идентифицированы как ингибиторы эластазы [17]; однако было проведено несколько исследований ингибирования эластазы водорослями. По литературным данным известно, что полифенолы, экстрагированные из растений, являются сильными ингибиторами эластазы и гиалуронидазы [66]. Недавнее исследование показало, что флоротанины, тип танина в бурых водорослях, экстрактах морских водорослей Eisenia bicyclis и бурых водорослей Ecklonia cava, приносят пользу коже, значительно снижая активность эластазы [67]. Экстракты A. esculenta, полученные в этом исследовании, показали, что самые высокие значения TPC и TFC по сравнению с другими исследованными видами (таблица 4), что может быть причиной того, что водные экстракты из P. palmaria и U. lactuca не проявляли антиэластазной активности. Для подтверждения этой гипотезы был проведен корреляционный анализ Пирсона, предполагающий, что антиферментативная активность положительно коррелирует с содержанием фенольных веществ (см. дальнейшее обсуждение в разделе 2.6. Корреляции между химическими соединениями и биоактивными свойствами).

2.5.3. Активность ингибирования тирозиназы

Экстракты A. esculenta показали положительный результат.тирозиназаингибирование выше 90 процентов для всех используемых методов экстракции, в то время как экстракты P. palmaria и U. lactuca не проявляли ингибирующего действия на тирозиназу (таблица 4). Однако антитирозиназная активность экстрактов A. esculenta не различалась (p < 0,05)="" в="" зависимости="" от="" методов="" экстракции.="" сравнивая="" эффект="" экстрактов="" a.="" esculenta="" с="" испытанными="" растворами="" кверцетина,="" неочищенные="" экстракты="" бурых="" водорослей="" показали="" лучшую="" ингибирующую="" активность,="" чем="" эти="" растворы="" (88="" и="" 75%="" для="" растворов="" кверцетина="" с="" концентрацией="" 0,5="" и="" 1="" мм="" соответственно).="" основываясь="" на="" литературе,="" несколько="" исследователей="" сообщают="" об="" антитирозиназной="" активности="" растений,="" бактерий="" и="" грибов="" [68].="" однако,="" несмотря="" на="" то,="" что="" различные="" исследования="" предполагают,="" что="" биологически="" активные="" соединения,="" полученные="" из="" морских="" водорослей,="" обладают="" хорошим="" потенциалом="" для="" использования="" в="" качестве="" агентов="" для="" отбеливания="" кожи="" [13],="" эта="" область="" все="" еще="" остается="" неизученной,="" и="" было="" проведено="" лишь="" несколько="" исследований.="" большинство="" исследований,="" проведенных="" в="" этой="" области,="" были="" сосредоточены="" на="" бурых="" водорослях,="" что="" согласуется="" с="" результатами="" настоящего="" исследования,="" в="" котором="" экстракты="" a.="" esculenta="" проявляли="" наилучшую="" антитирозиназную="" активность.="" например,="" производные="" флороглюцина="" и="" флоротаннины,="" распространенные="" вторичные="" метаболиты,="" обнаруживаемые="" в="" бурых="" водорослях,="" проявляют="" ингибирующую="" активность="" в="" отношении="" тирозиназы="" из-за="" их="" способности="" хелатировать="" медь="" [69].="" в="" недавнем="" исследовании="" экстракт="" бурых="" водорослей="" lessonia="" trabeculate,="" полученный="" с="" помощью="" микроволновой="" экстракции,="" ингибировал="" активность="" тирозиназы="" на="" 33,73%="" [60].="" в="" другом="" исследовании="" экстракт="" бурых="" водорослей="" turbinaria="" conoides="" показал="" активность="" в="">антиоксиданта такжетирозиназаингибитором, однако в качестве растворителя в этом случае использовали этанол [70]. Значительная корреляция между ингибирующей активностью полифенолов, экстрагированных из растений на грибы.тирозиназасообщалось в предыдущих исследованиях [68]. Аналогичным образом, результаты этого исследования показывают, что ингибирующая активность в отношении тирозиназы положительно коррелирует с содержанием флавоноидов и фенолов (см. Раздел 2.6. Корреляции между химическими соединениями и биоактивными свойствами).

Тирозиназа играет важную роль в биосинтезе пигмента меланина в коже. Меланин отвечает за защиту от вредного ультрафиолетового излучения, которое может вызывать ряд патологических состояний [71]. Кроме того, это может создать эстетические проблемы, когда меланин накапливается в виде гиперпигментированных пятен [72]. Таким образом, включение ингибиторов тирозиназы в косметические продукты может быть привлекательным благодаря эффекту отбеливания и/или осветления.

цистанхе может ингибировать тирозиназу

2.5.4. Активность ингибирования гиалуронидазы

Всеводорослиэкстракты проявляли значительно высокую антигиалуронидазную активность (таблица 4), демонстрируя результаты, сравнимые с растворами дубильной кислоты (хорошо известный ингибитор гиалуронидазы). В частности, экстракты A. esculenta показали 100 процент ингибирования для всех протестированных методов. Более того, экстракты U. lactuca проявляли активность, превышающую 90 процентов ингибирования, где ингибирование экстрактов, полученных с помощью PEF (96,8 процента) и комбинации PEF плюс HW (97,3 процента), было выше, чем ингибирование, вызванное традиционным методом горячей воды 93,4. процентов) (р < 0,05).="" все="" экстракты="" p.="" palmaria="" проявляли="" одинаковую="" активность=""><0,05), ингибирование="" экстрактов,="" полученных="" с="" помощью="" pef,="" было="" (91,9="" процента),="" а="" также="" сочетанием="" pef="" плюс="" hw="" (89,5="" процента)="" и="" традиционным="" методом="" горячей="" воды="" (91,8="">

Другие авторы также описали антигиалуронидазную активность различныхводорослиэкстракты, особенно экстракты, богатые флоротанинами, из бурых водорослей [73,74]. Однако, насколько нам известно, впервые сообщается об ингибирующей гиалуронидазу активности экстрактов P. palmata и U. lactuca, производимых PEF.

Гиалуроновая кислота является основным компонентом дермы, где она участвует в восстановлении тканей. С возрастом она разрушается, вызывая морщины и потерю упругости кожи. В этом смысле ингибиторы гиалуронидазы повышают уровень гиалуроновой кислоты в дермальном внеклеточном матриксе для улучшения внешнего вида стареющей кожи лица [13]. Таким образом, результаты этого исследования могут открыть новые возможности для использования природных ингибиторов гиалуронидазы из ресурсов водорослей с потенциальным использованием в косметических продуктах.

Таким образом, собранные данные позволили нам сделать вывод, что экстракты A. esculenta проявляли в целом лучшую ингибирующую активность, чем P. palmaria и U. lactuca, в отношении тестируемых ферментов. Таким образом, будучи наиболее перспективным видом водорослей с превосходной антиферментной активностью, он был выбран для дальнейших исследований в нашей лаборатории. Хотя неочищенные экстракты A. esculenta кажутся хорошими кандидатами для экспериментов in vitro, необходимо провести дальнейшие исследования для выяснения идентичности метаболитов, ответственных за эти биологические эффекты.

Экстракт цистанхе: антиоксидант

2.6. Корреляции между химическими соединениями и биологически активными свойствами

Результаты анализа основных компонентов (PCA) показали, что основное разделение групп определялось PC1 и PC2, на долю которых приходилось 71,9% и 14,5% дисперсии данных соответственно (рис. 2). Экстракты A. esculenta характеризовались более высоким содержанием флавоноидов и фенольных соединений, ингибирующим действием на ферменты (коллагеназу, тирозиназу и эластазу), значениями DPPH и FRAP, чем у других видов P. пальчатая и U. lactuca. С другой стороны, A. esculenta имела более низкое содержание углеводов, особенно по сравнению с P. palmata (которая располагалась на противоположной стороне PC1). Различия в данных вдоль PC2 были в основном связаны с ABTS и ингибированием гиалуронидазы. Как видно из расположения на графике, P. palmata имела более сильную корреляцию с ABTS, тогда как U. lactuca была больше связана с эффектами ингибирования гиалуронидазы по сравнению с этими двумя видами.

Высокая и достоверная положительная корреляция между TPC, TFC, DPPH, FRAP и ингибирующим действием на коллагеназу, эластазу итирозиназабыло продемонстрировано с помощью корреляционного анализа Пирсона (табл. 5).

Это согласуется с предыдущими исследованиями, в которых сообщается, что фенольные соединения (включая флавоноиды) вносят основной вклад в антиоксидантную активность различных веществ.водоросли[75–77]. Высокая антиоксидантная активность экстрактов бурых макроводорослей связана с особой группой полифенолов, флоротаннинами, и их уникальной молекулярной структурой. Сообщается, что флоротаннис из бурых водорослей имеет до восьми взаимосвязанных фенольных колец, которые действуют как ловушки для электронов [78,79]. Ожидалось, что ABT будут коррелировать с TPC, другимиантиоксидантпараметры. Возможные причины могут заключаться в том, что методы основаны на разных условиях реакции и что реакционная способность различается как по времени, так и по набору компонентов. Например, реагент ABTS реагирует с более широким диапазономантиоксидантчем радикал DPPH [80]. С другой стороны, одним из ограничений, упомянутых для ABTS, является длительная реакция, и общее время реакции может не позволить достичь конечной точки.

Результаты показывают, что существует высокая положительная корреляция TPC и TFC с ингибирующей активностью коллагеназы, эластазы и тирозиназы ({{0}},93–0,99), тогда как связь с ингибированием гиалуронидазы был не таким сильным (r=0,42 и 0,54 соответственно). Это указывает на то, что другие компоненты могли способствовать ингибирующему эффекту экстрактов. В других исследованиях сообщалось, что полисахариды обладают активностью, ингибирующей гиалуронидазу, например, альгиновая кислота в бурых водорослях [81,82]. Необходимы дальнейшие исследования химического состава видов макроводорослей на предмет воздействия выделенных соединений на фермент для оценки вклада каждого химического компонента, поскольку в этом исследовании основное внимание уделялось неочищенным экстрактам.

Полученные данные согласуются с предыдущими исследованиями, согласно которым химический состав и уровни биологической активности экстрактов значительно различаются между тремя линиями (красные, зеленые и бурые водоросли) и между разными видами, принадлежащими к одному и тому же типу, и на них влияют возраст и ткани. тип. Кроме того, состав и характеристики зависят от многих факторов окружающей среды, влияющих на распространение и рост макроводорослей. Например, свет (УФ-излучение), температура, доступность питательных веществ, воздействие воздуха, движение воды, воздействие волн и соленость. Температура была описана как фактор, оказывающий наиболее сильное влияние на образование пигмента и концентрацию питательных веществ, соленость и УФ-излучение как факторы, влияющие на концентрацию ТФХ [83].

Распределение различных видов макроводорослей зависит от глубины воды. Положения, расположенные выше по берегу в литорали или литорали, более стрессогенны, так как виды, произрастающие там, должны выдерживать многократные изменения абиотических факторов, обусловленные приливными изменениями. Например, иссушающее действие воздуха, высокая солнечная освещенность (во время отлива), изменения солености и температуры, а в условиях низких температур воздуха, в том числе и заморозки. Ниже минимальной отметки воды увеличение глубины приводит к очень быстрому уменьшению интенсивности света и уменьшению воздействия излучения.

Водоросли, растущие в зоне приливов и отливов, менее чувствительны к УФ-излучению и быстрее восстанавливаются после солнечного стресса. Тогда как водоросли, произрастающие в сублиторали, более чувствительны к УФ-излучению и хуже восстанавливаются после солнечного стресса [84]. В то же время столб воды обеспечивает защиту. В настоящем исследовании воздействие солнечного света было предположительно более сильным для P. palmata по сравнению с другими видами. Другие исследования показали, что образование МАА напрямую связано с солнечным светом [85], защищая организмы от УФ-А и УФ-В-излучения. Кроме того, было показано, что удельное количество МАК уменьшалось с увеличением глубины сбора. Известно, что водоросли, такие как A. esculenta, растут в верхней сублиторальной зоне, но также распространяются и на самую нижнюю литорали чуть выше нижней водяной отметки. Это означает, что толща воды обеспечивала более сильную защиту, чем для P. palmata. Кроме того, морфологические характеристики другие, лопасти A. esculenta толще по сравнению с двумя другими видами. U. lactuca, растущий в основном в приливной и сублиторальной областях, способен к фотосинтезу и росту при очень низкой освещенности. Было заявлено, что воздействие УФ-излучения ускоряет восстановление фотосинтетических параметров U. lactuca от негативного воздействия УФА-излучения. Он меньше, проще по строению и живет меньше (3 месяца), чем A. esculenta (5–7 лет) и P. palmata, у которого каждый год появляется новый рост.

Таким образом, можно сделать предположение, что основные различия в свойствах экстрактов связаны с изменением продолжительности жизни, морфологических характеристик и условий роста видов водорослей.

3. Материалы и методы

3.1. Материалы

исландскийводорослиs U. lactuca (зеленые водоросли), A. esculenta (бурые водоросли) и P. palmata (красные водоросли) были предоставлены исландской голубой мидией иВодоросли, которая собирала водоросли в Брейдафьордюре (Западная Исландия). После сбора водоросли сушили (примерно до 90 процентов сухого материала), измельчали ​​и доставляли в вакуумной упаковке. Образцы до использования хранились в сухом и темном месте при комнатной температуре.

Тирозиназаиз грибов, L-3,4-дигидроксифенилаланин (L-ДОФА), эластаза из поджелудочной железы свиньи, аскорбиновая кислота, N-сукцинил-Ала-Ала-Ала-п-нитроанилид (AAAPVN), гиалуронидаза из бычьих семенников , кверцетин, -токоферол, дубильная кислота, 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH), 2,4,6-трипиридил-s-триазин (TPTZ), Trolox, Folin-Ciocalteu реагент, галловая кислота и набор для колориметрического анализа активности коллагеназы (MAK293) были приобретены у Sigma-Aldrich Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Натриевую соль гиалуроновой кислоты приобретали у MakeingCosmetics (Редмонд, Вашингтон, США). Все другие использованные химикаты и реагенты были аналитической чистоты и получены от VWR International, LLC. Деионизированную воду (Elix® Essential, Merck, Дармштадт, Германия) использовали для экстракции и приготовления растворов на водной основе.

3.2. Экспериментальная дизайн

Факторный дизайн был использован для оценки воздействия видов исландских водорослей (U. lactuca, A. esculenta, P. palmata) и экстракции (экстракция горячей водой (HW, 95 ◦C)), экстракции с помощью PEF (PEF) и комбинации обоих методов. методы (PEF плюс HW), на состав экстракта и биологическую активность (таблица 6). Экстракцию проводили в трех повторах для каждой группы, и каждый дубликат экстракта анализировали в трех повторах.

3.3. Экстракция биоактивных веществ из исландских водорослей

Эксплуатация биомассы макроводорослей на разных уровнях побудила ученых исследовать более экологичные, эффективные и экономичные методы добычи, основанные на подходах к зеленой экстракции. В этой работе экстракция с помощью PEF оценивалась как новый и экологичный метод получения функциональных экстрактов, тогда как для сравнения использовалась традиционная экстракция горячей водой. Кроме того, было изучено влияние комбинации обоих методов, обработки макроводорослей ПЭФ с последующей традиционной экстракцией горячей водой, на биоактивное восстановление. Из-за ожидаемой электропорации, происходящей в клеточных мембранах после физической обработки, последующая экстракция горячей водой может дополнительно способствовать высвобождению внутриклеточного материала [86], увеличивая выход экстракции. Для материалов требуется некоторое время после обработки. диффундировать из клеток [87,88], и в этом эксперименте суспензии выжидали в течение ночи до отделения жидкости (экстракта) от пульпы.

Что касается экстракционной среды, для получения экстракции использовали дистиллированную воду.водорослиэкстракты для преодоления ограничений, касающихся использования токсичных и органических растворителей. Вода оказалась хорошим растворителем для экстракции ряда биологически активных соединений изводорослис [46,89–91] и является экологически чистым. Кроме того, вода обычно используется для экстракции с помощью PEF, поскольку она является хорошим проводником электричества.

3.3.1. Процедуры извлечения

Для каждой реплики в каждой группеводорослиs (15 г) замачивали в течение ночи при комнатной температуре (22°C) в деионизированной воде (300 мл). Затем суспензию обрабатывали PEF (PEF), нагревали (HW) или одновременно обрабатывали PEF и нагревали (PEF плюс HW). Суспензии выдерживали в течение ночи в холодильнике с последующим фильтрованием через бумажный фильтр грубой очистки (20 мкм). Затем фильтраты (экстракты) хранили при 4 ◦C до анализа.

Импульсная экстракция с помощью электрического поля осуществлялась с помощью собственного генератора импульсов. Он имел конденсатор FuGHCK-200-2000 (FuG Elektronik GmbH, Розенхайм, Германия) и искровой разрядник (18,5 кВ OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Визе-Баден, Германия). Аппаратура ФЭП генерировала импульсы экспоненциального затухания длительностью 0,96 мкс и амплитудой 18 кВ. Для обработки суспензий электрическим полем 8 кВ/см с частотой 1,2 Гц в течение 10 мин использовали камеру для обработки из плексигласа с размерами (Д х В х Ш) 20 х 8 х 2,5 см, с кратчайшим расстоянием между пластинчатыми электродами.

HW-экстракты готовили путем нагревания суспензии в химическом стакане на водяной термостатической бане и выдерживали при 95 ◦C в течение 45 мин. Для комбинированной обработки импульсным электрическим полем и нагреванием суспензии обрабатывали ИЭФ, затем помещали в химический стакан, нагревали на водяной бане и выдерживали при 95 ◦С в течение 45 мин.

3.3.2. Измерения проводимости, pH и температуры

Электропроводность и рН суспензий морских водорослей измеряли после замачивания и после обработки экстракцией при комнатной температуре с использованием рН-метра (настольный измеритель pH/проводимости OrionStar™ A215, Thermo Scientific, Уолтем, Массачусетс, США), оснащенного датчиком проводимости и Комбинированный триодный электрод pH/ARC. Кроме того, регистрировались изменения температуры в результате обработки.

3.4. Спектральные профили экстрактов морских водорослей

Спектры поглощения различных экстрактов морских водорослей в УФ-видимой области измеряли в диапазоне от 200 до 450 нм с использованием двухлучевого спектрофотометра Thermo Scientific Evolution 350 UV Vis (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США) с кварцевыми кюветами диаметром 1 см. Для каждого экстракта морских водорослей выполняли три сканирования.

3.5. Определение общего содержания полифенолов

Общее содержание фенолов (TPC) вводорослиЭкстракты определяли с использованием реагента Фолина-Чокальтеу по слегка модифицированному методу, описанному Чжаном [92], с использованием спектрофотометра Multiskan Sky Microplate (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Объем 20 мклводорослиэкстракт или серийный стандартный раствор смешивали со 100 мкл реактива Фолина-Чокальтеу (10% в дистиллированной воде). Через 5 минут добавляли 80 мкл 7,5-процентного (по объему) раствора карбоната натрия. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре и темноте в течение 30 мин. Поглощение измеряли при длине волны 760 нм. В качестве контроля использовали дистиллированную воду. Для определения общего содержания фенолов использовали стандартную кривую галловой кислоты, выраженную в мкг эквивалентов галловой кислоты (ЭАК) на грамм сухого материала (мкг ЭГА/г сух. массы).

3.6. Определение общего содержания флавоноидов

Общее содержание флавоноидов (ОСФ) вводорослиэкстрактов определяли методом, описанным Камтекаром [93] и адаптированным для 96-луночных микропланшетов. Вкратце, объем 25 мкл экстракта морских водорослей или серийного стандартного раствора смешивали с 100 мкл нитрита натрия (0,375% масс./об.). Через 5 мин к смеси добавляли 25 мкл хлорида алюминия (3% масс./об.) и инкубировали в течение 6 мин при комнатной температуре. Затем к смеси добавляли 100 мкл гидроксида натрия (2% масс./об.) и перемешивали. Сразу же измеряли поглощение при длине волны 510 нм. В качестве контрольных образцов использовали дистиллированную воду и этанол. Стандартную кривую кверцетина (растворенного в этаноле) использовали для определения общего содержания фенолов и выражали в мкг эквивалентов кверцетина (КЭ) на грамм сухого материала (мкг КЭ/г сухой массы).

3.7. Определение содержания углеводов

Содержание свободных сахаров измеряли по методике [94] с небольшими изменениями. К 100 мкл образца или стандартного раствора добавляли 50 мкл раствора фенола (4%) и 250 мкл серной кислоты (96%). После 10 мин инкубации при комнатной температуре считывали оптическую плотность смеси при 490 нм. Стандартную кривую глюкозы использовали для определения общего содержания углеводов и выражали в мг эквивалентов глюкозы (GluE) на грамм сухого материала (мг GluE/г сухой массы).

3.8. Антиоксидантные свойства экстрактов морских водорослей

3.8.1. Анализ поглощения свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH)

антиоксидантактивности (DPPH)водорослиэкстрактов определяли по ранее описанной методике [94] с некоторыми модификациями. Вкратце, 200 мкл 10,825 × 10-5 М раствора DPPH добавляли к 100 мкл образца (1:1 в метаноле) в 96-луночном планшете. Такой же объем DPPH смешивали с 50 мкл стандарта плюс 50 мкл метанола. Затем образцы и стандарт инкубировали в темном месте при комнатной температуре в течение 30 мин. Поглощение измеряли при длине волны 517 нм. В качестве холостого опыта использовали дистиллированную воду. Способность удалять радикал DPPH рассчитывали по следующему уравнению:

Эффект очистки (в процентах)=(1 – (образец – контрольный образец)/(контрольный – контрольный образец с амэтанолом)) × 100 (1)

где Aконтроль — это абсорбция контроля (раствор DPPH без образца), образец A — это поглощение тестируемого образца (раствор DPPH плюс тестируемый образец), контрольный образец A — это поглощение только образца (образец без раствора DPPH) а холостой образец с аменолом представляет собой поглощение только метанола. Коммерческийантиоксидантs (аскорбиновая кислота, галловая кислота и -токоферол) использовали в качестве положительных контролей.

цистанхе являются антиоксидантами

3.8.2. Анализ антиоксидантной способности, восстанавливающей ионы железа (FRAP)

Активность FRAP измеряли по методу Benzie and Strain [95]. Вкратце, ацетатный буфер (300 мМ, pH 3,6), 2,4,6-трипиридил-s-триазин (TPTZ) 10 мМ в 40 мМ HCl и FeCl3·6H2O (20 мМ) смешивали в соотношении 10:1:1, чтобы получить рабочий FRAPагент. Реакционную смесь инкубировали при 37°С в течение 10 мин. 50 мкл образца из каждого экстракта смешивали со 150 мкл рабочего раствора FRAP в течение 8 мин при комнатной температуре. Поглощение окрашенного продукта Ferrous-TPTZ измеряли при длине волны 593 нм. значения FRAPводорослиЭкстракты выражали в мкМ эквивалентов тролокса (TE) на грамм сухого материала.

3.8.3. Анализ 2,2-азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоновой кислоты) (ABTS)

Анализ проводили по протоколу обесцвечивания ABTS [76] с некоторыми модификациями. Катион-радикал ABTS (ABTS. plus) получали путем взаимодействия ABTS (66 мг) с 1 0 мл раствора персульфата калия (2,45 мМ). Перед использованием смесь оставляли в темноте при комнатной температуре на 12–16 ч. АБТС. плюс раствор разбавляли водой до поглощения 0,700 при 734 нм. Реакционную смесь (200 мкл) переносили на микропланшет, добавляли 50 мкл образца, а затем 150 мкл раствора реагента. Планшет встряхивали в течение 10 с при средней скорости и измеряли оптическую плотность при 734 нм после 5 мин инкубации при комнатной температуре. Стандартную кривую получали путем построения графика ингибирования A734 нм стандартов Trolox в зависимости от их концентраций. Эквивалент ТролоксаантиоксидантЗначение емкости (TEAC) образцов рассчитывали с использованием уравнения, полученного из линейной регрессии стандартной кривой, заменяющей значения A734nm для каждого образца:

TEAC (мкМ)=(ингибирование образца A734 нм − точка пересечения)/наклон (2)

антиоксидантактивность выражали в единицах концентрации ТЭАЦ, мкмоль/г сухой массы водоросли.

3.9. Антиферментная активность экстрактов морских водорослей

3.9.1. Анализ ингибирования коллагеназы

Набор для колориметрического анализа активности коллагеназы (MAK293), приобретенный у Sigma Aldrich, использовали для определения ингибирования коллагеназыводорослиэкстракты. Набор измерял активность коллагеназы с использованием синтетического пептида (FALGPA), который имитирует структуру коллагена. Процедуру проводили согласно инструкции к набору.

3.9.2. Анализ ингибирования эластазы

Ингибирование эластазыводорослиs-экстракты исследовали в ТРИС-буферном растворе модифицированным методом, как описано ранее [96]. Вкратце, 100 мкл 0,1 М буферного раствора ТРИС (pH 8,0), 25 мкл эластазы (1 ЕД/мл в ТРИС-буфере) и 25 мкл экстрактов образцов смешивали и инкубировали в течение 15 мин при 30°C перед добавлением субстрата для начала реакции. По истечении времени инкубации добавляли 50 мкл 2 мМ раствора AAAPVN. Затем контролировали поглощение при 420 нм в течение 20 минут с помощью устройства для считывания микропланшетов при постоянной температуре 30°С. Наконец, ингибирование эластазы рассчитывали в процентах по уравнению:

процент ингибирования=[(∆Abs/мин контроль − ∆Abs/мин образец)/∆Abs/минконтроль] × 100 (3)

где Abscontrol представляет собой оптическую плотность анализа с использованием буфера вместо ингибитора (образца), а Abs sample представляет собой оптическую плотность экстрактов образца. Кверцетин использовали в качестве положительного контроля. ТРИС-буфер использовали в качестве холостого опыта.

последствияЭкстракт цистанхе:против старения

3.9.3. Анализ ингибирования тирозиназы

Тирозиназаингибиторный анализ проводили по методике, описанной ранее [66], с использованием L-ДОФА в качестве субстрата. 20 мкл образца, 10 мкл грибатирозиназараствора (50 ЕД/мл в фосфатном буфере) и 80 мкл фосфатного буфера (pH=6.8) смешивали в микропланшете и предварительно инкубировали при 37°С в течение 5 мин. Затем добавляли 90 мкл L-ДОФА (2 мг/мл). Образование дофахрома немедленно отслеживали в течение 20 мин при 475 нм в микропланшетовом ридере при постоянной температуре 37 ◦C. Процент ингибированиятирозиназафермент рассчитывали по уравнению:

процент ингибирования=[(∆Ат/минимальный контроль − ∆Ат/мин образец)/∆Ат/минимальный контроль] × 100 (4)

где контроль Abs представляет собой оптическую плотность анализа с использованием буфера вместо ингибитора (образца), а Abs образца представляет собой оптическую плотность экстрактов образца. В качестве положительного контроля использовали кверцетин. В качестве холостого опыта использовали фосфатный буфер.

3.9.4. Анализ ингибирования гиалуронидазы

Ингибирующую активность гиалуронидазы измеряли, как описано ранее [66] с небольшими изменениями. Объем 100 мкл гиалуронидазы семенников крупного рогатого скота типа-1-S (2100 Ед/мл), растворенной в 0. 1 М ацетатный буфер (рН 3,5) смешивали со 100 мкл экстракта и инкубировали при 37°С в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли 200 мкл 6 мМ хлорида кальция, затем смесь инкубировали при 37°С в течение 20 мин. Эту Ca2 плюс активированную гиалуронидазу обрабатывали 250 мкл гиалуроната натрия (1,2 мг/мл), растворенного в 0,1 М ацетатном буфере (pH 3,5), а затем инкубировали на водяной бане при 37°C в течение 40 мин. К реакционной смеси добавляли 50 мкл 0,9 М гидроксида натрия и 100 мкл 0,2 М бората натрия и затем инкубировали на кипящей водяной бане в течение 5 мин. После охлаждения до комнатной температуры к реакционной смеси добавляли 250 мкл раствора ρ-диметиламинобензальдегида (DAMB). Раствор DAMB готовили путем растворения 0,25 г DAMB в 21,88 мл 100-процентной уксусной кислоты и 3,12 мл 10 н. соляной кислоты. Контрольной группе вместо экстракта вводили 100 мкл 5% воды. Поглощение измеряли при длине волны 585 нм через 45 мин. Ингибирование фермента в процентах рассчитывали по следующему уравнению:

процент ингибирования=[(Abscontrol − Abssample)/Abscontrol] × 100 (5)

где контроль Abs представляет собой оптическую плотность анализа с использованием буфера вместо ингибитора (образца), а Abs образца представляет собой оптическую плотность экстрактов образца. Дубильная кислота используется в качестве эталона.

3.10. Статистический анализ

Среднее значение трехкратного анализа каждого экстракта рассчитывали и использовали для определения средних значений и стандартных отклонений для каждой группы (n {{0}}). Общие линейные модели (GLM) для фиксированных факторов применялись для оценки основных эффектов и двустороннего взаимодействия экспериментальных факторов (видов и методов извлечения) на измеряемые переменные. Кроме того, ANOVA и критерий Тьюки-Крамера использовались для выявления значимых (p < 0,05)="" различий="" между="" группами.="" корреляция="" пирсона="" использовалась="" для="" оценки="" линейной="" зависимости="" между="" переменными.="" анализ="" главных="" компонентов="" (pca)="" использовался="" для="" выявления="" структуры="" взаимосвязи="" между="" измеряемыми="" переменными="" и="" экспериментальными="" факторами.="" pca="" сводит="" объемные="" данные="" к="" небольшому="" набору="" линейных="" комбинаций="" связанных="" переменных="" (т.="" е.="" факторов)="" на="" основе="" закономерностей="" корреляции="" между="" исходными="" переменными.="" полученные="" комбинации="" линейных="" атрибутов="" можно="" использовать="" для="" профилирования="" конкретных="" характеристик="" продукта="" на="" основе="" изучаемых="" переменных.="" все="" статистические="" анализы="" проводились="" с="" использованием="" ncss="" 2020="" statisticalsoftware="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" кейсвилл,="" юта,="">

экстракт цистанхе против старения

4. Выводы

Результаты этого первого скринингового эксперимента показали потенциал трех исландскихводоросливиды, оказывая эффективное благотворное воздействие несколькими путями. Зеленый подход, разработанный с использованием водных импульсных электрических полей, продемонстрировал результаты, аналогичные традиционной экстракции горячей водой, демонстрируя несколько преимуществ, таких как нетепловой характер и более короткое время экстракции (10 мин против 45 мин). Среди трех видов водорослей бурые макроводоросли A. esculenta показали самое высокое содержание TPC и TFC, а также самые высокиеантиоксидантКроме того, водные экстракты A. esculenta проявляли лучшую ингибирующую активность, чем P. palmaria и U. lactuca, в отношении коллагеназы, эластазы, тирозиназы и гиалуронидазы, что является наиболее многообещающим.водоросливиды с отличным антиферментативным действием для их использования при отбеливании кожи,против старенияи здоровье кожи. Интересно, что А. Экстракты esculenta, полученные методом PEF, продемонстрировали ингибирование коллагеназы на 91%, что выше ингибирующей активности, проявляемой традиционной экстракцией горячей водой, и даже выше, чем у ингибитора, входящего в состав коммерческого набора. В заключение, наше предварительное исследование предполагает, что исландскийводорослиЭкстракты на основе, особенно экстракты из бурых макроводорослей A. esculenta, полученные водной экстракцией с помощью импульсных электрических полей, являются потенциальными функциональными ингредиентами, которые могут быть использованы в качестве активных соединений для косметических и космецевтических составов в ближайшем будущем.

использованная литература

1. Ариеде, М.Б.; Кандидо, ТМ; Джакоме, ALM; Веласко, МВР; де Карвалью, JCM; Бэби, А.Р. Косметические свойства водорослей — Обзор. Алгал Рез. 2017, 25, 483–487. [Перекрестная ссылка]

2. Маккар, ГЭС; Тран, Г.; Хёзе, В .; Гигер-Ревердин, С.; Лессер, М.; Лебас, Ф.; Анкерс, П. Морские водоросли для рациона скота: обзор. Аним. Кормовая наука. Технол. 2016, 212, 1–17. [Перекрестная ссылка]

3. О'Коннор, Дж.; Мини, С .; Уильямс, Джорджия; Хейс, М. Извлечение белка из четырех различных водорослей с использованием трех различных стратегий физической предварительной обработки. Молекулы 2020, 25, 2005. [CrossRef]

4. Максимо П.; Феррейра, Л.М.; Бранко, П.; Лима, П.; Лоуренсо, А. Вторичные метаболиты и биологическая активность инвазивных макроводорослей Южной Европы. Mar. Drugs 2018, 16, 265. [CrossRef]

5. Баркиа И.; Саари, Н.; Мэннинг, С.Р. Микроводоросли для ценных продуктов для здоровья и питания человека. Мар. Наркотики 2019, 17, 304. [CrossRef]

6. Гомес-Завалья, А.; Прието Лаге, Массачусетс; Хименес-Лопес, К.; Меджуто, Дж. К.; Симал-Гандара, Дж. Потенциал морских водорослей как источника функциональных ингредиентов пребиотической и антиоксидантной ценности. Антиоксиданты 2019, 8, 406. [CrossRef] [PubMed]

7. Салехи, Б.; Шарифи-Рад, Дж.; Сека, ПОД; Пинто, DCGA; Михалак, И.; Тринконе, А .; Мишра, АП; Нигам, М .; Зам, В .; Мартинс, Н. Текущие тенденции в отношении морских водорослей: взгляд на химический состав, фитофармакологию и применение в косметике. Molecules2019, 24, 4182. [CrossRef]

8. Газали, Э.; Скоро ПК; Мутум, Д.С.; Нгуен, Б. Здоровье и косметика: изучение ценности потребителей при покупке органических средств личной гигиены. Дж. Розничная торговля. потреблять. Серв. 2017, 39, 154–163. [Перекрестная ссылка]

9. Амберг, Н.; Фогарасси, С. Поведение зеленых потребителей на косметическом рынке. Ресурсы 2019, 8, 137. [CrossRef]

10. Перейра Л. Морские водоросли как источник биоактивных веществ и терапия по уходу за кожей — космецевтика, альготерапия и талассотерапия. Косметика 2018, 5, 68. [CrossRef]

11. Мартинс, А.; Виейра, Х .; Гаспар, Х .; Сантос, С. Продажи морских натуральных продуктов в фармацевтической и космецевтической промышленности: советы для достижения успеха. Mar. Drugs 2014, 12, 1066–1101. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

12. Агатонович-Кюстрин, С.; Мортон, Д. Космецевтика, полученная из биоактивных веществ, содержащихся в морских водорослях. Океанография 2013,1,106.

13. Ван, Х.-М.Д.; Чен, К.-К.; Хьюн, П .; Чанг, Дж.-С. Изучение потенциала использования водорослей в косметике. Биоресурс. Технол. 2015, 184, 355–362. [Перекрестная ссылка]

14. Джахан А.; Ахмад, ИЗ; Фатима, Н.; Ансари, Вирджиния; Ахтар, Дж. Биоактивные соединения водорослей в космецевтической промышленности: обзор. Phycologia 2017, 56, 410–422. [Перекрестная ссылка]

15. Морон, Дж.; Алфеус, А .; Васконселос, В.; Мартинс, Р. Раскрытие потенциала цианобактерий в косметике и космецевтике — новый биоактивный подход. Алгал Рез. 2019, 41, 101541. [Перекрестная ссылка]

16. Цикош А.-М.; Джеркович, И.; Молнар, М .; Шубарич, Д.; Йокиц, С. Новые тенденции в применении натуральных продуктов из макроводорослей. Нац. Производ.рез. 2019, 37, 1–12. [Перекрестная ссылка]

17. Тринг, Т.С.; Хили, П.; Нотон, Д.П. Антиколлагеназная, антиэластазная и антиоксидантная активность экстрактов 21 растения. BMCКомплемент. Альтерн. Мед. 2009, 9, 27. [Перекрестная ссылка]

18. Якобсен, К.; Соренсен, AM; Холдт, С.Л.; Ако, CC; Хермунд, источник БД, извлечение, характеристика и применение новых антиоксидантов из морских водорослей. Анну. Преподобный Food Sci. Технол. 2019, 10, 541–568. [Перекрестная ссылка]

19. Кастехон, Н.; Señoráns, FJ Одновременная экстракция и фракционирование омега-3 ацилглицеролов и гликолипидов из биомассы влажных микроводорослей Nannochloropsis gaditana с использованием жидкостей под давлением. Алгал Рез. 2019, 37, 74–82. [Перекрестная ссылка]

20. Мохамед, MEA; Эйсса, AHA Импульсные электрические поля для технологии пищевой промышленности. Структура Функц. Фуд инж. 2012, 11, 275–306.

21. Геада П.; Родригес, Р.; Лурейро, Л.; Перейра, Р.; Фернандес, Б.; Тейшейра, Дж. А.; Васконселос, В.; Висенте, А.А. Электротехнологии, применяемые в биотехнологии микроводорослей — приложения, методы и будущие тенденции. Продлить. Поддерживать. Energy Rev. 2018, 94, 656–668. [CrossRef]

22. Пуджари, М.М.; Барба, Ф.Дж.; Алиакбарян Б.; Донси, Ф .; Патаро, Г.; Диас, Д.А.; Джулиано П. Инновационные альтернативные технологии извлечения каротиноидов из микроводорослей и морских водорослей. Mar. Drugs 2016, 14, 214. [CrossRef] [PubMed]

23. Воробьев, Е.; Лебовка, № 2 — Экстракция из пищевых продуктов и биоматериалов, усиленная импульсной электрической энергией. в инновационных технологиях пищевой промышленности; Кнёрцер, К., Джулиано, П., Смитерс, Г., ред.; Издательство Woodhead: Sawston, Великобритания, 2016 г.; стр. 31–56.

24. Кафербёк, А.; Сметана, С .; де Вос, Р.; Шварц, К.; Топфл, С .; Парняков О. Устойчивое извлечение ценных компонентов из спирулины с помощью технологии импульсных электрических полей. Алгал Рез. 2020, 48, 101914. [Перекрестная ссылка]

25. Парняков О.; Барба, Ф.Дж.; Грими, Н .; Маршал, Л.; Джубо, С .; Лебовка, Н .; Воробьев Е. Экстракция питательно ценных соединений из микроводорослей Nannochloropsis с помощью импульсного электрического поля. с использованием бинарной смеси органических растворителей и воды. Инновации. Пищевая наука. Эмердж. Технол. 2015, 27, 79–85. [Перекрестная ссылка]

26. Шерер Д.; Краст, Д.; Фрей, В.; Мюллер, Г.; Ник, П.; Gusbeth, C. Восстановление белка из ChlorellaVulgaris с помощью импульсного электрического поля (PEF) опосредовано ферментативным процессом после гибели клетки. Алгал Рез. 2019, 41, 101536. [Перекрестная ссылка]

27. Насери, А.; Мариньо, GS; Холдт, С.Л.; Бартела, Дж. М.; Якобсен, К. Экстракция с помощью фермента и характеристика белка из пальмитата красных морских водорослей. Алгал Рез. 2020, 47, 101849. [Перекрестная ссылка]

Пересекать

28. Робин А.; Казир, М .; Мешок, М .; Израиль, А .; Фрей, В.; Мюллер, Г.; Ливни, Ю.Д.; Гольберг, А. Концентраты функциональных белков, извлеченные из зеленых морских макроводорослей Ulva sp., с помощью высоковольтных импульсных электрических полей и механического пресса. ACS Sustain. хим. англ.2018, 6, 13696–13705. [Перекрестная ссылка]

29. Эйнарсдоттир, Р.; Тораринсдоттир, К.А.; Адалбьернссон, Б.В.; Гудмундссон, М .; Мартинсдоттир, Г.; Кристбергссон, К. Влияние параметров обработки с помощью импульсного электрического поля на сырую водную экстракцию Laminaria digitata. Дж. Заявл. Фикол. 2021, 33, 3287–3296. [Перекрестная ссылка]

30. Постма, PR; Сересо-Чинарро, О.; Аккерман, Р.Дж.; Оливьери, Г.; Вийффелс, Р. Х.; Бранденбург, Вашингтон; Эппинк, MHM Биопереработка макроводорослей Ulva Lactuca: экстракция белков и углеводов путем легкой дезинтеграции. Дж. Заявл. Фикол. 2018, 30, 1281–1293. [Перекрестная ссылка]

31. Збинден, МДА; Штурм, БСМ; Норд, РД; Кэри, WJ; Мур, Д.; Шиногл, Х .; Стэгг-Уильямс, С.М. Импульсное электрическое поле (PEF) как предварительная интенсификация для более экологичной экстракции липидов растворителем из микроводорослей. Биотехнолог. биоинж. 2013, 110, 1605–1615. [Перекрестная ссылка]

32. Силве А.; Папахристу, И.; Вюстнер, Р.; Штрасснер, Р .; Ширмер, М.; Лебер, К.; Го, Б .; Интерранте, Л.; Постен, К.; Фрей, В. Экстракция липидов из влажной микроводоросли Auxenochlorella protothecoides с использованием обработки импульсным электрическим полем и смесей этанол-гексан. АлгалРес. 2018, 29, 212–222. [Перекрестная ссылка]

33. Читтапун, С.; Джонжароен, В.; Кхумрангси, К.; Charoenrat, T. Извлечение C-фикоцианина из двух пресноводных цианобактерий с помощью методов замораживания-оттаивания и импульсного электрического поля для повышения эффективности и чистоты экстракции. Алгал Рез. 2020, 46, 101789. [Перекрестная ссылка]

34. Арьи, АНА; Агей, Д.; Аканби, Т.О. Восстановление и использование пигментов морских водорослей в пищевой промышленности. Курс. мнение Food Sci.2018, 19, 113–119. [Перекрестная ссылка]

35. Новацка, М.; Таппи, С .; Виктор, А .; Рыбак, К .; Мищиковская, А.; Чижевский, Дж.; Дроздзал, К.; Витрова-Райчерт, Д.; Тилевич, У. Влияние импульсного электрического поля на экстракцию биоактивных соединений из свеклы. Продукты питания 2019, 8, 244. [CrossRef]

36. Мартинес, Дж. М.; Делсо, К.; Альварес, И.; Расо, Дж. Извлечение ценных соединений из микроорганизмов с помощью импульсного электрического поля. Преподобный Food Sci. Пищевая безопасность 2020, 19, 530–552. [Перекрестная ссылка]

37. Патаро, Г.; Геттель, М .; Стресснер, Р.; Гусбет, К.; Феррари, Г.; Фрей, В. Влияние обработки PEF на экстракцию ценных соединений из микроводорослей C. vulgaris. хим. англ. Транс. 2017, 57, 67–72.

38. Брантон, Н.П.; Луенго, Э. Импульсные электрические поля для извлечения вторичных метаболитов из растений. В импульсных электрических полях для извлечения вторичных метаболитов из растений; Миклавчич, Д., изд.; Springer International Publishing: Cham, Швейцария, 2017; стр. 1–15.

39. Шинер, П.; Черный, КД; Стэнли, MS; Грин, Д.Х. Сезонные изменения химического состава водорослей Laminaria digitata, Laminaria hyperborea, Saccharina latissima и Alaria esculenta. Дж. Заявл. Фикол. 2015, 27, 363–373. [Перекрестная ссылка]

40. Сальгадо, LT; Томазетто, Р .; Синелли, LP; Фарина, М .; Filho, GMA Влияние альгинатов бурых водорослей на способность фенольных соединений поглощать ультрафиолетовое излучение in vitro. Браз. Ж. океаногр. 2007, 55, 145–154. [Перекрестная ссылка]

41. Орфанудаки, М.; Хартманн, А .; Карстен, У .; Ганзера, М. Химическое профилирование микоспориноподобных аминокислот у двадцати трех видов водорослей. Дж. Фикол. 2019, 55, 393–403. [Перекрестная ссылка]

42. Пангестути Р.; Сиахаан, EA; Ким, С.-К. Фотозащитные вещества, полученные из морских водорослей. Mar. Drugs 2018, 16, 399. [CrossRef] [PubMed]

43. Шнайдер Г.; Фигероа, Флорида; Вега, Дж.; Чавес, П.; Альварес-Гомес, Ф.; Корби, Н.; Бономи-Баруфи, Дж. Фотозащитные свойства морских фотосинтезирующих организмов, выращенных в районах с высоким уровнем воздействия ультрафиолета: космецевтические применения. Алгал Рез. 2020,49, 101956. [Перекрестная ссылка]

44. Нисида, Ю.; Кумагаи, Ю.; Мичиба, С.; Ясуи, Х .; Кишимура, Х. Эффективная экстракция и антиоксидантная способность микоспориноподобных аминокислот из пальмитата красной водоросли Dulse Palmaria в Японии. Mar. Drugs 2020, 18, 502. [CrossRef] [PubMed]

45. Рем, Э.; Далглиш, Ф .; Хуот, М .; Маттеоли, С.; Аршамбо, П.; Ламберт Жирар, С.; Пише, М .; Лагунас-Моралес, Дж. Сравнение методов флуоресцентного и дифференциального поглощения LiDAR для обнаружения биомассы водорослей с применением к арктическим субстратам. Датчики и мониторинг InOcean X; Международное общество оптики и фотоники: Беллингем, Вашингтон, США, 2018 г.; Том 10631, с. 106310Z.

46. ​​Ван Т.; Джонсдоттир, Р.; Олафсдоттир, Г. Общие фенольные соединения, удаление радикалов и хелатирование металлов в экстрактах исландских водорослей. Пищевая хим. 2009, 116, 240–248. [Перекрестная ссылка]

47. Беду Г.; Хардуэн, К.; Бурлот, А.С.; Бургуньон, Н. Глава двенадцатая — Биоактивные компоненты из морских водорослей: применение в косметике и будущее развитие. Достижения в области ботанических исследований; Бургуньон, Н., изд.; Academic Press: Кембридж, Массачусетс, США, 2014; Том 71, стр. 345–378.

48. Роледа, М.Ю.; Марфаинг, Х .; Десница, Н.; Йонсдоттир, Р.; Скьермо, Дж.; Ребурс, К.; Ничке, У. Изменения в содержании полифенолов и тяжелых металлов в объемной биомассе дикорастущих и культивируемых морских водорослей: оценка риска для здоровья и последствия для пищевых продуктов. Пищевой контроль 2019, 95, 121–134. [Перекрестная ссылка]

49. Уммат, В.; Тивари, БК; Джайсвал, Аляска; Кондон, К.; Гарсия-Вакеро, М.; О'Доэрти, Дж.; О'Доннелл, К.; Раджаурия, Г. Оптимизация частоты ультразвука, времени экстракции и растворителя для извлечения полифенолов, флоротаннинов и связанной с ними антиоксидантной активности из бурых водорослей. Наркотики, март 2020 г., 18, 250. [CrossRef]

50. Афонсу, К.; Матос, Дж.; Гуарда, И.; Гомеш-Биспо, А.; Гомес, Р.; Кардосо, К.; Гейфао, С .; Дельгадо, И.; Коэльо, И.; Кастанейра, И.; и др. Биоактивный и питательный потенциал Alaria esculenta и Saccharina latissima. Дж. Заявл. Фикол. 2021, 33, 501–513. [Перекрестная ссылка]

51. Котас, Дж.; Леандро, А .; Монтейро, П.; Пачеко, Д.; Фигейринья, А .; Гонсалвеш, AMM; да Силва, Г.Дж.; Перейра, Л. Фенолы морских водорослей: от экстракции до применения. Mar. Drugs 2020, 18, 384. [CrossRef]

52. Фарасат, М.; Хавари-Неджад, РА; Набави, С.М.; Намджуян, Ф. Антиоксидантная активность, общее содержание фенолов и флавоноидов в некоторых съедобных зеленых водорослях с северного побережья Персидского залива. IJPR 2014, 13, 163–170. [В паблике]

53. Маниваннан, К.; Тирумаран, Г .; Деви, ГК; Анантараман, П.; Баласубраманян, Т. Примерный состав различных групп морских водорослей из прибрежных вод Ведалаи (маннарский залив): юго-восточное побережье Индии. Ближний Восток J. Sci. Рез. 2009, 4, 72–77.

54. Мишурцова Л.; Шкрованкова, С.; Самек, Д.; Амброжова, Дж.; Mach˚u, L. Глава 3 — Польза для здоровья полисахаридов водорослей в питании человека. В достижениях в области исследований пищевых продуктов и питания; Генри, Дж., Изд.; Academic Press: Кембридж, Массачусетс, США, 2012; Том 66, стр. 75–145.

55. Лафарга, Т.; Асьен-Фернандес, FG; Гарсия-Вакеро, М. Биоактивные пептиды и углеводы из морских водорослей для пищевых продуктов: встречаемость в природе, выделение, очистка и идентификация. Алгал Рез. 2020, 48, 101909. [Перекрестная ссылка]

56. Мутрипа, С.; Мейнита, MDN; Канг, Дж.-Ю.; Чон, Г.-Т.; Сусанто, AB; Прабово, RE; Хонг, Ю.-К. Производство биоэтанола из гидролизата пальмарии пальмовой с использованием серной кислоты и ферментации на пивных дрожжах. Дж. Заявл. Фикол. 2014, 26, 687–693. [Перекрестная ссылка]

57. Домингес, Х.; Лорет, Е.П. Ulva lactuca, Источник проблем и потенциальных богатств. Mar. Drugs 2019, 17, 357. [CrossRef]

58. Кидджелл, Дж. Т.; Магнуссон, М.; де Нис, Р.; Glasson, CRK Ulvan: Систематический обзор экстракции, состава и функции. Algal Res. 2019, 39, 101422. [Перекрестная ссылка]

59. Хабибулла, ФСК; Алагарсами, С .; Арнус, А .; Якобсен, К. Ферментативная экстракция антиоксидантных ингредиентов из датских морских водорослей и характеристика активных компонентов. Алгал Рез. 2021, 56, 102292. [Перекрестная ссылка]

60. Юань Ю.; Чжан, Дж.; Фан, Дж.; Кларк, Дж.; Шен, П.; Ли, Ю .; Чжан, К. Экстракция фенольных соединений из четырех видов бурых макроводорослей с помощью микроволновой печи и оценка их антиоксидантной активности и ингибирующего действия на -амилазу, -глюкозидазу, панкреатическую липазу и тирозиназу. Междунар. Еда Рез. Дж. 2018, 113, 288–297. [Перекрестная ссылка]

61. Бальбоа, Э.М.; Конде, Э.; Мур, А .; Фальке, Э .; Домингес, Х. Антиоксидантные свойства неочищенных экстрактов и соединений из бурых водорослей in vitro. Пищевая хим. 2013, 138, 1764–1785. [Перекрестная ссылка]

62. Кайнама, Х.; Фатмавати, С.; Сантосо, М.; Папилая, ПМ; Эрсам, Т. Взаимосвязь поглощения свободных радикалов и общего содержания фенолов и флавоноидов в Garcinia lasoar PAM. фарм. хим. Дж. 2020, 53, 1151–1157. [Перекрестная ссылка]

63. Данг, ТТ; Ван Выонг, Q .; Шрайдер, М.Дж.; Бойер, MC; Ван Альтена, ИА; Скарлетт, С. Дж. Оптимизация условий ультразвуковой экстракции содержания фенолов и антиоксидантной активности водоросли Hormosirabankii с использованием методологии поверхности отклика. Дж. Заявл. Фикол. 2017, 29, 3161–3173. [Перекрестная ссылка]

64. Куто, К.; Coiffard, L. Глава 14 — Применение морских водорослей в косметике. В «Морские водоросли в области здравоохранения и профилактики заболеваний»; Флеранс, Дж., Левин, И., ред.; Academic Press: Сан-Диего, Калифорния, США, 2016 г.; стр. 423–441.

65. Цукахара, К.; Такема, Ю.; Мориваки, С.; Цудзи, Н .; Судзуки, Ю.; Фуджимура, Т .; Имокава, Г. Избирательное ингибирование фибробластоэластазы кожи вызывает зависящее от концентрации предотвращение образования морщин, вызванных ультрафиолетовым излучением В. Дж. Расследование. Дерматол. 2001, 117, 671–677. [Перекрестная ссылка]

66. Лиянаараччи, Г.Д.; Самарасекера, JKRR; Маханама, КРР; Гемалал, тирозиназа KDP, эластаза, гиалуронидаза, ингибирующая и антиоксидантная активность лекарственных растений Шри-Ланки для новых космецевтиков. Инд. Культуры Прод. 2018, 111, 597–605. [Перекрестная ссылка]

67. Гупта, PL; Раджпут, М .; Оза, Т .; Триведи, У .; Сангви, Г. Преимущество микробных продуктов в косметической промышленности. Нац. Прод.Биопроспект. 2019, 9, 267–278. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

68. Золгадри, С.; Бахрами, А .; Хасан Хан, MT; Муньос-Муньос, Дж.; Гарсия-Молина, Ф.; Гарсия-Кановас, Ф.; Сабури, А.А. Всесторонний обзор ингибиторов тирозиназы. J. Ингибирование ферментов. Мед. 2019, 34, 279–309. [Перекрестная ссылка]

69. Куто, К.; Coiffard, L. Фикокосметика и другая морская косметика, специальная косметика, созданная с использованием морских ресурсов. Mar. Наркотики 2020, 18, 322. [CrossRef]

70. Сари, ДМ; Анвар, Э .; Arifianti, AE Антиоксидантная активность и ингибитор тирозиназы этанольных экстрактов бурых водорослей (Turbinaria conoides) в качестве осветляющего ингредиента. фарм. Ж. 2019, 11, 379–382. [Перекрестная ссылка]

71. Бреннер, М.; Hearing, VJ Защитная роль меланина от УФ-повреждений кожи человека. Фотохим. Фотобиол. 2008, 84 539–549. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

72. Ли, С.Ю.; Бэк, Н .; Нам, Т.-Г. Природные, полусинтетические и синтетические ингибиторы тирозиназы. J. Ингибирование ферментов. Мед. хим. 2016, 31,1–13. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

73. Ферререс Ф.; Лопес, Г.; Хиль-Искьердо, А .; Андраде, ПБ; Соуза, К.; Муга, Т .; Валентао, П. Экстракты флоротаннина из фукалеса, охарактеризованные с помощью ВЭЖХ-DAD-ESI-MSn: подходы к ингибирующей способности гиалуронидазы и антиоксидантным свойствам. Mar.Drugs 2012, 10, 2766–2781. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

74. Файад, С.; Неме, Р .; Таннури, М .; Леселье, Э.; Пишон, К.; Morin, P. Водные экстракты Macroalga Padina pavonica, полученные жидкостной экстракцией под давлением и экстракцией с помощью микроволновой печи, ингибируют активность гиалуронидазы, как показано капиллярным электрофорезом. J. Хроматогр. А 2017, 1497, 19–27. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

75. Атукорала, Ю.; Ким, К.-Н.; Чон, Ю.-Дж. Антипролиферативные и антиоксидантные свойства ферментативного гидролизата бурой водоросли Ecklonia cava. Пищевая хим. Токсикол. 2006, 44, 1065–1074. [Перекрестная ссылка]

76. Хименес-Эскриг, А.; Гомес-Ордоньес, Э.; Руперес, П. Бурые и красные водоросли как потенциальные источники антиоксидантных нутрицевтиков. заявл. Фикол. 2012, 24, 1123–1132. [Перекрестная ссылка]

77. Каравита Р.; Сиривардхана, Н.; Ли, К.-В.; Хео, М.-С.; Йео, И.-К.; Ли, Ю.-Д.; Чон, Ю.-Дж. Улавливание активных форм кислорода, металлохелатирование, восстановительная способность и свойства ингибирования перекисного окисления липидов различных фракций растворителя из Hizikia fusiformis.Eur. Еда Рез. Технол. 2005, 220, 363–371. [Перекрестная ссылка]

78. Йормалайнен, В.; Хонканен, Т. Изменение естественного отбора в отношении роста и флоротанинов в бурой водоросли Fucus vesiculosus.J. Эволют. биол. 2004, 17, 807–820. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

79. Койвикко Р.; Лопонен, Дж.; Пихлая, К .; Йормалайнен, В. Высокоэффективный жидкостный хроматографический анализ флоротанинов бурой водоросли Fucus vesiculosus. Фитохим. Анальный. 2007, 18, 326–332. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

80. Маречек, В.; Микишка, А .; Хэмпел, Д.; Цейка, П.; Нойвиртов, Дж.; Малахова, А .; Церкал, Р. Методы ABTS и DPPH как инструмент изучения антиоксидантной способности ярового ячменя и солода. Дж. Зерновые науки. 2017, 73, 40–45. [Перекрестная ссылка]

81. Асада, М.; Суги, М .; Иноуэ, М .; Накагоми, К .; Хонго, С .; Мурата, К .; Ири, С .; Такеучи, Т .; Томизука, Н .; Ока, С. Ингибирующее действие альгиновых кислот на гиалуронидазу и высвобождение гистамина из тучных клеток. Бионауч. Биотехнолог. Биохим. 1997, 61, 1030–1032. [CrossRef] [PubMed]

82. Масе Т.; Ямаути, М .; Като, Ю.; Эсаки, Х .; Isshiki, S. Ингибирующий гиалуронидазу кислый полисахарид, выделенный из Porphyridium Purpureum. Сборник исследовательских очерков женского университета Гакуэн Суйшань. Нац. науч. 2013, 44, 105–113.83. Толпезникайте, Э.; Барткевич, В.; Рузаускас, М.; Пилкайте Р.; Вискелис, П.; Урбонавичене, Д.; Завистанавичюте, П.; Зокайтите, Э.; Руйбис, Р.; Барткине Э. Характеристика экстрактов макро- и микроводорослей. Биологически активные соединения и микро- и макроэлементы. Переход от водорослей к экстракту. Продукты питания 2021, 10, 2226. [Перекрестная ссылка]

84. Гомес И.; Хуовинен, П. Морфофункциональные закономерности и зональность южночилийских морских водорослей: важность фотосинтетических и биооптических признаков. Мар. Экол. прог. сер. 2011, 422, 77–91. [Перекрестная ссылка]

85. Карстен, У.; Винке, К. Факторы, контролирующие образование УФ-поглощающих микоспориноподобных аминокислот в пальмитате морской красной водоросли пальмарии со Шпицбергена (Норвегия). Дж. Плант. Физиол. 1999, 155, 407–415. [Перекрестная ссылка]

86. Уммат, В .; Шиваньянам, СП; Раджаурия, Г.; О'Доннелл, К.; Тивари, Б.К. Достижения в области методов предварительной обработки и технологий зеленой экстракции биоактивных веществ из морских водорослей. Тенденции Food Sci. Технол 2021, 110, 90–106. [Перекрестная ссылка]

87. Буссетта, Н.; Лануазель, Ж.-Л.; Бедель-Клутур, К.; Воробьев Е. Извлечение растворимых веществ из виноградных выжимок электрическими разрядами высокого напряжения для извлечения полифенолов: влияние диоксида серы и термической обработки. Дж. Фуд Инж. 2009, 95, 192–198. [Перекрестная ссылка]

88. Геттель, М.; Эйнг, К.; Гусбет, К.; Стресснер, Р.; Фрей, В. Извлечение внутриклеточных ценностей из микроводорослей с помощью импульсного электрического поля. Алгал Рез. 2013, 2, 401–408. [Перекрестная ссылка]

89. Хван, П.-А.; Ву, К.-Х.; Гау, С.-Ю.; Чиен, С.-Ю.; Хван, Д.-Ф. Антиоксидантная и иммуностимулирующая активность водогрейного экстракта водорослей Sargassum epiphyllum. Дж. Мар. Науч. Технол. 2010, 18, 41–46. [Перекрестная ссылка]

90. Сабина Фарвин, KH; Якобсен, К. Фенольные соединения и антиоксидантная активность отдельных видов морских водорослей с побережья Дании. Пищевая хим. 2013, 138, 1670–1681. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

91. Годлевская, К.; Михалак, И.; Тухи, Л.; Хойнацка К. Биостимуляторы роста растений на основе различных методов водной экстракции морских водорослей. Биомед Рез. Междунар. 2016, 2016, 1–11. [Перекрестная ссылка] [PubMed]

92. Чжан, В.; Чжан, Дж.; Шен, Дж.; Сильва, А .; Деннис, округ Колумбия; Барроу, CJ Простой 96-метод микропланшета для оценки общего содержания полифенолов в морских водорослях. Дж. Заявл. Фикол. 2006, 18, 445–450. [Перекрестная ссылка]

93. Камтекар, С.; Кир, В .; Патил, В. Оценка содержания фенолов, содержания флавоноидов, антиоксидантной и ингибирующей активности альфа-амилазы в поступающих на рынок политравных препаратах. Дж. Заявл. фарм. науч. 2014, 4, 61.

94. Нето Р.; Марсаль, К.; Кейрос, А .; Абреу, М.; Сильва, А .; Cardoso, S. Скрининг Ulva Rigida, Gracilaria sp., Fucus vesiculosus и Saccharina latissima в качестве функциональных ингредиентов. Междунар. Дж. Мол. науч. 2018, 19, 2987. [Перекрестная ссылка]

95. Бензи, ИФ; Штамм, JJ Железовосстанавливающая способность плазмы (FRAP) как мера «антиоксидантной силы»: анализ FRAP. Анал.Биохим. 1996, 239, 70–76. [Перекрестная ссылка]

96. Юн Ли, К.; Бхарадвадж, С.; Ядава, У .; Гу Кан, С. Оценка кофеина как ингибитора коллагеназы, эластазы и тирозиназы с использованием подхода in silico и in vitro. J. Ингибирование ферментов. Мед. хим. 2019, 34, 927–936. [Перекрестная ссылка] [PubMed]