Определение ВЭЖХ Эхинакозида в Цистанче Цистанче

Определение ВЭЖХ эхинакозида в Cistanche Cistanche

Для получения дополнительной information:ali.ma@wecistanche.com

Объективный:ВЭЖХ определила количествоэхинакозидвЦистанчеизмельчение в жидком азотном состоянии, а также в естественно высушенном на воздухе состоянии, сравнивая его вдикий цистанчиискусственно культивируемая цистанче.

Методика:использовалась система ВЭЖХ lc-20a (Shimadzu, Япония). Колонна была YMC inertsil ods-sp (4,6 мм × 150 мм,5 мкм;YMC Co Ltd, Япония); Подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-1% муравьиной кислоты (10:15:75); Длина волны обнаружения 334 нм; Расход 0,7 мг · мл-1. Температура колонны 30°С.

Результаты:различные условия обработки оказывали очень четкое влияние на содержание эхинакозида, причем, как правило, более высокие уровни эхинакозида в цистанче под жидким азотом, чем в тех, которые были получены в естественных условиях, высушенных на воздухе; Содержание активных ингредиентов дикихЦистанчебыла значительно выше, чем у искусственной культуры.

Нажмите на продукты из порошка экстракта цистанче

Цистанхе — исчезающий вид, паразитическое растение, населяющее корни Clostridium, Salix rubrum. В Китае Цистанче в основном распространен во Внутренней Монголии, Нинся, Ганьсу и Синьцзяне, с отличной репутацией «пустынного женьшеня», который имеет большую лекарственную ценность. Его основными лекарственными компонентами являются фенилэтаноловые гликозиды, которые можно разделить на эхинакозид, листовой кихозид, цистанч и другие в зависимости от их заместителей. Среди них эхинакозид обладает улучшенной сексуальной функцией, антиоксидантным и свободным радикальным действием, но также обладает некоторыми антиапоптотическими эффектами. С 1980-х годов технология ВЭЖХ, которая обеспечивает простой и быстрый метод разделения фенилэтанолических гликозидов, широко используется при разделении натуральных продуктов. Был выбран метод ВЭЖХ для анализа содержания Цистанхи, основного активного компонента дикой и искусственно культивируемой Цистанхи, в разные периоды роста, обеспечивая научную основу для рационального развития и использования Цистанхе и для эффективной оценки его качества.

Инструменты и реагенты

Shimadzu, Япония lc-20a ВЭЖХ аппарат, lc-20at тандемный двойной плунжерный насос, колонная печь cto-20a, детектор двойной длины волны spda-20a UV Vis; Ультразвуковой очиститель Kunshan kq-100; Ацетонитрил (хроматографически чистый, Тяньцзиньский институт химических исследований Гуанфу); Метанол (хроматографически чистый, Тяньцзиньский институт химических исследований Гуанфу); Муравьиная кислота (хроматографически чистая, Тяньцзиньский институт химических исследований Гуанфу); дистиллированная вода

Контроль: эхинеозид, содержание ≥ 98,43% (Shanghai Yuanye Bio Technology Co., Ltd.).

Пять образцов Цистанхе: искусственно посаженный в течение одного года со следующим Цистанчем, искусственно посаженный для Цистанхе, искусственно высушенный Цистанхе, дикий Цистанхе и искусственно посаженный более трех лет с Цистанхе.

2 метода и результата

2.1 Определение хроматографических условий

С целью отделения пика измеряемого эхинеозида в Хроматограмме ЛК от других веществ, а также для контроля давления насоса и временного табеля в пределах подходящего диапазона была проведена экспериментальная модификация хроматографических условий, и после оптимизационных экспериментов с подвижной фазой был сделан вывод, что чем выше температура, чем короче время удержания и чем ниже концентрация, тем короче давление насоса и тем ниже время удержания, но пиковая высота становилась ниже, что было неблагоприятно для измерения. Подвижной фазой была окончательно определена ацетонитрил-метанол-1% муравьиная кислота (10:15:75), длина волны обнаружения 334 нм, скорость потока 0,7 мл / мин и температура колонны 30 ° C в соответствии с объективными условиями комнатной температуры и максимального давления подшипника насоса, что привело к обильной информации с резкими пиковыми формами и хорошим разделением составляющих.

2.2 Определение колонок

YMC-Inertsil ODS-SP(4,6 мм × 150 мм, 5 μ м;YMC Co Ltd, Япония).

2.3 Подготовка экспериментального раствора

2.3.1 Подготовка стандартных растворов

Соответствующее количество стандарта эхинеозида точно взвешивали и добавляли к подвижной фазе ацетонитрил-метанол-1% муравьиной кислоты (10:15:75) до 0,06 мг · МЛ - 1, 0,05 мг · МЛ - 1, 0,04 мг · МЛ - 1, 0,03 мг · МЛ - 1, 0,02 мг · МЛ - 1, 0,01 мг · МЛ - 1 и 0,005 мг · МЛ - 1 раствор эхинакозида стандарта.

2.3.2 Подготовка испытательного раствора

Соответствующее количество искусственно посаженного свежего цистанча (до одного года), искусственно свежего цистанча и дикого свежего цистанча измельчали в порошок с использованием раствора под жидким азотом; Кроме того, соответствующее количество вышеуказанных 3 цистанчей разрезали на блоки, высушивали естественным образом на воздухе в теневой вентиляции, а после высыхания измельчали и измельчали в порошок. Искусственную сухую цистанчу и дикую в течение трех лет сухую цистанчу измельчали непосредственно в порошок. 0,5 г порошка Цистанче, приготовленного выше, брали и помещали в центрифужную трубку, добавляли 25 мл подвижной фазы, взвешивали и замачивали в течение 30 мин, обрабатывали ультразвуком в течение 40 мин, охлаждали, а затем снова взвешивали, чтобы восполнить недостающий вес подвижной фазой, встряхивали и центрифугировали, а супернатант брали для фильтрации 0,45 μ М микропористой фильтрующей мембраны.

2.4 Графики регрессионных кривых для стандартного образца эхинакозида

Подготовленные стандартные образцы эхинеозида вводили в аппарат ЛК отдельно, а концентрацию контроля (мг · L-1) использовали в качестве абсциссы, и соответствующие пиковые области были оптимированы для построения стандартной кривой, в результате чего получилось уравнение регрессии: y = 66 867 100x-46 360,83, R2 = 0,98637, которое показало эхинеозид при 0,1 ~ 1,2 мкг в пределах хорошего линейного соотношения.

3 Обсуждения

Эхинакозид является одним из основных активных компонентов Цистанхе, который вполне может представлять собой химическую основу фармакологического эффекта Цистанхе, делая соответствующую оценку качества лекарственного материала и его фармакологического эффекта, а также улучшая уместность оценки качества Цистанче.

Различные условия обработки оказывали явное влияние на содержание эхинакозидов, при этом, как правило, более высокие уровни эхинакозида в цистанче находились под жидким азотом, чем в тех, которые были получены в естественных условиях, высушенных на воздухе. Обычная сушка на воздухе уменьшала количество эхинеозида, который мог быть потреблен во время сушки воздуха или преобразован. Чтобы предотвратить снижение содержания активных ингредиентов и гарантировать эффективность Цистанхе, следует выбрать соответствующее лечение.

Последовательно большинство считало, что искусственная среда выращивания Цистанче, а также привычки роста были неотличимы от дикой природы без разницы в качестве, имели тенденцию делать акцент только на урожайности и не анализировали качество. Настоящее исследование показало, что количество искусственно культивируемого эхинакозида цистанче было ниже, чем у дикого эхинакозида цистанче. Самый высокий был 0,3360% дикого цистанча, а самый низкий был 0,007 0% искусственной цистанчи. Поэтому его еще нужно изучать в технологии выращивания для улучшения содержания активных ингредиентов.

Качество Цистанхе зависит от количества его активного ингредиента, эхинакозида, который, в свою очередь, имеет сильную связь с сезоном, временем и способом сбора урожая, поэтому при сборе цистанче следует учитывать статус накопления активного ингредиента и стадию роста и развития. Учитывайте как качество, так и урожайность.

Метод, упомянутый в этой статье, прост, точен, воспроизводим и точен для определения эхинеозида. Полезно для определения Цистанче.