Исследование по оптимизации технологии экстракции и антиоксидантной активности полисахаридов из цветков юньнаньского кофе арабика

Аннотация: Для оптимизации технологии экстракции и изученияантиоксидантдеятельностьполисахаридыиз кофейного цветка (ACP), ультразвуковая температура, ультразвуковое время, соотношение жидкости и твердого вещества, мощность ультразвука, время погружения образца и объемный процент этанола были исследованы с использованием выхода экстракции полисахарида в качестве индикатора. Затем в качестве основных влияющих факторов использовали температуру ультразвука, время ультразвука и мощность ультразвука, оптимизировали технологию экстракции методом поверхности отклика.антиоксидантактивность ACP исследовали с помощью DPPH· и ABTS plus· эффектов очистки, а также анализов FRAP. Результаты показали, что оптимальными технологическими условиями ультразвуковой экстракции были: температура ультразвука 69,5 градусов, время ультразвука 93 мин, мощность ультразвука 175 Вт, соотношение жидкость-твердое вещество 10:1 мл/г, время погружения образца 3{{ 17}} мин, объемная доля этанола 80 процентов. При этом выход полисахаридов составил 2,292%. Результаты показали, что значение IC50, основанное на DPPH·акцепторном эффекте ACP, составило 3,844 мг·мл-1, ABTS плюс·акцепторная активность составила 0,921 ммоль Trolox/г ACP. Значения FRAP ACP по анализу FRAP составляли 0,0565 ммоль Fe2 плюс / г ACP, что показало, что ACP имеет слабуюантиоксидантактивность. Это исследование обеспечит теоретическую основу для всестороннего использования и разработки побочных продуктов кофе.

Ключевые слова:кофейные цветы;полисахарид;экстракция;антиоксидантная активность

Кофепредставляет собой растение рода Rubiaceae (Coffea), в основном распространенное в таких странах, как Южная Америка, Центральная Америка, Африка и Азия, и выращивается более чем в 80 странах мира [1]. Согласно «Китайской Материи Медике», кофе обладает освежающим, мочегонным и желудочным действием и в основном используется при умственной усталости и потере аппетита. Его часто используют как освежающее, мочегонное и желудочное лекарство. Современные исследования показали, что кофе содержит множество активных ингредиентов, таких как алкалоиды, фенольные кислоты, флавоноиды и терпены, которые обладают различной фармакологической активностью, такой как защита печени, нейропротекция,антиоксиданти антидиабетические [2-3]. моей страныкофеВ выращивании преобладает мелкозернистый кофе, и более 99 процентов его распространяется в Юньнани. Мелкозернистый юньнаньский кофе богат веществами, кроме кофеина, хлорогеновой кислоты, тригонеллина и других компонентов, он также содержит аскарозиды.

I~II[4], паникулозид VI[4], кофарилозид I[4], вилланован I[4], каффаролиды A~H[5], коферуенол AB[6], коферуоны AD[6] и коферуолид AB[7] и некоторые новые терпеноиды. Среди них было подтверждено, что коферолиды C, D и F обладают определенной активностью активации агрегации тромбоцитов in vitro [5]; caffruenol AB и caffruolide AB обладают эффектом ингибирования липополисахарид-индуцированной продукции NO в 264,7 макрофагах [7]. При углубленном изучении кофе добавленная стоимость кофе продолжает увеличиваться. В последние годы побочные продукты кофе богаты фенольными кислотами, флавоноидами, терпенами, алкалоидами и другими биологическими веществами.

Активные ингредиенты, которые можно использовать в качестве натуральных и устойчивых источников активных ингредиентов, таких какантиоксиданты, защиты печени и защиты нервов, исследования побочных продуктов кофе все больше и больше беспокоят исследователей [8-10]. Кампа и др. сообщили, что кофейные листья содержат фенольные соединения [11]; Чен рассмотрел богатые химические составляющие алкалоидов, флавоноидов, фенольных кислот, терпенов и т. д. в кофейных листьях и их фармакологическую активность, такую ​​как антиоксидантное, противовоспалительное и антибактериальное действие. [12], а также изучали влияние методов обработки кофейного листа и возраста листа на его химический состав и активность [13].

Кроме того, Fu Xiaoping et al. [14−15] обнаружили, что неочищенный экстракт кожуры юньнаньского мелкого кофе оказывает определенное защитное и восстанавливающее действие на поврежденные эндотелиальные клетки пупочной вены человека, а также обладает потенциальнымантиоксидантэффектов, и обнаружили, что основными цветочными цианидами являются цианидин-3-глюкозид и цианидин-3-рутинозид.

Кофейные цветы часто выбрасываются как основной побочный продукт в индустрии выращивания кофе. Однако существующие исследования показали, что цветки кофе богаты химическими компонентами. Сташенко и др. [16] использовали ГХ-МС для анализа летучих и полулетучих компонентов в мелких цветках кофе, и в результате было определено в общей сложности 150 соединений с содержанием н-пентадекана. Самый высокий, за ним следует гераниол. Кроме того, Нгуен и соавт. [17] изучали активные ингредиенты цветков кофе и обнаружили, что цветки кофе имеют высокое содержание фенольных соединений, поэтому цветки кофе можно использовать в качестве сырья для получения натуральныхантиоксидантактивные ингредиенты. Кроме того, кофейные цветы также содержат кофеин и тригонеллин. Кофеин связан со сниженным риском нейродегенеративных заболеваний [18–19].

Тригонеллин может предотвратить диабет и повреждение почек, а также обладает эффектом лечения нейродегенеративных заболеваний [20-21]. Пинейро и др. [22] проанализировали содержание четырех активных компонентов тригонеллина, хлорогеновой кислоты, галловой кислоты и кофеина в цветках кофе при различных методах сушки и экстракции методом ВЭЖХ, среди которых кофеин и тригонеллин имели наибольшее содержание; Антиоксидантную активность оценивали с помощью экспериментов ABTS и DPPH, которые подтвердили, что кофейный цветок обладает антиоксидантной активностью и может быть использован в качестве потенциального сырья для приготовления чайных напитков. В настоящее время существует несколько отчетов об исследованиях цветков кофе, но из существующих отчетов видно, что цветки кофе имеют широкие перспективы применения в качестве потенциального источника биологически активных соединений.

Полисахаридыпредставляют собой высокомолекулярные соединения, состоящие из более чем 10 моносахаридов, связанных гликозидными связями, и широко встречаются у животных, растений и микроорганизмов. Полисахариды имеют сложную структуру, различные конформации и относительные молекулярные массы, а также вторичные структуры внутрицепочечных и межцепочечных водородных связей. Современные исследования показали, что полисахариды обладают фармакологической активностью, такой как антиоксидант [23-24], омолаживающая [25], иммунная регуляция [26], противовоспалительная [27] и противоопухолевая [28]. Биологическая активность полисахаридов связана с их чистотой, химической структурой, растворимостью и т. д. В последние годы биологическая активность полисахаридов стала центром исследований натуральных лекарственных средств, а также каналом для открытия новых лекарств и разработки функциональных продуктов питания. . Поэтому полисахариды играют важную роль в области медицины и пищевых продуктов. Юньнань в моей стране является основным районом выращивания кофе, и кофейные цветы имеют потенциальную ценность для развития, но исследований по развитию юньнаньских кофейных цветов мало, и потенциальная ценность кофейных цветов не была использована. Поэтому в этой статье в качестве объекта исследования используются цветки юньнаньского мелкозернистого кофе для проведения исследований его активных полисахаридов с целью глубокого изучения комплексной ценности использования юньнаньского мелкозернистого кофе.

В этой статьеполисахаридвыход был использован в качестве показателя оценки для оптимизации процесса экстракции полисахаридов и антиоксидантной способности цветков кофе, собранных в городе Баошань, провинция Юньнань, для получения основных данных для дальнейшего развития биологически активных полисахаридов. И предоставить справку для изучения мелкозернистого кофе Юньнань и повышения его добавленной стоимости.

1 Материалы и методы

1.1 Материалы и инструменты

Кофецветочный город Баошань, провинция Юньнань; Безводный спирт Tianjin Chemical Reagent Co., Ltd.; Чистота антрона 98,0 процентов, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; концентрированная серная кислота, соляная кислота Chongqing Chuandong Chemical Co., Ltd.; 1,1-дифенил-2- тринитрофенилгидразин (DPPH), 2,2'-диаза-бис-3-этилбензотиазолин{{1{15}}}}сульфоновая кислота (ABTS), 2, 4,6-трипиридилтриазин (TPTZ), чистота рутина 98,0 процентов, Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; чистота водорастворимого витамина Е 98,0%, Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd.; железа хлорид гексагидрат ч. д. а., вестерн

Лонг Сайенс Ко., Лтд.; Персульфат калия аналитической чистоты, Тяньцзиньский завод химических реагентов Дамао; Буфер PBS, буфер ацетата натрия Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Нажмите здесь, чтобы узнать больше о Rich inполисахарид

Продукт растворимого кофе Cistanche

FA2104N Электронные весы, 722-спектрофотометр Shanghai Qinghua Technology Co., Ltd.; KQ-250ультразвуковой прибор DB, вакуумный насос циркуляционной воды SHZ-D (Ⅲ) Gongyi Yuhua Instrument Co., Ltd.; Многофункциональная шлифовальная машина Xuman 1000Y Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; Электрическая центрифуга 800 Jintan Fuhua Instrument Co., Ltd.; VFD-3000 Вакуумная сублимационная сушилка Beijing Bo Yikang Experimental Instrument Co., Ltd.

1.2 Экспериментальный метод

1.2.1 Экстракция кофейного цветкаполисахаридыОбратитесь к методу Zheng Tingting et al. [29] с изменениями. Кофейные цветы, собранные в городе Баошань, провинция Юньнань, высушивали в тени при комнатной температуре, измельчали ​​с помощью пульверизатора и пропускали через 80-сетчатое сито для использования. Взвесить 2,0 г порошка цветков кофе, добавить 20,0 мл чистой воды, выдержать 30 мин.

Ультразвук при 100 Вт в течение 30 мин при 40°С, охлаждение до комнатной температуры и фильтрат сохраняли после вакуумной фильтрации. К фильтрату добавляли этанол до концентрации 80% для осаждения и выдерживали 12 ч. После центрифугирования при 4000 об/мин в течение 10 мин супернатант отбрасывали, а осадок растворяли в воде и лиофилизировали при -80°, получая сырой полисахарид.

Приготовьте раствор полисахарида кофейного цветка 5 мг·мл-1 и отложите в сторону.

1.2.2 Получение стандартной кривой полисахаридов и определение содержания полисахаридов в цветках кофе Стандартную кривую глюкозы строили в соответствии с антрон-сернокислотным методом [30]. Приготовьте 0.0, 25.{{10}}, 50.0, 100.{{23} }, 150,0 и 200,0 мкг/мл стандартных растворов глюкозы соответственно. Аккуратно отберите пипеткой 1,00 мл вышеуказанного стандартного раствора глюкозы с различными концентрациями, добавьте 1,00 мл чистой воды и поместите в пробирку с пробкой на 25 мл. Добавляют 5,0 мл раствора 2,1 мг·мл-1 антрон-серной кислоты, хорошо встряхивают, охлаждают на бане с ледяной водой, нагревают на бане с кипящей водой в течение 7 мин и быстро охлаждают до комнатной температуры на бане с ледяной водой. Используя деионизированную воду в качестве холостого контроля,

Поглощение А измеряли колориметрически при 625 нм. Принимая за ось абсцисс содержание безводной глюкозы (0.0, 25.0, 50.0, 1{{10 }}}0.0, 150.0, 200.0 мкг) и значение абсорбции по оси ординат, начертите стандартную кривую, и уравнение стандартной кривой будет следующим: Y=0.0051X−0,0092 ( R2=0,9970) (где: Y - значение поглощения, X - количество глюкозы, мкг).

Внесите пипеткой определенный объем раствора полисахарида цветка кофе с концентрацией 5 мг/мл, приготовленного выше, в пробирку на 25 мл с пробкой и добавьте чистую воду, чтобы довести объем до 2,00 мл. Добавить 5,0 мл раствора 2,1 мг·мл-1 антрон-серной кислоты, хорошо встряхнуть, охладить на бане с ледяной водой, нагревать на кипящей водяной бане в течение 7 мин и быстро охладить до комнатной температуры в ванна с ледяной водой. Поглощение А измеряли колориметрически при 625 нм с использованием деионизированной воды в качестве холостого контроля. Выход полисахаридов цветков кофе рассчитывали в соответствии с уравнением стандартной кривой глюкозы, и каждый образец повторяли 3 раза. Результаты выражали в виде среднего значения, а формула расчета была следующей:

Выход полисахаридов цветков кофе (в процентах) =X×m1×10−35×V×ms×100

В формуле: X - содержание полисахаридов в V объеме раствора полисахаридов цветков кофе, мкг; V – измеренный объем раствора полисахарида, мл; 5 – концентрация приготовленного раствора полисахарида цветков кофе, 5 мг·мл–1; m1 – лиофилизированный кофейный цветок Суммарная масса полисахарида, г; ms – масса образца цветка кофе, г.

1.2.3 Однофакторный эксперимент

В процессе экстракции полисахарида цветка кофе с помощью ультразвука важными факторами, влияющими на выход полисахарида, в основном являются температура ультразвука, время ультразвука, соотношение жидкости и материала, мощность ультразвука, время замачивания и концентрация спиртового осадка. Было выбрано пять уровней ультразвуковой температуры: 40, 50, 60, 70 и 80 градусов; выбрано пять уровней времени ультразвука: 30, 60, 90, 120 и 150 мин; : 1, 30: 1 мл/г пять уровней; мощность ультразвука выбирает пять уровней 100, 125, 150, 175, 200 Вт; время погружения выбирает пять уровней 30, 60, 90, 120, 150 мин; Концентрация этанола выбирает пять уровней 75 процентов, 80 процентов, 85 процентов, 90 процентов, 95 процентов пять уровней, соответственно, однофакторный эксперимент. При фильтрации по одному из параметров

, другие факторы: ультразвуковая температура 40 градусов, ультразвуковое время 30 мин,

Соотношение жидкости и материала 10:1 мл/г, мощность ультразвука 100 Вт, время выдержки 30 мин.

и концентрация спиртовых осадков 80 процентов.

1.2.4 Эксперимент по оптимизации поверхности отклика В соответствии с принципом планирования эксперимента Бокса-Бенкена, с выходом полисахарида кофейных цветков в качестве переменной отклика, три фактора, оказывающие наибольшее влияние на выход полисахарида кофейных цветков, были выбраны из однофакторного результаты испытаний, как показано в таблице 1. Оптимизация ультразвуковой температуры с выходом полисахарида цветков кофе в качестве степени индекса, ультразвукового времени и ультразвуковой мощности.

1.2.5 Тест на антиоксидантную способность

1.2.5.1 Эксперименты по поглощению свободных радикалов DPPH Эксперименты по поглощению свободных радикалов DPPH проводили, как описано в Ref. [31]. Возьмите 3,9 мл 0.075 ммоль/л реакционного раствора DPPH и смешайте его с 100 мкл растворов полисахаридов различной концентрации. Реакцию проводили при комнатной температуре в течение 30 мин в темноте, значения оптической плотности измеряли при 515 нм. Используя рутин в качестве положительного контроля, скорость поглощения свободных радикалов DPPH рассчитывали как: 1% =[(A0–As)/A0]×100 (где: абсорбция раствора без образца), а антиоксидантная активность выражается как 50-процентная степень ингибирования (IC50).

1.2.5.2 ABTS плюс эксперимент по удалению свободных радикалов

Эксперименты по очистке ABTS плюс радикалы проводились с использованием метода, описанного в Ref. [32]. Возьмите 2 мл раствора полисахарида и добавьте его к 2 мл раствора ABTS плюс свободные радикалы соответственно после равномерного перемешивания, реагируйте при комнатной температуре в течение 6 минут и измерьте УФ-поглощение при 734 нм, а рутин является положительным контролем. Формула расчета ABTS плюс способность поглощать свободные радикалы выглядит следующим образом: I(проценты)=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (где As — поглощение раствора образца; A0 — поглощение раствора без образца) Стандартная кривая определяется путем измерения. Нанесение стандартных растворов Trolox с различной концентрацией (I процентов =0.0247C −0,0046, R2=0,9937), ABTS анти-

Окислительную активность выражают в ммоль тролокса/г.

1.2.5.3 Метод FRAP

Метод, описанный в Ref. [33] использовали для определения антиоксидантной способности FRAP. Возьмите 5,0 мл ТПТЗ, 5,0 мл 20 ммоль/л FeCl3 и 50 мл буферного раствора ацетата натрия (300

ммоль/л, рН 3,6) для приготовления рабочего раствора ФРАП; 100 мкл образца смешивали с 300 мкл воды и 3,0 мл рабочего раствора FRAP, помещали на водяную баню при 37°С на 30 мин; поглощение измеряли при 595 нм. Стандартную кривую строили с FeSO4 в качестве стандартного вещества (A=0,572C0,008, R2=0,9974), а в качестве положительного контроля использовали рутин, согласно стандартной кривой

Рассчитайте восстанавливающую способность в ммоль FeSO4/г полисахарида.

1.3 Обработка данных

Все опыты повторяли трижды и брали среднее значение. Программное обеспечение DesignExpert 8.0.6 использовалось для разработки и анализа экспериментов с поверхностью отклика.

2 Результаты и анализ

2.1 Результаты экспериментов с одним фактором

Результаты однофакторного эксперимента показаны на рис. Влияние температуры ультразвука на выход полисахарида цветков кофе: температура ультразвука составляла 40-80 градусов, а выход полисахарида составлял 1,0048 процента -1.7982 процент . В диапазоне 40-70 градусов выход полисахарида цветков кофе постепенно увеличивался с повышением температуры ультразвука, достигал максимума при 70 градусах и начинал снижаться после 70 градусов. Это может быть связано со снижением выхода полисахаридов из-за разрушения структуры полисахаридов цветков кофе в условиях высокой температуры, о чем также сообщалось в литературе [29,34-35]. Температура обработки ультразвуком была выбрана равной 70 градусам.

Влияние времени ультразвука на выход полисахарида кофейного цветка: время ультразвука составляло 30-150 мин, выход полисахарида составлял 1,0369 процента -1,5853 процента, выход полисахарида увеличивался с увеличением времени ультразвука, и достиг максимума через 90 мин, выход начал снижаться с увеличением времени обработки ультразвуком. Это связано с тем, что кратковременная ультразвуковая экстракция не способствует полному растворению полисахаридов, в то время как длительная ультразвуковая экстракция будет разрушать полисахариды и приводить к снижению выхода, о чем также сообщается в литературе [29,34-35]. Поэтому время обработки ультразвуком было выбрано равным 90 мин.

Влияние соотношения жидкость-твердое вещество на выход полисахарида кофейного цветка: влияние соотношения твердое-жидкое на выход полисахарида невелико. Выход полисахаридов увеличивался с увеличением отношения жидкости к твердой фазе и достигал максимума при 25:1 мл/г. После 25:1 мл/г выход снижался с увеличением отношения жидкости к твердой фазе. Меньшее количество растворителя приведет к недостаточному растворению полисахарида, что приведет к снижению выхода полисахарида; большее количество растворителя растворит полисахарид и затруднит его осаждение, и в то же время выход будет снижен из-за поглощения ультразвукового излучения растворителем. 29,34−35] также есть аналогичные сообщения. Учитывая, что соотношение жидкости и материала мало влияет на выход, для экономии количества реагентов соотношение жидкости и материала было выбрано равным 10:1 мл/г.

Влияние мощности ультразвука на выход полисахаридов цветков кофе: мощность ультразвука была выбрана равной 100-200 Вт, а выход полисахаридов составил 1,1185 процента -1,8583 процента. После W выход уменьшался с увеличением мощности ультразвука. Увеличение мощности ультразвука может эффективно разрушать клетки и ткани для растворения полисахаридов в растворителе, поэтому увеличение мощности ультразвука полезно для осаждения полисахаридов; однако эффект фрагментации и термический эффект, создаваемые более крупными ультразвуковыми волнами, также увеличивают растворение примесей в цветках кофе. , термическое воздействие будет разрушать полисахаридные компоненты и вызывать снижение выхода полисахаридов, о чем также сообщается в литературе [36-37]. Поэтому мощность ультразвука была выбрана равной 175 Вт.

Влияние времени замачивания на выход полисахарида цветков кофе: влияние времени замачивания на выход полисахарида было небольшим, время замачивания составляло 30-150 мин, а выход полисахарида составлял 1,1827 процента -1. 4609 процентов. В диапазоне 30-90 мин выход полисахаридов увеличивался с увеличением времени выдержки и достигал максимума на 90 мин. Через 90 мин, с увеличением времени замачивания, выход немного снижался и имел тенденцию оставаться на одном уровне. Увеличение времени замачивания может способствовать осаждению полисахаридов во время обработки ультразвуком и снизить потребление энергии. Но слишком длительное замачивание не может привести к более высокому выходу, а слишком длительное замачивание также приведет к высвобождению других компонентов и повлияет на выход полисахаридов. Это аналогично тому, что сообщается в [38]. Учитывая, что влияние времени замачивания невелико, в целях экономии времени время замачивания было выбрано равным 30 мин.

Влияние концентрации спиртовых осадков на выход полисахаридов цветков кофе: концентрация спиртовых осадков мало влияет на выход полисахаридов, концентрация спиртовых осадков составляет 75 ~ 95%, выход полисахаридов составляет 0,9703% ~ 1,2806%. Выход полисахарида увеличивался с увеличением концентрации этанола и достигал максимума при 85%. После 85 процентов выход снижался с увеличением концентрации этанола. Экстракция водой и осаждение спиртом - это использование нерастворимого в спирте полисахарида для его осаждения. Когда количество добавляемого этанола увеличивается, полисахарид становится нерастворимым в этаноле и выпадает в осадок, а выход увеличивается. Когда концентрация спиртового осадка превышает 85 процентов, выход полисахаридов не может быть улучшен, но реагенты тратятся впустую. Это аналогично тому, что сообщается в [38]. Чтобы упростить операцию, в этой статье используется метод прямого добавления этанола для регулировки концентрации спирта для осаждения. В то же время, поскольку выход 80-процентного и 85-процентного полисахарида не сильно отличается, это позволяет экономить реагенты и сокращать количество отходов. Поэтому концентрация осаждения спирта была выбрана равной 80 процентам.

2.2 Результаты испытаний поверхности отклика

2.2.1 Результаты испытаний поверхности отклика Большое влияние оказывают температура ультразвука, время ультразвука и мощность ультразвука. Следовательно, на основе приведенных выше однофакторных экспериментов метод поверхности отклика оптимизируется для трех условий ультразвуковой температуры, ультразвукового времени и ультразвуковой мощности. Результаты представлены в таблице 2.

Принимая выход полисахаридов (Y) в качестве индекса отклика, была создана регрессионная модель с тремя факторами: ультразвуковой температурой, ультразвуковым временем и ультразвуковой мощностью, и было получено уравнение квадратичной регрессии:

Y{{0}}.29–0.067A плюс 0.{{1{0}}54B–0. 019C плюс 0,34AB плюс 0,083AC плюс 0,011BC-0,40A2

−0.19B2−0.27C2

2.2.2 Критерий значимости дисперсии

Результаты испытаний представлены в таблице 3.

По результатам дисперсионного анализа в табл. 3 общая модель оказалась значимой (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05, тест на отсутствие подходящего элемента незначителен, что указывает на то, что неизвестные факторы мало влияют на результаты теста, а остаточный элемент в основном вызван случайными ошибками, что указывает на то, что выбор модели является подходящим и правильным. . Влияние АБ было значительным (P<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].

2.2.3 Поверхности отклика и контуры

Диаграмма поверхности отклика взаимодействия различных факторов на выход полисахарида цветков кофе показана на рисунке 2. Взаимодействие между ультразвуковой температурой и ультразвуковым временем показало, что взаимодействие между ними было значительным; когда ультразвуковая температура оставалась неизменной, выход полисахаридов цветков кофе сначала увеличивался, а затем уменьшался с увеличением времени ультразвука; когда время ультразвука оставалось неизменным, выход цветочного полисахарида кофе сначала увеличивался, а затем уменьшался с увеличением температуры ультразвука. Из взаимодействия между ультразвуковой температурой и ультразвуковой мощностью видно, что, когда ультразвуковая температура постоянна, выход полисахарида кофейного цветка сначала увеличивается, а затем уменьшается с увеличением ультразвуковой мощности; когда мощность ультразвука остается неизменной, выход полисахарида кофейного цветка увеличивается с ультразвуковой волной. Повышение температуры сначала увеличивается, а затем уменьшается. Из взаимодействия между временем ультразвука и мощностью ультразвука видно, что, когда время ультразвука является постоянным, выход полисахарида кофейного цветка сначала увеличивается, а затем уменьшается с увеличением мощности ультразвука; когда мощность ультразвука постоянна, выход полисахарида кофейного цветка увеличивается с увеличением мощности ультразвука. Увеличение времени сначала увеличивается, а затем уменьшается.

Таким образом, используя выход полисахаридов в качестве стандарта оценки, результаты оптимизации метода поверхности отклика для трех условий ультразвукового времени, ультразвуковой температуры и ультразвуковой мощности: ультразвуковая температура 69,56 градусов, ультразвуковое время 92,99 мин и ультразвуковая мощность 174,01 Вт, это прогнозируется, что при этом условии 2,290 проц. В соответствии с реальной ситуацией, ультразвуковая температура 69,5 градусов, время ультразвука 93,00 мин, мощность ультразвука 175 Вт, время погружения 30 мин, отношение жидкости к материалу 10: 1 мл/г и концентрация этанола 80 процентов были выбраны для 4 параллельных испытаний.

Средний выход составил 2,292% ±0,061%. Он в основном близок к теоретическому значению, полученному в результате теста, что указывает на хорошее соответствие между прогнозируемым значением и реальным значением, поэтому оптимизированные параметры процесса, полученные с помощью поверхности отклика в этом исследовании, являются точными и надежными [43].

2.3 Экспериментальные результаты антиоксидантной способности

Тест DPPH представляет собой эффективную и чувствительную модель оценки антиоксидантной способности растений. Способность тестируемого образца поглощать свободные радикалы связана с его потенциальной способностью отдавать протоны; Тест ABTS широко используется для оценки антиоксидантной способности образцов растений, которые могут тестировать образцы Антиоксидантная активность липофильных и гидрофильных компонентов в методе FRAP; восстановительную способность натуральных продуктов оценивали по восстановлению Fe3 плюс -TPTZ до Fe2 плюс -TPTZ [44-45]. Результаты экспериментов по антиоксидантному действию полисахаридов цветков кофе показаны в таблице 4. Полисахариды цветков кофе обладают определенной антиоксидантной активностью в отношении свободных радикалов DPPH и ABTS плюс свободные радикалы, но их антиоксидантная активность ниже, чем у рутина.

3 Заключение

В этом эксперименте в качестве сырья использовались цветки юньнаньского мелкозернистого кофе.полисахаридюньнаньского мелкозерновогокофецветок был извлечен с помощью ультразвука. Было обнаружено, что время ультразвука, температура ультразвука и мощность ультразвука оказывают важное влияние на экстракцию полисахаридов цветков кофе. Затем время ультразвука, температура ультразвука и мощность ультразвука были оптимизированы с помощью поверхности отклика, а оптимальные условия обработки полисахарида кофейного цветка были определены следующим образом: температура ультразвука 69,5 градусов, время ультразвука 93 мин, мощность ультразвука 175 Вт, соотношение жидкости и материала. 10:1 мл/г. Время выдержки составляло 30 минут, а концентрация этанола составляла 80 процентов. В этих условиях выход полисахаридов составил 2,292% ± 0,061%. Метод может эффективно повысить урожайность кофейного цветка.полисахарид, сокращая время экстракции и уменьшая количество используемого этанола. Результаты экспериментов с антиоксидантами показали, что полисахариды цветков кофе обладают слабой антиоксидантной способностью. Это исследование послужит эталоном для дальнейшего разделения и очистки кофейного цветка.полисахариди исследования его активности и функций, а также обеспечит теоретическую основу и поддержку для дальнейшего развития и использования кофе.

Поддерживать:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950