Тайские растения с высоким уровнем антиоксидантов, активностью по удалению свободных радикалов, анти-тирозиназной и анти-коллагеназной активностью

Контакт:

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Мораго Чататикун1 и Анчали Чиабчалар2

Абстрактный

Фон:Ультрафиолетовое излучение солнечного света вызывает перепроизводство активных форм кислорода (АФК), что приводит к фотостарению кожи и нарушениям гиперпигментации. В последнее время все больший интерес вызывают новые отбеливающие и против морщин составы из натуральных продуктов. Цель этого исследования состояла в том, чтобы найти продукты, которые снижают содержание АФК в экстрактах 14 тайских растений.

Методы:Для определения суммы фенолов ифлавоноидсодержание,антиоксидантМероприятия,анти-тирозиназаактивности и антиколлагеназной активности мы сравнили экстракты 14 растений Таиланда, приготовленные с использованием различных растворителей (петролейный эфир, дихлорметан и этанол).антиоксидантактивности определяли анализами DPPH и ABTS.

Полученные результаты:Общее содержание фенолов в экстрактах 14 тайских растений было самым высоким в этаноле, за которым следовали экстракты дихлорметана и петролейного эфира, соответственно, в то время какфлавоноидсодержание обычно обнаруживается во фракции дихлорметана. Очищающая активность варьировалась от 7 до 99 процентов по оценке с помощью анализов DPPH и ABTS. Спиртовой экстракт листьев Ardisia elliptica Thunb. имели самое высокое содержание фенолов, антиоксидантную активность и ингибирование коллагеназы, в то время как Cassia alata (L.) Roxb. Экстракт был самым богатымфлавоноидсодержание. Интересно, что экстракты трех растений, представляющие собой спиртовые фракции Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. и Senna alata (L.) Roxb. был высокийантиоксидантсодержанием и активностью и значительно ингибировал кактирозиназаи коллагеназы.

Вывод:Наши данные показывают, что этанольные фракции Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb. и Senna alata(L.) Roxb. показывает перспективы в качестве потенциальных ингредиентов для косметических продуктов, таких как средства против морщин и продукты для отбеливания кожи.

Ключевые слова:Ardisia elliptica Thunb.,антиоксидантсодержание, деятельность по удалению мусора,Антитирозиназаактивность, Антиколлагеназная активность

Флавоноиды являются одним из элементовцистанхе

Фон

Ультрафиолетовое излучение (УФО) солнечного света является наиболее значимым фактором риска развития немеланомного и меланомаскеного рака [1]. Чрезмерное воздействие солнечного света, в частности УФ-А и УФ-В, вызывает сверхэкспрессию активных форм кислорода (АФК), которые повреждают липиды, белки и дезоксирибонуклеиновые кислоты. Коллаген является основной основой внеклеточного матрикса в дермальном слое кожи. Чрезмерное количество АФК увеличивает экспрессию коллагеназы, протеазы, которая расщепляет коллаген, что может привести к фотостарению и образованию морщин на коже [2]. Кроме того, воздействие УФ-излучения вызывает выработку меланина, что приводит к гиперпигментации.Тирозиназаявляется ключевым ферментом, инициирующим пигментацию кожи. Сначала L-тирозин гидроксилируется с образованием 3,4-дигидроксифенилаланина (L-ДОФА) под действием тирозиназы. Впоследствии L-ДОФА окисляется до ДОФА-хинона под действием тирозиназы. ДОФА-хинон далее превращается в ДОФАхром, который может быть преобразован в 5,6-дигидроксииндол (DHI) или 5,6-дигидроксииндол-2-карбоновую кислоту (DHICA)[3]. Современные методы лечения старения кожи включают гидроксикислоту для пилинга эпидермального слоя, ретиноиды для уменьшения огрубевшей кожи и кожный наполнитель, вводимый путем инъекции коллагена в кожу. Однако эти методы лечения имеют побочные эффекты, такие как гиперпигментация, воспаление, цитотоксичность, раздражение и бактериальная инфекция [4]. Наиболее популярным средством для отбеливания кожи является гидрохинон, который ингибируеттирозиназа, но его побочные эффекты включают дерматит, отек, аллергические реакции и охроноз [5]. В последнее время исследователи сосредоточились на натуральных продуктах, которые ингибируют вызванные УФ-излучением АФК, подавляют ферменты и снижают образование меланина в качестве альтернативы существующим методам лечения. Например, активные фитосоединения, такие как арбутин, алоэзин, гентизиновая кислота,флавоноиды, гесперидин, солодка, ниацинамид, производные дрожжей и полифенолы ингибируют меланогенез без цитотоксичности томеланоцитов [6]. Таким образом, растения могут уменьшить образование морщин и гиперпигментацию, вызванную воздействием солнечного света.

Цель этого исследования состояла в том, чтобы проанализировать 14 тайских растений, экстрагированных тремя различными растворителями, на предмет их потенциала в качестве ингредиентов против морщин и отбеливания кожи. Количествоантиоксидантфенолы ифлавоноидыбыла оценена на предмет корреляции с активностью по удалению свободных радикалов, а также антиколлагеназной и антиколлагеназной активностью.антитирозиназавиды деятельности. Экстракты имелиантиоксидантыочищает от свободных радикалов и ингибирует ферменты, участвующие в формировании морщин и пигментации. Мы определили, что Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. и Senna alata (L.) Roxb являются очень многообещающими кандидатами для использования в косметических продуктах.

бодибилдинг

Методы

Химикаты и реагенты

Фенольный реактив Фолина Чиокальтеу, карбонат натрия (Na2CO3), галловая кислота, кверцетин, 10-процентный раствор хлорида алюминия, этанол, 2, 2-дифенил-1-пикрилгидразил (DPPH), аскорбиновая кислота, 2,2'-азино- бис(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновая кислота)(ABTS), персульфат калия, койевая кислота, тирозиназа грибов (EC 1.14.18.1), 3,4-дигидрокси-L-фенилаланин(L- ДОФА), N-[3-(2-фурил)акрилоил]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), коллагеназа из Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), галлат эпигаллокатехина (EGCG) , хлорид натрия, хлорид кальция и диметилсульфоксид (ДМСО) были приобретены у Sigma-Aldrich Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Петролейный эфир, дихлорметан, абсолютный этанол, метанол, гидрофосфат динатрия и дигидрофосфат натрия были приобретены у Merck (Дармштадт, Германия). Все химикаты и реагенты были аналитической чистоты.

Растительное сырье и экстракция

Тринадцать видов тайских листьев были собраны в Травяном саду Ее Королевского Высочества принцессы Сириндхорн, провинция Районг, Таиланд. Мангустины были получены из провинции Чантабури, Таиланд. Эти растения были аутентифицированы и депонированы в гербарии кафедры ботаники факультета естественных наук Университета Чулалонгкорн в Таиланде. Научные названия, номера ваучеров и части растений показаны в таблице 1. Растения экстрагировали с использованием аппарата Сокслета. Вкратце, 10 г высушенного растения отдельно экстрагировали петролейным эфиром, дихлорметаном и этанолом. Растворители удаляли с помощью вакуумного роторного испарителя при пониженном давлении с использованием концентратора MiVac Quattro. Концентрированные образцы растворяли в ДМСО в концентрации 100 мг/мл и хранили при температуре -20 до использования. Выходы сухих экстрактов представлены в таблице 1 в процентах по массе от сухого растительного сырья.

Определение общего содержания фенолов

Общее фенольное содержание растительных экстрактов оценивали по методу Фолина-Чокальтеу [7]. Вкратце, 50 мкл экстрактов с концентрацией 1 мг/мл в дистиллированной воде смешивали с 50 мкл 10-процентного реактива Фолина-Чиокальтеу и 50 мкл 0,1 М Na2CO3. Реакционную смесь инкубировали 1 ч при комнатной температуре в темноте. Поглощение при 750 нм измеряли с помощью устройства для считывания микропланшетов (Biotek, США). В качестве стандарта использовали галловую кислоту от 1,56 до 100 мкг/мл. Общее содержание фенолов в экстрактах выражается в мг эквивалентов галловой кислоты (ЭАК) на г сухого растительного материала. Все образцы были проанализированы в трехкратной повторности.

Определение содержания флавоноидов

Общийфлавоноидсодержание (ОКФ) определяли колориметрическим методом с хлоридом алюминия (AlCl3) [7]. Вкратце, 50 мкл экстрактов с концентрацией 1 мг/мл в 80-процентном этаноле смешивали с 50 мкл 2-процентного раствора AlCl3 в лунке планшета с 96 стенками. Планшет инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Поглощение при 435 нм измеряли с использованием устройства для считывания микропланшетов. Стандартом служил кверцетин от 1,56 до 100 мкг/мл. Общее содержание флавоноидов выражается в мг эквивалентов кверцетина (QE) на г сухого растительного материала. Образцы анализировали в трехкратной повторности.

Активность по очистке DPPH

Анализ активности удаления DPPH проводили, как описано Yamasaki et al. [8]. Раствор DPPH был свежеприготовленным для каждого анализа. Вкратце, 100 мкг/мл экстрактов или стандарта аскорбиновой кислоты от 1,56 до 100 мкг/мл в абсолютном метаноле смешивали со 180 мкл реагента DPPH в 96-луночном планшете. Реакционную смесь инкубировали 30 мин при комнатной температуре в темноте. Затем с помощью устройства для считывания микропланшетов измеряли поглощение при 517 нм. Опыты проводились в трехкратной повторности. Поглощение при 517 нм DPPH составляло 0,70 ± 0,02 и снижало поглощающую активность, измеренную по поглощению. Способность к очистке рассчитывали как активность по очистке (в процентах)=100 процентов × [(훥A517 контроля - 훥A517 образца)/ 훥A517 контроля]. Процент активности экстрактов по удалению DPPH сравнивали с таковой для аскорбиновой кислоты и выражали в мг эквивалента витамина С.антиоксидантпроизводительность (VCEAC) на г сухого растительного материала. IC50 определяли по графику зависимости процента ингибирования от концентрации (от 0,78 до 100 мкг/мл каждого экстракта).

Очищающая активность ABTS

Активность по удалению свободных радикалов ABTS выполняли, как описано ранее [9]. Рабочий реагент ABTS• plus готовили путем смешивания 7 мМ ABTS• и 2,45 мМ персульфата калия в соотношении объем/объем 8:12. Рабочий раствор выдерживали 16–18 ч при комнатной температуре в темноте. Раствор ABTS• plus разбавляли абсолютным этанолом, чтобы получить поглощение при 734 нм 0,70 ± 0,02. Затем 100 мкг/мл экстрактов или 1,56-100 мкг/мл стандарта аскорбиновой кислоты в абсолютном этаноле добавляли к 180 мкл ABTS• плюс рабочий реагент в лунки 96-луночного планшета. Планшет инкубировали в течение 45 минут при комнатной температуре и измеряли оптическую плотность при 734 нм. Опыты проводились в трехкратной повторности. Способность к очистке рассчитывали как поглощающую активность (в процентах)=100 × [(훥A734 контроля - 훥A734 образца)/ 훥A734 контроля]. Процент активности экстрактов по удалению ABTS сравнивался с таковым для аскорбиновой кислоты и представлен как мг эквивалента витамина С.антиоксидантпроизводительность (VCEAC) на г сухого растительного материала. IC50 определяли по графику зависимости процента ингибирования от концентрации (от 15,62 до 1000 мкг/мл каждого экстракта).

Определение ингибирования грибной тирозиназы

Дофахромный метод был выполнен с небольшой модификацией [10]. Вкратце, 20 мкл растительных экстрактов или ДМСО (в качестве контроля), 20 мкл 203,3 ед/мл тирозиназы грибов и 140 мкл 20 мМ фосфатного буфера при рН 6,8 предварительно инкубировали в течение 10 мин при 25°С. После предварительной инкубации добавляли 20 мкл 2,5 мМ L-DOPA, после чего образцы инкубировали в течение дополнительных 20 минут при 25°С. Количество дофахрома измеряли при 492 нм с помощью устройства для считывания микропланшетов. Койевая кислота (КА) служила положительным контролем ингибирования. Процент ингибирования активности тирозиназы (в процентах) выражали в процентах.тирозиназаингибирование {{0}} × [(훥A492 контроля – 훥A492 образца)/ 훥A492 контроля]. Конечные концентрации экстрактов и койевой кислоты составили 1 и 0,1 мг/мл соответственно. IC50 определяли по процентному графикутирозиназаингибирование в зависимости от концентрации (от 15,62 до 1000 мкг/мл каждого экстракта).

бодибилдинг

Определение ингибирования коллагеназы

Ингибирование коллагеназы определяли описанным ранее методом [11]. Вкратце, 4 0 мкл коллагеназы из Clostridium histolyticum с концентрацией 0,25 единиц/мл в 50 мМ Tricine буфере, содержащем 10 мM CaCl2 и 400 мM NaCl, и 10 мкл 50 мM Tricine буфера смешивали с 10 мкл экстрактов или ДМСО (в качестве контроля). Галлат эпигаллокатехина (ЭГКГ) использовали в качестве положительного контроля. После 15-минутной инкубации при комнатной температуре добавляли 50 мкл N-[3-(2-фурил)акрилоил]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA). Поглощение измеряли при 340 нм сразу и непрерывно в течение 20 мин. Ферментативную активность оценивали по уменьшению поглощения в течение временного интервала. Процент ингибирования активности коллагеназы рассчитывали как 100 × [(Активность контроля – Активность образца)/Активность контроля]. Конечные концентрации экстрактов и галлата эпигаллокатехина составляли 1 и 0,1 мг/мл соответственно. IC50 определяли по графику процентного ингибирования коллагеназы в зависимости от концентрации (от 15,62 до 1000 мкг/мл каждого экстракта).

Статистический анализ

Все эксперименты были проведены в трех повторностях, и результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка. Коэффициент корреляции (R2) междуантиоксидантСодержание и антиоксидантную активность определяли с помощью программного обеспечения SigmaPlotversion 12.2. Разницу между двумя средними значениями оценивали с использованием t-критерия Стьюдента. Различия считались значительными, когда значение P было меньше 0,05.

Полученные результаты

Добыча дает

В таблице 1 показаны научные названия, номера ваучеров и части растений 14 тайских растений, использованных в этом исследовании. Процент выхода экстрактов варьировался от 0,73 процента до 31,11 процента по весу (таблица 1). Ардизия эллиптическая Thunb. имел самый высокий выход в экстрактах петролейного эфира (19,89%) и этанола (31,11%), тогда как Garcinia mangostanaL. имел самый высокий процент выхода при экстракции дихлорметаном (11,07%).

Содержание фенолов в 14 тайских растениях

Поэтому общее содержание фенолов в растениях определяли по методу Фолина-Чокальтеу. Экстракты имели широкий диапазон количества фенолов, как показано в таблице 2, и значения варьировались в 33-кратном размере среди экстрактов. Ardisiaelliptica Thunb. имел самое высокое содержание фенола во всех трех типах экстрактов, в то время как самое низкое содержание фенола было в Stemona curtissi Hook. ф. экстракт петролейного эфира.

Содержание флавоноидов в 14 тайских растениях

Аналогично фенолам, всегофлавоноидсодержание существенно варьировало среди видов растений, в пределах от 2,04 ± 0,16 до 31,38 ± 0,81 мг QE на г сухого материала (таблица 2). В целом, экстракция дихлорметаном дала самые высокие результаты.флавоноидуровень по сравнению с другими растворителями. Из всех экстрактов наибольшее количество флавоноидов было обнаружено в этанольном экстракте листьев Senna alata (L.) Roxb (31,38 ± 0,81 мг QE на 1 г сухого материала). С другой стороны, Ardisia elliptica Thunb. (23,14 ± 1,10 мг QE на г сухого материала). имела самое богатое содержание флавоноидов в дихлорметановой фракции. Более того, Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. имели самое высокое содержание флавоноидов среди экстрактов петролейного эфира (27,48 ± 2,59 мг ХЭ на 1 г сухого вещества). Самый низкий обнаруживаемый уровень флавоноидов был в этанольном экстракте Daturametel L. В противоположность этому,флавоноидыне были обнаружены в петролейно-эфирных и дихлорметановых экстрактах из Stemona curtisii Hook.f., а также в петролейно-эфирных экстрактах из Streblus asper Lour. и Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Общее содержание флавоноидов не коррелировало с общим содержанием фенолов (R2=0.0284, рис. 1а).

Активность по удалению радикалов DPPH в различных экстрактах 14 тайских растений

Активность по удалению свободных радикалов с использованием DPPH в качестве индикатора является основнымантиоксидантанализ [12]. Как показано в Таблице 3, очищающая активность экстрактов сильно различалась, в пределах от 7,11 ± 0,59 процента до 96,17 ± 0,05 процента. Спиртовой экстракт Ardisia ellipticaThunb обладал самой высокой очищающей активностью — 96 процентов. Более того, следующий по силеантиоксидант activities (>90 процентов) наблюдались во фракциях этанола из Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels. и Garcinia mangostana Linn. Что касается других растворителей, Ardisia elliptica Thunb также обладала самой высокой очищающей активностью среди фракций петролейного эфира, а Garcinia mangostana L. обладала самой высокой антиоксидантной активностью во фракциях дихлорметана. Наименьшая поглотительная способность обнаружена у Croton sublyratus Kurz во фракции петролейного эфира. В 7 экстрактах петролейным эфиром и 2 экстрактах дихлорметана не было обнаружено активности очистки.

Активность по удалению радикалов ABTS в различных экстрактах из 14 тайских растений

антиоксидантактивность водной и липидной фаз в растениях оценивали также методом обесцвечивания с использованием ABTS [13]. Опять же, аскорбиновая кислота служила эталоном.антиоксидант. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 процентов, а поглотительная активность была обнаружена во всех дихлорметановых экстрактах и ​​экстрактах петролейного эфира из Annona squamosa L. и Ipomoea pes-caprae(L.) R.br. который не был обнаружен при анализе DPPH.

Ингибирование активности тирозиназы растительными экстрактами

Способность соединений из тайских растений ингибировать грибытирозиназаактивность оценивали с использованием анализа in vitro с L-ДОФА в качестве субстрата. Койевая кислота служила известным ингибитором и вызывала максимальное ферментативное ингибирование 93,38±1,63%. Как показано в Таблице 5, только этанольные экстракты значительно ингибировали активность тирозиназы Ardisia elliptica Thunb. препараты являются исключением. Петролейно-эфирная и дихлорметановая фракции Ardisia elliptica Thunb. ингибирует активность тирозиназы примерно на 20%. Этанольная фракция Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz (значение IC 50 271,50 мкг/мл) была наиболее сильным ингибитором тирозиназы, за ней следовали этанольные экстракты Ardisia elliptica Thunb. и Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Другие фракции этанола значительно снижали ферментативную активность более чем на 20 процентов (таблица 5), в то время как остальные экстракты не обладали обнаруживаемой ингибирующей активностью (данные не представлены).

Ингибирование активности коллагеназы 14 растениями

Экстракты тестировали на антиколлагеназную активность с использованием коллагеназы Clostridium histolyticum и N-[3-(2-фурил)акрилоил]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) в качестве субстрата. известный ингибитор коллагеназы и снижение ферментативной активности на 90,51 ± 2,79 процента. Как показано в Таблице 5, только 4 этанольных экстракта обладали обнаруживаемой ингибирующей коллагеназу активностью. Из вызывающих торможение Ardisia elliptica Thunb. (значение IC 50 157,78 мкг/мл) демонстрировали самый высокий уровень ингибирования коллагеназы, за ним следовали Annona squamosa L. (значение IC 50 426,67 мкг/мл), Senna alata (L.) Roxb. и Croton sublyratusKurz в ранге заказ. Экстракты других растений существенно не ингибировали активность коллагеназы в условиях реакции, использованных в этом исследовании (данные не представлены).

Обсуждение

Солнечное излучение является важным экологическим фактором повреждения кожи и может вызывать рак кожи [14]. УФ-излучение вызывает провоспалительную реакцию, деградацию внеклеточного матрикса иантиоксидантистощение [15, 16]. Ультрафиолетовое излучение вызывает образование активных форм кислорода (АФК), которые вызывают гиперпигментацию и экспрессию коллагеназы [17, 18]. В нашем исследовании было изучено 14 тайских растений, экстрагированных тремя различными растворителями, на предмет их потенциала в качестве ингредиентов против морщин и отбеливания кожи. В этом исследовании мы использовали петролейный эфир, дихлорметан и этанол для экстракции растений с помощью аппарата Сокслета. Ардизия эллиптическая Thunb. имеет самый высокий выход в экстрактах петролейного эфира и этанола, тогда как Garcinia mangostana L. имеет самый высокий процент выхода при экстракции дихлорметаном. Эти растворители представляют собой серию органических растворителей с возрастающей полярностью. Различия в процентах урожайности зависели от видов растений и, вероятно, отражали различия в химическом составе растений.

Фенолы представляют собой самую большую группу фитохимических веществ, обнаруженных в растениях, и они обладают различной биологической активностью у животных, включая человека [19]. Общее содержание фенолов в растениях определяли по методу Фолина-Чокальтеу. В целом фракция этанола имеет самое высокое содержание фенолов, за ней следует дихлорметан, в то время как петролейный эфир с низкой полярностью имеет самое низкое содержание фенолов по сравнению с другими растворителями. В этом исследовании Ardisia elliptica Thunb. имел самое высокое содержание фенолов во всех трех видах экстрактов. В предыдущих исследованиях дихлорметановые экстракты листьев Ardisia elliptica Thunb. имели содержание фенолов 101 ± 1,3 мг GAE на г сухого растительного материала, что больше, чем содержание в экстракте ветвей [20]. Кроме того, метанольный экстракт спелых плодов Ardisia содержал 5,64 ± 0,37 г ЭГА на 100 г экстракта [21]. Следовательно, листья и плоды Ardisia elliptica Thunb. имеют высокое содержание фенолов, которые легко экстрагируются метанолом, дихлорметаном и этанолом.

Флавоноидыявляются пигментами в цветах, листьях, плодах и семенах. Эти соединения являются вторичными метаболитами растений и широко распространены среди видов растений [22]. Затем содержание флавоноидов в растениях тайского происхождения оценивали с помощью колориметрического анализа хлорида алюминия. Наши результаты показали, что наибольшее количество флавоноидов было обнаружено в этанольном экстракте из Senna alata (L.) Roxbleaves. В предыдущем исследовании высокое содержание флавоноидов было обнаружено в водной (4,25 мг QE на 100 г) и метанольной фракциях (3,97 мг QE на 100 г) Senna alata (L.) Roxb.[23]. Таким образом, препараты Senna alata (L.) Roxb имеют высокое содержание флавоноидов при экстракции высокополярными растворителями, включая этанол, метанол и воду. Ardisiaelliptica Thunb. имела самое богатое содержание флавоноидов в дихлорметановой фракции. Плоды этого растения также имеют высокое содержание флавоноидов 36,91 ± 2,37 мг QE на г экстракта [24]. Следовательно, плоды и листья Ardisia elliptica Thunb. являются богатыми флавоноидами. Общее содержание флавоноидов не коррелировало с общим содержанием фенолов. Однако,флавоноидыобладают многими биологическими активностями, такими как защита от ультрафиолетового излучения [25], противовоспалительное действие [26], антигепатотоксичность [27] и противораковое действие [28].

Активность по удалению свободных радикалов с использованием анализа DPPH и ABTS. В анализе DPPH DPPH получает атом водорода отантиоксидант[29]. Мы обнаружили, что этанольный экстракт Ardisiaelliptica Thunb обладает самой высокой очищающей активностью. Другие исследователи также сообщали о дихлорметановых фракциях Ardisia elliptica Thunb. Листья и стебли имеют высокие уровниантиоксидантактивность, как определено с помощью анализа DPPH, и, следовательно, это растение очень интересно для дальнейшего изучения в качестве лечения травами [20]. Экстракты из этанольной фракции с высокой полярностью явно показали лучшие результаты.антиоксидантактивности, чем фракции с меньшей полярностью, содержащие дихлорметан и петролейный эфир. Экстракты этанола показали самые высокие уровни активности по удалению свободных радикалов по сравнению с другими экстрактами, и все экстракты этанола были активны. В анализе ABTS ABTS превращается в радикал путем добавления персульфата калия. В присутствии антиоксиданта реактивный катион ABTS (или ABTS• plus ) превращается в свою бесцветную природную форму [9]. В соответствии с анализом DPPH, этанольные экстракты содержали самые высокие уровни акцепторной активности по сравнению с другими экстрактами. Опять же, самая высокая поглощающая активность в этаноле, дихлорметане и экстрактах петролейного эфира была получена из тех же растений, как показано в анализе DPPH. Результаты анализов DPPH и ABTS, как и ожидалось, сильно коррелировали (рис. 1f).

Тем не менее, общаяфлавоноидсодержание растительных экстрактов не коррелировало с активностью поглотителя свободных радикалов, что было обнаружено с помощью анализа DPPH (рис. 1c) или анализа ABTS (рис. 1e). Наши выводы об отсутствии существенной связи междуфлавоноидсодержание и активность поглотителя с использованием анализа ABTS согласуются с результатами других исследователей [30]. Напротив, общее содержание фенолов в растительном препарате положительно коррелировало с активностью поглотителей, измеренной с помощью обоих анализов (рис. 1b и d), что не согласуется с предыдущим исследованием [31]. Примечательно, что очищающая активность зависела от общего содержания фенолов и растворителей с высокой полярностью, таких как этанол и дихлорметан. Эти результаты показывают, что содержание фенолов является основным компонентом сантиоксидантдеятельность на 14 тайских заводах.

Меланин, основной пигмент цвета кожи и волос, синтезируется меланоцитами внутри меланосом. Перепроизводство и накопление меланина в коже может привести к пигментным нарушениям и эстетическим проблемам. Гиперпигментация возникает на открытых участках кожи [32]. В меланогенезетирозиназаявляется ключевым ферментом на стадии ограничения скорости, на которой L-тирозин гидроксилируется до L-ДОФА, который далее окисляется до ДОФАхинона. После этого он превращается в ДОФАхром, который является субстратом для синтеза меланина [3]. ПонижениетирозиназаБыло высказано предположение, что активность ответственна за снижение выработки меланина. Разработка новых отбеливающих фитохимических соединений из натуральных продуктов в последнее время стала растущей тенденцией. Наше открытие показало, что этанольная фракция Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz была наиболее мощным ингибитором тирозиназы, за ней следовали этанольные экстракты Ardisia elliptica Thunb. и Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Очевидно, 7 растений из 14 имели высокое содержание фенолов, особенно Ardisiaelliptica Thunb. и Annona squamosa L. Более того, Senna alata (L.) Roxb. был самым богатымфлавоноидсодержание, которое может ингибировать активность тирозиназы. Активные соединения растений, такие как арбутин, алоэзин, гентизиновая кислота, флавоноиды, гесперидин, солодка, ниацинамид, производные дрожжей и полифенолы, могут ингибировать меланогенез без цитотоксичности для меланоцитов [6].

Коллагеназа представляет собой трансмембранную пептидазу цинка, расщепляющую связь X-Gly коллагена. Коллаген является обильным структурным белком и компонентом внеклеточного матрикса [33]. Уменьшение количества коллагеновых и эластиновых волокон увеличивается с возрастом и повреждением УФ-излучением, вызывающим морщинистую кожу [34]. Ингибирование коллагеназы было предложено для предотвращения старения кожи. Из вызывающих торможение в нашем исследовании Ardisiaelliptica Thunb. продемонстрировал самый высокий уровень ингибирования коллагеназы, за которым следуют Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb. и Croton sublyratus Kurz в порядке ранжирования. В предыдущем исследовании экстракт стручков какао содержал фенольную кислоту ифлавоноидыкоторый ингибировал активность эластазы и коллагеназы [35]. Примечательно, что три этанольных экстракта (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. и Senna alata (L.) Roxb.) ингибировали обатирозиназаи коллагеназы. Эти растения также имели высокий уровень фенолов и флавоноидов.антиоксидантактивность. Интересно, что эти экстракты можно использовать в качестве ингредиентов для косметических продуктов.

Вывод

Наши результаты показывают, что экстракты 14 тайских растений имеют различную степень общего содержания фенолов ифлавоноидсодержание, а также активность по удалению свободных радикалов, в зависимости от экстрагирующих растворителей. Была выявлена ​​высокая корреляция между общим содержанием фенолов и активностью по удалению свободных радикалов, оцененной с помощью анализов DPPH и ABTS. Этанольная фракция Ardisia elliptica Thunb. имел самое высокое содержание фенолов, за ним следовала Annona squamosa L. Оба растения значительно ингибировали активность тирозиназы и коллагеназы, в то время как Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz показал самое высокое ингибирование тирозиназы. Более того, Senna alata (L.) Roxb. был самым богатым по содержанию флавоноидов, а также проявлялтирозиназаингибирующее действие на коллагеназу. Этанольная фракция трех растений, а именно Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb и Senna alata (L.) Roxb., потенциально может быть ингредиентом косметических продуктов для борьбы с морщинами, а также для отбеливания кожи. Необходимы дальнейшие исследования для изучения активных компонентов и безопасности этих экстрактов.

бодибилдинг

использованная литература

1. Мёрле М. Спорт на открытом воздухе и рак кожи. Клин Дерматол. 2008;26(1):12–5.

2. Лопес-Камарильо С., Окампо Э.А., Казамичана М.Л., Перес-Пласенсиа С., Альварес-Санчес Э., Марчат Л.А. Активация протеинкиназ и факторов транскрипции в ответ на УФ-облучение кожи: значение для канцерогенеза. Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Ивата М., Корн Т., Ивата С., Эверетт М.А., Фуллер Б.Б. Взаимосвязь между активностью тирозиназы и цветом кожи крайней плоти человека. J Investig Dermatol.1990;95(1):9–15.

4. Штерн РС. Лечение фотостарения. N Engl J Med. 2004;350(15):1526–34.

5. Левин В.Ю., Майбах Х. Экзогенный охроноз. Обновленная информация о клинических особенностях, возбудителях и вариантах лечения. Am J Clin Дерматол. 2001;2(4):213–7.

6. Zhu W, Gao J. Использование растительных экстрактов в качестве местных средств для осветления кожи для улучшения пигментации кожи. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Зонго С., Савадого А., Уаттара Л., Бассоле ИХН, Уаттара К.А.Т., Уаттара А.С., Барро Н., Куду Дж., Траореи А.С. Содержание полифенолов, антиоксидантная и антимикробная активность Ampelocissusgrantii (baker) Planch. (Vitaceae): лекарственное растение из Буркина-Фасо. Int J Pharmacol. 2010;6(880–887)

8. Ямасаки К., Хасимото А., Кокусеня Ю., Миямото Т., Сато Т. Электрохимический метод оценки антиоксидантного действия метанольных экстрактов лекарственного сырья. Chem Pharm Bull (Токио). 1994;42(8):1663–5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Антиоксидантная активность с использованием улучшенного анализа обесцвечивания катион-радикалов ABTS. Свободный Радик Биол Мед. 1999; 26 (9–10): 1231–7.

10. Нититанакоол С., Питаянукул П., Бавовада Р., Сапарпакорн П. Молекулярные исследования и антитирозиназная активность экстракта ядра семян тайского манго. Молекулы. 2009;14(1):257–65.

11. Бонвичини Ф., Антоньони Ф., Яннелло С., Максиа А., Поли Ф., Джентиломи Г.А. Актуальная и селективная активность Pancratium Illyricum L. против клинических изолятов Candida Albicans: комбинированное действие на рост и вирулентность дрожжей. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Шарма О.П., Бхат Т.К. Повторный анализ антиоксидантного анализа DPPH. Пищевая хим. 2009;113(4):1202–5.

13. Макдональд-Уикс Л.К., Вуд Л.Г., Гарг М.Л. Методология определения биологической антиоксидантной способности in vitro: обзор. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046–56.

14. Армстронг Б.К., Крикер А. Эпидемиология рака кожи, индуцированного УФ-излучением. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Башир М.М., Шарма М.Р., Верт В.П. UVB и провоспалительные цитокинессы синергетически активируют продукцию TNF в кератиноцитах за счет усиленной транскрипции генов. J Расследуя дерматол. 2009;129(4):994–1001.

16. Уотсон Р.Э., Гиббс Н.К., Гриффитс К.Е., Шерратт М.Дж. Повреждение внеклеточного матрикса кожи, вызванное УФ-облучением. Антиоксидный окислительно-восстановительный сигнал. 2014;21(7):1063–77.

17. Д'Оразио Дж., Джарретт С., Амаро-Ортис А., Скотт Т. УФ-излучение и кожа. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222–48.

18. Питтаяпруек П., Мифансан Дж., Прапапан О., Комине М., Оцуки М. Роль матриксных металлопротеиназ в фотостарении и фотоканцерогенезе. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Сулейман С.Т., Балачандран И. Общее количество фенолов и общее количество флавоноидов в отобранных индийских лекарственных растениях. Индийская Дж. Фарм. 2012;74(3):258–60.

20. Мамат Н., Джамал Дж. А., Джантан И., Хусейн К. Активность некоторых видов Primulaceae в отношении ингибирования ксантиноксидазы и удаления радикалов DPPH. SainsMalaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T. Антиоксидантная активность некоторых тайских и экзотических фруктов, выращиваемых в Таиланде. Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Фальконе Феррейра М.Л., Риус С.П., Казати П. Флавоноиды: биосинтез, биологические функции и биотехнологические применения. Фронт завод науч. 2012;3:222.

23. Девендра К., Киран Д., Ритеш В., Сатьендра Б., Абхишек К. К оценке общего содержания фенолов и флавоноидов на различных растениях Чхаттисгарха. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Сити-Азима А.М., Нортам А., Нурхуда М. Антиоксидантная активность SyzygiumCumini и ArdisiaElliptica по отношению к их оцененным фенольным составам и хроматическим свойствам. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Соловченко А., Шмитц-Эйбергер М. Значение кожных флавоноидов для защиты от УФ-В в плодах яблони. J Опытный бот. 2003; 54 (389): 1977–84.

26. Гонсалес-Гальего Х., Санчес-Кампос С., Тунон М.Дж. Противовоспалительные свойства пищевых флавоноидов. Нутр Хосп. 2007;22(3):287–93.

27. Судха А., Сумати К., Маникандасельви С., Прабху Н.М., Шринивасан П. Антигепатотоксическая активность неочищенной флавоноидной фракции Lippia Nodiflora L. Индуцированное этанолом поражение печени у крыс. Азиатский J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Сак К. Цитотоксичность пищевых флавоноидов при различных типах рака человека. Pharmacogn Rev. 2014;8(16):122–46.

29. Кедаре С.Б., Сингх Р.П. Генезис и разработка метода антиоксидантного анализа DPPH. J Food Sci Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Бу Х.О., Ким Т.С., Косио К., Шин Дж.Х., Чон СУ. Общие уровни фенолов и антиоксидантные свойства в метанольных экстрактах нескольких вьетнамских дикорастущих растений. Корейская компания J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Дюдонн С., Витрак Х., Кутьер П., Войлез М., Мериллон Дж.М. Сравнительное исследование антиоксидантных свойств и общего содержания фенолов в 30 растительных экстрактах, представляющих промышленный интерес, с использованием анализов DPPH, ABTS, FRAP, SOD и ORAC. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768–74.

32. Сломински А., Тобин Д.Дж., Шибахара С., Вортсман Дж. Пигментация меланина в коже млекопитающих и ее гормональная регуляция. Physiol Rev. 2004;84(4):1155–228.

33. Плечи М.Д., Рейнс Р.Т. Коллагеновая структура и стабильность. Анну РевБиохим. 2009; 78: 929–58.

34. Куа А.Б., Вильгельм К.П., Майбах Х.И. Эластические свойства кожи человека: в зависимости от возраста, пола и анатомической области. Арка Дерматол Рез. 1990;282(5):283–8.

35. Карим А.А., Азлан А., Исмаил А., Хашим П., Гани С.С.А., Зайнудин Б.Х., Абдулла Н.А. Фенольная композиция, антиоксидантная, антивозрастная и тирозиназоингибирующая активность экстракта какао-бобов. BMC Комплемент Altern Med. 2014;14(381):1–13.