Взаимосвязь между ишемически-реперфузионным повреждением (ИРИ) и функцией почек

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ЧАСТЬ Ⅰ: Прекондиционирование метформином и посткондиционирование для уменьшения реперфузионного повреждения ишемии в изолированной модели перфузии Ex Vivo крысы и почки свиньи в нормотермическом аппарате

Тобиас М.Хуинк,Леони Х.Венемаль,Рене А.Посма,Нинке Дж.де Врис, Андри К.Вестеркампл и др.

КАКОВЫ СОВРЕМЕННЫЕ ЗНАНИЯ ПО ТЕМЕ?

Ишемия-реперфузионное повреждение (ИРИ) отрицательно влияет на исходы трансплантации почки, в то время как метформин был предложен для ослабления ИРИ помимо его сахароснижающего действия. Аппаратная перфузия обеспечивает платформу для добавления защитных агентов, таких как метформин, до или во время реперфузии для снижения ИРИ. Предыдущие данные показали, что прекондиционирование метформином способно улучшить гепатобилиарную функцию во время нормотермической машинной перфузии и последующей трансплантации печени крыс.

цистанхе травянистое растениезапочечная функция

КАКОЙ ВОПРОС ЗАДАВАЕТСЯ В ЭТОМ ИССЛЕДОВАНИИ?

В этом исследовании потенциальные положительные эффекты прекондиционирования и посткондиционирования метформином на ИРИ оценивались в различных изолированных моделях нормотермической машинной перфузии ex vivo с использованием почек крысы и свиньи.

ЧТО ЭТО ИССЛЕДОВАНИЕ ДОБАВЛЯЕТ К НАШИМ ЗНАНИЯМ?

Мы показываем, что как прекондиционирование метформином, так и посткондиционирование уменьшали повреждение почек у крыс и свиней, но улучшения были незначительными. Остается неизвестным, приводит ли добавление метформина во время машинной перфузии к улучшению качества органов после трансплантации. Более того, мы показываем, что использование токсических концентраций метформина in vivo во время машинной перфузии не было связано с повреждением клеток, что указывает на безопасность использования этих концентраций во время перфузии почек ex vivo.

КАК ЭТО МОЖЕТ ИЗМЕНИТЬ КЛИНИЧЕСКУЮ ФАРМАКОЛОГию ИЛИ ПЕРЕВОДЧЕСКУЮ НАУКУ?

Широко применяемая машинная перфузия является идеальной платформой для фармакологических вмешательств, направленных на уменьшение или предотвращение ИРИ, а также для тестирования терапевтических средств в изолированных органах ex vivo. Поскольку эффекты метформина были незначительными, остается неясным, следует ли его использовать в качестве ренопротекторного средства перед трансплантацией. Наши результаты не обязательно подтверждают использование метформина в качестве вмешательства перед трансплантацией почки, но необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, может ли метформин в сочетании с другими потенциальными методами лечения быть полезным.

где я могу купитьпорошок цистанхе

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Параметры перфузии

IVR оставался постоянным во время NMP в модели крыс без существенных различий между группами лечения (рисунок S1a). В группах с почками свиньи не было обнаружено существенных различий в отношении IVR (рисунок S1b). Параметры функции почек

В исследовании на крысах не наблюдалось существенных различий в общем клиренсе креатинина между всеми группами лечения (рис. 2а). В исследовании на свиньях общий клиренс креатинина не отличался между почками, получавшими метформин, и контрольной группой (рис. 2b), хотя в группе, получавшей метформин, наблюдалась тенденция к более низкому клиренсу креатинина (P=0,07).

Предварительно обработанные метформином крысы, почки которых перфузировались 30 мг/л метформина, имели значительно более низкую продукцию мочи по сравнению с крысами, предварительно обработанными метформином без последующей перфузии метформином (P= 0.02), и крысами, предварительно обработанными пероральным физиологическим раствором, у которых почки посткондиционировали метформином 30 мг/л (P=0.04). Посткондиционирование метформином в дозе 300 мг/л не привело к каким-либо существенным различиям в продукции мочи, независимо от условий предварительного кондиционирования. По сравнению с контрольной группой общая продукция мочи в почках свиней была значительно ниже в почках, получавших метформу (P=0,004; рис. 2c, d).

В исследовании на крысах общая экскреция белка была ниже в почках, предварительно обработанных метформином, без последующей перфузии метформином, чем в контрольной группе (P=0,001). Никаких различий в общей экскреции белка между всеми другими экспериментальными группами не наблюдалось (рис. 2е).

Во время NMP свиных почек не было обнаружено существенных различий в экскреции белка с мочой между группой, получавшей метформин, и контрольной группой (рис. 2f).

цистанхе трубчатая

Маркеры травм

Крысы, предварительно обработанные метформином, чьи почки не перфузировались метформином, имели более низкий уровень высвобождения ЛДГ, чем контрольная группа (P= 0,005). Крысы, прекондиционированные метформином, чьи почки впоследствии перфузировались 30 мг/л метформина, имели более низкий выброс ЛДГ, чем контрольные (P=0.01), и имели более низкий выброс ЛДГ, чем крысы, прекондиционированные физиологическим раствором, чьи почки перфузировали метформином 30 мг/л. (стр.=0.04). Перфузия метформином в концентрации 300 мг/л не приводила к снижению высвобождения ЛДГ (рис. 3а). Общее высвобождение ЛДГ во время NMP не отличалось между почками свиньи, получавшей метформин, и контрольной группой (рис. 3b).

Как прекондиционирование, так и посткондиционирование метформином не ассоциировалось со значительной разницей в общем количестве высвобожденного ASAT в исследовании на крысах (рис. 3c). Аналогичным образом, в почках свиней не было обнаружено различий между почками, получавшими метформин, и контрольной группой по уровням ASAT (рис. 3d).

Морфологические признаки ишемического реперфузионного повреждения По сравнению с контрольной группой канальцевый некроз значительно уменьшился в почках, которые перфузировались 300 мг/л метформина, независимо от физиологического раствора (P=0.02) или метформина (P=0. 02) предварительная подготовка. Крысы, предварительно обработанные метформином, чьи почки перфузировались метформином в дозе 300 мг/л, имели меньший канальцевый некроз по сравнению с крысами, предварительно обработанными метформином, без последующей перфузии метформином (P=0.01), и крысами, предварительно обработанными метформином, чьи почки были перфузированы метформином в дозе 30 мг/л. (P=0.02; рис. 3e).

Вакуолизация клеток проксимальных канальцев была значительно снижена у крыс, прекондиционированных физиологическим раствором, чьи почки перфузировались метформином в концентрации 300 мг/л, по сравнению с крысами, предварительно обработанными физиологическим раствором, чьи почки перфузировались метформином в концентрации 30 мг/л (P=0.05). Вакуолизация также была значительно ниже в предварительно обработанных метформином почках, перфузированных метформином в концентрации 300 мг/л, по сравнению с предварительно обработанными метформином почками без перфузии метформином (P=0.02) (рис. 3g). Статистических различий в отношении формирования отека в исследовании на крысах не наблюдалось (рис. 3е). Различий в морфологических признаках ИРИ в конце НМП в почках свиньи не наблюдалось (рис. 3з).

Рисунок 3Маркеры повреждения в перфузионной жидкости и морфологическое повреждение тканей после нормотермической машинной перфузии. Суммарные маркеры повреждения рассчитывали как площадь под кривой. Общее количество лактатдегидрогеназы (ЛДГ) (а, б) и аспартатаминотрансферазы (АСАТ) (в, г) в перфузате. Ткани оценивали по некрозу клеток проксимальных канальцев (от легкого до тяжелого: 1–5), отеку (от легкого до тяжелого: 1–4) и вакуолизации клеток проксимальных канальцев (от легкой до тяжелой: 1–4) в исследование на крысах соответственно (e–g). Признаки ишемического реперфузионного повреждения свиных почек оценивали в баллах (h). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего. Группы содержат 5–7 почек. *P < 0.05,="" **p=""><0,01 по="" сравнению="" со="" всеми="" другими="">

Экспрессия генов

Относительную экспрессию мРНК генов, участвующих в регуляции сосудистого тонуса, оценивали как в почках крысы, так и в почках свиньи. По сравнению с контролем экспрессия EDN-1 была значительно снижена в почках крыс, перфузированных 300 мг/л метформина, независимо от предварительного кондиционирования физиологическим раствором (P=0.002) или метформином (P{{4}). },005;рис. 4а). По сравнению с предварительно обработанными физиологическим раствором крысами, почки которых перфузировались метформином в дозе 30 мг/л, экспрессия eNOS была значительно снижена в контроле (P=0.04) и у предварительно обработанных физиологическим раствором крыс, чьи почки перфузировались метформином в дозе 300 мг/л (P{ {11}}.01; рис. 4б). В исследовании почек свиньи не было обнаружено различий в отношении экспрессии EDN-1 или eNOS (рис. 4h). Экспрессия KLF-2 не отличалась между группами как в исследовании почек крысы, так и в исследовании почек свиньи (рис. 4c, h).

цистанхе китайская травапдф

Кроме того, оценивались гены, участвующие в активации эндотелия. Экспрессия vWF не отличалась между группами лечения в почках как крыс, так и свиней (рис. 4d). По сравнению с контролем экспрессия гена VCAM-1 была значительно снижена в почках крыс, перфузированных 30 мг/л метформина, независимо от предварительного кондиционирования физиологическим раствором (P=0.002) или метформином (P=0 .03). Предварительно обработанные физиологическим раствором крысы, почки которых перфузировались 30 мг/л метформина, имели более низкую экспрессию VCAM-1, чем предварительно обработанные метформином крысы, чьи почки также перфузировались 30 мг/л метформина (P=0.04). Крысы, предварительно обработанные физиологическим раствором, чьи почки перфузировались 300 мг/л метформина, имели значительно более высокую экспрессию VCAM-1, чем крысы, предварительно обработанные физиологическим раствором, чьи почки перфузировались 30 мг/л метформина (P=0.002). с другой стороны, крысы, предварительно обработанные метформином, чьи почки перфузировались метформином в дозе 300 мг/л, имели значительно более высокую экспрессию VCAM-1, чем контрольная группа (P=0.03; рис. 4e).

По сравнению с предварительно обработанными метформином крысами, чьи почки перфузировались 300 мг/л метформина, экспрессия гена L-6 была снижена у предварительно обработанных метформином крыс, чьи почки не перфузировались метформином (P=0.03), и метформин -прекондиционированные крысы, чьи почки перфузировали 30 мг/л метформина (P=0.004; рис. 4f).

Экспрессия HSP-70 в почках крыс не отличалась между группами лечения (рис. 4g). Экспрессия vWF, VCAM-1 и IL-6 существенно не отличалась между экспериментальными группами в почках свиньи. исследование (рис. 4i). Однако уровень HSP-70 повышался в обработанных метформином почках свиньи (P=0.03; рис. 4l).

Рисунок 4Относительная экспрессия мРНК генов, участвующих в регуляции сосудистого тонуса, включая вазоконстрикцию (эндотелин 1 (EDN{1}})), вазодилатацию (эндотелиальная синтаза оксида азота (eNOS)) и напряжение сдвига ламинарного потока (фактор Крюппеля 2). (KLF-2)) как в исследовании на крысах (соответственно, a–c), так и в исследовании на свиньях (h). Гены, участвующие в активации эндотелия, играющие роль в адгезии тромбоцитов (фактор фон Виллебранда (vWF)) и лейкоцитов (молекула адгезии сосудистых клеток 1 (VCAM-1)), а также в воспалительных процессах (IL{{7} }) оценивали в почках крысы (соответственно г–е) и свиньи (и). Экспрессию белка теплового шока 70 (HSP{{10}}) также оценивали в почках как крысы, так и свиньи (соответственно, g, i). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего. Группы содержат 5–7 почек. *Р<0,05,><>

НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, ЧТОБЫ ЧАСТЬ Ⅱ И Ⅲ

Примечание: традиционные китайские лекарственныетрава цистанхе(также известный как «трава дракона» и «женьшень пустыни»), растет только в засушливых и теплых пустынях. Как одна из девяти бессмертных трав,Цистанхе(цистанхе трубчатая/цистанхе пустынная/desertliving cistanche/cistanche salsa) содержит большое количество эффективных ингредиентов, таких как эхинакозид, актеозид, полные фенилэтаноидные гликозиды, флавоноиды, полисахариды и т. д. Эти эффективные ингредиенты сделалицистанхеценная питательная трава и пищевой материал для человеческого иммунитета, внутренних органов, клеток мозга и нейронов и т. д. Современные фармакологические исследования подтвердили следующие эффекты цистанхе (преимущества цистанхе): повысить иммунитет;улучшить половую функцию и функцию почекн; против усталости; против старения; улучшить память; антипаркинсоническая болезнь; против болезни Альцгеймера; антиоксидант; легкость-запор; противовоспалительное средство; способствуют росту костей, отбеливанию кожи; защитить печень; и т.п.