Нейропротекторные свойства 4-аминопиридина

Контактное лицо: Одри Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Электронная почта:audrey.hu@wecistanche.com

Майкл Дитрих, доктор философии, Ханс-Петер Хартунг, доктор медицины, доктор философии, FRCP, и Филипп Альбрехт, доктор медицины

Абстрактный

В качестве антагониста потенциалзависимых калиевых (Kv) каналов 4-аминопиридин (4-AP) используется в качестве симптоматической терапии при некоторых неврологических расстройствах. Улучшение зрительных функций и двигательных навыков, а также уменьшение утомляемости у пациентов с рассеянным склерозом связывают с 4-АП. Его форма с пролонгированным высвобождением (фампридин) одобрена для симптоматического лечения нарушения ходьбы при рассеянном склерозе. Благоприятные эффекты объяснялись блокадой аксональных Kv-каналов, что усиливало проводимость по демиелинизированным аксонам. Однако все больше данных свидетельствует о том, что 4-AP может обладать дополнительными свойствами помимо симптоматического механизма действия. В этом обзоре мы суммируем доклинические и клинические данные о возможных нейропротекторных свойствах 4-АП.

4-Аминопиридин при неврологических заболеваниях

Аминопиридины представляют собой группу моноаминовых и диаминопроизводных пиридина, которые ингибируют потенциалзависимые калиевые (Kv) каналы. В частности, два блокатора калиевых каналов широкого спектра действия 4-аминопиридин (4-AP) и 3,4-аминопиридин (3,4-DAP) использовались в качестве новых исследуемых веществ. при различных неврологических заболеваниях. Несмотря на то, что 3,4-DAP является более сильным антагонистом калиевых каналов, 4-AP легче проникает через гематоэнцефалический барьер1 и имеет клинические преимущества у пациентов с рассеянным склерозом, особенно в отношении улучшения зрительных функций,2 утомляемости. ,3 когнитивные функции,4 и скорость ходьбы.1 Кроме того, сообщалось, что 4-AP облегчает нервную проводимость при неврологических заболеваниях, отличных от рассеянного склероза.5,6

Эффекты цистанхе: защита нейронов

В здоровых аксонах каналы Kv1.1 и Kv1.2 сгруппированы рядом с перехватами Ранвье. 7 Эти каналы обнажаются после демиелинизации и мигрируют через демиелинизированный сегмент. В то же время экспрессия этих каналов увеличивается в несколько раз.8 Такое неправильное перераспределение каналов Kv нарушает передачу потенциалов действия, что приводит к стойкой инвалидности. 4-AP блокирует эти открытые калиевые каналы и, следовательно, усиливает передачу сигнала.9,10Канал Kv1.3 был обнаружен в Т-клетках человека,11 было обнаружено, что он сильно экспрессируется в воспалительных инфильтратах в мозге рассеянного склероза,12 и экспрессируется на макрофагах, микроглии и эффекторных Т-клетках памяти.13 Селективные и неселективные блокаторы каналов Kv1.3 могут, таким образом, обеспечивать иммуномодулирующие свойства путем ингибирования пролиферации клеток и секреции провоспалительных цитокинов.14 Исследования до 2009 г. не смогли установить 4-AP в качестве Симптоматическое лечение рассеянного склероза, потому что уровни препарата в крови у пациентов были непредсказуемы, а чрезмерные дозы были связаны с риском эпилептических припадков и нарушения сознания. впоследствии был одобрен для симптоматического лечения нарушения ходьбы при рассеянном склерозе. Несмотря на признанные симптоматические эффекты, 4-AP может обладать дополнительными защитными свойствами.

Оценка 4-AP с использованием моделей in vitro

In vitro нейропротекторные эффекты 4-AP наблюдались на многочисленных моделях. Когда двигательные нейроны (МН), дифференцированные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток пациентов с боковым амиотрофическим склерозом, несущих мутации гена FUS и SOD1, подвергались воздействию 4-AP, дисбаланс ионных каналов устранялся, уровни активности нейронов повышались, эндоплазматический ретикулум стресс уменьшился, а активация каспаз ослабла. Мутантные МН показали более низкие потоки натрия и отношения Na+/K+, что может быть, по крайней мере частично, причиной их повышенной возбудимости. Это было обратным после 4-обработки АП, что привело к снижению калиевых токов и восстановлению паттернов спонтанной активности и синаптического входа в МН.24 4-Обработка АП уменьшила высвобождение провоспалительных медиаторов из микроглии человека, пораженной амилоидами. бета и защищенные культивированные нейроны гиппокампа крысы, залитые супернатантами микроглии, обработанной бета-амилоидом.25 Производное 4-AP, как сообщается, снижает накопление, окисление, воспаление и активацию Rho-киназы в модели болезни Паркинсона in vitro.26 В других исследованиях in vitro сообщалось, что 4-AP увеличивает фосфорилирование белка, связывающего элемент ответа цАМФ, защищенного от клеточного стресса глутаматом, NMDA и 3-нитропропионовой кислотой, воздействующей на гранулярные нейроны мозжечка новорожденных крыс. Глутамат также приводит к снижению жизнеспособности клеток, предварительно кондиционированных 4-AP, но без значительной активации каспазы-3. Эти наблюдения показали, что 4-AP в первую очередь эффективен против некротической эксайтотоксичности.27 Было также показано, что он защищает первичные культуры нейронов от кислородно-глюкозного голодания или токсичности уабаина/DL-три- -бензилоксиаспарагиновой кислоты.28

нейропротекторный эффект Цистанхе

Доклинические исследования 4-AP in vivo

В нескольких исследованиях изучалось защитное действие 4-AP на различных моделях заболеваний (таблица 1). В моделях повреждения периферических нервов с раздавливанием профилактическое и раннее лечение 4-AP вызывало восстановление скорости нервной проводимости, способствовало ремиелинизации и увеличению площади аксонов. Последние наблюдения были объяснены эффектами, сходными с эффектами, появляющимися после электрической стимуляции, например повышением уровня нейротрофического фактора головного мозга (BDNF). крысы вызывали повреждение нейронов и повышенную активацию микроглии. Было обнаружено, что ежедневное введение 1 мг/кг 4-AP подавляет активацию микроглии и обеспечивает нейропротекцию. Это было связано со способностью 4-AP блокировать неинактивирующий направленный наружу выпрямляющий ток K plus в активированной микроглии и снижать клеточную продукцию провоспалительных цитокинов. {11}}AP, который может быть аннулирован неконкурентным антагонистом рецептора NMDA MK-801 и антагонистом аденозина A1 8-циклопентилтеофиллином. Эти наблюдения предполагают, что рецепторы NMDA имеют отношение к 4-опосредованной АП защите в этой модели. 30 В животной модели аутоиммунной невропатии у крыс Льюис 4-АП улучшал клиническую тяжесть и патологические электрофизиологические данные. Авторы предположили, что защита аксонов обеспечивалась путем блокирования натрий-опосредованных внутренних токов в ранней фазе, потому что высокие мембранные потенциалы в острой фазе воспаления могут быть нейротоксическими. В хронической фазе нервная проводимость потенциально улучшалась за счет блокирования калий-опосредованного внешнего тока.1

Сообщалось, что при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (ЭАЭ), модели иммуноопосредованного воспаления ЦНС, повторяющей основные признаки рассеянного склероза, блокада Kv-каналов ингибирует активацию Т-клеток, потенциально путем блокирования каналов подсемейства Kv1.3 и ослабления демиелинизации аксонов. и дегенерация путем воздействия на канал K.3.1 на астроглии, что потенциально может индуцировать сигнал BDNF. линг. При ЭАЭ, индуцированном протеолипидным белком, у мышей SJL4-обработка АП значительно улучшила цифровые показатели, которые были подтверждены патологически. Было обнаружено, что экспрессия глиального фибриллярного кислого белка подавляется у мышей, получавших 4-AP, а активация Т-клеток и поляризация Th1/17 были смягчены. Однако в модели хронического ЭАЭ, индуцированного пептидом миелиновых олигодендроцитов (MOG) у мышей C57BL/6, 4-АП не изменила течение ЭАЭ.5 В другом исследовании также изучались эффекты {{19} } AP в модели MOG-EAE у мышей C57BL/6 и сообщалось о симптоматических, но не модифицирующих заболевание эффектах. Ни профилактическое, ни терапевтическое лечение 4-AP не ослабляло тяжести течения пальцевого ЭАЭ, тогда как животные, получавшие 4-AP, демонстрировали улучшение подвижности, что оценивалось с помощью анализа следа и вращающегося стержня. Демиелинизация спинного мозга, повреждение нейронов и МРТ изменения объема головного мозга не изменились. Пролиферация, продукция IL17 или IFN-y CD4* T-клеток также не были затронуты.3

Совсем недавно мы продемонстрировали, что, помимо симптоматического воздействия на усиление нервной проводимости, 4-AP может предотвращать нейродегенерацию сетчатки при экспериментальном оптическом неврите, индуцированном пептидом MOG (EAEON) у мышей C5BL6. Используя оптическую когерентную томографию in vivo ( ОКТ), тестирование зрительных функций и гистологическая оценка, мы наблюдали снижение степени дегенерации внутренних слоев сетчатки в моделях EAEON как при профилактическом, так и при терапевтическом введении 4-AP. В этой модели 4-AP потенцировал эффекты иммуномодулирующего лечения модулятором сфингозин-1-фосфатных рецепторов финголимодом, предполагая независимые способы действия. Разумно предположить, что этот эффект не ограничивается только финголимодом и применим к 4-АП в сочетании с другими иммуномодулирующими препаратами при РС. В нашем исследовании гистология зрительного нерва показала, что, в отличие от финголимода,4-AP не оказывал значительного влияния на активацию микроглии и/или инфильтрацию лимфоцитов или макрофагов, что свидетельствует о том, что защитные эффекты не были связаны с противовоспалительным действием. действия. В соответствии с этим лечение 4-АП не мешало индукции ЭАЭ, что подтверждается анализом повторной стимуляции Т-клеток. Кроме того, мы наблюдали значительную защиту от нейродегенерации сетчатки при лечении 4-AP также в модели невоспалительного повреждения зрительного нерва, тогда как здесь финголимод не оказывал никакого эффекта. Интересно, что in vitro лечение 4-AP не смогло напрямую защитить ганглиозные клетки сетчатки. Вместо этого гистология и эксперименты in vitro показали 4-AP-опосредованную стабилизацию клеток-предшественников миелина и олигодендроцитов. Этот эффект был связан с усилением притока кальция и ядерной транслокацией ядерного фактора активированных Т-клеток (NFAT). Ранее было показано, что 4-AP регулирует гомеостаз кальция, повышая уровень инозитолтрифосфата и тем самым вызывая высвобождение кальция из внутриклеточных запасов кальция. Тем не менее, дополнительные исследования 4-АП на моделях демиелинизации, например, при лечении купризоном или на моделях трансгенных мышей с индуцируемой абляцией олигодендроцитов, могут быть полезны для подтверждения этих состояний. Существующие исследования на животных моделях демиелинизации в основном сосредоточены на способности 4-AP восстанавливать потенциал действия, но отсутствуют дальнейшие исследования олигодендроглиальных клеток (рисунок).

Важно отметить, что дозы, необходимые для получения этих эффектов in vitro, примерно 100-1,000x выше, чем концентрация, достигаемая у пациентов. Следовательно, для наблюдений, сделанных in vivo и in vitro, могут иметь значение дополнительные или другие механизмы. К ним относятся, помимо прочего, снижение рассеяния энергии демиелинизированными аксонами из-за блокирования утечки калия и более сильные защитные и репаративные способности мозга, косвенно возникающие в результате повышенной подвижности и большей физической нагрузки.

Кроме того, нельзя исключать иммуномодулирующие механизмы 4-AP, особенно потому, что сниженная активация Т-клеток и поляризация Th1/17 были продемонстрированы при PLP-индуцированном ЭАЭ у мышей SJL.3 Кроме того, доклинические исследования других моделей заболевания обнаружили ослабленная активация и снижение высвобождения провоспалительных медиаторов микроглией. Эти противоречивые результаты подчеркивают различные патологические механизмы различных животных моделей, где иммунные клетки более или менее восприимчивы к стратегиям лечения. Расхождения между нашими результатами и предыдущими отчетами только о симптоматических эффектах при ЭАЭ, вызванном пептидом MOG, у мышей C57BL6» можно, по крайней мере, частично объяснить (1) различиями в дозировке, поскольку другие использовали дозы 100 мкг и 600 мкг/мышь/день, тогда как мы вводили 250 мкг/мышь/день; (2) продолжительность лечения (40, 60 и 90 дней по Göbel et al.*, Moriguchi et al.3 и Dietrich et al., «соответственно); и (3) количество MOG, используемого для иммунизации, поскольку мы использовали 200 мкг MOG на мышь, тогда как другие использовали только 100 мкг MOG на мышь. Недавние исследования сосредоточены на роли кишечной микробиоты во влиянии на индукцию и тяжесть ЭАЭ путем изменения баланса эффекторных и регуляторных Т- и В-клеток. Микробиом грызунов может различаться в разных вивариях, что приводит к различиям в тяжести, течении и, возможно, даже ответе на терапию ЭАЭ. В совокупности эти факторы могут объяснить неоднородность результатов исследования.

нейропротекторный эффект Цистанхе

Клинический подход к 4-АП у пациентов с РС

Несколько клинических испытаний, проведенных с 1980-х годов, уже показали благотворное влияние 4-АП на людей с РС. Среди прочего, они выявили улучшение моторных40-2 и зрительных функций-44 и утомляемость.5-7 Однако ограничения исследования, отсутствие однородного дизайна исследования и небольшое количество пациентов не позволили одобрить {{ 5}}AP обычными властями и привели к использованию не по прямому назначению в течение более 3 десятилетий.4 С другой стороны, некоторые из этих исследований способствовали разработке лекарственной формы с замедленным высвобождением (SR-4-AP или фампридин), поскольку они обнаружили, что уровни исходного соединения с немедленным высвобождением в плазме непостоянны и непредсказуемы. Первое клиническое исследование с SR-4-AP было проведено в 1997 году Schwid et al.,49 продемонстрировав значительное улучшение скорости ходьбы и тенденцию к увеличению мышечной силы.

Технологическая система пролонгированного действия была разработана компанией Elan Pharmaceuticals. В нем использовалась так называемая матричная система абсорбции лекарств, состоящая из запатентованной полимерной матрицы, которая контролирует высвобождение путем диффузии и эрозии желудочно-кишечными ферментами. Это привело к более низким пиковым уровням препарата в плазме и большей продолжительности действия.1 Первоначально SR-4-AP тестировали в 4 испытаниях. В 2007 году Гудман и соавт. 1 выполнили дозировку с увеличением дозы на 5 мг от 10 до 40 мг два раза в день у 36 пациентов с РС. В тесте ходьбы на 25 футов на время (T25FW) значительных изменений не наблюдалось, тогда как апостериорный анализ, преобразующий данные в скорость ходьбы (фут/с), достиг значимости. Кроме того, наблюдалось улучшение самооценки утомляемости. В исследовании по сравнению доз в 2008 г. (рандомизированном, двойном слепом, плацебо-контролируемом) Гудман и др.2 набрали 206 пациентов, получавших плацебо или дозы 10, 15 или 20 мг два раза в день. Опять же, апостериорный анализ, сравнивающий улучшение скорости ходьбы, показал значительно лучшие результаты для всех групп лечения в отдельности и для всех объединенных пациентов, получавших SR{25}}AP, по сравнению с плацебо. Сила Muse была улучшена для групп, получавших 10-мг и 15-мг, но не для групп, получавших 20 мг, по сравнению с субъектами, получавшими плацебо. В 2 последующих клинических испытаниях фазы Ⅲ (21-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое рандомизированное исследование, 301 пациент и 14-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, 239 пациентов) с дозой 10 мг два раза в день. пациенты были разделены на группу респондеров и группу нереспондеров, что определялось постоянным улучшением на T25FW. В обоих исследованиях увеличение скорости ходьбы было значительным по сравнению с группой нереспондеров или плацебо. Кроме того, у респондентов улучшились показатели по 12-Шкале ходьбы по предметам MS (MSWS-12)2122.

В открытом расширенном исследовании этих исследований было продемонстрировано, что клиническое улучшение исчезало после отмены препарата, но возвращалось через 2 недели после возобновления терапии SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, таблетированная форма SR{ {3}}AP получила полное одобрение Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов в январе 2010 г. для улучшения ходьбы у пациентов с рассеянным склерозом, но только условное разрешение на продажу в 2011 г. от Европейского агентства по лекарственным средствам (EMA). На основании упомянутых испытаний одобрение было обусловлено положением о предоставлении более долгосрочных данных об эффективности и безопасности. Поэтому были начаты исследовательская фаза II (MOBILE) и подтверждающая фаза I (ENHANCE).

В предварительном исследовании MOBLE с участием 132 участников было обнаружено улучшение общего впечатления пациента об изменении (PGIC), MSWS-12 и Timed Up and Go (TUG)23. Чтобы оценить долгосрочную эффективность и безопасность Было проведено SR-4-AP, подтверждающее исследование ENHANCE (10 мг дважды в день у 646 пациентов с рассеянным склерозом). В дополнение к улучшениям, о которых сообщалось в исследовании MOBILE, авторы обнаружили значительное улучшение у пациентов, получавших SR -4-AP, по шкале 29-Item MS Impact Scale5. Впоследствии EMA безоговорочно одобрило SR{ {11}}AP для лечения пациентов с рассеянным склерозом с нарушениями ходьбы. Обсервационное исследование фазы ENABLE с участием 901 пациента продемонстрировало, что лечение с помощью SR-4-AP полезно для пациентов с РС посредством самоощущения физического функционирования и психологического здоровья в реальных условиях2 (таблица 2).

Основываясь на многообещающих доклинических данных о защите от нейродегенерации сетчатки, описанной выше, наша группа провела ретроспективное многоцентровое ОКТ-исследование для продольного сравнения нейродегенерации сетчатки между 52 пациентами, получавшими непрерывную 4-AP-терапию, и 51 контрольной группой, которые были сопоставлены по всем соответствующим ковариациям. используя предопределенный алгоритм сопоставления. В соответствии с экспериментальными данными, при одновременной терапии 4-АП дегенерация макулярного слоя нервных волокон сетчатки уменьшилась в течение 2 лет. Однако эти результаты необходимо подтвердить в независимых и идеально проспективных когортных исследованиях, особенно потому, что размер эффекта был низким, а скорость истончения слоя перипапиллярных нервных волокон сетчатки и макулярных ганглиозных клеток/внутреннего плексиформного слоя существенно не различалась между группами. . Эти несоответствия защитного действия 4AP только на mRNFL, но ни на pRNFL, ни на McGill объяснить непросто. Важно отметить, что, поскольку 4AP лицензирован только для улучшения нарушения ходьбы у пациентов с EDSS 3.5-5, проанализированные показатели изменений были исследованы на более поздних стадиях заболевания и без острого неврита зрительного нерва. В таких условиях происходят только очень тонкие изменения сетчатки, и для выявления эффектов лечения потребуются большие когорты. Таким образом, ретроспективное исследование пациентов, безусловно, не имело достаточной мощности для надежного выявления защитных эффектов лечения, и неудивительно, что только один из результатов оказался положительным. Возможно, мРНВС был наиболее чувствительным слоем для обнаружения эффектов лечения.5"

Таким образом, растущий объем данных in vivo предполагает, что 4-AP, в дополнение к его хорошо известным симптоматическим эффектам, путем предотвращения нейродегенерации может изменить течение заболевания EAEON и, возможно, даже у пациентов с РС. Предварительные данные in vitro предполагают участие клеточных уровней кальция и пути NFAT, но необходимы дальнейшие исследования для выяснения точных молекулярных механизмов, лежащих в основе нейропротекторного эффекта 4-AP при иммуноопосредованной воспалительной демиелинизации. Эти результаты могут оказать заметное влияние на стратегии лечения РС, если они будут подтверждены в проспективном рандомизированном контролируемом клиническом исследовании.

эффект Цистанхе

использованная литература

1. Леуссинк В.И., Монтальбан Х., Хартунг Х.П. Восстановление функции аксонов с помощью 4-аминопиридина: клиническая эффективность при рассеянном склерозе и не только. Препараты ЦНС 2018;32:637–651.

2. Хортон Л., Конгер А., Конгер Д. и др. Влияние 4-аминопиридина на зрение у пациентов с рассеянным склерозом и нейропатией зрительного нерва. Неврология 2013; 80: 1862–1866.

3. Морроу С.А., Роузхарт Х., Джонсон А.М. Влияние Fampridine-SR на когнитивную усталость в рандомизированном двойном слепом перекрестном исследовании у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler Relat Disord 2017; 11: 4–9.

4. Брат С.Д., Филли Л., Гейслер О. и др. Положительное влияние фампридина на когнитивные функции, утомляемость и депрессию у больных рассеянным склерозом в течение 2 лет. Дж. Нейрол, 2018 г.; 265: 1016–1025.

5. Хейс К.С., Блайт А.Р., Поттер П.Дж. и др. Доклинические испытания 4-аминопиридина у пациентов с хронической травмой спинного мозга. Параплегия 1993; 31: 216–224.

6. Яки Дж. Ф., Парри Т. Дж., Хуанг З. и др. Дальфампридин улучшает сенсомоторную функцию у крыс с хроническим дефицитом после окклюзии средней мозговой артерии. Инсульт 2013; 44: 1942–1950.

7. Триммер Дж.С., Родс К.Дж. Локализация потенциалзависимых ионных каналов в мозге млекопитающих. Annu Rev Physiol 2004; 66: 477–519.

8. Род Игес-Рангел С., Бравин А. Д., Рамос-Торрес К. М., Бругаролас П., Санчес Род Игес Дж. Э. Исследования взаимосвязи между структурой и активностью четырех новых 4-аминопиридиновых блокаторов К(плюс) каналов. Научный представитель 2020; 10:52.

9. Босток Х., Сирс Т.А., Шеррат Р.М. Влияние ионов 4-аминопиридина и тетраэтиламмония на нормальные и демиелинизированные нервные волокна млекопитающих. J Physiol 1981; 313:301–315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Влияние фампридина на возбудимость аксонов при рассеянном склерозе. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. ДеКурси Т.Э., Чанди К.Г., Гупта С., Кахалан М.Д. Потенциал-зависимые К+-каналы в Т-лимфоцитах человека: роль в митогенезе? Природа 1984; 307: 465–468.

12. Рус Х., Пардо К.А., Ху Л. и соавт. Потенциалзависимый калиевый канал Kv1.3 высоко экспрессируется на воспалительных инфильтратах при рассеянном склерозе головного мозга. Proc Natl Acad Sci USA 2005; 102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J и др. Канал Kv1.3 как ключевая терапевтическая мишень при нейровоспалительных заболеваниях: современное состояние и не только. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulfffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. Потенциалзависимый канал Kv1.3 K(plus) в эффекторных Т-клетках памяти как новая мишень для рассеянного склероза. J Clin Invest 2003; 111: 1703–1713.

15. Бертон Дж.М., Белл С.М., Уокер С.Е., О'Коннор П.В. 4-токсичность аминопиридина при непреднамеренной передозировке у четырех пациентов с рассеянным склерозом. Неврология 2008; 71: 1833–1834.

16. Джонсон Н.К., Морган М.В. Необычный случай отравления 4-аминопиридином. J Emerg Med 2006; 30: 175–177.

17. Schwam E. Серьезная случайная передозировка 4-аминопиридина из-за ошибки аптеки. J Emerg Med 2011; 41: 51–54.

18. Этемадифар М., Сабури М., Чицаз А. и др. Влияние фампридина на риск судорог у больных рассеянным склерозом. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Гудман А.Д., Коэн Дж.А., Кросс А. и соавт. Фампридин-SR при рассеянном склерозе: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с диапазоном доз. Мульт Склер 2007; 13:357–368.

20. Гудман А.Д., Браун Т.Р., Коэн Дж.А. и соавт. Исследование сравнения доз фампридина с замедленным высвобождением при рассеянном склерозе. Неврология 2008;71:1134–1141.

21. Гудман А.Д., Браун Т.Р., Крупп Л.Б. и др. Пероральный фампридин с замедленным высвобождением при рассеянном склерозе: рандомизированное двойное слепое контролируемое исследование. Ланцет 2009; 373: 732–738.

22. Гудман А.Д., Браун Т.Р., Эдвардс К.Р. и соавт. Фаза 3 испытания перорального далфампридина с пролонгированным высвобождением при рассеянном склерозе. Энн Нейрол 2010; 68: 494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Фампридин с пролонгированным высвобождением и ходьба и равновесие при РС: рандомизированное контролируемое исследование MOBILE. Мульт Склер 2016; 22: 212–221.

24. Науджок М., Стансловски Н., Бафлфлер С. и соавт. 4-Аминопиридин-индуцированная активность спасает гиповозбудимые двигательные нейроны от плюрипотентных стволовых клеток, индуцированных пациентом с боковым амиотрофическим склерозом. Стволовые клетки 2016; 34:1563–1575.

25. Франциози С., Рю Дж. К., Чой Х. Б., Радов Л., Ким С.У., МакЛарнон Дж. Г. Эффекты широкого спектра действия 4-аминопиридина для модулирования бета-амилоида1-42-индуцированной клеточной сигнализации и функциональных ответов в микроглии человека. J Neurosci 2006; 26:11652–11664.

26. Ли С., Вэй Д., Мао З. и др. Дизайн, синтез, иммуноцитохимическая оценка и исследование молекулярного докинга нескольких производных 4-аминопиридина в качестве потенциальных нейропротекторных средств для лечения болезни Паркинсона. Bioorg Chem 2017; 73: 63–75.

27. Смит А.Дж., Таускела Дж.С., Стоун Т.В., Смит Р.А. Прекондиционирование 4-аминопиридином защищает гранулярные нейроны мозжечка от эксайтотоксичности. Brain Res 2009; 1294: 165–175.

28. Таускела Дж. С., Эйлсворт А., Хьюитт М., Брюнетт Э., Блондо Н. Отказ и восстановление нейропротекции, вызванной предварительным кондиционированием, при тяжелых инсультоподобных инсультах. Нейрофар микология 2016; 105: 533–542.

29. Ценг К.С., Ли Х., Кларк А. и др. 4-Аминопиридин способствует функциональному восстановлению и ремиелинизации при остром повреждении периферических нервов. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. Лечение in vivo блокатором K+каналов 4-аминопиридином защищает от каинат-индуцированной гибели нейронов за счет активации рецепторов NMDA у мышей. гиппокамп. Нейрофармакология 2005;48:810–821.

31. Моригучи К., Миямото К., Кусуноки С. 4-Аминопиридин улучшает экспериментальный аутоиммунный неврит у крыс Льюис. Дж. Нейроиммунол 2017; 305:72–74.

32. Шмальхофер В.А., Бао Дж., Макманус О.Б. и соавт. Идентификация нового класса ингибиторов потенциалзависимых калиевых каналов Kv1.3 с иммунодепрессантными свойствами. Биохимия 2002;41:7781–7794.

33. Варга З., Компания Т., Папп Ф. и др. Экспрессия калиевых каналов в CD4 человека плюс регуляторные и наивные Т-клетки здоровых людей и больных рассеянным склерозом. Иммунол Лет 2009;124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Подавление воспалительной демиелинизации и дегенерации аксонов путем ингибирования каналов Kv3. Front Mol Neurosci 2017; 10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Аминопиридин улучшает течение экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита с ремиттирующим течением у мышей SJL/J. J Нейроиммунол 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-Аминопиридин улучшает подвижность, но не течение заболевания в модели рассеянного склероза на животных. Exp Neurol 2013; 248: 62–71.

37. Дитрих М., Коска В., Хеккер С. и соавт. Защитные эффекты 4-аминопиридина при экспериментальном оптическом неврите и рассеянном склерозе. Мозг 2020; 143: 1127–1142.

38. Гримальди М., Атзори М., Рэй П., Алкон Д.Л. Мобилизация кальция из внутриклеточных запасов, потенцирование индуцированных нейротрансмиттерами транзиентов кальция и емкостное поступление кальция с помощью 4-аминопиридина. J Neurosci 2001; 21:3135–3143.

39. ван Димен Х.А., Полман К.Х., Кутсер Дж.К., ван Лоенен А.С., Наута Дж.Дж., Бертельсманн Ф.В. 4-Аминопиридин у пациентов с рассеянным склерозом: доза и уровень в сыворотке, связанные с эффективностью и безопасностью. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Дэвис Ф.А., Стефоски Д., Раш Дж. Пероральный прием 4-аминопиридина улучшает клинические признаки рассеянного склероза. Энн Нейрол 1990; 27: 186–192.

41. Стефоски Д., Дэвис Ф.А., Фаут М., Шауф К.Л. 4-Аминопиридин улучшает клинические признаки рассеянного склероза. Энн Нейрол 1987; 21: 71–77.

42. Стефоски Д., Дэвис Ф.А., Фитцсиммонс В.Е., Лускин С.С., Раш Дж., Паркхерст Г.В. 4- Аминопиридин при рассеянном склерозе: длительное введение. Неврология 1991; 41: 1344–1348.

43. Джонс Р.Э., Херон Дж.Р., Фостер Д.Х., Снелгар Р.С., Мейсон Р.Дж. Эффекты 4-аминопиридина у пациентов с рассеянным склерозом. J Neurol Sci 1983; 60: 353–362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM и соавт. Влияние 4-аминопиридина на клинические признаки рассеянного склероза: рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое перекрестное исследование. Энн Нейрол 1992; 32: 123–130.

45. Полман К.Х., Бертельсманн Ф.В., ван Лоенен А.С., Кутсер Дж.К. 4-аминопиридин в лечении больных рассеянным склерозом. Долгосрочная эффективность и безопасность. Arch Neurol 1994; 51: 292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Усталость при рассеянном склерозе: многомерная оценка и ответ на симптоматическое лечение. Мульт Склер 2004; 10: 462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Усталость при прогрессирующем рассеянном склерозе: результаты рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого перекрестного исследования перорального 4-аминопиридина. Мульт Склер 2001; 7: 354–358.

48. Хаузер С.Л., Джонстон С.К. 4-аминопиридин: новая жизнь старого препарата. Энн Нейрол, 2010 г .; 68:А8–А9.

49. Швид С.Р., Петри М.Д., Макдермотт М.П., ​​Тирни Д.С., Мейсон Д.Х., Гудман А.Д. Количественная оценка 4-аминопиридина пролонгированного действия для симптоматического лечения рассеянного склероза. Неврология 1997;48:817–821.

50. Гудман А.Д., Бету Ф., Браун Т.Р. и соавт. Долгосрочная безопасность и эффективность далфампридина при нарушении ходьбы у пациентов с рассеянным склерозом: результаты открытых расширений двух клинических испытаний фазы 3. Мульт Склер 2015; 21: 1322–1331.

51. Хобарт Дж., Цимссен Т., Фейс П. и соавт. Оценка клинически значимых улучшений способности ходить, о которых сообщают сами участники с рассеянным склерозом: результаты рандомизированного двойного слепого исследования III фазы ENHANCE фампридина пролонгированного действия. Препараты ЦНС 2019; 33:61–79.

52. Макдонелл Р., Нагельс Г., Лапландия Д.А. и соавт. Улучшение воздействия рассеянного склероза на здоровье, о котором сообщают пациенты: исследование ENABLE PR-фампридина. Мульт Склер 2016; 22: 944–954.

53. Ноубл М., Ценг К.К.С., Ли Х., Эльфар Дж.К. 4-Аминопиридин в качестве единственного средства для диагностики и лечения тяжелого повреждения нерва. Мил Мед 2019; 184 (прил. 1): 379–385.